實驗5不同因素對家兔離體腸肌收縮的影響.doc

實驗5不同因素對家兔離體腸肌收縮的影響xxx（浙江中醫(yī)藥大學(xué)20xx級xxxxxxxxxxxx，20xxxxxxxxx）摘要：目的 研究17臺氏液、0.01%乙酰膽堿（Ach）、0.01%腎上腺素(E)、1當(dāng)量NaOH、1當(dāng)量HCl、缺氧等條件對家兔離體腸肌運動的影響。方法 向浸有離體家兔腸肌的38的臺氏液迅速換成17的臺氏液并依次滴加0.01% Ach、0.01%E、1N NaOH、1N HCl及停止供氧，并用生物信號采集處理系統(tǒng)記錄腸肌的收縮情況。結(jié)果 將38的臺氏液迅速換成17的臺氏液后，腸肌運動腸肌運動張力與頻率先迅速降低后逐漸增大；滴加0.01%Ach、1N NaOH 后，腸肌運動張力和頻率都增大；滴加0.01%E、1N HCl 腸肌運動張力與頻率迅速降低；停止通氧后，腸肌運動張力和頻率逐漸降低；恢復(fù)通氧后，腸肌運動張力和頻率逐漸升高。結(jié)論 低溫能使腸肌運動暫時減弱；一定濃度Ach、NaOH 可促進腸肌的運動；一定濃度的E、HCl 可以抑制腸肌的運動；短時缺氧使腸肌運動在一開始有增強的現(xiàn)象，而后減弱。關(guān)鍵詞 離體腸??；收縮；臺氏液；Ach；E；NaOH；HCl；缺氧1.材料和方法11.1實驗材料：家兔。1.2實驗儀器：恒溫水泵、空氣泵、固定器、恒溫離體小腸灌流裝置、微調(diào)固定器、 張力換能器、鐵支架、電腦、生物信號采集處理系統(tǒng)、木錘、止血鉗、手術(shù)刀、20ml注射器、手術(shù)剪、持針器、手術(shù)圓針、縫線、燒杯、手術(shù)盤、鋼碗。 1.3實驗藥品和試劑：臺氏液、0.01%乙酰膽堿（Ach）、0.01%腎上腺素(E)、NaOH、HCl。1.4離體家兔腸肌制備：取家兔一只，將其倒提，用木錘猛擊后腦勺，使之昏迷，將其仰臥位固定，用手術(shù)剪從劍突下沿腹部白線向恥骨聯(lián)合方向剪開皮膚約5cm長，打開腹壁，暴露腹腔，順著胃找到與胃相連的十二指腸，沿十二指腸向空腸的方向取出小腸段約30cm，放入一小手術(shù)盤中，用注射器抽取預(yù)冷臺氏液沖洗腸內(nèi)容物，直至沖洗干凈為止。將干凈的小腸段放入另一盛有預(yù)冷臺氏液的小手術(shù)盤中，用手術(shù)刀刮去腸管外的血管和系膜，將小腸段切割成小段，每小段腸約2cm長，并在小段腸的兩端、距斷端約1mm處各穿約30cm長的線。1.5標(biāo)本固定 1.5.1取出固定架，將腸段的下端的線頭盡量靠近并牢固地綁緊在固定架的小鉤，將固定架放回內(nèi)槽，使小鉤盡量靠近槽底（盡量減少臺式液的使用），重新用張力微調(diào)器固定固定架，將空氣泵重新連接至固定架，并通過固定架將空氣輸入內(nèi)槽的臺氏液中。1.5.2將腸段的上端的線頭與張力換能器的應(yīng)變梁連接, 用張力微調(diào)器緩慢升降拉線，保持線有一定緊張度，腸段、線應(yīng)與地平面垂直，同時，腸段及上端的線頭不得碰及槽壁和固定架。1.5.3換液：打開灌流槽的內(nèi)槽排水閥門，排去原來的臺氏液，用20ml注射器從恒溫水泵的小燒杯中抽取被加溫的臺氏液放入灌流槽的內(nèi)槽中，其每次用量以淹過腸段的量為準(zhǔn)。調(diào)節(jié)位于固定架尾部的空氣流量調(diào)節(jié)旋鈕，使氣泡即細(xì)小、均勻，又不影響腸段的運動。 1.6實驗觀察1.6.1記錄一段38的臺氏液環(huán)境中小腸平滑肌收縮活動曲線，觀察其收縮活動的特點。關(guān)閉恒溫水泵，將原38臺氏液換成等量的17臺氏液，觀察腸活動的改變, 待其活動改變明顯時，沖洗1遍，再加入等量的38的臺氏液。1.6.2待腸活動恢復(fù)后，向臺氏液中加入0.01%乙酰膽堿（Ach）2滴，觀察小腸收縮活動的改變, 待反應(yīng)穩(wěn)定后沖洗2遍，再加入等量的38的臺氏液。1.6.3待腸活動恢復(fù)后，向臺氏液中加入0.01%腎上腺素(E)2滴，觀察小腸活動的改變，待反應(yīng)穩(wěn)定后沖洗2遍，再加入等量的38的臺氏液。1.6.4待腸活動恢復(fù)后，向臺氏液中加入1N NaOH 2滴，觀察小腸收縮活動的改變，待.反應(yīng)穩(wěn)定后沖洗2遍。1.6.5待腸活動恢復(fù)后，向臺氏液中加入1N HCl 2滴，觀察小腸收縮活動的改變反應(yīng)穩(wěn)定后沖洗2遍。1.6.6待腸活動恢復(fù)后，停止空氣泵的工作，觀察腸活動的改變，待其收縮活動改變明顯時反應(yīng)穩(wěn)定后沖洗1遍，再加入等量的38的臺氏液，空氣泵描記一段腸段收縮活動恢復(fù)曲線后終止實驗。2.實驗結(jié)果圖表 1 17的臺氏液圖表 2 0.01%Ach圖表 3 0.01%E圖表 4 1N NaOH圖表 5 1N HCl圖表 6 停止通氧、恢復(fù)通氧將38的臺氏液迅速換成17的臺氏液后，腸肌運動腸肌運動張力與頻率先迅速降低后逐漸增大；滴加0.01%Ach、1N NaOH 后，腸肌運動張力和頻率都增大；滴加0.01%E、1N HCl 腸肌運動張力與頻率迅速降低；停止通氧后，缺氧后腸肌開始一段有增強的現(xiàn)象，而后腸肌運動張力和頻率逐漸恢復(fù)正常；恢復(fù)通氧后，腸肌運動張力和頻率先降低而后恢復(fù)正常。3分析與討論3.1消化道平滑肌對溫度刺激敏感。38的臺氏液迅速換成17的臺氏液后，腸肌內(nèi)的酶活性降低，小腸代謝水平降低，故平滑肌興奮性降低導(dǎo)致收縮頻率降低，同時收縮幅度也減弱。由于腸肌對低溫有適應(yīng)能力，故隨后腸肌運動逐漸恢復(fù)正常。3.2 Ach可明顯興奮胃腸道平滑肌，故：收縮頻率增高：Ach與肌膜上的M受體結(jié)合，使生電性鈉泵活動減弱，從而使靜息電位升高，平滑肌興奮性提高。收縮幅度增加：平滑肌鈣離子專用通道開放，鈣離子內(nèi)流，一方面使收縮頻率增加，另一方面可以增加肌漿鈣離子濃度。3.3腎上腺素作用于肌膜，一方面使生電性鈉泵活動增強，另一方面結(jié)合膜受體。其中受體使鉀離子外流增加，受體使鉀、鈣離子外流增加，同時增強鈣泵活動。其中生電性鈉泵活動增強、鉀、鈣離子外流增加導(dǎo)致細(xì)胞膜超級化，平滑肌興奮性降低，收縮頻率降低。鈣離子外流、鈣泵活動增強導(dǎo)致肌漿鈣離子濃度下降，收縮幅度下降。3.4消化道平滑肌對化學(xué)刺激敏感，小腸的PH約為7.08.0,過高或過低的PH都會影響腸肌的收縮。滴加1N NaOH 后，臺氏液的PH值處于7.08.0 之間，處于腸肌收縮的最適PH，腸肌運動加強。由于H+ 濃度降低：使鈣離子通道活性受抑制減弱，鈣離子內(nèi)流，平滑肌興奮性增高，故收縮頻率增高，收縮幅度增強；肌漿網(wǎng)鈣離子釋放增加，平滑肌收縮幅度增強。張力曲線而后下降，說明腸肌對PH值變化有一定的適應(yīng)力2。3.5消化道平滑肌對化學(xué)刺激敏感，滴加1N HCl 后，臺氏液的PH低于最適范圍（7.08.0），胞外H+升高：抑制鈣通道的活性，鈣離子內(nèi)流減少，肌肉收縮減弱。干擾肌肉的代謝和肌絲滑行的生化過程，氫離子與鈣離子競爭鈣調(diào)蛋白的結(jié)合位點而使肌球蛋白ATP酶活性降低，使肌原纖維對鈣離子的敏感性和鈣離子從肌質(zhì)網(wǎng)的釋放量減少。收縮減弱。 3.6停止通氧后，腸肌運動得不到能量供給，故腸肌運動在缺氧開始一段時間代償性增強；由于ATP有限，故隨后運動張力和收縮幅度減弱?；謴?fù)通氧后，腸肌得到能量供給，腸肌代償運動消失，故造成運動張力和頻率短暫降低，由于ATP充足，故隨后運動張力和頻率逐漸升高。4.結(jié)論 低溫通過抑制酶活性而使腸肌運動暫時減弱；一定濃度Ach、NaOH 通過增強鈣離子通