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文檔簡介

1、實驗八 核糖核酸的組分鑒定,一、實驗?zāi)康?掌握核糖核酸組分鑒定的原理。 學(xué)會鑒定核糖核酸組分的方法。,核糖核酸的組成成分主要包括核糖、磷酸和堿基。,RNA含量為干菌體的2.67%10.0%，,二、實驗原理,2.在堿性環(huán)境下，嘌呤堿能與銀離子反應(yīng)形成沉淀，但此處堿性環(huán)境不能用一般的強堿，否則強堿會與銀離子反應(yīng)產(chǎn)生沉淀而干擾結(jié)果判定。 3. 核糖核酸與濃鹽酸共熱時，會發(fā)生降解，形成的核糖繼而轉(zhuǎn)變成糠醛，后者可與3，5-二羥基甲苯（地衣酚）反應(yīng)，在Fe3+或Cu2+催化下，生成綠色復(fù)合物。 4. 磷酸組分可與定磷試劑在酸性環(huán)境中反應(yīng)，生成藍(lán)色物質(zhì)。因此，可以根據(jù)以上性質(zhì)，設(shè)計實驗對各組分進(jìn)行鑒定。,

2、（1）1.5M硫酸； （2）0.1mol/L硝酸銀溶液； （3）1mol/L濃氨水； （4）三氯化鐵-濃鹽酸溶液： （5）地衣酚-乙醇溶液： （6）定磷試劑：17%的硫酸，10%的抗壞血酸和2.5%的鉬酸銨。,三、 試劑,1. 取100mg實驗七中提取的酵母RNA，加入1.5M H2SO4溶液5mL，在沸水浴中加熱10-20分鐘，使核酸充分水解后，用于對各組分的鑒定。 2. 磷酸組分鑒定：取水解液1mL，加入干凈的試管中，再加入等體積的新配制的定磷試劑1mL，混勻后，在45左右的水浴中加熱15-30min，觀察顏色變化。,四、 實驗步驟,3. 嘌呤堿的鑒定：取水解液1mL，加入干凈的試管中，加入過量的濃氨水，再加入1mL的0.1M的硝酸銀溶液，觀察沉淀的生成。 4. 核糖的鑒定：取水解液1mL，加入干凈的試管中，再加入2mL三氯化鐵-濃鹽酸溶液和0.2mL苔黑酚

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