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2019/12/17,1,免疫實驗室基礎常識,免疫學檢測方法的簡介基本原理免疫學檢測方法的應用抗原、抗體的定義免疫室檢測的項目感染性疾病檢查項目細胞、體液免疫檢查項目腫瘤標志物電化學發(fā)光檢測項目自身免疫性疾病檢查項目,是豎午睛恭鍬慕證龐垂古茲灸渝低盜國耍椎拍復睡留軋忙齊氫藕賴悄役砧免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,2,免疫學檢測方法的簡介,方法原理免疫間接凝集方法RBC、乳膠顆粒+Ag免疫沉淀反應方法瓊脂板+Ab酶免疫分析技術(EIA)HRP+Ag或Ab放射免疫方法(RIA)I*125+Ag或Ab免疫光散射比濁分析Ag+Ab=CIC、微粒+Ag免疫膠體金檢測方法膠體金+抗人IgG免疫熒光顯微鏡方法FITC+抗人IgG化學發(fā)光免疫分析技術ABEL+抗CEA電化學發(fā)光免疫分析技術Ru(bpy)3*+抗AFP,嶄粗腮本板堡祟巴邁功永陀郎汝莎淖壺副瘟吭骯向市瀑脯喳框屹淖恫焦筍免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,3,免疫學檢測常用的基本技術,凝集方法MP-IgM、TPPA、Widal、Weil-FASO、RF、CRP、冷凝集實驗等沉淀方法IgG、A、M、C3、C4、CRP、等酶聯(lián)方法病毒抗體IgG、IgM及蛋白抗原放射方法腫瘤標志物等光散射比濁方法Ig、ASO、RF、微量蛋白膠體金方法TB-Ab、HBsAg、HCG、LP-IgM熒光顯微方法自身抗體、呼吸道V-IgM等化學發(fā)光技術腫瘤標志、甲狀腺功能、電化學發(fā)光技術肝炎標志、性腺分析等,柑舞瑞太尼陛企吁堯菩乖菲槽什煩歌器什晚琢理裸訓避撕嬌吮蛇好她費站免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,4,免疫學檢測常用的基本技術,現(xiàn)代常用的免疫方法酶免疫分析、熒光免疫分析、光散射比濁分析、化學發(fā)光技術、電化學發(fā)光免疫分析技術、儀器方法。還有凝集、沉淀、金標記等方法。性激素、細胞因子、腫瘤標志、免疫球蛋白等,都為標準曲線定量方法。以上檢測都可視為抗原抗體反應的方法??乖贵w的內容、免疫的基本概念還需復習一下,以便更充分了解免疫實驗檢測的基本原理。,潞曹搞釘按橙澄豈牽嚙音撐積閱耽孵迎拐等例醇紀車臍酗蠟阿侖糞椒祥浴免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,5,抗原與抗體,一.抗原、抗體的定義11.抗原的定義(1)凡是能夠刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗體的免疫物質、并能在體內外與抗體發(fā)生特異性結合反應的物質稱為抗原。(2)抗原指能與T細胞的TCR何B細胞的BCR結合,促使其增殖、分化、產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細胞,并能與之結合,發(fā)揮免疫效應的物質。(3)抗原兩個特性:免疫原性、抗原性。2.醫(yī)學上重要的抗原2a.病原微生物:細菌、病毒、立克次氏體。(表面抗原、核心抗原、鞭毛抗原等),背披骸貪妊兄琴績垃羌齲芋溯咎嘲妨拷劉粟澎捶南閣百抗堰汾傀嫁毀煞程免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,6,抗原與抗體,a.自身抗原:一般自身組織對機體自身沒有抗原性,但在外傷、感染、電離輻射、藥物等影響下可以發(fā)生變性成為自身抗原,刺激機體產(chǎn)生免疫反應引起自身免疫性疾病,ANA.dsDNA等。a.腫瘤抗原:如AFP、CEA、PSA等。b.同種異體抗原:紅細胞血型抗原、白細胞抗原(人類白細胞抗原又稱HLA)等等。2抗體的定義:(1)抗體是機體在抗原物質刺激下所形成的一類具有與抗原發(fā)生特異性結合反應的球蛋白。,繼坊肚快頃睹吶熟設稠接甸運牽進扼錠風隋聾堯睬粒明姿煮豆措記俱衙棉免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,7,(2)抗體是介導體液免疫的重要分子,是指B細胞識別抗原后增殖分化為漿細胞所產(chǎn)生的一種蛋白質,主要存在于血清等體液中。能與抗原特異性結合,具有免疫功能。(3),太岸陷凌坤潤欺施碑苔擇膘承涪家攬澄沾睡占隔漚轍顏貴毫泵萬泊痘寥留免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,8,抗原與抗體,l抗體產(chǎn)生的一般規(guī)律抗原刺激機體后可產(chǎn)生免疫球膽白G、A、M。一般2-3周后才有抗體產(chǎn)生,其出現(xiàn)順序;IgM最早,但消失也快,在血液中只維持數(shù)周至數(shù)月。(所以臨床檢測IgM抗體利于早期診斷)IgG出現(xiàn)稍遲于IgM,當IgM接近消失時,IgG達高峰階段,它在血液維持時間較長可達數(shù)年之久。IgA繼IgM和IgG后出現(xiàn)。,燃甘個傣棘摯駱襟謅癟趾王張粱炬迪湃襲嘯泰莖疲檢街澄委桔肆平妙嘛胖免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,9,抗體的基本內容,用電泳的方法可將血清或血漿蛋白分離成白蛋白和球蛋白兩個組分。大多數(shù)抗體位于r球蛋白區(qū)域內??贵w的另一個常用名為免疫球蛋白(Ig),意為r球蛋白中與免疫相關的組分??贵w在血液中檢出,但它在其他部位存在;細胞質內質網(wǎng)和高爾基體的膜和B淋巴細胞膜上、NK細胞和肥大細胞的細胞膜上、組織液和血漿中、還在乳汁和分泌液中??贵w分類;IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。IgG亞類IgG1-4、IgA亞類1-2,咨韋詹饞柱明題鉗豺敷坐恩褪茄啟捎寧癟奔弱琉菲佃沈湯嗚舌恰火夾仍澗免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,10,抗體的基本內容,抗體的功能對有害因子,如毒素、藥物、病毒、細菌、和其它寄生蟲可通過與特出細胞受體結合而造成機體的損害,而分泌抗體可通過與其結合了阻止與響應受體結合,起到了中和作用。IgG的調理作用促進吞噬細胞對抗原的吞噬。IgG、IgE和IgM介導的抗體依賴性細胞介導的細胞毒作用。(NC、MC、NK細胞)IgE所介導的超敏反應IgA介導的粘膜免疫母體的IgG介導的新生兒免疫,賤冷舒佃辜廉翔宵箱系搐宇坤票撰惑默潮進庚羹嚼故贛怖挑維只藏價氟檄免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,11,應用抗原抗體結合原理檢測的項目,感染性疾病檢測項目肝炎病毒篩查:A、B、C、D、E、G、TTV、CMV呼吸道病原體篩查:EB、AD、CB、RSV、MP、CP感染性疾病檢查項目:Uu、CT、NG、USR.TPPA、HIV自身免疫性疾病項目免疫全項:ANA、ds-DNA、AMA、ANCA、ENA、Ig.C3、C4、CRP、ASO、RF、CIC肝病自身抗體:ANA、ds-DNA、SMA、AMA、LKM、SLA可溶性肝抗原、LC1抗肝溶質型抗原自身抗體:ANA、ds-DNA、AMA、ANCA、ENA腎病自身抗體:ANA,ds-DNA,GBM,ANCN.ENA糖尿病自身抗體:IAA、ICA、GAD,爸賒授沈捻艾蘇屈孝崔殼茨鵝寸勺泄復睫現(xiàn)沂甜均達竅拙邪熏拓涼皿皿鍋免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,12,應用抗原抗體結合原理檢測的項目,電化學發(fā)光定量分析儀檢查項目參考值AFP肝15.0ng/mlCEA結腸、胃、乳腺3.40ng/mlPSA/fPSA前列腺PSA4.0ng/mlCA15-3乳腺25.0U/mlCA125卵巢35.0U/mlCA19-9胰腺、膽囊27.0U/mlCA724胃、卵巢6.9U/mlNSE小細胞肺Ca12.5/mlCYFRA2非小細胞肺Ca3.3ng/ml,版醞根陡掂趙輩豪港渭屋倆苗贛楚診仁漳宅滬噸隘凡毆愛鼠殆睹檢資洼動免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,13,應用抗原抗體結合原理檢測的項目,性激素6項參考值黃體生成素(LH)青春期、成年期卵泡激素(FSH)、泌乳素(PRL)3.4-24.1ng/ml雌二醇(E2)卵泡期、黃體期、絕經(jīng)期孕酮(PRO)、睪酮(T)0.06-0.82ng/ml糖尿病項目胰島素C肽,瞳召貴擴解黨然約幅砒建踢恢鉑錯窖莉困國艾妥湃宣廷逾宏炊艷亢堅謝鐘免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,14,免疫指標與臨床疾病,.HBsAg:急、慢性乙肝無癥狀攜帶者2.HBsAb:疫苗接種后、既往感染后,有免疫力。3.HbeAg:病毒復制,傳染性強。re-S1:病毒復制,傳染性強。4.HBeAb:病毒復制降低或消失,傳染性很弱。5.HbcAb:乙肝感染后產(chǎn)生,持續(xù)性強,可終生不消失。6.HbcIgM:乙肝感染早期,為早期診斷標志。7.HAVAbIgM:急性甲肝,2個月后陽性消失。8.HCV-Ab:感染過丙肝,陽性可持續(xù)1年以上。9.HDV-Ab:感染過丁肝,一般在乙肝感染后出現(xiàn)。10.HEV-IgM:戊肝感染的早期。11.HGV-Ab:感染過庚肝。12.CMV-IgM:感染CMV,偶發(fā)可引起肝細胞炎癥。13.TTV-Ab:感染TTV而引起的肝細胞炎癥。,蟲翟貫訛員窩蒜蝶收棲掄咖岸衷害幼攔然照愉絢洋銜狄媽臨獰滌澗擰唾起免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,15,免疫指標與臨床疾病,乙型肝炎標志物模式分析及臨床意義臨床診斷、免役接種、臨床分期、傳染判斷、母嬰檢查等常見乙肝的8種模式:sAgsAbeAgeAbcAb臨床意義HBV感染,急、慢性乙肝,傳染性強急、慢性乙肝,傳染性弱,或攜帶者急慢性乙肝,或攜帶者。查HBV-DNA既往感染過乙肝病毒,有免疫力既往感染,乙肝恢復期,有免疫力接種乙肝疫苗后,HBV感染后的恢復既往感染,乙肝恢復期基本無傳染既往感染,排除檢查HBV-DNA,懷慈瞅藹筍仙萄謊成承然采膽鎮(zhèn)膀錐隆親夸鄰土暫封酗希約膿埂催弧轅稠免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,16,免疫指標與臨床疾病,不常見乙肝的6種模sAgsAbeAgeAbcAb臨床意義早期HBV感染.慢性攜帶傳染性強急性HBV,趨向恢復,慢性肝炎不同亞型HBV二次感染,感染早期同上非典型性急性感染同上+不同亞型HBV二次感染Ag-Ab轉換期,倔露丘顛掖翁勤經(jīng)堂鐮宵吾勝專嶺騁皮艦忌祈秤冠扶烘墳滬績云磋普薛恭免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,17,免疫指標與臨床疾病,呼吸道病菌抗體IgM檢測的臨床意義呼吸道病毒并非分類上的名稱,而是習慣上指由呼吸道傳播并能引起呼吸道感染的病毒總稱。1MP-IgM(肺炎支原體抗體IgM)MP通過呼吸道傳播引起原發(fā)性非典型肺炎(肺炎病歷10-20%),可并發(fā)鼻竇炎、皮炎、心包炎、心肌炎等,檢出MP-IgM陽性可判斷進期有的感染。2CP-IgM(肺炎衣支體抗體IgM)CP是一類介于細菌和病毒之間的微生物,傳播途徑主要是呼吸道,可引起肺炎有時還侵犯心臟、心包、腦膜、肝臟等部位,檢出CP-IgM陽性可判斷進期有CP的感染。,席骯韶坍貳辭哭躊珠回蓑虐冠馴敦閹辱化漳憋蒂圈咨媳顱疚盜姻紳挨斡仲免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,18,免疫指標與臨床疾病,3EBV-IgM(EB病毒抗體IgM)EBV是傳染性單核細胞增多癥的病原體,主要通過唾液傳播,EBV對兒童及青少年易感,陽性見于兒童期扁桃體炎和炎頰炎偶發(fā)的病歷,EBV偶發(fā)波及中樞神經(jīng)系統(tǒng)和肝炎,EBV與非洲兒童惡性淋巴瘤和鼻煙癌密切相關。4CBV-IgM(柯薩奇病毒抗體IgM)CBV可經(jīng)口或呼吸道侵入人體,在局部繁殖,通過病毒血癥擴散,除局部癥狀外可產(chǎn)生一系列綜合癥,如感冒、急性心肌炎、心包炎、無菌性腦膜炎、皰疹性咽炎、皮炎、肝炎等疾病。,忿雄均易淌簍和馮艷踏沽幾悅墨盡池桑永莎涎魂毋娛石識釜軒撅秸獺犁鎬免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,19,免疫指標與臨床疾病,5ADV-IgM(腺病毒抗體IgM)ADV從脾體細胞分離而得名,能引起呼吸道和眼部的疾患,急性病為發(fā)熱、咽炎、咳漱,常有角、結膜炎、鼻炎、氣管炎、非典型肺炎等,并伴有全身癥狀,檢出ADV-IgM陽性可判斷進期有ADV的感染。6RSV-IgM(合胞病毒抗體IgM)RSV是引起嬰幼兒下呼吸道感染的病原體,也是肺炎和支氣管炎的病因,成年多表現(xiàn)發(fā)熱性感冒,老年人可使氣管炎和肺氣腫加重,檢出RSV-IgM陽性可判斷進期有RSV的感染。,矣帚糟的資魏舊故韓楚肘糖鎢裸潦速邯限瞳淵釉雞見赦溜晚博野顏湛股趙免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,20,應用抗原抗體結合原理檢測的項目,7冷凝集素實驗冷凝集素本質是IgM,正常人血清中可含少量,1%的人.1:32以上,60%的肺炎支原體肺炎病人病后2周可達1:32-64或更多,某些疾病如傳單增多癥、重癥貧血、雷諾氏癥、肝硬化等亦可呈陽性。8.肥達(Widal)氏凝集實驗傷寒和副傷寒是由傷寒沙門氏菌及甲、乙、丙3種副傷寒沙門氏菌所致的腸道傳染病?!癘”菌體”H”鞭毛抗原菌液檢查血清中的抗體。參考值:“O”、甲、乙、丙1:40”H”、25%前列腺癌可能性?。?.75ng/mL/年,前列腺癌可能性增加。,秉狂徘妨六布煌闖昏弗翼入旋答扯臀邀札操蓉葦災閉騎乖籍攢藍沮蒼渙旱免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,46,12.血清鐵蛋白(SF)是一種儲鐵蛋白。SF升高見于肺癌、胰癌、白血病、肝臟疾病。SF減低見于缺鐵性貧血、大量失血、長期腹瀉。,肛驢飄脆第繪嬰頭粱仍載拼凄忍紐蝗毅咎炊憨儡諄竭嬌翼礎彎悔胺熙倪膽免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,47,部分腫瘤標志物的陽性順序,簡冶嘶蕩毖醇群陰郊清只睡梨硫旅歧閩姿習勺縮椎恰扮框貧睬丹蜂矽壓蕪免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,48,腫瘤標志物檢測圖譜,十腫瘤標志物檢測圖譜,乘予兔拉敢哪燕甭卜帚淚狐仙肄陶信舉優(yōu)約緒騁遞尖夸蟄生秸牌孵紙描凜免疫實驗室基礎常識免疫實驗室基礎常識,2019/12/17,49,自身抗體的分類及命名,1、以抗體在細胞或組織中存在的位置進行命名:ANA、AMA、LKM等。2、以靶細胞或靶組織進行命名:抗骨骼肌抗體、抗胰島細胞抗體等。3、以首先被檢測到該抗體的患者名字的縮寫進行命名:抗Sm、抗Ro、抗La等。4、以相關疾病的名字的縮寫進行命名:抗Scl-70、抗SS-A、抗SS-B等。5、以抗原的化學性質進行分類命名:抗RNP

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