微生物學專業(yè)畢業(yè)論文 [精品論文] 中藥雄黃微生物浸出及其浸出液對肝癌的體內外抗腫瘤作用研究

微生物學專業(yè)畢業(yè)論文精品論文中藥雄黃微生物浸出及其浸出液對肝癌的體內外抗腫瘤作用研究關鍵詞雄黃微生物浸礦肝癌氧化亞鐵硫桿菌抗腫瘤作用摘要雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。正文內容雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊?，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/。總之，本研究提出了一種微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/L，礦漿PH值為22，細菌接種量為20的條件下雄黃微生物浸出效果最好，130RPM搖瓶浸出30天，雄黃中砷的浸出率可達2664，比無菌對照提高了約23個百分點。ATFBY3的直接作用在雄黃的生物浸出過程中起到重要作用，加入10G/L的FE2能夠大大促進雄黃中砷的溶出。無機的三價砷IAS和五價砷IAS是雄黃微生物浸出液ER/AF中砷的主要賦存形態(tài)，同時存在少量的一甲基胂酸MMA和二甲基胂酸DMA等有機砷化物。另外，雄黃中富含的ZN、CU、MG、MN、FE、SE等與人體健康密切相關的微量元素在ATFBY3存在條件下也能夠得到有效浸出。為了闡明ATFBY3用于雄黃炮制的合理性和有效性，本論文研究了ER/AF對肝癌的體內外抗腫瘤作用。實驗結果表明，0520G/ML砷濃度的ER/AF對肝癌細胞株HEPG2均具有顯著的增殖抑制效應，且呈現(xiàn)出明顯的時間和濃度依賴性。體內條件下，ER/AF對肝癌H22實體瘤以及腹水瘤小鼠具有很強的抑瘤作用，30MG/ER/AF腹腔注射給藥后對肝癌H22腹水瘤小鼠的生命延長率可達1188，對實體瘤小鼠腫瘤生長抑制率可達4278。分別采用透射電鏡技術及流式細胞術研究了ER/AF對H22實體瘤細胞以及體外培養(yǎng)H22細胞的凋亡誘導作用，實驗結果表明，腹腔給藥ER/AF能夠有效誘導肝癌荷瘤小鼠實體瘤組織H22細胞的凋亡，在體外條件下，ER/AF也可以大大提高H22細胞的凋亡率，且隨著藥物濃度的增加其對細胞的凋亡誘導作用愈強。值得注意的是，ER/AF對荷瘤小鼠的毒副作用較小，與對照組相比沒有引起明顯的組織毒性病理變化，而且對腫瘤組織具有很強的選擇性。ER/AF治療組荷瘤小鼠腫瘤組織中砷的蓄積遠遠大于生理鹽水，可達到578334G/G約為生理鹽水對照組及三氧化二砷ATO治療組的8倍左右。最后，本論文研究了ER/AF不同給藥途徑對正常小鼠的急性毒性，實驗結果表明，與ATO相比，ER/AF腹腔給藥具有更高的毒性，而靜脈及灌胃給藥都顯示出比ATO更低的毒性。腹腔、靜脈及灌胃給藥ER/AF對正常小鼠的半數致死劑量分別為545/、421/和1583/?？傊狙芯刻岢隽艘环N微生物法炮制雄黃的新工藝，可以有效地解決雄黃生物利用度低、臨床使用量與毒性大等問題，同時也為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供了一條有效的途徑。雄黃是一種常見的礦物中藥，主含四硫化四砷AS4S4，在中醫(yī)藥中具有悠久的醫(yī)用歷史，廣泛用于解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧和抗腫瘤等。然而，由于雄黃的水不溶性而導致的生物利用度低、毒副作用大以及給藥途徑單一等缺點嚴重制約其臨床應用。為了解決這一問題，本論文將微生物濕法冶金技術用于雄黃的炮制，采用微生物濕法冶金常用菌株ACIDITHIOBACILLUSFERROOXIDANSBY3ATFBY3對雄黃進行生物化學溶解，釋放砷等活性成分，為制備一種水溶性、高效、低毒的新型砷劑提供新的途徑。研究結果表明，在室溫30左右，粒度為180200目，礦漿濃度為05，初始FE2濃度為10G/