2025年新科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年新科版選擇性必修3生物下冊階段測試試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、我國政府不贊成；不允許、不支持、不接受任何形式的生殖性克隆人。下列屬于其原因的一組是（）

①克隆人只是某些人出于某種目的制造出的“產(chǎn)品”；沒有“父母”，這可能導(dǎo)致他們在心理上受到傷害。

②生殖性克隆技術(shù)可能帶有一定的致癌風(fēng)險(xiǎn)。

③由于技術(shù)問題；可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆人。

④克隆人的家庭地位難以認(rèn)定；可能使以血緣為紐帶的父子；兄弟和姐妹等人倫關(guān)系消亡。

⑤生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻；家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念。

⑥克隆人作為一項(xiàng)科學(xué)研究屬于中性的；但可能帶來嚴(yán)重的基因歧視。

⑦生殖性克隆人是對人類尊嚴(yán)的侵犯⑧生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性，不利于人類的生存和進(jìn)化A.①②③④⑤⑥B.①③④⑤⑦⑧C.①②③⑤⑦⑧D.①④⑤⑥⑦⑧2、下圖是制備單克隆抗體流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B.②中使用活性較強(qiáng)的病毒有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時(shí)具有巨噬細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群3、據(jù)報(bào)道；某科學(xué)實(shí)驗(yàn)室運(yùn)用克隆技術(shù)，成功培育克隆豬，其流程如圖所示，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.過程①中培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制等現(xiàn)象B.過程②與過程③所用的培養(yǎng)液成分相似且一般都含有血清C.過程④代表胚胎移植，常選擇囊胚或原腸胚作為移植對象D.過程④常用激素處理代孕豬，使其處于易接受外來胚胎的生理狀態(tài)4、為拓寬白菜育種的基因資源，改良白菜品質(zhì)，研究人員以白菜（2n＝20，AA）和甘藍(lán)（2n＝18，CC）為材料進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交，得到雜種植物。對兩種親本和某融合植株進(jìn)行細(xì)胞DNA含量檢測，結(jié)果如圖。下列說法正確的是（）

A.白菜的DNA相對含量較少說明其基因數(shù)量比甘藍(lán)少B.操作中只能用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.該技術(shù)需要再生細(xì)胞壁后才能進(jìn)行植物組織培養(yǎng)D.檢測結(jié)果說明待檢測植株為白菜—甘藍(lán)雜種植株5、下面的資料表明在各種培養(yǎng)基中細(xì)菌的生長狀況（S、C、M為簡單培養(yǎng)基；U、V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì)），據(jù)表推測細(xì)菌自身不能合成的物質(zhì)是（說明：“+”表示能正常生長，“-”表示不能生長）。（）。培養(yǎng)基生長狀態(tài)S、C、M-S、C、M，+V+Z-S、C、M，+U+Y+S、C、M，+Z+X-S、C、M，+V+Y+S、C、M，+U+X-S、C、M，+Y+Z+

A.UB.VC.YD.Z6、精氨酸依賴型谷氨酸棒狀桿菌缺乏將鳥氨酸轉(zhuǎn)化為精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培養(yǎng)基上正常生長，但可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種。如圖為野生型谷氨酸棒狀桿菌經(jīng)誘變獲得精氨酸依賴型菌并進(jìn)行篩選的過程示意圖，過程①將紫外線照射處理過的菌液接種在培養(yǎng)基甲上，待培養(yǎng)至菌落不再增加時(shí)，將甲中菌落轉(zhuǎn)移到乙培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)得到如圖所示的結(jié)果。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會(huì)出現(xiàn)菌落B.乙培養(yǎng)基與甲相比可能缺少了精氨酸C.紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生可遺傳變異D.乙中的菌落是通過影印法接種獲得的，菌落A為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種7、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.CO2培養(yǎng)箱中95%的氧氣可保證細(xì)胞進(jìn)行正常呼吸B.原代培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞需經(jīng)胰蛋白酶處理后再進(jìn)行傳代培養(yǎng)C.傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞失去增殖能力是由于細(xì)胞發(fā)生分化所致D.對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆培養(yǎng)即可獲得所需的單克隆抗體評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)8、下列關(guān)于單克隆抗體的敘述中，正確的是（）A.制備單克隆抗體是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用B.單克隆抗體特異性強(qiáng)、純度高、產(chǎn)量大、靈敏度高C.工業(yè)化制備單克隆抗體一般通過體內(nèi)培養(yǎng)獲得D.單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的9、PCR可以特異性地快速擴(kuò)增目的基因，成功的擴(kuò)增應(yīng)該產(chǎn)生與目的基因大小一致的擴(kuò)增產(chǎn)物，不嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鲿?huì)導(dǎo)致無擴(kuò)增產(chǎn)物或出現(xiàn)非目的基因擴(kuò)增產(chǎn)物。下列說法正確的是（）A.若PCR反應(yīng)緩沖溶液中未加入Mg2+，則結(jié)果可能不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物B.若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白，則結(jié)果可能不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物C.若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，則結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物D.若引物間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，則結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物10、農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA可以轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的染色體DNA中。研究者將下圖中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)；并以此環(huán)為模板，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，以此可確定T-DNA插入的具體位置。下列說法正確的是（）

A.進(jìn)行PCR擴(kuò)增的依據(jù)是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理B.進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要的酶有解旋酶和熱穩(wěn)定DNA聚合酶C.利用圖中的引物②、③組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列D.通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對，可確定T-DNA的插入位置11、豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白；對于病毒入侵細(xì)胞至關(guān)重要。研究人員利用E2蛋白來制備抗CSFV單克隆抗體的過程如圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.注射E2蛋白后，從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞均能產(chǎn)生E2蛋白抗體B.過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法，得到的③不一定是雜交瘤細(xì)胞C.細(xì)胞③經(jīng)一次篩選即可得到足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞D.此過程生產(chǎn)的單克隆抗體既可用于CSFV的檢測，也可用于該種豬瘟的治療12、體細(xì)胞核移植胚胎組的蛋白甲基化可導(dǎo)致克隆效率降低；毛殼素是組蛋白H3K9甲基化轉(zhuǎn)移酶SUV39H1/2的特異性化學(xué)抑制劑，使用毛殼素處理供體細(xì)胞，可降低SUV39H1/2在供體細(xì)胞和核移植胚胎中的表達(dá)水平，提高豬胚胎的發(fā)育率，如圖是利用不同濃度毛殼素處理對豬胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)成功率的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，下列敘述正確的是（）

A.克隆豬的遺傳物質(zhì)來自供體細(xì)胞和代孕母豬B.過程①使用的培養(yǎng)液需添加動(dòng)物血清或血漿C.過程④采用滅活的病毒處理以促進(jìn)精卵結(jié)合D.過程⑤成功與否與代孕母豬的生理狀態(tài)有關(guān)13、據(jù)人民網(wǎng)報(bào)道，“一對名為露露和娜娜的基因編輯嬰兒于2018年11月在中國健康誕生。這對雙胞胎的一個(gè)基因經(jīng)過修改，使她們出生后即能天然抵抗艾滋病。這是世界首例免疫艾滋病的基因編輯嬰兒”。下列有關(guān)說法不正確的是（）A.基因編輯制造人類的行為是符合倫理道德的B.基因編輯技術(shù)，可改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，有利于人類的進(jìn)化C.通過基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)，使人類進(jìn)化成新物種D.基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究，但不能用于編輯嬰兒14、如圖為利用酵母菌釀制葡萄酒的實(shí)驗(yàn)裝置示意圖。下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的敘述，正確的是（）

A.果酒發(fā)酵時(shí)，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌B.用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要維持閥a、b的開放狀態(tài)C.利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵，發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃D.果酒、果醋發(fā)酵所用的菌種細(xì)胞內(nèi)均含有多種細(xì)胞器15、通過設(shè)計(jì)引物，運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。下圖為基因工程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個(gè)堿基T不能與目的基因片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。下列敘述正確的是（）

A.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入載體B.PCR的過程主要包括變性→延伸→復(fù)性（退火），溫度逐漸降低C.第3輪PCR，引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因D.每一輪PCR都消耗引物和原料，需要在操作中及時(shí)補(bǔ)充評卷人得分三、填空題(共6題，共12分)16、一般包括______、______等技術(shù)17、獲取目的基因的方法______、______、______18、毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的_____________分解成小分子的____________和______________；脂肪酶可以將_____________水解成_________________和________________。19、在___________條件下，DNA與___________反應(yīng)呈現(xiàn)______________，因此_____________可以作為鑒定DNA的試劑。20、干細(xì)胞的應(yīng)用：有著_____能力及_____的干細(xì)胞，與組織、器官的發(fā)育、_____和_____等密切相關(guān)。21、應(yīng)用分析與比較的方法，對生殖性克隆與治療性克隆進(jìn)行列表闡述?

生殖性克隆與治療性克隆的比較。比較項(xiàng)目生殖性克隆治療性克隆含義__________用到的技術(shù)__________目的__________評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)22、胚胎發(fā)育早期，細(xì)胞的數(shù)量不斷增加，胚胎的總體積也增加。()A.正確B.錯(cuò)誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)23、鼠傷寒沙門氏菌的野生型菌株（his+）可在基本培養(yǎng)基（含微量組氨酸）上生長形成菌落，而突變型的組氨酸營養(yǎng)缺陷型菌株（his-）不能合成組氨酸；無法在基本培養(yǎng)基上形成菌落。利用his菌株可檢測環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑（誘發(fā)his-菌株突變）?；卮鹣铝袉栴}：

(1).基本培養(yǎng)基的成分主要包括_____。制備基本固體培養(yǎng)基的操作：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時(shí)應(yīng)注意：_____。

(2).檢測是否存在化學(xué)致癌劑時(shí)，用_____法將his-菌株接種于基本培養(yǎng)基上，使其密集均勻分布在平板上，將浸泡過待測化合物的濾紙片貼于平板中央。若培養(yǎng)基滅菌合格，則可能影響該檢測結(jié)果的兩個(gè)重要因素是_____。若圖A為對照組，B為實(shí)驗(yàn)組，則A組濾紙片的處理方法是_____。經(jīng)正確檢驗(yàn)后，結(jié)果如B所示，則實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論為_____。

(3).使用過的培養(yǎng)基在丟棄之前應(yīng)做的處理及目的是_____。24、下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的實(shí)驗(yàn)流程示意圖；請據(jù)圖回答：

（1）泡菜是乳酸菌發(fā)酵的產(chǎn)物，乳酸菌的代謝類型是___________________。制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜，原因是____________________________。

（2）將鹽與清水按照一定的比例配制鹽水，待鹽水煮沸冷卻后，注入裝好原料的泡菜壇中，同時(shí)加入一定量的“老汁”(陳泡菜水)。將鹽水煮沸冷卻的目的是____________________；加入“老汁”的作用是____________________________。

（3）測定亞硝酸鹽含量的方法是_________________。即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與____________________________發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成_______________色的染料，然后將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的____________進(jìn)行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。25、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_______。

（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。評卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)26、GDNF是一種神經(jīng)營養(yǎng)因子；對損傷的神經(jīng)細(xì)胞具有營養(yǎng)和保護(hù)作用。研究人員構(gòu)建了含GDNF基因的表達(dá)載體（如圖1所示），并導(dǎo)入到大鼠神經(jīng)干細(xì)胞中，用于干細(xì)胞基因治療的研究。請回答：

（1）基因表達(dá)載體除了目的基因外，還必須有啟動(dòng)子、_____以及_____等。啟動(dòng)子是RNA聚合酶_____的部位；有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。

（2）一般將GDNF基因的表達(dá)載體導(dǎo)入大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的方法是_____。

（3）構(gòu)建含GDNF基因的表達(dá)載體時(shí)，需選擇圖1中的_____限制酶進(jìn)行酶切。

（4）經(jīng)酶切后的載體和GDNF基因進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物經(jīng)篩選得到的載體主要有3種，單個(gè)載體自連、GDNF基因與載體正向連接、GDNF基因與載體反向連接（如圖1所示）。為鑒定這3種連接方式，選擇HPaⅠ酶和BamHⅠ酶對篩選得到的載體進(jìn)行雙酶切，并對酶切后的DNA片段進(jìn)行電泳分析，結(jié)果如圖2所示。圖中第_____泳道顯示所鑒定的載體是正向連接的。如果換用HPaⅠ酶和XhoI酶進(jìn)行雙酶切，能否鑒定出載體與目的基因是正向連接還是反向連接，_____（填“能”或“否”），用這兩種酶切的結(jié)果中DNA片段最長的是_____，最短的是_____。

（5）將正向連接的表達(dá)載體導(dǎo)入神經(jīng)干細(xì)胞后，為了檢測GDNF基因是否成功表達(dá)，可用相應(yīng)的_____與提取的蛋白質(zhì)雜交。檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA的方法（技術(shù)）是_____。27、動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)傳代比較困難；為長期保存動(dòng)物的基因組，一般利用大腸桿菌構(gòu)建基因組文庫，具體流程如下圖所示?；卮鹣铝袉栴}：

(1)為保證載體和基因組DNA片段能夠連接，載體要先用__________（酶）處理。將基因組DNA導(dǎo)入大腸桿菌菌群前，大腸桿菌需要提前用__________處理；使其處于感受態(tài)。

(2)研究者需要從基因組文庫中獲取動(dòng)物細(xì)胞的Y基因進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有______和4種脫氧核苷酸，該技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是______。

(3)甲鏈為Y基因的轉(zhuǎn)錄模板鏈，乙鏈為甲鏈的互補(bǔ)鏈。轉(zhuǎn)化之后，為了判斷Y基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞，可以用__________。鏈片段作為探針；為判斷目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄，可以用__________鏈片段作為探針。28、戴口罩；勤洗手是預(yù)防新型冠狀病毒（COVID-19）的有效措施。某公司在防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠。為衡量該凝膠的清洗效果；研究人員檢測了凝膠洗手前后，手部細(xì)菌的含量。凝膠洗手前的檢測流程見下圖。請根據(jù)上表實(shí)驗(yàn)回答下列問題：

實(shí)驗(yàn)組別對照設(shè)置接種處理數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，求平均值A(chǔ)不洗手按上述實(shí)驗(yàn)步驟處理；每組設(shè)置3個(gè)平板。

B用水吸收C有洗手凝膠洗手D空白不接種

(1)人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)稱為________，雖然它的配方不同，但一般都含有水、碳源、__________和無機(jī)鹽。如果培養(yǎng)乳酸桿菌，還需要在其中添加___________。

(2)在實(shí)驗(yàn)中，需要對圖中培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌，常用的方法是___________。

(3)表格實(shí)驗(yàn)步驟中添加D組的目的是____________________。

(4)如果想了解手部是否有大腸桿菌，可以在培養(yǎng)基中加入一定量的_____染料；觀察菌落的特點(diǎn)。

(5)新型冠狀病毒不能用基本培養(yǎng)基培養(yǎng)，原因是__________________。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、B【分析】【分析】

1；生殖性克隆：指將克隆技術(shù)用于生育目的；即用于產(chǎn)生人類個(gè)體。

2；中國政府：禁止生殖性克隆人；堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），不反對治療性克隆人。

【詳解】

①克隆人只是某些人出于某種目的制造出的“產(chǎn)品”；沒有“父母”，這可能導(dǎo)致他們在心理上受到傷害，①符合題意；

②生殖性克隆人不會(huì)帶有致癌風(fēng)險(xiǎn)；②不符合題意；

③由于技術(shù)問題；可能孕育出有嚴(yán)重生理缺陷的克隆人，③符合題意；

④克隆人的家庭地位難以認(rèn)定；可能使以血緣為紐帶的父子；兄弟和姐妹等人倫關(guān)系消亡，④符合題意；

⑤生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻；家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念；⑤符合題意；

⑥生殖性克隆人不涉及轉(zhuǎn)基因技術(shù)；因此不存在基因歧視，⑥不符合題意；

⑦生殖性克隆人是對人類尊嚴(yán)的侵犯；⑦符合題意；

⑧生殖性克隆人破壞了人類基因多樣性的天然屬性；不利于人類的生存和進(jìn)化，⑧符合題意。

故選B。

【點(diǎn)睛】

2、D【分析】【分析】

1；雜交瘤技術(shù)的目的是制備對抗原有特異性的單克隆抗體；所以融合一方必須是經(jīng)過抗原刺激產(chǎn)生的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）。

2；使用細(xì)胞融合劑造成細(xì)胞膜一定程度的損傷；使細(xì)胞易于相互粘連而融合在一起。最佳的融合效果應(yīng)是最低程度的細(xì)胞損傷而又產(chǎn)生最高頻率的融合。聚乙二醇是目前最常用的細(xì)胞融合劑。

3；細(xì)胞融合是一個(gè)隨機(jī)的物理過程；在小鼠脾細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞混合細(xì)胞懸液中，經(jīng)融合后細(xì)胞將以多種形式出現(xiàn)。如融合的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞、融合的脾細(xì)胞和脾細(xì)胞、融合的瘤細(xì)胞和瘤細(xì)胞、未融合的脾細(xì)胞、未融合的瘤細(xì)胞以及細(xì)胞的多聚體形式等。在選擇培養(yǎng)基的作用下，只有B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交才具有持續(xù)增殖的能力，形成同時(shí)具備抗體分泌功能和保持細(xì)胞永生性兩種特征的細(xì)胞克隆。

【詳解】

A；①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應(yīng)B細(xì)胞；A錯(cuò)誤；

B；在動(dòng)物細(xì)胞融合的過程中；可用物理法、化學(xué)法和生物法誘導(dǎo)細(xì)胞融合，而胰蛋白酶是在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程用于分離細(xì)胞的，B錯(cuò)誤；

C；雜交瘤細(xì)胞同時(shí)具有效應(yīng)B細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性；C錯(cuò)誤；

D；④表示用選擇培養(yǎng)基篩選出的能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞群；D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

1；核移植是將體細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中；所以實(shí)驗(yàn)前要去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核?；虮磉_(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，所以提取小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交。

2；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)．其中提供胚胎的個(gè)體稱為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱為“受體”。

【詳解】

A；過程①培養(yǎng)豬的體細(xì)胞時(shí)；會(huì)出現(xiàn)貼壁生長和接觸抑制的現(xiàn)象，A正確；

B；過程②動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與過程③早期胚胎培養(yǎng)所用的培養(yǎng)液成分相似且一般都含有血清；B正確；

C；過程④代表胚胎移植；一般選擇囊胚或桑椹胚的胚胎作為移植對象，C錯(cuò)誤；

D；通常用激素處理代孕母豬和供體母豬；對他們進(jìn)行同期發(fā)情處理，故過程④常用激素處理代孕豬，使其處于易接受外來胚胎的生理狀態(tài)，D正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】4、C【分析】【分析】

植物體細(xì)胞雜交過程：酶解法去壁獲取原生質(zhì)體→人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合→再生出新細(xì)胞壁；標(biāo)志著原生質(zhì)體融合完成→經(jīng)脫分化和再分化過程，通過組織培養(yǎng)把雜種細(xì)胞培育成雜種植株。

【詳解】

A；基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段；白菜的DNA相對含量較少，不一定其基因數(shù)量比甘藍(lán)少，A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可以用化學(xué)方法PEG誘導(dǎo)；也可以用物理方法如離心法，B錯(cuò)誤；

C；原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是再生出新的細(xì)胞壁；故該技術(shù)需要再生細(xì)胞壁后才能進(jìn)行植物組織培養(yǎng)得到完整植株，C正確；

D；據(jù)圖可知；白菜DNA相對含量約為50，甘藍(lán)DNA相對含量約為75，檢測結(jié)果DNA相對含量為＞150，說明待檢測植株不是白菜—甘藍(lán)雜種植株，可能為甘藍(lán)-甘藍(lán)雜合植株，D錯(cuò)誤。

故選C。5、C【分析】【分析】

培養(yǎng)基是按照微生物的生長需要；用人工方法配制而成的營養(yǎng)物，其中有些是各種微生物都必需的，大多數(shù)情況下微生物特殊營養(yǎng)要求配制的培養(yǎng)基，稱選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

分析表格可知；U；V、X、Y、Z代表加入培養(yǎng)基的不同物質(zhì)，凡添加了物質(zhì)Y的培養(yǎng)基，細(xì)菌都能生長，反之則不能生長，說明物質(zhì)Y是細(xì)菌不能合成的。

故選C。6、D【分析】【分析】

由圖分析可知；圖中①表示將紫外線照射處理的菌液接種在含精氨酸的培養(yǎng)基上，②表示繼續(xù)培養(yǎng)在缺乏精氨酸的培養(yǎng)基上，圖甲中有A；B兩種菌落，圖乙中只有A菌落，因此甲中A表示野生型谷氨酸棒狀桿菌，B為精氨酸依賴型菌株。

【詳解】

A；液體培養(yǎng)基只是用作細(xì)菌的快速大量繁殖；如果需要形成菌落，那么應(yīng)該接種在固定培養(yǎng)基上，因此野生型菌液的培養(yǎng)皿中不會(huì)出現(xiàn)菌落，A正確；

B；圖甲平板上有A、B兩種菌落；乙平板上只有A菌落，據(jù)此推測A菌落可能是野生型谷氨酸棒狀桿菌，B菌落是精氨酸依賴型谷氨酸棒狀桿菌，乙培養(yǎng)基中可能缺少精氨酸，B正確；

C；紫外線照射可導(dǎo)致谷氨酸棒狀桿菌發(fā)生基因突變；為可遺傳變異，C正確；

D；乙中的菌落是在甲的基礎(chǔ)上采用影印法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果；由圖可知，菌落A是野生型菌種，菌落B為精氨酸依賴型菌株，可作為鳥氨酸發(fā)酵的優(yōu)良菌種，D錯(cuò)誤。

故選D。7、B【分析】【分析】

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件。

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物。

（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。

（3）適宜的溫度和pH。

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

【詳解】

A、CO2培養(yǎng)箱中的混合氣體是95%的空氣和5%的CO2（維持pH）；A錯(cuò)誤；

B；原代培養(yǎng)過程中用胰蛋白酶處理后分瓶可以有效解除細(xì)胞間的接觸抑制；從而保證細(xì)胞的增殖過程，B正確；

C；正常細(xì)胞的細(xì)胞分裂次數(shù)是有限的；據(jù)此可知，傳代培養(yǎng)中的細(xì)胞失去增殖能力是由于細(xì)胞衰老或遺傳物質(zhì)發(fā)生改變所致，C錯(cuò)誤；

D；對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細(xì)胞再在體外大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中獲得所需的單克隆抗體，D錯(cuò)誤。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)8、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動(dòng)物注射抗原；從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；制備單克隆抗體是動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最重要的應(yīng)用；融合后形成的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體，A正確；

B；單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、純度高、靈敏度高；并可能大量制備的特點(diǎn)，B正確；

C；體內(nèi)誘生法制備的單克隆抗體需要注入到小鼠的體內(nèi)；最后從小鼠的腹腔中提取腹水，此方法比較麻煩，而且抗體的量也較少，因此對于工業(yè)上需求較多的抗體而言，通常是采用體外培養(yǎng)法，C錯(cuò)誤；

D；單克隆抗體是由骨髓瘤細(xì)胞和效應(yīng)B細(xì)胞形成的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的；D錯(cuò)誤。

故選AB。9、A:B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制。

（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃；引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。

【詳解】

A、Mg2+離子濃度對PCR擴(kuò)增效率影響很大；濃度過高可降低PCR擴(kuò)增的特異性，濃度過低則影響PCR擴(kuò)增產(chǎn)量甚至使PCR擴(kuò)增失敗而不出擴(kuò)增條帶，A正確；

B；若模板DNA中含有抑制耐高溫的DNA聚合酶活性的雜蛋白；則可能會(huì)抑制PCR反應(yīng)中的延伸步驟，導(dǎo)致結(jié)果不會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物，B正確；

C；若引物與非目的序列發(fā)生堿基互補(bǔ)配對；則會(huì)使引物與模板結(jié)合位置錯(cuò)誤，導(dǎo)致擴(kuò)增片段錯(cuò)誤出現(xiàn)非目的序列擴(kuò)增產(chǎn)物，C正確；

D；若引物間發(fā)生堿基互補(bǔ)配對；則結(jié)果可能不出現(xiàn)擴(kuò)增產(chǎn)物或產(chǎn)物減少，D錯(cuò)誤。

故選ABC。10、A:D【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；PCR擴(kuò)增依據(jù)的是DNA分子雙鏈復(fù)制的原理；A正確；

B；進(jìn)行PCR擴(kuò)增需要熱穩(wěn)定DNA聚合酶（TaqDNA聚合酶）；但不需要解旋酶，B錯(cuò)誤；

C；DNA的兩條鏈反向平行；子鏈從引物的3′端開始延伸，則利用圖中的引物①、④組合可擴(kuò)增出兩側(cè)的未知序列，C錯(cuò)誤；

D；通過與受體細(xì)胞的基因組序列比對；即可確定T-DNA的插入位置，D正確。

故選AD。

【點(diǎn)睛】11、A:C【分析】【分析】

將漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)，獲得大量的特異性抗體的技術(shù)，稱為單克隆抗體的制備。

【詳解】

A；注射E2蛋白后；從小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞有多種，不一定能產(chǎn)生E2蛋白抗體，A錯(cuò)誤；

B；過程②可使用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法；得到的③可能是雜交瘤細(xì)胞，或者是融合的B細(xì)胞或是融合的骨髓瘤細(xì)胞，B正確；

C；細(xì)胞③要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；經(jīng)過多次篩選，才可獲得足量多的能產(chǎn)生E2蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；豬瘟病毒（CSFV）的檢測采用抗原-抗體雜交技術(shù)；抗CSFV的單克隆抗體能與豬瘟病毒（CSFV）蛋白質(zhì)外殼上的E2蛋白結(jié)合，故此過程生產(chǎn)的單克隆抗體可用于CSFV的檢測，D正確。

故選AC。12、B:D【分析】【分析】

細(xì)胞核移植是指通過顯微操作將一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移植到一個(gè)去核的卵母細(xì)胞內(nèi)的技術(shù)過程。體細(xì)胞核移植技術(shù)包括核供體細(xì)胞與受體細(xì)胞的準(zhǔn)備；細(xì)胞核移植、重構(gòu)胚的融合、激活、培養(yǎng)和移植等過程。

【詳解】

A；克隆豬的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)來自提供細(xì)胞核的胎豬成纖維細(xì)胞；克隆豬的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自去核的卵母細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；過程①不僅需要在培養(yǎng)液中添加毛殼素；還需要在培養(yǎng)液中添加動(dòng)物血清或者血漿，提供一個(gè)類似生物體內(nèi)的環(huán)境，B正確；

C；過程④使用顯微操作技術(shù)使胎豬成纖維細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞融合；C錯(cuò)誤；

D；過程⑤是胚胎移植；胚胎移植時(shí)供體與受體的生理狀態(tài)要相同，否則無法成功妊娠，D正確。

故選BD。13、A:B:C【分析】【分析】

基因編輯技術(shù)屬于基因工程；而對于人體胚胎的操作又涉及胚胎工程，所有對于人體的操作都應(yīng)經(jīng)過安全性審查，要符合倫理道德；但用于疾病預(yù)防領(lǐng)域的研究又具有進(jìn)步意義。

【詳解】

A；基因編輯制造人類的行為不符合倫理道德；A錯(cuò)誤；

B；基因編輯技術(shù)；只是對個(gè)別人個(gè)別基因進(jìn)行編輯，不一定改變?nèi)祟愡M(jìn)化的速度和方向，B錯(cuò)誤；

C；基因編輯技術(shù)改變了人類的遺傳物質(zhì)；但并沒有出現(xiàn)生殖隔離，即沒有形成新物種，C錯(cuò)誤；

D；基因編輯技術(shù)可用于疾病預(yù)防領(lǐng)域研究；具有進(jìn)步意義，但不能用于編輯嬰兒，D正確。

故選ABC。14、A:C【分析】【分析】

1.果酒的制作離不開酵母菌；酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時(shí)，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當(dāng)中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

2.醋酸菌是一種好氧細(xì)菌；只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)。醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí)，即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣，也會(huì)引起醋酸菌死亡。當(dāng)氧氣；糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃。

【詳解】

A；果酒發(fā)酵時(shí)；為了避免雜菌污染，圖中裝置應(yīng)用70%的乙醇消毒和用洗潔精洗滌，A正確；

B、用該裝置進(jìn)行果酒發(fā)酵時(shí)，需要先維持閥a，b的開放狀態(tài)，此后閥a、閥b，發(fā)酵過程中定時(shí)打開閥b排氣；B錯(cuò)誤；

C；利用該裝置進(jìn)行果醋發(fā)酵；發(fā)酵溫度需要維持在30～35℃，因?yàn)榇姿峋m宜的發(fā)酵溫度是30～35℃，另外還需要通入無菌空氣，保證醋酸菌代謝的需要，C正確；

D；果酒發(fā)酵的就菌種是酵母菌；酵母菌是真核生物，細(xì)胞中含有多種細(xì)胞器，果醋發(fā)酵的菌種是醋酸菌，醋酸菌是原核生物，細(xì)胞中只有核糖體這一種細(xì)胞器，D錯(cuò)誤。

故選AC。15、A:C【分析】【分析】

PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制；步驟包括高溫變性；復(fù)性、延伸。該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料。根據(jù)圖中可得，由于引物的一個(gè)堿基在不影響與模板鏈整體配對的前提下不與目的基因配對，再利用PCR技術(shù)實(shí)現(xiàn)了目的基因的定點(diǎn)誘變。其技術(shù)原理是堿基互補(bǔ)配對原則。

【詳解】

A；引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)；可以配合載體的限制酶識別位點(diǎn)，幫助目的基因定向定點(diǎn)插入運(yùn)載體，避免發(fā)生自身環(huán)化，A正確；

B；在PCR反應(yīng)過程中變性大約94℃→復(fù)性大約55℃→延伸大約72℃；B錯(cuò)誤；

C；第3輪PCR中；物質(zhì)②是引物2以引物1拓展得到的DNA鏈為模板進(jìn)行復(fù)制得到的，故引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因，C正確；

D；PCR一次大概有30個(gè)循環(huán)；每一輪PCR都消耗引物和原料，是在最初加入，不是后期補(bǔ)充，D錯(cuò)誤。

故選AC。三、填空題(共6題，共12分)16、略

【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】基因文庫人工合成PCR技術(shù)18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)肽氨基酸脂肪甘油脂肪酸19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】沸水浴二苯胺藍(lán)色二苯胺20、略

【分析】略【解析】自我更新分化潛能再生修復(fù)21、略

【分析】【詳解】

生殖性克隆指利用克隆技術(shù)獲得胚胎；并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)，其目的是用于生育，獲得人的復(fù)制品；治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)，其目的是用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療。

據(jù)概念可知，實(shí)現(xiàn)生殖性克隆和治療性克隆都會(huì)用到的技術(shù)有體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等；治療性克隆在獲取胚胎干細(xì)胞后，根據(jù)治療目的誘導(dǎo)干細(xì)胞分化形成各種組織和器官，供患者移植用，故治療性克隆還會(huì)應(yīng)用到的技術(shù)為干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)?！窘馕觥可承钥寺≈咐每寺〖夹g(shù)獲得胚胎，并將胚胎孕育成為人類個(gè)體的克隆性技術(shù)治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定細(xì)胞或組織等，用于治療性移植的克隆性技術(shù)體細(xì)胞核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等體細(xì)胞核移植技術(shù)，早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)等用于生育，獲得人的復(fù)制品用于醫(yī)學(xué)研究和疾病的治療四、判斷題(共1題，共8分)22、B【分析】【詳解】

胚胎發(fā)育早期；細(xì)胞數(shù)量不斷增加，但胚胎總體積不變或略有縮小。

故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共3題，共27分)23、略

【分析】【分析】

培養(yǎng)基的制作流程一般為：計(jì)算→稱量→溶化（包括瓊脂）→調(diào)節(jié)pH→分裝→滅菌→倒平板→（冷卻后）倒置平板。微生物接種是微生物學(xué)研究中最常用的基本操作；主要用于微生物的分離純化。具體來說，就是在無菌條件下，用接種環(huán)或接種針等專用工具，從一個(gè)培養(yǎng)皿（上面可能存在各種雜菌落）挑取所需的微生物，轉(zhuǎn)接到另一個(gè)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)的方法。【小問1】

培養(yǎng)基的組成成分包括碳源；氮源、水、無機(jī)鹽、生長因子等。倒平板時(shí)；應(yīng)待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右倒平板，平板冷凝后要將平板倒置，倒平板過程中應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，以防止雜菌污染。【小問2】

題干中表明菌體密集均勻分布在平板上；所以是稀釋涂布平板法接種。培養(yǎng)基滅菌合格，影響因素應(yīng)為除培養(yǎng)基滅菌以外可能的影響因素，因此，可能操作過程中是否無菌操作，以及使用的濾紙條是否滅菌合格等。A為對照組，應(yīng)除自變量以外，其他條件都相同，因此，處理方法為浸泡在無菌水中處理后貼于平板中央；實(shí)驗(yàn)中能觀察到出現(xiàn)野生型菌株菌落，說明環(huán)境中存在化學(xué)致癌劑導(dǎo)致突變型菌株突變成野生型菌株?！拘?】

使用過的培養(yǎng)基應(yīng)滅菌后再丟棄；以防止培養(yǎng)基中的有害物質(zhì)污染環(huán)境或感染實(shí)驗(yàn)操作者。

【點(diǎn)睛】

本題考查培養(yǎng)基的成分、制備過程以及微生物的接種方法等相關(guān)知識，意在考查考生對所學(xué)知識的識記和理解能力。【解析】【小題1】①.碳源；氮源、水和無機(jī)鹽②.待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)；在酒精燈火焰旁附近倒平板。

【小題2】①.稀釋涂布平板②.濾紙片是否滅菌徹底和待測化合物是否含有雜菌③.（濾紙片）用無菌水浸泡④.his-菌株在培養(yǎng)基上突變?yōu)閔is+菌株；說明待測化合物中存在致癌劑（或待測化合物中存在化學(xué)誘變劑，這些化學(xué)物質(zhì)具有致癌性，敘述合理即可）

【小題3】滅菌，避免對環(huán)境造成污染24、略

【分析】【分析】

1；泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌；代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗帷?/p>

2；泡菜的制作過程：按照清水與鹽的質(zhì)量比為4：1的比例配制鹽水；將鹽、水煮沸冷卻。將經(jīng)過預(yù)處理的新鮮蔬菜混合均勻，裝入泡萊壇內(nèi)，裝至半壇時(shí)，放入蒜瓣、生姜及其他香辛料，繼續(xù)裝至八成滿，再徐徐注入配制好的鹽水，使鹽水沒過全部菜料，蓋好壇蓋。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水，以保證壇內(nèi)乳酸菌發(fā)酵所需的無氧環(huán)境。在發(fā)酵過程中要注意經(jīng)常向水槽中補(bǔ)充水。發(fā)酵時(shí)間長短受室內(nèi)溫度的影響。

3；泡菜中的亞硝酸鹽含量可以用比色法測定；即在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)生成重氮鹽，重氮鹽與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。

（1）

乳酸菌的代謝類型是異養(yǎng)厭氧型；制作泡菜宜選用新鮮的蔬菜或其他原料；這是因?yàn)樾迈r的蔬菜亞硝酸鹽的含量低。

（2）

將鹽水煮沸冷卻的目的是煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動(dòng)不受影響）；加入“老汁”的作用是“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時(shí)間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）

測定亞硝酸鹽含量的方法是比色法。即在鹽酸酸化條件下；亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合后形成玫瑰紅色的染料，然后將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液進(jìn)行目測比較，大致估算出亞硝酸鹽的含量。

【點(diǎn)睛】

本題考查制作泡菜，要求考生識記制作泡菜的原理和過程，理解用比色法測定亞硝酸鹽的含量，意在考查考生的識記能力和分析能力。【解析】（1）異養(yǎng)厭氧型亞硝酸鹽的含量低。

（2）煮沸的目的是除去鹽水中的空氣和殺菌；冷卻的目的是防止高溫殺死原料中的乳酸菌（乳酸菌的生命活動(dòng)不受影響）“老汁”中含有大量的乳酸菌；可使其在短時(shí)間內(nèi)成為優(yōu)勢菌。

（3）比色法對氨基苯磺酸玫瑰紅標(biāo)準(zhǔn)顯色液25、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積??；結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)；在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因?yàn)橛械拇竽c桿菌會(huì)釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生能夠識記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌六、綜合題(共3題，共6分)26、略

【分析】【分析】

由圖可知，載體上有HpaI酶切位點(diǎn)，無BamHI酶切位點(diǎn)，則載體自連情況下電泳得到的條帶只有一條，且分子量為6000bp，即①；基因與載體正向連接或反向連接的情況下，都有BamHI和HpaI兩個(gè)酶切位點(diǎn)，經(jīng)酶切可產(chǎn)生兩條鏈，且正向連接時(shí)，HpaI和BamHI之間有700bp，反向連接時(shí)HpaI和BamHI之間有200bp，則載體正向連接后產(chǎn)生一個(gè)700bp和一個(gè)6000bp的條帶；即②。

（1）

基因表達(dá)載體除了目的基因外；還必須有啟動(dòng)子；終止子以及標(biāo)記基因（便于目的基因的篩選和鑒定）等。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，有了終止子才能在合適的位置終止基因的轉(zhuǎn)錄，確保基因的正確表達(dá)。

（2）

大鼠神經(jīng)干細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞；一般將GDNF基因的表達(dá)載體導(dǎo)入大鼠神經(jīng)干細(xì)胞的方法是顯微注射法