實驗二微量凱氏定氮法.ppt

實驗二 微量凱氏定氮法,一、目的要求： 理解與掌握凱氏定氮法測定氮含量的原理，掌握樣本消化、蒸餾、吸收和滴定的正確操作方法。 二、原理： 有機(jī)物與濃硫酸共熱，有機(jī)氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)氮（氨），氨與硫酸作用生成硫酸氨，后者與強(qiáng)堿作用釋放出氨，借蒸汽將氨蒸至酸液中，根據(jù)此過量酸液被中和的程度，即可計算出樣品的含氮量。用反應(yīng)式表示如下：,4.滴定:,(NH4)2B4O7 + 2HCl + 5H2O 2NH4Cl + 4H3BO3,中和程度用滴定法來判斷，分回滴法和直接法兩種。 （1）回滴法：用過量的標(biāo)準(zhǔn)酸吸收氨，其剩余的酸可用標(biāo)準(zhǔn)NaOH滴定，由鹽酸量減去滴定所耗NaOH的量即為被吸收的氨之量。此法采用甲基紅做指示劑。 （2）直接法：用硼酸作為氨的吸收溶液，結(jié)果使溶液中H+降低，混合指示劑（PH4.35.4），黑紫色變?yōu)榫G色。再用標(biāo)準(zhǔn)酸來滴定，使硼酸恢復(fù)到原來的氫離子濃度為止，指示劑出來淡紫色為終點，此時所耗的鹽酸量即為氨的量。,為了加速消化，可加入CuSO4作催化劑，硫酸鉀或硫酸鈉可提高溶液的沸點。此外硒汞混合物或鉬酸鈉可作為催化劑，且可縮短作用時間，H2O2也可加速反應(yīng)。,二、試劑 樣液：1g卵清蛋白溶于0.9%NaCl液，并稀釋至100ml。如有不溶物，離心取上清液備用。 濃硫酸（A.R.）。 硫酸鉀：硫酸銅=3：1（W/W）混勻研成粉末。 30%氫氧化鈉溶液：30gNaOH溶于蒸餾水，釋至100ml。 2%硼酸溶液：2g硼酸溶于蒸餾水，釋至100ml。 混合試劑：0.1%甲基紅酒精溶液和0.1%甲烯藍(lán)酒精溶液按4：1比例（V/V）混合。本指示劑在PH5.2時為紫紅色，PH4.5時為暗藍(lán)（或灰色）色，PH5.6時為綠色，變色點PI為5.4。 0.01mol/L標(biāo)準(zhǔn)鹽酸溶液，用恒沸鹽酸準(zhǔn)確稀釋。,三、操作方法,X: 樣品總氮含量（%）； A: 樣品消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積（mL）； B: 空白實驗消耗鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積（mL）； M:鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度（mol/L） C: 相當(dāng)于樣品未稀釋前的體積 (mL),消化,1. 凱氏燒瓶編號加樣: 空白管 (1.0ml蒸餾水) : 樣品管(1.0ml樣品),2. 加硫酸鉀-硫酸銅20mg, 濃硫酸2ml, 沸石,3. 凱氏燒瓶一起放入消化爐, 蓋好, 消化至透明淡綠色,4. 注意控制火力, 防止暴沸!,蒸餾,1. 錐形瓶及定氮儀的洗滌,3. 加堿, 加蒸餾水,2. 凱氏燒瓶及錐形瓶的安裝,4.注意硼酸顏色的變化,取凱氏燒瓶時小心