各種培養(yǎng)基配方.docx

2008-09-09 17:081 g9 _; t( q/ j. t4 ! p1營(yíng)養(yǎng)肉湯8 L4 + 7 N- J4 X$ 0 h z* C, p4 d( H2 g$ f& Y) J& c& z/ f成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，蒸餾水1000mL，pH7.4。7 j8 ?2 |3 L, 9 A) m7 y* R6 K1 ?* y. D3 H( d A6 J4 k$ a制法：按上述成分混合，溶解后校正pH，121高壓滅菌15min。/ v- 9 x. 3 J6 i$ 5 e$ ( a5 . S$ x) + b) S9 2營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基( K! L; f/ W- y3 L- . W% V! B; F: F# 0 C, q成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂17g，蒸餾水1000mL，pH7.2。: q8 e) m s2 L4 M0 p8 L3 b& ! _1 n$ R; u7 h制法：將除瓊脂外的各成分溶解于蒸餾水中，校正pH，加入瓊脂，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，121，15min高壓滅菌備用。( 9 d$ s K7 b3 # d9 U8 M o# b( 0 r4 i; 9 p8 R3MRS培養(yǎng)基; a/ s- w9 T# B) P+ c; g! V+ T2 I- $ 6 i成分：蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母粉5g，K2HPO4 2g，檸檬酸二銨2g，乙酸鈉5g，葡萄糖20g，吐溫80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（瓊脂1520g），蒸餾水1000mL。; f4 # f! w+ v1 N$ I$ T6 l+ ?& y8 S0 L: z$ R Q制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)pH至6.26.4，分裝于三角瓶中，121,滅菌15min。, p8 3 t! i- n. _1 q5 H: b! H- % e8 U$ A9 P) h4脫脂乳培養(yǎng)基$ 7 ?& a, G, L7 M+ p7 . L3 w1 |! n A成分：牛奶，蒸餾水。# % y2 F; J& 4 T; X: o3 z2 9 x4 G. Z- s% : g) c制法：將適量的牛奶加熱煮沸2030min，過夜冷卻，脂肪即可上浮。除去上層乳脂即得脫脂乳。將脫脂乳盛在試管及三角瓶中，封口后置于滅菌鍋中在108條件下蒸汽滅菌1015min，即得脫脂乳培養(yǎng)基。% h8 j- C+ - g3 N* g6 P4 t9 z- E9 |% H/ 3 V0 G/ Y4 t) g+ H; w5培養(yǎng)基A1 U) e7 W# d- S# U( T% U, I, A s$ J5 G! l& t成分：蛋白胨10.0g，酵母提取物1.0g，葡萄糖10.0g，NaCL5.0g，瓊脂15.0g，水1000mL。制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)pH至7.07.2，分裝于三角瓶中，121，滅菌15min。0 a& P* j3 F5 E2 x. r$ S6 h7 ; Z4 H% G( o1 c7 q5 x: p6PTYG培養(yǎng)基1 i+ f* w2 J2 s0 G6 : i* X/ * j; I2 S; j1 4 i0 o$ B成分：胰胨Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨5g，酵母粉（Oxoid）10g，葡萄糖10g，吐溫80 0 1mL，瓊脂1520g，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.05g，鹽溶液4mL。$ c8 f, b6 a& s! u, l: K& e/ D( c _( N8 g + 9 x制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)pH至6.87.0，分裝于三角瓶中，115滅菌30min。5 M8 a v) w& s* l6 1 8 |, S d9 d$ H O6 b鹽溶液制備：無水氯化鈣0.2g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。7H2O 0.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸餾水1000mL，溶解后備用。6 T2 O( Y- P, H. Z n/ z: _5 _/ v* p) L+ M7豆芽汁液體培養(yǎng)基, I G) H( z3 L- E& & f L; l p: R! ! 6 P4 H8 I! X成分：豆芽汁10mL，磷酸氫二銨1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，瓊脂20g。 A+ F- o. M* c4 h: 7 h: V k# L8 I/ j& W* , p制法：將以上成分加入到蒸餾水中，加熱使完全溶解，調(diào)pH至6.26.4，分裝于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黃色5.26.8紫色）作為指示劑，115滅菌20min。. l4 E4 # A# l% G0 b( x* d# g D8 O4 z$ L7 c豆芽汁制備：將黃豆芽或綠豆芽200g洗凈，在1000mL中煮沸30 min，紗布過濾得豆芽汁、補(bǔ)足水分至1000mL。) 6 D2 I# o i& q$ E3 i- D9 i! / d& s7 J7 o# m- S4 s8麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基: b& _) u* i$ g! d% y |) w. W成分：優(yōu)質(zhì)大麥或小麥，蒸餾水，碘液。. H. f- K1 |+ A- J8 b# x% o+ b! b 8 S1 S; 9 m制法：取優(yōu)質(zhì)大麥或小麥若干，浸泡612h，置于深約2cm的木盤上攤平，上蓋紗布，每日早、中、晚各淋水一次，麥根伸長(zhǎng)至麥粒兩倍時(shí)，停止發(fā)芽晾干或烘干。: b, U/ 4 l$ y* P9 ?# Y: ! ?+ ?% W g l% x% B$ Y稱取300g麥芽磨碎，加1000mL水，38保溫2h，再升溫至45，30min，再提高到50，30min，再升至60，糖化11.5h。0 1 m6 i M8 X: D- Z! V: p, p5 g! g , m2 z5 取糖化液少許，加碘液12滴，如不為藍(lán)色，說明糖化完畢，用文火煮半小時(shí)，四層紗布過濾。如濾液不清，可用一個(gè)雞蛋清加水約20mL調(diào)勻，打至起沫，倒入糖化液中攪拌煮沸再過濾，即可得澄清麥芽汁。用波美計(jì)檢測(cè)糖化液濃度，加水稀釋至10倍，調(diào)pH56，用于酵母菌培養(yǎng)；稀釋至56倍，調(diào)pH7.2，可用于培養(yǎng)細(xì)菌，121滅菌20min。& X1 P! K5 V. - X/ E( m& j. Q3 X6 q$ v% + $ K0 z7 O: d9查（察）氏培養(yǎng)基3 , A) . j9 P$ o. ! U- z+ a& S% I; b3 . E; ( L成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，F(xiàn)eSO4.7H2O 0.01g，蔗糖30g，瓊脂1520g，蒸餾水1000mL，pH值自然。a9 - L, Y6 T7 U/ V/ M& _. D- ) e, K/ J2 E制法：加熱溶解，分裝后121滅菌20min。0 h T, D6 E7 q4 P/ e2 # C6 e. x 10馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）7 Z; r& Q7 0 1 z0 F* k# Q6 _ X3 9 v, ) D成分：馬鈴薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，瓊脂20g，水1000mL。 V6 K8 p7 i O* k/ j+ P i& f B1 C V9 |2 : j9 u Q9 Q2 W制法：pH值自然。將馬鈴薯去皮、洗凈、切成小塊，稱取200g加入1000mL蒸餾水，煮沸20min，用紗布過濾，濾液補(bǔ)足水至1000mL，再加入糖和瓊脂，溶化后分裝，121滅菌20min。另外，用少量乙醇溶解0.1g氯霉素，加入1000mL培養(yǎng)基中，分裝滅菌后可用于食品中霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、分離。* p3 0 s: V7 # e$ M* # Y; W3 U0 A/ I; s2 D11PY基礎(chǔ)培養(yǎng)基0 c; A J R/ m. B $ C$ Q % u% y5 H% x8 e5 z成分：蛋白胨0.5g，酵母提取物1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，鹽溶液 4.0mL，蒸餾水1000mL。5 I- B1 g6 H1 B9 $ |# ; J, 1 h: K鹽溶液成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸餾水1000mL。7 i5 ; s o1 H, P6 |8 M- G. W- E; A$ U) u# 5 b& c! s; # ) y制法：加熱溶解，分裝后121滅菌20min。4 + a+ 3 g2 w2 R3 ; T0 T8 Y- d 1 a. K12甘露醇瓊脂培養(yǎng)基（MSA）. Z+ ! p3 d% ) U) E/ _/ 7 U9 N+ l8 E成分：牛肉浸膏1g，月示胨NO.3（Difco）10g，D-甘露醇10g，NaCL 75g，瓊脂約13g，酚紅0.025g，水1000mL，pH7.27.69 c: C- X+ O8 ?( . l5 / |. n# m! P+ x, ; C c制法：按量將各成分（酚紅除外）混合，加熱使完全溶解，調(diào)pH至7.40.2。加1%的酚紅溶液2.5mL，混勻。121高壓滅菌15min+ _/ ( h8 * g+ K U& X _. 6 z; E+ t. C6 p. 13高氏一號(hào)（淀粉瓊脂）培養(yǎng)基（主用于放線菌、霉菌培養(yǎng)）. 3 h: x H) G6 % 7 S9 0 I+ 4 k2 h $ R3 C可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，F(xiàn)eSO4.7H2O 0.01g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，pH7.27.4，121滅菌20min。* Z v7 9 i3 q N. N- y9 g/ P t. l* # K4 W14淀粉銨鹽培養(yǎng)基 （主要用于霉菌、放線菌培養(yǎng)）- i5 g8 y/ ?$ a; m0 E0 ! ?% O/ E - X+ ?0 , K$ B可溶性淀粉10g，（NH4）2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸餾水1000mL，pH7.27.4，121滅菌20min。若加入1520g瓊脂即成固體培養(yǎng)基。/ f4 G! z: L& L- m3 o8 g( J/ $ c E ( r& U15麥?zhǔn)吓囵B(yǎng)基（醋酸鈉瓊脂培養(yǎng)基）4 f6 F/ b9 # H8 w . g* $ j- u# K8 e0 C! a 0 N葡萄糖1.0g，KCL 1.8g，酵母汁2.5g，醋酸鈉8.2g，瓊脂15g，蒸餾水1000mL，pH自然，0.7kg/cm2滅菌30min。, ) + H, a$ T( I/ X7 i& d) h/ C3 s; o* j. n0 16高鹽察氏培養(yǎng)基(用于霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)、分離用). Z: m* Z/ p N- k2 I) X* C, c$ n硝酸鈉2g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂（MgSO4 7H2O）0.5g，氯化鉀 0.5g，硫酸亞鐵0.01g，氯化鈉60g，蔗糖30g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，115滅菌30min。$ c1 m, a6 6 Q# y0 A k& i1 m4 T+ m$ E5 k注：分離食品和飲料中的霉菌和酵母可選用馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基和/或孟加拉紅培養(yǎng)基。分離糧食中的霉菌可用高鹽察氏培養(yǎng)基。$ G7 . h+ w2 f* ; c/ A0 G8 i8 b; H17糖、醇類發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基 p0 w& W; y9 F$ R Y( l( L2 C7 K; N U# % w5 Z _（1）一般細(xì)菌常以休和利夫森二氏培養(yǎng)基0 D8 e5 v f ) t7 R W: M& c# Q G蛋白胨5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，瓊脂56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚藍(lán)）3mL，蒸餾水1000mL，pH7.07.2，分裝試管，培養(yǎng)基高度約4.5cm，115滅菌20min。+ ) e7 y, r8 v1 d. h9 a$ E- Y; i$ e! o/ 7 z) i% z1 e（2）芽孢菌培養(yǎng)基8 s7 c2 t2 P$ J$ x# h0 o/ |p8 o: o; m8 r, s(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏0.2g，瓊脂56g，糖或醇類10.0g，蒸餾水1000mL，溴甲酚紫（0.04）15mL，pH7.07.2，分裝試管，培養(yǎng)基高度約45cm，112滅菌30min。- 8 b+ u4 j( D ( q( v) c; j2 e4 Q7 F! ? v0 Y* （3）乳酸菌培養(yǎng)基% k3 H: U* v _ j9 P$ / A% M5 K; e4 q5 n y4 x7 t蛋白胨5g，牛肉膏5g，酵母膏5g，吐溫80（Tween 80）0.5mL，糖或醇10g，瓊脂56 g，蒸餾水（自來水）1000mL，加入1.6溴甲酚紫溶液約1.4mL。以上調(diào)pH6.87.0，分裝試管，112滅菌30min。4 m3 A! w- 2 Q! p8 Z. m8 v T) g p# r b8 J* v18硝酸鹽培養(yǎng)基（硝酸鹽還原試驗(yàn)用）# j6 T, t* D8 V q0 h . k! R; b, g! I/ Z* Z9 i/ f/ V* E蛋白胨5.0g，KNO3 0.2g, 蒸餾水1000 mL，pH7.4，每管分裝45mL，121滅菌1520min。 ) Q7 3 J: d( X/ Q5 t$ w/ Z) w/ q! o8 D L. 9 w$ j) W$ | ( o5 d& c吲哚實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基：1胰蛋白胨，調(diào)pH7.27.6，分裝1/31/4試管，115滅菌30min。, F# & g D) z* A5 c/ Z% S0 # N/ I3 x2 C- O0 v19硫化氫試驗(yàn)（紙條法）培養(yǎng)基% G) ?) o/ f& ? A j6 o. L l b/ # j, u蛋白胨10g，NaCL 5g，牛肉膏10g，半胱氨酸0.5g，蒸餾水1000mL，pH7.07.4，分裝試管，每管液層高度45cm，112滅菌2030min。另外將普通濾紙剪成0.51cm寬的紙條，長(zhǎng)度根據(jù)試管與培養(yǎng)基高度而定。用510的醋酸鉛將紙條浸透，然后用烘箱烘干，放于培養(yǎng)皿中滅菌備用。$ m7 w! h! f0 x, B0 w! R! s% y) E) j- % ?0 N20尿素培養(yǎng)基(尿酶試驗(yàn))9 s7 9 e5 h/ S / Td; a1 l$ f4 E$ w/ z成分：蛋白胨1.0g，葡萄糖1.0g，NaCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4酚紅3.0mL，瓊脂20.0g，20尿素100.0mL，pH7.17.4。- l$ V( u) B7 F9 F) g: G& y& q4 V Q7 C5 C+ G制法：將除尿素和瓊脂以外的成分配好，并校正pH值，加入瓊脂，加熱熔化并分裝于三角瓶，121滅菌15min，冷卻至5055，加入過濾除菌的尿素溶液，分裝于滅菌試管內(nèi)，擺成瓊脂斜面?zhèn)溆谩? P 9 $ 1 d/ Y( j j! m1 n$ e N: U0 ?5 ?1 G21氮源利用基礎(chǔ)培養(yǎng)基6 / . e- k& x; X& L- r# A5 A3 N, R6 s, hKH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO4 7H2O 0.2g，F(xiàn)eSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖10.0g，蒸餾水1000mL。, C0 _8 K; P l+ O. m+ 5 |/ g0 O! I: v將需要測(cè)定的氨基酸、氨態(tài)氮（如磷酸氫二氨）、硝態(tài)氮（如硝酸鉀）加入到上述基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，使其終濃度為0.050.1，如測(cè)定菌不能利用葡萄糖為碳源，可用其它碳源代替（終濃度為0.20.5），另做一份不加氮源的空白對(duì)照，調(diào)pH7.07.2，分裝于試管，每管45mL，112滅菌2030min，制備出的培養(yǎng)基要求無沉淀。) A 1 Y: A8 t3 f9 z5 O- j/ d$ x) D6 K6 l! H0 _22甲基紅培養(yǎng)基（M.R及V-P試驗(yàn)用）0 v- X0 t( y4 P! y6 d1 s x9 e5 H% 8 p. N H# U s蛋白胨7.0g，葡萄糖5.0g，K2HPO4（或NaCL）5g，水1000mL，pH7.07.2，每管分裝45mL，115滅菌30min。1 O + ; d( s$ f4 C; g% s! Y$ * _6 n8 j- n# f23動(dòng)力、靛基質(zhì)、尿素（MIU）綜合培養(yǎng)基 （用于檢驗(yàn)細(xì)菌運(yùn)動(dòng)性、吲哚、尿素酶用）; y* 4 p3 w b8 Q7 _# # t M1 V蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、瓊脂3 g、0.2%酚紅酒精溶液2mL、尿素20g、蒸餾水1000mL。分裝于小試管，112滅菌15min，滅菌后液體應(yīng)呈淡黃色。& E7 F( |! P5 J# r$ y9 j+ 2 g# z% ; J24半固體培養(yǎng)基（用于細(xì)菌的動(dòng)力試驗(yàn)）1 i; t* a# o& E- w$ _; t4 6 G! z9 p2 S c* u牛肉膏5.0g，蛋白胨10.0g，瓊脂35g，蒸餾水1000mL，pH7.27.4，熔化后分裝試管（8mL）121滅菌15min，取出直立試管待凝固。/ D7 T8 n , E3 I5 P, + x- A7 y% B1 c) C3 . _2 c9 2 j( M25M17瓊脂培養(yǎng)基（分離、培養(yǎng)乳球菌等的選擇培養(yǎng)基）8 |; d * i8 F8 x* C, P T/ b. O! P/ F$ R植物蛋白胨5g，酵母粉5g，聚蛋白胨5g，抗壞血酸0.5g，牛肉膏2.5g，MgSO4 7H2O 0.01g，ß-甘油磷酸二鈉19g，蒸餾水1000mL，121滅菌15min。: y4 d H G$ C& N* h 0 w/ l* ?2 ; c% l3 v1 _26蛋白胨水溶液（靛基質(zhì)試驗(yàn)用）0 H6 H7 ? B+ E3 S A9 u G F6 D% _( R d- x) |/ g蛋白胨20.0g，NaCL 5.0g，蒸餾水1000mL，pH7.4，121滅菌15min。) R5 d& 8 U+ I3 u+ p( z4 q1 B1 k9 Q( Q7 l0 z27精氨酸雙水解酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基9 p3 z: I- P! n. ( t. y6 . A& m# r成分：蛋白胨1g，氯化鈉5g，K2HPO4 0.3g，L-精氨酸10g，瓊脂10g，酚紅0.01g，蒸餾水1000mL。2 % o: 9 l b1 I$ ? V0 ?9 p( d8 D6 O2 u2 k制法：除酚紅外，將以上各成分溶解，調(diào)節(jié)pH7.07.2，加入指示劑，分裝試管，培養(yǎng)基高約45cm，121滅菌20min備用。$ x( q w* t8 B& n. Q. a$ |3 L# d4 E+ d9 + N* G28葡萄糖氧化發(fā)酵培養(yǎng)基/ D C- 8 y, y! v7 c. p$ _( B/ * F9 2 & N& ?0 Y h1 成分：蛋白胨2g，氯化鈉5g，1溴百里酚藍(lán)水溶液3mL，瓊脂56g，K2HPO4 0.2g，葡萄糖1，蒸餾水1000mL。9 i+ r9 Y3 8 P3 U( M- G. i* F8 f2 f4 Q- s; R$ t制法：除溴百里酚藍(lán)外，溶解以上各成分，調(diào)節(jié)pH值為6.87.0，分裝試管，用115滅菌20min備用。/ v6 u0 ( . m2 u) w R6 L- N8 j2 S! q) t8 Q0 A, z, O29假單胞菌選擇培養(yǎng)基（PSA）8 K# B. C; K4 R: h5 , Q: # n. L1 Z6 h O6 , 7 _; f+ D基礎(chǔ)成分：多價(jià)胨16g，水解酪蛋白10g，硫酸鉀10g，氯化鎂1.4g，瓊脂11g，甘油10mL，蒸餾水1000mL，pH7.10.2。6 9 r k/ f: _. 9 H0 L6 l3 M; Z8 j) L/ rCFC選擇添加物：溴化十六烷基三甲胺10mg/L，梭鏈孢酸鈉10mg/L，頭孢菌素50mg/L。; k% x! C# s s# w o P% u+ E X8 |& 8 M2 e9 w( s制法：先將基礎(chǔ)成分加熱煮沸使之完全溶解，121，15min條件下滅菌。冷卻到50備用。當(dāng)基礎(chǔ)培養(yǎng)基冷卻到50后加入溶解后過濾除菌的CFC補(bǔ)充物，完全混合后倒平板備用。& U; S) I: y% y4 H x6 j3 s3 5 a1 y+ ) c2 P! h30乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基2 x4 O$ J4 g) v N, P9 A* D$ D9 v0 & y p) 1 Q成分：蛋白胨20g，豬膽鹽（或牛、羊膽鹽）5g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸餾水1000mL，pH7.4。8 C# W! h. D; s$ H: I: i a6 R9 l. R. f5 O4 y; S! n制法：將蛋白胨、膽鹽及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示劑，分裝每管10mL，并放入一個(gè)小倒管，115，15min高壓滅菌.% d2 v( 7 z5 J* ; G) R8 y1 , r R# O* z3 L注：雙料乳糖膽鹽培養(yǎng)基除蒸餾水外，其他成分加倍。- Z, e7 t3 % V0 3 D P, B% m0 |3 T I2 # p31伊紅美蘭瓊脂培養(yǎng)基1 $ _8 ?; B, d8 J# S9 L, | e2 Q5 ?8 l成分：蛋白胨20g，乳糖10g，磷酸氫二鉀2g，瓊脂17g，2%伊紅Y溶液20mL，0.65%美蘭溶液10mL，蒸餾水1000mL，pH7.1。9 S. ( I- g$ b Q. U % : X1 J! z% D) l6 . O8 C* n制法：將蛋白胨、磷酸氫二鉀和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH，分裝于燒瓶?jī)?nèi)，高壓滅菌121，15min備用。9 g2 a) ( |- V1 J0 d I/ Y* K5 y1 s$ a: I H臨用時(shí)，加入乳糖，并加熱溶化瓊脂，冷至5055，加入伊紅和美蘭溶液，搖勻，傾注平板。7 H9 k8 d; v8 o, X7 w/ Y9 2 C% : y ( k7 g4 i32乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基) E( B0 F5 i z4 y; c! C$ L7 f4 h: g$ 0 C. M成分：蛋白胨20g，乳糖10g，0.04%溴甲酚紫水溶液25mL，蒸餾水1000mL，pH7.4。. a1 D1 y1 G: v. A) d7 J5 U h3 ! q3 & Y制法：將蛋白胨、乳糖溶于水中，校正pH，加入指示劑，按檢驗(yàn)要求分裝30mL、10mL或3mL，并放入一個(gè)小倒管，115，15min高壓滅菌。 |! r4 0 L+ I2 i2 N+ G: z7 4 . h33胰酪胨大豆肉湯, l- j ?- G& D; N0 k; e( W# : L, j* 5 h5 d成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化鈉100g，磷酸氫二鉀2.5g，葡萄糖2.5g，蒸餾水1000mL。% ? W7 c J# Y5 _6 o* V: b$ K& |. ! W/ o, C8 _* + i/ l2 c制法：將上述成分混合，加熱并輕輕攪拌溶液，分裝后12115min高壓滅菌。最終pH7.30.2。# I$ n6 b: j0 r% b) p _5 o$ A# J T347.5%氯化鈉肉湯* m. |1 w/ j- % U# g4 g2 a5 v$ q* N4 G成分：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉75g，蒸餾水1000mL，pH7.4。8 I/ Z4 G; a$ h- ?9 n( k; _( a& m Z% t; F制法：將上述成分加熱溶解，校正pH，分裝試管，12115min高壓滅菌。 A* 0 s$ X9 e3 R5 r5 Q2 S& S) i& U8 K3 n( q35豆粉瓊脂( G, y, c( Y2 U6 # h2 1 L M l3 W, M T+ K1 成分：牛心消化湯1000mL，瓊脂20g，黃豆粉浸液50mL，pH 7.47.6。+ V% Z: F+ b0 ( P# E( Az Y9 g9 U! Z& f( R$ H u8 P制法：將瓊脂加在牛心消化湯中，加熱溶解，過濾。加入黃豆粉浸液，分裝每瓶100mL，12115min高壓滅菌。4 q3 h/ 7 j. W _% h! L: M/ H3 K9 R; n$ |7 j, l4 K, 6 I3 C36血瓊脂平板- V9 B: & n9 M0 4 H- Q5 c : j3 , h* S0 h 1 H- J6 c成分：豆粉瓊脂100mL，脫纖維羊血（或兔血）510mL。; e( . K6 |+ X* R3 M4 |# x0 / z7 R x/ n制法：加熱融化瓊脂，冷至50，以無菌操作加入脫纖維羊血或兔血，搖勻，傾注平板?；蚍盅b滅菌試管，擺成斜面。2 K8 L% w3 D J/ G ?% |4 s i. W$ e6 S4 I37aird-Parker氏瓊脂平板6 o; P; e7 B% Y* & : k( r& m f% M s: y1 + D$ 成分：胰蛋白胨10g，牛肉膏5g，酵母膏1g，丙酮酸鈉10g，甘氨酸12g，氯化鋰（LiCL6H2O）5g，瓊脂20g，蒸餾水950mL，pH7.5。/ n D* c) % u0 B& % l: I Q6 z6 P0 - V* 7 D7 j增菌劑的配法：3050%卵黃鹽水50mL與除菌過濾的1%亞碲酸鉀溶液10mL混合，保存在冰箱內(nèi)。# q F1 B2 2 N& 8 $ f; : e$ 2 c2 h) v/ o制法：將各成分加到蒸餾水中，加熱煮沸至完全溶解。冷至25，矯正pH。分裝每瓶95mL，121高壓滅菌15min。臨用時(shí)，加熱融化瓊脂，冷至50，每95mL加入預(yù)熱至50的卵黃-亞碲酸鉀增菌劑5mL，搖勻后傾注平板。培養(yǎng)基應(yīng)是致密不透明的。使用前在冰箱儲(chǔ)存不得超過48h。* h! x! c2 p& W1 m I3 _( Z% B, K6 D+ I$ C6 j9 t8 X; _8 P9 w- K38肉浸液2 u0 U, E, q; K! g/ u7 i3 X8 o/ k. w! $ 成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，蒸餾水1000mL，pH 7.47.6。* A: N0 c8 C% Z$ X0 P/ W% W1 W* E S& S) V! P. |制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后矯正pH7.47.6煮沸并過濾，分裝燒瓶，121，30min高壓滅菌。 n2 m g5 Q2 v K4 k; e9 D( j n3 k3 A39兔血漿 f9 O7 v8 y* V# W! x0 L/ p# r9 - i+ s成分：檸檬酸鈉0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O72H2O溶于1L蒸餾水中）; s i# _2 f- K0 d2 G j0 R! B6 W* Z5 s9 e ! ! V制法：一份加兔血9份混合后離心2000rpm，10min吸取上清液即為兔血漿。; W E J8 1 N3 M4 T4 c, F8 z$ P8 r. X4 X5 D* y 40腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基# Z3 9 Y/ K0 : _9 1 z1 V5 q4 3 G成分：蛋白胨20g，胰消化酪蛋白200mg，氯化鈉5g，磷酸二氫鉀1g，氯化鈣0.1g，硫酸鎂0.2g，菸酸0.01g，蒸餾水1000mL，瓊脂1012g（固體透析培養(yǎng)用），pH7.27.4。3 C$ n1 q. |5 S6 P3 u( : T- q2 a6 n41葡萄糖肉浸液肉湯 C( ? & S. m/ u/ b Q3 C J) t3 _; Y+ Y5 t w1 U! 成分：絞碎牛肉500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，葡萄糖10g，蒸餾水1000mL，pH7.47.6。6 s; Q8 m& f5 k3 / Q/ q$ 5 . _# Y* B# G% I6 v! y制法：將絞碎之去筋膜無油脂牛肉500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH，煮沸并過濾、分裝，12130min高壓滅菌。- 6 p) B) W4 W+ + s5 D$ y9 Z% E& o) + S42牛心浸液, X o( d9 . l/ O% t s/ _8 v; p& U6 e c* H成分：絞碎牛心500g，氯化鈉5g，蛋白胨10g，磷酸氫二鉀2g，蒸餾水1000mL，pH7.47.6。9 K% ! v, $ F+ x4 f$ D$ q! w/ 4 k- q( x F制法：將絞碎牛心500g，混合后放冰箱24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小時(shí)，使肉渣完全凝結(jié)成塊，用絨布過濾，并擠壓收集全部濾液，加水補(bǔ)足原量。加入蛋白胨、氯化鈉和磷酸鹽，溶解后校正pH，煮沸并過濾、分裝，121，30min高壓滅菌。& _3 L : c* A9 P6 R Y# K0 5 i 43匹克氏肉湯; V- 7 o. N3 I/ k7 k+ a: T! k1 n* |8 R成分：含1%胰蛋白胨的牛心浸液200mL，1：25000結(jié)晶紫鹽水溶液10mL，1：800三氮化鈉溶液10mL，脫纖維兔血（羊血）10mL。 b% j) p$ a: D# d1 $ o* 5 k+ p6 K制法：將上述已滅菌的各種成分，無菌依次混合，分裝于無菌試管內(nèi)，每管2mL，保存冰箱內(nèi)備用。0 U0 Q9 F# p. v; Y& m) f8 b, K) f+ y6 k44胰蛋白胨大豆胨瓊脂（TSA）9 2 t, L* R0 f) s# R4 b$ v3 x4 a * x0 ( 9 _成分：胰蛋白胨15g，大豆胨5g，氯化鈉5g，瓊脂約13g，蒸餾水1000mL，pH7.17.5。; O. A: R8 b+ - a. u( Q3 I, z# N3 * J+ L制法：按量將各成分溶解，加熱使完全溶解，調(diào)pH值，121，15min滅菌。: P& |( w( j% x6 _. e7 m* 2 ) j+ |1 Z& I! w7 M% H+ g7 A- s6 _45緩沖蛋白胨水(BP)培養(yǎng)基 F% A |2 e( _ u, 0 H& K1 e: P9 h- 成分：蛋白胨l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸餾水1000mL，pH7.2。+ W& e4 D- |, a) G+ |) y0 o/ ; l% k t3 K! a e 制法：121滅菌15min，沙門氏菌前增菌使用。( J5 * U% + P; H+ G8 Z8 7 s0 u6 m7 o$ # M46氯化鎂孔雀綠(MM)增菌液 ; V3 ?9 v( K r/ , U- l/ : S J2 n T成分：4 * r& X0 H) K$ v& b& 7 H2 3 S, c, 7 M1 ?甲液：胰蛋白胨5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸餾水1000m1x, : M, 8 D7 $ D8 O) ; D/ & S. # C. A0 D乙液：MgCL2 40g，蒸餾水100mL$ ( d7 X. G2 C# H8 y6 S( m7 i- r+ Y& $ f2 F4 A0 A丙液：0.4孔雀綠水溶液! S ?5 q8 W 2 m! Q ) 4 / m0 v1 o! z8 t. Y9 k制法：分別按上述成分配好后，121滅菌15min備用。臨用時(shí)取甲液90mL、乙液9mL、丙液0.9mL以無菌操作混合即成。, , X8 b a- p0 s& $ G) J/ g$ t2 q- & c 8 _7 Z47四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液1 ! t0 e M) C- L5 l8 m0 f t1 _9 W4 8 G) C成分：多胨或胨1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸餾水1000m1。! k+ K/ w$ K; q6 n. w& ; r* I, ?( Z+ s. I* D制法：將各成分加入蒸餾水中，加熱溶解，分裝每瓶100m1。分裝時(shí)應(yīng)隨時(shí)振蕩，使其中的CaCO3混勻。121滅菌15min備用。臨用時(shí)每100m1培養(yǎng)基中加入碘溶液2m1、0.1煌綠1m1。5 B% k L8 Z7 T1 9 N* G m& O, ? b$ |- U48亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液) q g, d1 l9 r* g! b; K! A0 _8 C, t1 * b: O2 ?7 r; | f2 / j成分：蛋白胨5g，乳糖4g，亞硒酸氫鈉4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L胱氨酸0.01g，蒸餾水1000m1，pH7.0。, w+ G6 v* I6 F2 |- u& k# _& L* E! O0 Z5 h, z: R制法：將除亞硒酸氫鈉和胱氨酸以外的各種成分溶解于900mL蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻備用。另將亞硒酸氫鈉溶解于100mL蒸餾水中，加熱煮沸，冷卻，以無菌操作與上液混合。再加入1L-胱氨酸氫氧化鈉溶液1m1。分裝于滅菌瓶中，每瓶l00mL。0 P* ?2 z# c6 M J5 _; c) q( 1 3 ) a49亞硫酸鉍瓊脂(BS)培養(yǎng)基2 s- |+ V4 a0 v$ U: J i2 G7 v* m$ e) b成分：蛋白胨10g，牛肉膏5g，葡萄糖5g，F(xiàn)eSO4 0.3g，Na2HPO4 4g，煌綠0.025g，檸檬酸鉍銨2g，Na2SO4 6g，瓊脂20g， 蒸餾水1000mL，pH7.5。( U* 6 I3 0 O5 v* % I0 J X Z, v3 Q$ u1 c制法：將前5種成分溶解于300mL蒸餾水中，再將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉另用50m1蒸餾水溶解。將瓊脂于600mL蒸餾水中煮沸溶解，冷至80左右。將以上三液合并，補(bǔ)充蒸餾水至1000m1，校正pH，加0.5煌綠水溶液5mL ；搖勻。冷卻至5055，傾注平板。1 + i4 v0 w s+ z$ J, S, l, s+ q& O% : |注：此培養(yǎng)基不需高壓滅菌。制備過程中不宜過分加熱，以免降低其選擇性。應(yīng)在臨用前一天制備，貯存于室溫暗處。超過48h不宜使用。! k- t( i# b0 G6 J# f P) |8 : m1 X% o50DHL瓊脂培養(yǎng)基( T6 X6 ?- K R/ o6 g8 F& b! h0 P* t0 ; y% H7 c成份：蛋白胨20g，牛肉膏3g，乳糖10g，蔗糖10g，去氧膽酸鈉1g，Na2S203 2.3g，檸檬酸鈉1g，檸檬酸鐵銨1g，中性紅0.03g，瓊脂20g，蒸餾水1000mL，pH7.3。! k) i/ Y M: |, p& c; # J# g$ j: : # c: 1 k 制法：除中性紅和瓊脂外，將其他成分溶解于400m1蒸餾水中，校正pH值。再將瓊脂溶于600mL蒸餾水中，兩液合并，加0.5中性紅水溶液6mL，待冷至5055，傾注平板。3 b/ Z - R s i o) s3 J3 C5 Z# |# j) J3 u2 J$ Z& F4 _; N! v51HE瓊脂培養(yǎng)基2 f$ C5 $ , h p! V1 U* r* O( D; g8 X2 L M4 _; Z$ M7 e0 I成份：月示 胨12g，牛肉膏3g，乳糖12g，蔗糖g，水楊素2g，膽鹽20g，NaCL 5g，瓊脂20g，蒸餾水1000m1，0.4溴麝香草酚藍(lán)溶液16mL，Andrade指示劑20mL，甲液20mL，乙液20m1。H: f8 Y/ a9 r8 Z/ r1 f0 G, Uy. n: X3 R$ R- I& B! ?; j X制法：將前七種成分溶解于400mL蒸餾水中。作為基礎(chǔ)液，加入甲液和乙液，校正pH值為7.5，再加入指示劑；將瓊脂溶于600m1蒸餾水中。二者合并，待冷至5055，傾注平板。+ & R2 q, , X+ w4 3 C4 D3 C3 H) K: o$ & l# w注：此培養(yǎng)基不可高壓滅菌；Andrade指示劑：酸性復(fù)紅0.5g，1M NaOH溶液16m1，蒸餾水100mL。制法為：將復(fù)紅溶解于蒸餾水中，加入氫氧化鈉溶液。數(shù)小時(shí)后如果復(fù)紅退色不全，再加氫氧化鈉溶液12mL。甲液：Na2S203 34g，檸檬酸鐵銨4g，蒸餾水100m1。乙液：去氧膽酸鈉10g，蒸餾水100mL。2 J j: R# j6 ?* Z d2 b4 |# r8 r C3 - i- U52S.S.瓊脂3 Q1 U1 ; U1 b+ t0 z, F9 Z; n0 M: & D% （1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基9 s7 2 w- k% D f: B& S P* E: 4 # i成分：牛肉膏5g，月示 胨5g，三號(hào)膽鹽3.5g，瓊脂17g，蒸餾水1000mL。6 F5 f: b; |+ b2 o7 I A5 m# w, % : L% j2 d- k6 y! s制法：將牛肉膏、月示 胨和膽鹽溶解于400mL蒸餾水中，將瓊脂溶于500m1蒸餾水中，二液混合，121滅菌15min備用。( V: * H: f6 $ - M* V: ?. D# O6 P, K z9 g9 a5 W（2）完全培養(yǎng): x0 c2 F9 N, T: o: s 6 q4 w: C. L9 u成分：基礎(chǔ)培養(yǎng)基1000mL，乳糖10g，檸檬酸鈉8.5g，Na2S203 8.5g，10檸檬酸鐵溶液10m1，1中性紅溶液2.5m1，0.1煌綠溶液0.33m1。 0 U+ ? k0 X+ I8 |8 9 V# v6 p7 n2 D- N+ A0 k* E% U制法：加熱熔化基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按比例加入上述染料以外的各成分，充分混合均勻，校正pH值為7.0，加入中性紅和煌綠溶液，傾注平板。8 N! w8 c# o0 n0 |/ N! O9 i9 D2 g& K* u y注：制好的培養(yǎng)基宜當(dāng)日使用，或保存于冰箱內(nèi)于48h內(nèi)使用；煌綠溶液配好后應(yīng)在10d以內(nèi)使用。3 E( u0 ) l) P) E8 r y# u! b0 b) _0 Z53靛基質(zhì)試驗(yàn)培養(yǎng)基0 Q k8 U4 _. 1 t# Q* S! ?7 R3 I R( _& h+ G1 d: 0 f成分：蛋白胨10g，氯化鈉5g，水1000mL，pH7.37.5。9 f; a, s* o; W. ?, q$ R X6 e7 H) S. B制法：稱取各成分，加入水中加熱溶化。用1mol/L NaOH調(diào)至pH 7.47.5。分裝小試管，每管約3mL，116，15min高壓滅菌后410保存?zhèn)溆谩? T# B. b* w M5 t& N; y3 Q% k4 + c54三糖鐵瓊脂（TSI）, q( 1 L2 l p1 e0 & % _4 U成分：蛋白胨20g，硫代硫酸鈉0.2g，乳糖10g，蒸餾水1000mL，硫酸亞鐵銨0.2g，蔗糖10g，酚紅0.025g，氯化鈉5g，牛肉膏5g，瓊脂12g，葡萄糖1g，pH7.4。5 k e8 Q# n+ e7 i+ # m . t$ f, Q4 Q: F: N4 T制法：將除瓊脂和酚紅以外的各種成分溶解于蒸餾水中，校正pH。加入瓊脂，加熱煮沸以溶化瓊脂。加入0.2%酚紅水溶液12.5mL，搖勻。分裝試管，裝量宜多些，以便得到較高的底層。121高壓滅菌15min后放置高層斜面?zhèn)溆谩?