HIV SOP艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室資料

目錄TOC\o"1-2"\h\u5235第一章、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況 第一章、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及人員情況為了更好發(fā)揮艾滋病檢測在艾滋病防治工作中的作用，根據(jù)《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》對于艾滋病的檢測要求，我院檢驗(yàn)科設(shè)置了獨(dú)立的艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室。為了使檢測工作能夠正常進(jìn)行，保證艾滋病檢測結(jié)果的正確性和準(zhǔn)確性，我們不僅對工作環(huán)境條件和檢測設(shè)施加以整改，而且建立了完整的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程，以確保艾滋病檢測結(jié)果的準(zhǔn)確有效。艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室分為清潔區(qū)、半污染區(qū)和操作區(qū)，配備了專用的的生物安全柜、電腦、冰箱、酶標(biāo)儀、離心機(jī)、高壓消毒鍋等設(shè)備和安全防護(hù)用品等。根據(jù)艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室工作的需要，我科配備從事艾滋病檢測工作人員3名，全部都是臨床檢驗(yàn)中級，所有人員從業(yè)年限均在7年以上。并積極參加省級、省級舉辦的艾滋病檢測技術(shù)培訓(xùn)，不斷提高質(zhì)量意識、技術(shù)水平和業(yè)務(wù)能力，保證艾滋病檢測工作的質(zhì)量。艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人：**人員：****第二章、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室工作管理程序一、目的 對艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室工作全過程進(jìn)行質(zhì)量保證，保證檢驗(yàn)工作符合規(guī)定要求，提供可靠的檢驗(yàn)數(shù)據(jù)和有效的檢驗(yàn)報(bào)告。二、范圍適用于本實(shí)驗(yàn)室開展的相關(guān)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的各個(gè)環(huán)節(jié)。三、職責(zé)1、工作人員負(fù)責(zé)門診檢驗(yàn)樣品的采集。2、工作人員負(fù)責(zé)住院檢驗(yàn)樣品的接收。3、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)完成檢驗(yàn)任務(wù)，并對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督。4、工作人員負(fù)責(zé)執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)。5、實(shí)驗(yàn)室報(bào)告審核人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)報(bào)告的簽發(fā)、發(fā)放。6、實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計(jì)算機(jī))工作。四、工作程序（一）、檢驗(yàn)工作分類本實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)工作，我院標(biāo)本的來源為采樣檢驗(yàn)，工作性質(zhì)為常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)。（二）、樣本記錄工作需按下列程序執(zhí)行：1、當(dāng)面核對標(biāo)本姓名、性別、年齡及標(biāo)本質(zhì)量等資料；2、按要求進(jìn)行檢驗(yàn)；3、如實(shí)的完善檢驗(yàn)單，真實(shí)的填寫檢測結(jié)果（三）、采樣及樣品管理采樣執(zhí)行本科程序文件。樣品接收、分發(fā)和保管處理，樣品一旦受理即給予受理唯一編號。（四）、標(biāo)本檢驗(yàn)檢驗(yàn)執(zhí)行本科程序文件和操作規(guī)范（五）、檢驗(yàn)依據(jù)1、國家標(biāo)準(zhǔn)方法；2、部頒標(biāo)準(zhǔn)方法和檢驗(yàn)規(guī)范；3、衛(wèi)生技術(shù)部門推薦使用方法；4、有關(guān)科技文獻(xiàn)或雜志上發(fā)表的方法；（六）、檢驗(yàn)實(shí)施檢驗(yàn)人員按檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)或作業(yè)指導(dǎo)書的要求按時(shí)完成檢驗(yàn)任務(wù)，做好原始記錄。（七）、檢驗(yàn)報(bào)告的編制、復(fù)核和簽發(fā)按本科程序文件嚴(yán)格執(zhí)行。（八）、檢驗(yàn)方法控制檢驗(yàn)必須按國家規(guī)定的方法或標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行，也可用經(jīng)本科技術(shù)負(fù)責(zé)人批準(zhǔn)的非標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法進(jìn)行。其他檢驗(yàn)方法不得采用。

艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室工作流程圖

第三章、艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室規(guī)章制度實(shí)驗(yàn)室工作制度實(shí)驗(yàn)室保持清潔整齊，儀器設(shè)備要擺放整齊，說明書手冊要妥善保管，原始記錄不得擅自修改和銷毀。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前要摘除首飾修剪指甲，以免劃破手套。嚴(yán)禁在艾滋病實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食，飲水，吸煙和化妝。不要將與工作無關(guān)的物品帶入實(shí)驗(yàn)室。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿隔離衣，戴手套必要時(shí)戴雙層手套和防護(hù)眼鏡。認(rèn)真對待樣品，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。確實(shí)知道洗眼裝置、安全沖洗設(shè)備，以及滅火器的位置。并懂得如何使用這些設(shè)備。采血時(shí)一定要注意安全，使用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作防止刺傷皮膚以免造成污染。嚴(yán)格執(zhí)行實(shí)驗(yàn)室工作人員年度采血和備案年度，工作人員從事工作必須進(jìn)行艾滋病抗體和乙肝，丙肝等肝炎病毒標(biāo)記物的檢測，注射乙肝疫苗，每半年至一年進(jìn)行一次抗體檢測，并保留血清樣品。

崗位責(zé)任制崗位責(zé)任制是保證工作質(zhì)量和醫(yī)療安全，提高工作效率的重要環(huán)節(jié)。建立崗位責(zé)任制，要有艾滋病檢測實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員負(fù)責(zé)。做到人人分工職責(zé)明確，立足本職，團(tuán)結(jié)互助，相互協(xié)調(diào)，保證各項(xiàng)任務(wù)的順利完成。牢固樹立把質(zhì)量放在第一位的思想，在工作中必須加強(qiáng)檢查和復(fù)查制度，以保證血液質(zhì)量及醫(yī)療安全。交接工作必須認(rèn)真負(fù)責(zé)，須核對實(shí)物和記錄，對工作一般情況、存在問題和注意事項(xiàng)應(yīng)進(jìn)行具體交待，否則，發(fā)生問題由交班人負(fù)責(zé)。在實(shí)驗(yàn)室主任領(lǐng)導(dǎo)下，負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室儀器、器械、藥物試劑的安全管理，對本崗位的安全，負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室、器材庫的安全防范工作，經(jīng)常檢查安全設(shè)施完好狀況，防火、防盜、防水、防銹、防腐蝕，保持室內(nèi)整潔衛(wèi)生，安全無事故。負(fù)責(zé)保管、使用消防器材，保持完好狀態(tài)，并會撲救初期火災(zāi)；一旦發(fā)生其他意外事故，必須采取果斷措施予以搶救和處理，同時(shí)，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人及主管領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告；發(fā)生重大災(zāi)害事故時(shí)，可以直接報(bào)警。實(shí)驗(yàn)室人員臨時(shí)因故離開工作崗位，必須將工作委托給能勝任該項(xiàng)工作的人員，否則，發(fā)生問題由原擔(dān)任該項(xiàng)工作者負(fù)責(zé)。新參加工作的人員，在未熟悉和掌握工作前不能獨(dú)立工作不能頂崗位，在確能掌握經(jīng)考核合格后方可。建立艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室專用的精密儀器和重要設(shè)備專責(zé)崗位制，其他人不得任意使用。嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程操作，不可擅自亂改設(shè)置。凡是一物多人使用的，除共同負(fù)責(zé)外，應(yīng)指定一人為該崗位責(zé)任制負(fù)責(zé)人，負(fù)責(zé)指導(dǎo)正確操縱，定期安全檢查，經(jīng)常維護(hù)保養(yǎng)，保持正常運(yùn)轉(zhuǎn)，該負(fù)責(zé)人有權(quán)制止任何違章操作和有害設(shè)備安全的行為。人員職責(zé)分工：行政班人員負(fù)責(zé)協(xié)助值班人員做好實(shí)驗(yàn)室的所有日常工作，并負(fù)責(zé)對檢驗(yàn)工作質(zhì)量的監(jiān)督，檢驗(yàn)報(bào)告的復(fù)核、發(fā)放，結(jié)果的解釋，實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)消毒以及每日醫(yī)療廢棄物的消毒處理。每日值班人員負(fù)責(zé)樣品的采集，接收，執(zhí)行檢驗(yàn)任務(wù)，做好檢驗(yàn)記錄，填報(bào)檢驗(yàn)數(shù)據(jù)，把檢驗(yàn)資料的歸檔保管(計(jì)算機(jī))工作。簽發(fā)報(bào)告及實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的日常維護(hù)和保養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)室工作人員職責(zé)分工隨著我院檢驗(yàn)科規(guī)模的不斷壯大，傳統(tǒng)的單一管理模式已經(jīng)制約著我科室的發(fā)展，現(xiàn)根據(jù)《臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》和《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)，采用分學(xué)科管理模式，有利于培養(yǎng)各學(xué)科技術(shù)骨干，提高工作積極性，有效做好儀器的維護(hù)保養(yǎng)和檢驗(yàn)質(zhì)量控制工作，從而提高整體檢驗(yàn)科的技術(shù)水平。**職責(zé)制度、職責(zé)、SOP文件**儀器酶標(biāo)儀，生物安全柜，溫度計(jì)項(xiàng)目艾滋病,RPR,HCV,HBV**儀器高壓滅菌鍋，離心機(jī)，冰箱，移液器項(xiàng)目艾滋病,RPR,HCV,HBV以上各組職責(zé)屬監(jiān)督管理作用，日常工作不按崗位上班。強(qiáng)調(diào)若儀器出現(xiàn)故障，應(yīng)及時(shí)報(bào)告各組負(fù)責(zé)人和科主任。申請?jiān)O(shè)立專項(xiàng)補(bǔ)貼，各組的質(zhì)量控制和儀器維護(hù)情況與獎(jiǎng)金和評優(yōu)相掛鉤。成立質(zhì)量控制小組，各組負(fù)責(zé)人應(yīng)及時(shí)反饋本組的質(zhì)量問題給科主任，盡快解決問題，確保檢驗(yàn)科結(jié)果的準(zhǔn)確性。

四、交接班制度1.目的本著為臨床服務(wù)，讓病人滿意的宗旨。確保急診檢驗(yàn)工作正常、有序的進(jìn)行。2.范圍適用于常規(guī)工作時(shí)間以外的急診值班人員的上下班、交接班。3.值班任務(wù)3.1值班人員必須堅(jiān)守崗位，履行職責(zé)，確保臨床診療工作不間斷進(jìn)行。主要醫(yī)療工作包括：生化類急診項(xiàng)目、凝血四項(xiàng)、血、尿、便常規(guī)、急診血型和交叉配血等，若遇臨床須急查而自己又不熟悉的項(xiàng)目，應(yīng)及時(shí)向科室領(lǐng)導(dǎo)（指定負(fù)責(zé)人）報(bào)告。3.2值班人員要按規(guī)定檢查儀器狀況、試劑冰箱溫度、科室安全狀況等，根據(jù)值班情況準(zhǔn)確填寫值班記錄并與接班人員交接清楚。3.3急診化驗(yàn)要立即進(jìn)行，結(jié)果及時(shí)回報(bào)病房，接到非急診標(biāo)本要妥善處理，按要求保留標(biāo)本。3.4值班時(shí)遇有特殊情況，如大批病人或疑難檢查應(yīng)及時(shí)報(bào)告科室領(lǐng)導(dǎo)或上級人員協(xié)助解決。3.5檢查門、窗、水、電及貴重儀器安全，室內(nèi)物品不得隨便借出。3.6值班者不得帶客人或小孩到科室，以免影響工作或發(fā)生意外。4.值班要求4.1值班安排：值班人員需提前10分鐘接班。4.2主班負(fù)責(zé)接班，副班到位后根據(jù)工作需要進(jìn)行分工，確保急診檢驗(yàn)工作正常、有序的進(jìn)行。4.3交班應(yīng)按時(shí)、清楚、明確，做到交不清不接，接不清不走。主、副班應(yīng)相互尊重、相互協(xié)作，在值班過程中，使用主班程序。4.4值班表由科室指定專人定期制定，休假、出差時(shí)跳過順延，產(chǎn)假按醫(yī)院規(guī)定執(zhí)行。4.5關(guān)于同事之間的換班、頂班，采取雙方自愿的原則，換班或頂班者即為值班人員。4.6夜班值班后補(bǔ)休半天，值班員可根據(jù)自身情況選擇值班后補(bǔ)休或擇日補(bǔ)休。5.值班獎(jiǎng)懲5.1值班期間杜絕安全隱患，發(fā)現(xiàn)漏洞時(shí)，經(jīng)科室黨支部研究后給予重獎(jiǎng)5.2未按時(shí)填寫交接班記錄，扣20元。5.3值班期間發(fā)生醫(yī)療差錯(cuò)、事故時(shí)，按醫(yī)院規(guī)定執(zhí)行。5.4因交接班不清發(fā)生儀器、冰箱損壞和物品丟失時(shí)，責(zé)任由接班者承擔(dān)。5.5違反值班安排時(shí)，一律按故意逃班處理，扣除當(dāng)事人當(dāng)月超勞補(bǔ)貼300元，情節(jié)嚴(yán)重的經(jīng)科室黨支部研究后給予重罰。5.7因換班、頂班而發(fā)生脫班時(shí)，責(zé)任全在當(dāng)天值班者，亦按故意逃班處理。

標(biāo)本管理制度（一）、樣品的采集和處理1.血液樣本的采集和處理1.1抗凝全血：消毒局部皮膚，用加有抗凝劑（EDTA鈉鹽或鉀鹽、枸櫞酸鈉、肝素鈉）的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至加有抗凝劑的試管中，輕輕顛倒混勻10-15次，備用。1.2末梢全血：消毒局部皮膚（成人和1歲以上兒童可選擇耳垂、中指、無名指或食指，1歲以下兒童采用足跟部）。用采血針刺破皮膚，用無菌紗布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，備用。血漿：根據(jù)檢測需要，選擇含適宜抗凝劑的采血管，按照采1.3血管說明采集：靜脈血，分離血漿；或?qū)⒉杉目鼓?500～3000r/min離心15分鐘，上層即為血漿，吸出置于合適的容器中，備用。血清：根據(jù)檢測需要，按照采血管說明采集靜脈血，分離血清；或用不含抗凝劑的真空采血管抽取適量靜脈血，或用一次性注射器抽取靜脈血，轉(zhuǎn)移至無抗凝劑或含促凝劑的試管中放置1～2小時(shí)，待血液凝固、血塊收縮后再用1500～3000r/min離心15分鐘，吸出血清，置于合適的容器中，備用。淋巴細(xì)胞富集液：將采集的抗凝全血1500～3000r/min離心15分鐘，吸取血漿層下的淋巴細(xì)胞富集液，置于合適的容器中，備用。外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）：使用淋巴細(xì)胞分離液，進(jìn)行密度梯度離心，吸出PBMC層，置于合適的容器中，備用。1.4抗凝劑的選擇：根據(jù)檢測要求選用適當(dāng)?shù)目鼓齽鏑D4+和CD8+T淋巴細(xì)胞數(shù)測定可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽、枸櫞酸鈉、肝素鈉（如果血液不用于核酸檢測）；艾滋病-1分離、核酸定性/定量檢測可選用EDTA鉀鹽或鈉鹽或枸櫞酸鈉。2、樣本采集后處理、保存、運(yùn)輸?shù)臅r(shí)限和條件，因不同的檢測項(xiàng)目而異，應(yīng)參見相應(yīng)檢測項(xiàng)目要求。采血完成后的穿刺針頭必須丟棄于尖銳危險(xiǎn)品容器內(nèi)，妥善處理，防止發(fā)生職業(yè)暴露。3、采集樣品注意事項(xiàng)（1）采集樣品原則上應(yīng)按臨床采血技術(shù)規(guī)范操作。（2）采集樣品時(shí)應(yīng)注意安全，建議采用真空采血管及蝶形針具，以避免直接接觸血液；直接接觸艾滋病感染者/艾滋?。ˋIDS）病人血液/體液的操作,應(yīng)戴雙層手套。（3）所有的血液、血清、未固定的組織和組織液樣品，均應(yīng)視為有潛在傳染性，都應(yīng)以安全的方式進(jìn)行操作。（4）應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。（5）采血時(shí)一定要注意安全，采血用一次性注射器，謹(jǐn)慎操作，防止發(fā)生刺傷皮膚和造成外界污染。（6）離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。（二）樣品的保存用于抗體和抗原檢測的血清或血漿樣本，短期（1周）內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于2～8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃以下。用于核酸檢測的血漿和血細(xì)胞樣本，4天內(nèi)進(jìn)行檢測的可存放于2-8℃：3個(gè)月以內(nèi)應(yīng)存放于-20℃以下；3個(gè)月以上應(yīng)置于-70℃以下保存。用于CD4+T淋巴細(xì)胞檢測的全血樣本，室溫保存，時(shí)間不超過48小時(shí)。如果用CD45設(shè)門，樣本保存不超過72小時(shí)。篩查結(jié)果為陽性的樣本應(yīng)及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充試驗(yàn)；篩查結(jié)果為陰性的樣本，可根據(jù)具體需要決定保存時(shí)間，建議至少保存1個(gè)月。艾滋病檢測確證實(shí)驗(yàn)室收到的篩查陽性樣本，無論補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果如何，均應(yīng)保存剩余樣本，保存時(shí)間根據(jù)需要確定，建議至少保存3年，特殊用途或?qū)ｍ?xiàng)項(xiàng)目的樣本根據(jù)具體要求確定保存時(shí)間。補(bǔ)充試驗(yàn)結(jié)果為陽性的樣本按照國家生物樣本管理的有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。（三）樣品的運(yùn)送1、全血、血漿的運(yùn)送應(yīng)符合生物安全要求，參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》(衛(wèi)生部第45號令,2006年2月1日執(zhí)行)。2、血液樣本運(yùn)送時(shí)應(yīng)采用三層容器對樣本進(jìn)行包裝，隨樣本應(yīng)附有與樣本唯一性編碼相對應(yīng)的送檢單。送檢單應(yīng)標(biāo)明受檢者姓名、樣本種類等信息，并應(yīng)放置在第二層和第三層容器之間。第一層容器：直接裝樣本，應(yīng)防滲漏。樣本應(yīng)置于帶蓋的試管內(nèi)，試管上應(yīng)有明顯的標(biāo)記，標(biāo)明樣本的唯一性編碼或受檢者姓名、種類和采集時(shí)間。在試管的周圍應(yīng)墊有緩沖吸水材料，以免碰碎。第二層容器：容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。要求不易破碎、帶蓋、防滲漏、容器的材料要易于消毒處理。第三層容器：容納并保護(hù)第二層容器的運(yùn)輸用外層包裝箱。外面要貼上醒目的標(biāo)簽，注明數(shù)量、收樣和發(fā)件人及聯(lián)系方式，同時(shí)要注明“小心輕放、防止日曬、小心水浸、防止重壓、禁止倒立”等字樣，還應(yīng)易于消毒。3、用于抗體檢測的血清和血漿樣本應(yīng)在凍存條件下運(yùn)送。用于CD4+和CD8+T淋巴細(xì)胞測定的樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運(yùn)送。用于病毒載量檢測的樣本應(yīng)在-20℃以下運(yùn)輸。干血斑和尿液樣本應(yīng)在室溫下（18～25℃）運(yùn)送，可通過郵寄方式運(yùn)送。血液制品樣本的運(yùn)送按照血液制品有關(guān)使用說明執(zhí)行。4、運(yùn)送樣本必須有記錄。（四）樣本接收和拒收標(biāo)準(zhǔn)1、含有感染性樣品的包裹必須在具有處理感染源設(shè)備的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由經(jīng)過培訓(xùn)的、穿戴防護(hù)衣的工作人員打開，用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒。2、核對樣品與送檢單，認(rèn)真核對標(biāo)本上病人姓名、年齡、性別、病區(qū)、床號、住院號是否與中請單符合。檢查樣品管有無破損和溢漏，如發(fā)現(xiàn)溢漏應(yīng)立即將尚存留的樣品移出，對樣品管和盛器消毒，同時(shí)報(bào)告有關(guān)領(lǐng)導(dǎo)和專家。3、檢查樣品的狀況，觀察標(biāo)本的量、標(biāo)本類型、是否抗凝或有小凝塊樣品，記錄有無嚴(yán)重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況，判斷標(biāo)本是否符合檢驗(yàn)要求。如果污染過重或者認(rèn)為樣品不能被接受，則應(yīng)將樣品安全廢棄。并要將樣品情況立即通知送樣人。4、打開標(biāo)本容器時(shí)要小心，以防內(nèi)容物潑濺。樣品處理時(shí)若內(nèi)容物有可能濺出，則應(yīng)在生物安全柜中戴手套進(jìn)行。同時(shí)應(yīng)戴口罩、防護(hù)眼鏡，以防皮膚或粘膜污染。5、因特殊臨床治療導(dǎo)致自發(fā)熒光的樣品不可用于熒光方法測試。6、接收樣品時(shí)應(yīng)規(guī)范填寫樣品接收單。7、不符要求的標(biāo)本，必須及時(shí)填寫退回理由單，及時(shí)通知送樣人，說明情況，重新留取。不符要求的標(biāo)本與可疑含有感染性樣品用后的包裹同檢驗(yàn)后的標(biāo)本一樣進(jìn)行消毒或無害化處理后廢棄。（五）標(biāo)本檢測1、離心機(jī)要使用密閉的罐和密封頭，以防液體溢出或在超/高速離心時(shí)形成氣溶膠。復(fù)核標(biāo)本接收過程中的每一步驟，在檢測過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。2、在標(biāo)本足夠的情況下，不能浪費(fèi)、隨意丟棄或損壞標(biāo)本。應(yīng)象操作未知傳染風(fēng)險(xiǎn)樣品一樣，小心存放、拿取和使用所有可能有傳染性的質(zhì)量控制和參考物質(zhì)。用后的包裹應(yīng)進(jìn)行消毒（六）、標(biāo)本處理檢驗(yàn)標(biāo)本先用含2-3g/L有效氯消毒劑浸泡半小時(shí)，再用高壓鍋高壓消毒。然后用雙層專用黃色醫(yī)用垃圾袋專人收集所有廢棄醫(yī)用垃圾。送專門存放醫(yī)用垃圾處統(tǒng)一焚化處理。

試劑管理制度（一）、采購與審批科主任根據(jù)需要定期擬定采購計(jì)劃，交由院領(lǐng)導(dǎo)審批，批核后由科主任交與器械科，有器械科與經(jīng)銷商聯(lián)系（二）、驗(yàn)收與登記倉管負(fù)責(zé)人根據(jù)供應(yīng)商提供的試劑及清單對數(shù)量、品種、品牌、包裝等進(jìn)行驗(yàn)收，并將入庫數(shù)據(jù)登記。（三）、貯存冷藏試劑統(tǒng)一存放在艾滋病實(shí)驗(yàn)室專用的冰箱內(nèi)，冷箱保管及溫度控制由艾滋病實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)。艾滋病試劑一般應(yīng)2～8℃避光保存，在有效期內(nèi)使用。（四）、出庫管理各室提出試劑申領(lǐng)，倉管人填寫出庫單據(jù)，院領(lǐng)導(dǎo)簽字同意后，認(rèn)領(lǐng)人簽名后出庫。（五）、其它1、試劑的保存應(yīng)嚴(yán)格按照要求存放，以保證有效期內(nèi)能有效地使用，杜絕浪費(fèi)現(xiàn)象。2、倉管人應(yīng)對試劑庫存定期檢查，不使用過期變質(zhì)的試劑。3、易燃，易爆試劑應(yīng)分開存放遠(yuǎn)離火源和電源。

4、劇毒試劑必須由科主任和負(fù)責(zé)科室保衛(wèi)的同志負(fù)責(zé)保存，放保險(xiǎn)箱內(nèi)，使用時(shí)應(yīng)有兩人在場，并做好登記。污染區(qū)工作守則做好污染區(qū)實(shí)驗(yàn)室廢棄物的消毒處理，未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室管理人員許可不得進(jìn)入污染區(qū)。凡是被血液、體液污染的物品要先消毒滅菌后清洗。嚴(yán)格操作程序，做好各種實(shí)驗(yàn)記錄，實(shí)驗(yàn)陽性標(biāo)本保存至5年，（經(jīng)過免疫印記確診的陰性標(biāo)本也要保存），不得擅自處理。禁止用口吸液體，必須使用移液器操作。操作中有標(biāo)本等外濺時(shí)，應(yīng)及時(shí)消毒，對大量濺出的高濃度污染物在清潔前先用1%次氯酸鈉溶液浸泡，然后戴上手套擦洗。每次實(shí)驗(yàn)后，要對工作臺面消毒，用0.2%-1%次氯酸鈉溶液噴灑和浸泡。離開實(shí)驗(yàn)室前要脫去手套，隔離衣等防護(hù)物品，放入指定污桶，用肥皂和流水洗手。

清潔區(qū)工作守則實(shí)驗(yàn)室是檢驗(yàn)工作的場所，要保持清潔、安靜、物品擺放要整齊。清潔的防護(hù)服置于實(shí)驗(yàn)室清潔區(qū)內(nèi)存放處。檢驗(yàn)人員工作時(shí)應(yīng)按要求穿工作服、工作衣、帽、專用鞋等。禁止將與檢驗(yàn)工作無關(guān)的物品帶入檢驗(yàn)室，禁止在檢驗(yàn)室內(nèi)會客、抽煙、吃東西。注意安全，下班后、節(jié)假日必須切斷水源、氣源、電源，關(guān)好門窗。嚴(yán)禁將污染區(qū)的物品帶入清潔區(qū)。妥善保管儀器、設(shè)備的說明書、操作規(guī)程、原始記錄表、零（部）件、常用工具、電源線、連接線要排列整齊。檢驗(yàn)室須配置消防設(shè)備，并經(jīng)常檢查待用狀態(tài)，任何人不得擅自挪用或挪動。

環(huán)境消毒隔離制度1、實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為清潔區(qū)和操作區(qū)，清潔區(qū)要注意保護(hù)不受污染。操作有氣溶膠可能的標(biāo)本應(yīng)配置生物安全柜及其它防護(hù)設(shè)置，如紫外線燈，排氣扇等操作區(qū)的工作臺及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染時(shí)隨時(shí)消毒，每周大掃除一次。2、采血室每日操作前用清水擦拭操作臺一次，采血結(jié)束用消毒液擦拭操作臺、桌子和地面一次，紫外線每日照射消毒二次，每月空氣細(xì)菌培養(yǎng)一次，紫外線強(qiáng)度定期測定。3、各種檢驗(yàn)標(biāo)本的收集，送檢必須用相應(yīng)指定的容器留取，不得外溢污染。4、靜脈及末稍采血，應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離措施，靜脈抽血做到一人一針一筒一巾一帶一消毒，所用止血帶及紙墊每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜絕交叉污染。5、一次性醫(yī)用器具包括采血針，注射器、尿杯、血紅蛋白微量吸血吸管，應(yīng)嚴(yán)格做好領(lǐng)發(fā)登記，注射器先浸泡消毒后由供應(yīng)室一對一調(diào)換，統(tǒng)一處理，其余一次性器具浸泡消毒后裝入污物袋送焚燒爐焚燒。6、檢驗(yàn)人員在進(jìn)行靜脈抽血時(shí)應(yīng)嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作技術(shù)，操作前必須洗手必須戴好帽子與口罩，操作臺和手被污染時(shí)應(yīng)用肥皂和流水認(rèn)真洗手，必要時(shí)用消毒液浸泡雙手，酒精、碘酒瓶每周更換消毒兩次。7、溢出試管外的血液，應(yīng)立即用碘酒棉簽擦拭干凈，注意防止玻璃碎片刺傷手，并注意試管有無破裂。8、當(dāng)針頭和碎玻璃刺傷手時(shí),用流水沖洗,擠出血水,應(yīng)立即用碘酒消毒局部。9、實(shí)驗(yàn)室操作時(shí)應(yīng)戴上手套。吸取標(biāo)本，離心振蕩等應(yīng)嚴(yán)格按操作規(guī)程，防止自身和實(shí)驗(yàn)室受污染。10、已檢查標(biāo)本與容器分別浸泡于次氯酸鈉(2000mg/L)中兩小時(shí)后，標(biāo)本傾棄，一次性容器送焚燒，重復(fù)使用的經(jīng)清洗消毒和滅菌后再使用，均要有記錄。有毒化學(xué)試劑和放射性試劑使用后要經(jīng)無害化處理，防止污染環(huán)境。11、非科室工作人員不準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，外來人員參觀需經(jīng)科主任同意方可進(jìn)入。

實(shí)驗(yàn)臺消毒措施實(shí)驗(yàn)臺消毒措施必須符合艾滋病實(shí)驗(yàn)室的通用生物安全要求。由專人按特定程序和方法進(jìn)行清潔和消毒。儀器等表面消毒：工作結(jié)束后，用含有效氯1000mg/L的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。實(shí)驗(yàn)器材的分類消毒：將使用后的銳器方入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)，121℃高壓消毒30分鐘。其他器材方入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內(nèi)浸泡1小時(shí)以上。處理時(shí)應(yīng)避免皮膚損傷。工作臺等物體表面消毒：工作完畢，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分鐘以上。個(gè)人防護(hù)用品消毒：實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高壓消毒30分鐘。防護(hù)鏡浸泡在75％乙醇或有效氯為1000mg/L的含氯消毒劑中，作用30-60分鐘。手的消毒：用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分鐘?？諝庀荆好看螌?shí)驗(yàn)前后用紫外燈照射消毒，每次不少于1小時(shí)，每立方米空間安裝紫外燈瓦數(shù)≥1.5W，距紫外燈1米處照射強(qiáng)度≥70W/㎡。地面消毒：工作結(jié)束，應(yīng)用含有有效2000mg/L的消毒液噴灑拖地。各類在實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)臺上操作后的廢棄物品均應(yīng)視作物染物分類處理，所有廢棄物應(yīng)視為艾滋病污染物品，按照醫(yī)院規(guī)定嚴(yán)格執(zhí)行處理。

廢棄物處置和實(shí)驗(yàn)室消毒1、廢棄物處置從艾滋病實(shí)驗(yàn)室出來的所有廢棄物，包括不再需要的樣品、培養(yǎng)物和其它物品，均應(yīng)視為感染性廢棄物，應(yīng)置于專用的密封防漏容器中，安全運(yùn)至消毒室，并在高壓消毒后再進(jìn)行處理或廢棄。2、艾滋病常用的物理消毒方法壓力蒸汽消毒，121℃，保持15～20min;干燥空氣烘箱消毒（干烤消毒），140℃，保持2～3h。3、艾滋病常用的化學(xué)消毒方法艾滋病最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000～5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持10～30min。4、廢棄物缸：5000mg/L次氯酸鈉。5、生物安全柜工作臺面和儀器表面：75%乙醇。6、溢出物：5000mg/L次氯酸鈉。7、污染的臺面和器具：2000mg/L次氯酸鈉,也可以用過氧化氫或過氧乙酸。器械可用2%戊二醛浸泡消毒。

消毒液的配制及使用措施1、艾滋病實(shí)驗(yàn)室最常用的化學(xué)消毒劑是含氯消毒劑（次氯酸鈉，含有效氯2000-5000mg/L）、75%乙醇和2%戊二醛，保持10～30min。2、含氯消毒劑的配制：次氯酸鈉原液使用前進(jìn)行1：20～1：50稀釋（2000-5000mg/L）或聯(lián)昌84使用前進(jìn)行1：10～1：25（2000-5000mg/L）稀釋后，用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的消毒。3、乙醇，俗稱“酒精”，能夠殺滅多種細(xì)菌，對艾滋病病毒有一定的殺滅作用，70～75%的效果最好。因此，使用前新鮮配置足量70～75%的乙醇，用于生物安全柜、工作臺面和儀器表面的消毒，可以達(dá)到最佳的消毒效果。4、過氧乙酸也是目前使用比較廣泛的一種高效消毒劑，新鮮配置1～3%的過氧乙酸熏蒸，用于地面、墻壁、實(shí)驗(yàn)器材及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)資料、文件、書本等物品的消毒。0.04%的過氧乙酸用于實(shí)驗(yàn)室工作人員手浸泡1～20分鐘，再用肥皂洗手。5、2%戊二醛用于可浸泡物品的消毒，醫(yī)療器械等。6、艾滋病實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)消毒劑的配置，本著多用多配，少用少配，現(xiàn)用現(xiàn)配的原則，保證消毒劑使用時(shí)的濃度，保證消毒效果。

檢驗(yàn)科人員準(zhǔn)入制度目的禁止與實(shí)驗(yàn)室工作無關(guān)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，保證進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的各類人員的安全，防止出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室感染和病原微生物擴(kuò)散。適用范圍檢驗(yàn)科各實(shí)驗(yàn)室職責(zé)檢驗(yàn)科主任負(fù)責(zé)授權(quán)本科室人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作、監(jiān)督檢查本制度的執(zhí)行情況及制度的修訂；實(shí)驗(yàn)室組長負(fù)責(zé)本制度的執(zhí)行和對本制度提出修訂意見；實(shí)驗(yàn)室工作人員執(zhí)行本制度和填寫相關(guān)記錄。具體要求實(shí)驗(yàn)室門要保持關(guān)閉狀態(tài)，二級實(shí)驗(yàn)室門口要有國際生物危險(xiǎn)警告標(biāo)志。禁止16歲以下人員和禁止保潔工作人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室（室內(nèi)清潔工作由本室工作人員完成）。禁止在實(shí)驗(yàn)室接待各種來訪人員。進(jìn)入病原微生物室從事實(shí)驗(yàn)活動人員要符合下列要求：經(jīng)過健康體檢，建立健康檔案。不得戴隱型眼鏡：手、臉部不能有較明顯外傷。具有臨床檢驗(yàn)技術(shù)職稱和兩年以上臨床檢驗(yàn)工作經(jīng)驗(yàn)。經(jīng)過實(shí)驗(yàn)室生物安全培訓(xùn)和微生物實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)培訓(xùn)與考核。了解微生物室的生物安全防護(hù)和所有項(xiàng)目與儀器的操作的SOP文件及《實(shí)驗(yàn)室突發(fā)事件處理預(yù)案和程序》。進(jìn)入微生物室但不從事實(shí)驗(yàn)活動的人員要符合下列要求：實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)施維修人員，要在實(shí)驗(yàn)工作結(jié)束，并進(jìn)行物體表面、地面和維修儀器消毒后，在實(shí)驗(yàn)室工作人員陪同下進(jìn)入，同時(shí)采取必要的實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)措施并告知所從實(shí)驗(yàn)室生物安全工作的注意事項(xiàng)。外來合作者、進(jìn)修和學(xué)習(xí)人員并經(jīng)醫(yī)院科教科批準(zhǔn)和備案。在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室之前，要了解實(shí)驗(yàn)室工作的潛在風(fēng)險(xiǎn)、學(xué)習(xí)生物安全防護(hù)和所要進(jìn)行所有工作的SOP文件，其所有操作要有實(shí)驗(yàn)室正式工作人員在場陪同。檢查、參觀人員要有實(shí)驗(yàn)室工作人員在場陪同，采取必要的實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)措施。所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員，必須經(jīng)科主任授權(quán)批準(zhǔn)。經(jīng)過批準(zhǔn)進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室從事實(shí)驗(yàn)活動人員必須承諾遵守本實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章制度和操作規(guī)程。

消防安全制度1、根據(jù)“誰主管、誰負(fù)責(zé)”的原則，實(shí)行科室負(fù)責(zé)制。2、主管領(lǐng)導(dǎo)和保衛(wèi)科對全體職工經(jīng)常進(jìn)行消防安全教育，提高思想認(rèn)識，掌握消防知識和消防器材的使用。3、嚴(yán)格禁止各種火種與易燃易爆物品，必須嚴(yán)格分區(qū)，保持一定的安全距離。實(shí)驗(yàn)室實(shí)施單向流向制度，通道不得亂堆放易燃爆物品和雜物。4、嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吸煙。5、電器的安裝與拆除，必須由電工進(jìn)行，嚴(yán)禁亂接電源，亂拉電線。6、各種機(jī)電設(shè)備、高溫電器設(shè)備、耐高壓容器和設(shè)施，使用時(shí)必須有專人負(fù)責(zé)，隨時(shí)檢查，消除隱患，嚴(yán)防事故發(fā)生。7、各防火區(qū)域設(shè)置的消防器材和設(shè)備，應(yīng)定期進(jìn)行檢查，維修和更換，隨時(shí)處于完好狀態(tài)，并不得隨便挪動。8、任何人發(fā)現(xiàn)火、水災(zāi)等隱患者，必須及時(shí)向科領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告。科主任及時(shí)向院領(lǐng)導(dǎo)報(bào)告，及時(shí)做好善事處理工作。

生物安全防護(hù)制度1、上崗工作人員應(yīng)是經(jīng)過崗前安全與技術(shù)培訓(xùn)，取得合格證，具有獨(dú)立工作能力的人員。2、進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿隔離衣、戴手套，必要時(shí)（如對篩查陽性標(biāo)本進(jìn)行復(fù)測或檢測高危標(biāo)本）要戴防護(hù)眼鏡，防止污染暴露的皮膚和衣物。3、嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。操作過程中，不得用戴手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等。4、操作時(shí)可能發(fā)生的觸電、失火、針頭刺傷、燒傷、傳染性標(biāo)本的污染，有應(yīng)急處理的方法，有關(guān)工作人員均應(yīng)熟悉。5、操作中手套破損，應(yīng)立即丟棄，洗手后戴上新手套繼續(xù)操作，不慎發(fā)生瀉漏，應(yīng)立即按照發(fā)生職業(yè)暴露后的處理措施，進(jìn)行處理。6、防止腐蝕、灼傷、中毒、火災(zāi)和爆炸等事件發(fā)生。7、實(shí)驗(yàn)操作完畢后，應(yīng)按照實(shí)驗(yàn)室清理與消毒程序，進(jìn)行善后處理。同時(shí)記錄相關(guān)資料與數(shù)據(jù)并存檔。8、工作結(jié)束后，應(yīng)先洗戴手套的手，然后脫去手套丟棄，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手后離開實(shí)驗(yàn)室。9、注意安全，隨手關(guān)門，做好水，電，門的安全保衛(wèi)工作，防火防盜防水。

職業(yè)暴露的防護(hù)及處理措施

艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室職業(yè)暴露是指檢驗(yàn)工作人員在從事檢測工作過程中意外被艾滋病病毒感染者或者艾滋病病人的血液、體液污染了皮膚或者粘膜，或者被含有艾滋病病毒的血液、體液污染了的針頭及其他利器刺破皮膚,有可能被艾滋病病毒感染的情況。防護(hù)措施：醫(yī)務(wù)人員對所有病人的血液、體液及被血液、體液污染的物品均視為具有傳染性的病源物質(zhì)，醫(yī)務(wù)人員接觸這些物質(zhì)時(shí)，必須采取防護(hù)措施

1.醫(yī)務(wù)人員進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴手套，操作完畢，脫去手套后立即洗手，必要時(shí)進(jìn)行手消毒。

2.在診療、護(hù)理操作過程中，有可能發(fā)生血液、體液飛濺到醫(yī)務(wù)人員的面部時(shí)，醫(yī)務(wù)人員應(yīng)當(dāng)戴手套、具有防滲透性能的口罩、防護(hù)眼鏡；有可能發(fā)生血液、體液大面積飛濺或者有可能污染醫(yī)務(wù)人員的身體時(shí)，還應(yīng)當(dāng)穿戴具有防滲透性能的隔離衣或者圍裙。

3.醫(yī)務(wù)人員手部皮膚發(fā)生破損，在進(jìn)行有可能接觸病人血液、體液的診療和護(hù)理操作時(shí)必須戴雙層手套。

4.醫(yī)務(wù)人員在進(jìn)行侵襲性診療，護(hù)理操作過程中，要保證充足的光線，并特別注意防止被針頭、縫合針、刀片等銳器刺傷或者劃傷。

5.使用后的銳器應(yīng)當(dāng)直接放入耐刺、防滲漏的利器盒，也可使用具有安全性能的注射器、輸液器等醫(yī)用銳器，以防刺傷。6.禁止將使用后的一次性針頭重新套上針頭套。禁止用手直接接觸使用后的針頭、刀片等銳器。處理措施：1.脫離污染環(huán)境，用肥皂液和流動水清洗污染的皮膚，用生理鹽水沖洗粘膜。2.如有傷口，應(yīng)當(dāng)在傷口旁端輕輕擠壓，盡可能擠出損傷處的血液，再用肥皂液和流動水進(jìn)行沖洗，禁止進(jìn)行傷口的局部擠壓。3.受傷部位的傷口沖洗后，應(yīng)當(dāng)用消毒液，如75%的酒精或者0.5%的碘伏等進(jìn)行消毒，并包扎傷口；被暴露的粘膜，應(yīng)當(dāng)反復(fù)用生理鹽水沖洗干凈。4.在暴露后的0周、第四周、第八周、第十二周及六個(gè)月時(shí)抽血進(jìn)行檢測艾滋病病毒抗體。5.預(yù)防性用藥應(yīng)當(dāng)在發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后盡早開始，最好在四小時(shí)內(nèi)實(shí)施，最遲不得超過二十四小時(shí)；即使超過24小時(shí)，也應(yīng)當(dāng)實(shí)施預(yù)防性用藥，連續(xù)使用28天。6.發(fā)生艾滋病病毒職業(yè)暴露后立即通知院感科備案、評估。接受相關(guān)指導(dǎo)，必要時(shí)給予藥物預(yù)防干預(yù)。在感染管理科的指導(dǎo)下，進(jìn)行自我監(jiān)測，并保持信息溝通，以便及時(shí)、積極處理可能出現(xiàn)的問題。

保密程序制度艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室的所有工作人員要具有高度的保密意識。不得對無關(guān)人員透漏任何實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部的信息。艾滋病檢測實(shí)驗(yàn)室要有專人負(fù)責(zé)妥善保存與艾滋病/AIDS相關(guān)檢測項(xiàng)目的所有資料（包括送檢單、各種實(shí)驗(yàn)記錄、感染者檔案、報(bào)告單的發(fā)放），不得擅自修改和銷毀。未經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門許可，不得向無關(guān)人員或單位提供任何情況。嚴(yán)格遵守保密制度，杜絕泄密事件的發(fā)生。我院艾滋病實(shí)驗(yàn)室屬于篩查實(shí)驗(yàn)室，檢測的結(jié)果也不是最終結(jié)果，檢測到陽性結(jié)果應(yīng)及時(shí)啟動應(yīng)急預(yù)案，根據(jù)WHO提出的三級包裝系統(tǒng)送到上級實(shí)驗(yàn)室作進(jìn)一步確認(rèn)。此時(shí)，不能出具艾滋病抗體陽性的結(jié)果報(bào)告，更不能告知受檢者本人。確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)陽性結(jié)果，以機(jī)密級向送檢單位出具陽性報(bào)告；送檢單位接到報(bào)告后，由專人負(fù)責(zé)接收，并應(yīng)及時(shí)會同醫(yī)院感染科上報(bào)縣衛(wèi)生防疫站和衛(wèi)生局。在對陽性者告知檢測結(jié)果時(shí)要先做好法律、醫(yī)學(xué)、生活等方面的咨詢。經(jīng)確認(rèn)的陽性標(biāo)本，包括在實(shí)驗(yàn)室留存的標(biāo)本，應(yīng)送省級艾滋病抗體確認(rèn)中心或省級衛(wèi)生行政部門指定的單位保存，不得擅自處理。標(biāo)本保存時(shí)間至少5年。當(dāng)發(fā)生職業(yè)暴露事故后，無論職業(yè)暴露事故級別的大小，對涉及的職業(yè)暴露者，均應(yīng)注意做好保密工作。任何一個(gè)得到信息的人都要做好保密工作。保密守則：不該說的機(jī)密絕對不說；不該問的機(jī)密絕對不問；不該看的機(jī)密絕對不看；不該記錄的機(jī)密絕對不記錄；不在非保密本上記錄機(jī)密；不在私人通信中涉及機(jī)密；不在公共場所和家屬、子女、親友面前談?wù)摍C(jī)密；不在不利于保密的地方存放機(jī)密文件資料；不在普通電話、明碼電話、普通郵件傳達(dá)機(jī)密事項(xiàng)；不攜帶機(jī)密材料游覽、參觀、探親、訪友和出入公共場所。

儀器的使用維護(hù)（一）、設(shè)立常用儀器的維護(hù)及校準(zhǔn)制度，以保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)。1、酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)每天：核對濾光片波長，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。每周：清潔儀器表面，保護(hù)光學(xué)零件不沾灰塵。每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求。每年：檢查、清洗濾光片，如果出現(xiàn)破裂或霉點(diǎn)則要更換。根據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或使用校準(zhǔn)板，對濾光片的精密度進(jìn)行校準(zhǔn)并保留記錄。實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)異常情況，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行處理，可根據(jù)使用情況更換必要的部件。2、移液器1年至少應(yīng)該標(biāo)定1次，發(fā)現(xiàn)異常情況應(yīng)隨時(shí)進(jìn)行校準(zhǔn)。標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必須保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的精密度應(yīng)在廠家說明書規(guī)定的范圍內(nèi)。（二）、儀器使用環(huán)境良好的工作環(huán)境不僅能確保艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室的酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性，還能夠延長其使用壽命。1、儀器應(yīng)放置在無強(qiáng)磁場和干擾電壓的位置。2、儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。3、為延緩光學(xué)部件的老化，應(yīng)避免陽光直射。4、操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C-40°C之間，環(huán)境濕度在15%-85%之間。5、操作時(shí)電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。6、操作環(huán)境空氣清潔，避免水汽、煙塵。7、保持干燥、干凈、水平的工作臺面，以及足夠的操作空間。（三）、儀器操作注意事項(xiàng)1、使用移液器加液，移液槍頭不能混用2、洗板要干凈，避免交叉污染。3、嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作，反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。4、請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部，操作完成注意做好清潔工作。5、不要在測量過程中關(guān)閉電源。6、對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù)，以達(dá)到最佳效果。7、使用后蓋好防塵罩。出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系，切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀、洗板機(jī)等儀器。

儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序酶標(biāo)儀的標(biāo)準(zhǔn)操作程序開機(jī)將酶標(biāo)儀電源打開，儀器自檢，隨后顯示當(dāng)前的測量方法和方法及準(zhǔn)備就緒測量方法在儀器所顯示的測量方法中選擇測量所需采用的測量方法，一般采用計(jì)算機(jī)控制在計(jì)算機(jī)上打開酶標(biāo)儀控制軟件在樣本信息欄輸入樣本信息設(shè)置好檢驗(yàn)項(xiàng)目后，進(jìn)行排版布局點(diǎn)擊控制頁面的讀板按鈕，接受數(shù)據(jù)后經(jīng)行計(jì)算和保存。酶標(biāo)儀的維護(hù)保養(yǎng)平常不用時(shí)，拔掉電源插頭，蓋好防塵罩。使用完畢，一定要拿下測試完的反應(yīng)板，千萬不要將控制板留在載物臺上。若有液體濺到載物臺或酶標(biāo)儀外壁，應(yīng)用濕抹布及時(shí)擦去。每次使用完畢用濕抹布擦拭酶標(biāo)儀，以保持其潔凈。

生物安全柜的標(biāo)準(zhǔn)操作程序目的生物安全柜在制藥、醫(yī)療生物以及工業(yè)實(shí)驗(yàn)室等領(lǐng)域起到非常重要的作用。使用生物安全柜的目的是使工作人員及其工作環(huán)境免受生物細(xì)菌的危害，因?yàn)樵诟鞣N致病性微生物的環(huán)境下工作將會直接威脅到人的生命安全。適用范圍Ⅱ級生物安全柜主要用于臨床、診斷、教學(xué)和群體中出現(xiàn)的與人類嚴(yán)重疾病有關(guān)的廣譜內(nèi)源性中度風(fēng)險(xiǎn)生物因子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)診斷時(shí)的操作的。操作人員本實(shí)驗(yàn)室所有實(shí)驗(yàn)人員。操作步驟打開風(fēng)機(jī)5～10分鐘，待柜內(nèi)空氣凈化并氣流穩(wěn)定后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。將雙臂緩緩伸入安全柜內(nèi)，至少靜止1分鐘，使柜內(nèi)氣流穩(wěn)定后再進(jìn)行操作。安全柜內(nèi)不放與本次實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。柜內(nèi)物品擺放應(yīng)做到清潔區(qū)、半污染區(qū)與污染區(qū)基本分開，操作過程中物品取用方便，且三區(qū)之間無交叉。物品應(yīng)盡量靠后放置，但不得擋住氣道口，以免干擾氣流正常流動。操作時(shí)應(yīng)按照從清潔區(qū)到污染區(qū)進(jìn)行，以避免交叉污染。為防可能激出的液滴，可在臺面上鋪一用消毒劑浸泡過的毛巾或紗布，但不能覆蓋住安全柜格柵。柜內(nèi)操作期間，嚴(yán)禁使用酒精燈等明火，以避免產(chǎn)生的熱量產(chǎn)生氣流，干擾柜內(nèi)氣流穩(wěn)定；且明火可能損壞HEPA濾器。工作時(shí)盡量減少背后人員走動以及快速開關(guān)房門，以防止安全柜內(nèi)氣流不穩(wěn)定。在實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，不可打開玻璃視窗，應(yīng)保證操作者臉部在工作窗口之上。在柜內(nèi)操作時(shí)動作應(yīng)輕柔、舒緩，防止影響柜內(nèi)氣流。安全柜應(yīng)定期進(jìn)行檢測與保養(yǎng)，以保證其正常工作。工作中一旦發(fā)現(xiàn)安全柜工作異常，應(yīng)立即停止工作，采取相應(yīng)處理措施，并通知相關(guān)人員。工作完全后，關(guān)閉玻璃窗，保持風(fēng)機(jī)繼續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)10～15分鐘，同時(shí)打開紫外燈，照射30分鐘。安全柜應(yīng)定期進(jìn)行清潔消毒，柜內(nèi)臺面污染物可在工作完成且紫外燈消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜體外表面則應(yīng)每天用1%的84消毒液擦拭。10、柜內(nèi)使用的物品應(yīng)在消毒后再取出，以防止將病原微生物帶出而污染環(huán)境。生物安全柜的維護(hù)保養(yǎng)程序妥善進(jìn)行生物安全柜的維護(hù)，可以為實(shí)驗(yàn)室提供有效的安全保障。具體方法如下：日常維護(hù)可用70%的乙醇，或其他中性洗滌劑將生物安全柜的內(nèi)、外部進(jìn)行徹底的擦拭。清洗時(shí)先斷電，防止消毒劑引起電器導(dǎo)電。定期檢查生物安全柜的硬件設(shè)備是否有損壞故障產(chǎn)生。在生物安全柜工作時(shí)，通常打開前視窗檢查其報(bào)警系統(tǒng)是否正常。正常情況下，這樣做會引起報(bào)警系統(tǒng)報(bào)警。不要用過強(qiáng)的清潔劑清潔柜體外部，強(qiáng)溶解性或強(qiáng)磨損性清潔劑可能會損壞生物安全柜外表面的粉體膜層。不銹鋼上頑固的污漬清除時(shí)，可以用MEK（甲基-乙基-酮）。但是，必須在清除污漬后立即用清水和中性清潔劑進(jìn)行清洗。不銹鋼的定期清洗，可以保持和維護(hù)生物安全柜的優(yōu)質(zhì)表面。6、檢查日光燈和紫外線燈管，確定他們的正常工作。日光燈和紫外線燈管在長時(shí)間使用后，可以用酒精擦洗燈管表面的污潰，注意先斷電，以防觸電。紫外線燈應(yīng)每年更換一次，以保持最佳的消毒滅菌效果。7、定期檢查生物安全柜的外殼是否有縫隙，發(fā)現(xiàn)縫隙可以用密封膠密封好。

離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程儀器分析原理和適用范圍原理：主要利用其高速旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的高離心力場的作用，可將不同大小或不同密度的顆粒分開。顆粒是指細(xì)胞、細(xì)胞器或病毒、大分子等。適用范圍：血清、血漿或體液標(biāo)本的離心處理。操作規(guī)程樣品準(zhǔn)備：未抗凝標(biāo)本垂直放置30-60分鐘后離心。標(biāo)本配平。標(biāo)本放入離心機(jī)。蓋上離心機(jī)蓋，鎖上安全鎖。打開離心機(jī)電源，設(shè)定離心轉(zhuǎn)速及離心時(shí)間。一般檢測項(xiàng)目的未抗凝血離心3000轉(zhuǎn)（rpm）7分鐘或2400轉(zhuǎn)（rpm）15分鐘?？鼓蛱厥鈾z測項(xiàng)目的樣本離心按作業(yè)指導(dǎo)書設(shè)定。待離心機(jī)轉(zhuǎn)速停止后或離心轉(zhuǎn)速降至0時(shí)，輕輕取出標(biāo)本，關(guān)閉離心機(jī)電源。離心后立即將標(biāo)本轉(zhuǎn)移至干凈不含抗凝劑或防腐劑的試管，同時(shí)此管應(yīng)具有可識別標(biāo)簽。維護(hù)保養(yǎng)項(xiàng)目：每日用軟布和中性洗滌劑清潔儀器內(nèi)外表面，離心轉(zhuǎn)筒每周及需要時(shí)消毒。校準(zhǔn)：廠家校準(zhǔn)。相關(guān)記錄：儀器使用記錄、定期維護(hù)記錄、期間核查記錄、校準(zhǔn)記錄

標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程人類免疫缺陷病毒抗體檢測（酶聯(lián)免疫法）科華生物操作方法：將試劑盒平衡至室溫，取出所需的條板，剩余的即時(shí)封存。用去離子水和蒸餾水25倍稀釋濃縮洗滌液。將所需數(shù)量的條板固定于支架按順序編號設(shè)置樣品孔、外部對照孔、陽性對照孔和陰性對照孔每次實(shí)驗(yàn)需設(shè)外部對照陽性對照2孔、陰性對照1孔。在樣品孔中加入100ul待測樣品，陰性、陽性對照及外部對照每孔加入100ul，輕拍混勻。置37℃溫育60分鐘。置洗板機(jī)用洗滌液充分洗滌5遍，扣干。每孔加入100ul酶標(biāo)記物，輕拍混勻，置37℃溫育30分鐘。重復(fù)步驟⑥。在所有孔內(nèi)加顯色A、顯色B劑各50ul，輕拍混勻，置37℃避光溫育30分鐘。每孔加入50ul終止液終止顯色反應(yīng)，用酶標(biāo)儀（雙波長450nm/630nm）測定各孔A值。結(jié)果判定：臨界值Cutoff＝0.1﹢陰性對照的平均A值（陰性對照的平均A值小于0.08按0.08計(jì)算，大于0.08按實(shí)際值計(jì)算），樣品的A值≥Cutoff值為艾滋病抗體陽性；樣品的A值<Cutoff值為艾滋病抗體陰性。同時(shí)滿足一下條件的實(shí)驗(yàn)是有效的。NC<0.080PCx>0.8，抗-艾滋病-2陽性對照OD值>0.3雙波長讀數(shù)，顯色劑空白≦0.040，單波長讀數(shù)，顯色劑空白≦0.080.計(jì)算COV：COV=PCxX10%(若PCx>2.5按2.5計(jì)算)初篩陽性者應(yīng)重新取樣進(jìn)行雙孔復(fù)試，復(fù)試陽性者應(yīng)按照“全國艾滋病檢測管理規(guī)范”送艾滋病確認(rèn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)確認(rèn)試驗(yàn)。

萬泰生物操作方法：配液：將濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。編號：將樣品對應(yīng)微孔板按序號編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照3孔，陽性對照1型，2型各1孔，空白對照1孔。（用雙波長檢測，可不設(shè)空白對照孔）。加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品或陰性，陽性對照100ul.溫育：用封板膜封板后，置37±1℃溫育60±2分鐘。洗板：小心揭掉封板膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干。加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100ul,空白孔除外。溫育：用封板膜封板后，置37±1℃溫育30±1分鐘。洗板：操作同步驟5.顯色：每孔加入顯色劑A，B液各50ul,輕輕振蕩混勻，37±1℃避光顯色30±1分鐘。測定：每孔加終止液50ul,輕輕振蕩混勻，10分鐘內(nèi)測定結(jié)果。設(shè)定酶標(biāo)儀波長于450nm處（建議用雙波長450nm/600-650nm）,用空白孔調(diào)零后測定各孔A值。結(jié)果判讀:陰性對照孔A值≤0.10，陽性對照孔A值≥0.80，否則實(shí)驗(yàn)無效。若有1孔陰性對照A值大于0.1應(yīng)舍棄；若兩孔或兩孔以上陰性對照A值大于0.1，實(shí)驗(yàn)無效。陰性判定：樣品A值＜臨界值（CUTOFF）者為艾滋病抗體陰性。陽性判定：樣品A值≥臨界值（CUTFF）者為艾滋病抗體陽性（注意：初試陽性應(yīng)重新取樣雙孔復(fù)試。復(fù)試陽性者按《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》送艾滋病確證實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行確證實(shí)驗(yàn)。）

丙型肝炎病毒抗體檢測（酶聯(lián)免疫法）操作步驟：配液：濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照3孔，陽性對照2孔和空白對照1孔（空白對照孔只加稀釋液不加樣品及酶標(biāo)試劑）其余各孔加入100UL樣本稀釋液。加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品，陰，陽對照10微升，輕輕振蕩混勻。溫育：用封版膜封版后，置37oc溫育60分鐘。洗滌：揭掉封版膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶標(biāo)記抗體100微升，輕輕振蕩混勻。溫育：置37oc溫育30分鐘。洗滌：揭掉封版膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色30分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），輕輕振蕩混勻。測定：10分鐘內(nèi)測定結(jié)果，設(shè)定酶標(biāo)儀單波長450nm或雙波長450nm/600-650nm測定。用空白孔調(diào)零點(diǎn)后測定各孔A值。結(jié)果判斷臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：CUT/OFF=陰性對照孔A均值+0.12。（不足0.02按0.02計(jì)算）陽性判定：樣品A值≥臨界值（CUTOFF）者判為抗HCV陽性。(注意初試陽性應(yīng)重新取樣雙孔復(fù)試)陰性判定：樣品A值<臨界值（CUTOFF）者判為抗HCV陰性。

梅毒螺旋體抗體（酶聯(lián)免疫法）操作步驟：配液：濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水20倍稀釋。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照3孔，陽性對照2孔和空白對照1孔（用雙波長檢測，可不設(shè)空白對照孔）加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品，陰，陽對照100微升，輕輕振蕩混勻。溫育：用封版膜封版后，置37oc溫育60分鐘。洗滌：揭掉封版膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶標(biāo)記抗體100微升，輕輕振蕩混勻。溫育：用封版膜封板后，置37oc溫育30分鐘。洗滌：揭掉封版膜，用洗板機(jī)洗滌5遍，最后一次盡量扣干顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色30分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），輕輕振蕩混勻。測定：10分鐘內(nèi)測定結(jié)果，設(shè)定酶標(biāo)儀波長于450nm（建議雙波長450nm/600-650nm測定）用空白孔調(diào)零點(diǎn)后測定各孔A值。結(jié)果判斷臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對照孔A均值+0.18。陽性判定：樣品A值≥臨界值（CUTOFF）者判為TP陽性。(注意:初試陽性應(yīng)重新取樣雙孔復(fù)試)陰性判定：樣品A值<臨界值（CUTOFF）者判為TP陰性。

乙肝五項(xiàng)操作規(guī)程乙型肝炎表面抗原（HBsAg）操作步驟：配液：配制工作濃度洗滌液（以純化水做25倍稀釋）編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號（共預(yù)留陰性對照孔3孔、陽性對照1孔、建議預(yù)留空白對照1孔）加樣：加入75微升待測樣本和陰、陽性對照與反應(yīng)孔中。溫育：用封片紙覆蓋反應(yīng)板后，置37oc溫育60分鐘。加酶標(biāo)抗體：取出反應(yīng)板，撕去封片，在已加入待測樣本和陰性、陽性對照孔中加入50微升酶結(jié)合物。微孔振蕩器或手工輕輕振蕩10秒鐘。溫育：用封片紙覆蓋反應(yīng)板后，置37oc溫育30分鐘。洗滌：手工：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20秒，扣去洗滌液，重復(fù)5次在吸水紙上拍干。洗板機(jī)：將孔內(nèi)液體甩干。選擇5次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，用封板紙覆蓋反應(yīng)板后，將反應(yīng)板放置37oc孵育30分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。測定：用酶標(biāo)儀讀數(shù)，波長450nm。（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm或630相近的波長）若需扣除顯色劑空白，則先用顯色劑空白對照孔校零，然后讀取各孔OD值。結(jié)果判斷目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，有明顯黃色者為乙型肝炎表面抗原（HBsAg）陽性；無色者為乙型肝炎表面抗原（HBsAg）陰性。酶標(biāo)儀檢測：臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：COV:Cut-offValue參考值PC：陽性對照OD值NCx:陰性對照平均OD值。NCx=(NC1+NC2+NC3)÷3檢測有效性：NCx≤0.1、PC≥1.0,則檢測結(jié)果有效。COV=NCx+0.100S:待測樣品的OD值，S/COV：待測樣本和COV的比值。陽性判定：樣品OD值S/COV≥1.0者判為HBsAg陽性。陰性判定：樣品OD值S/COV<1.0者判為HBsAg陰性。

乙型肝炎表面抗體（抗-HBs）、操作步驟：配液：濃縮洗滌液配置前充分混勻（如有結(jié)晶析出應(yīng)充分溶解），將濃縮洗滌液（20*）用蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰陽性對照各2孔和空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑）加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品50微升和陰，陽對照50微升及質(zhì)控血清。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶結(jié)合物50微升，輕輕振蕩混勻。溫育：置37oc溫育30分鐘。洗滌：手工：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置5秒，扣去洗滌液，重復(fù)5次在吸水紙上拍干。洗板機(jī)：將孔內(nèi)液體甩干。選擇4次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色15分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。測定：用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長450nm（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm）測定各孔OD值先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。結(jié)果判斷目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，有明顯黃色者為乙型肝炎表面抗體（抗－HBs）陽性；無色者為乙型肝炎表面抗體（抗－HBs）陰性。酶標(biāo)儀檢測：臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：COV=陰性對照平均OD值×2.1。（陰性對照孔OD值低于0.05者按0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算。陽性判定：樣品的OD值大于或等于COV值時(shí)，說明HBsAg陽性。陰性判定：樣品OD值小于COV值時(shí)，說明為HBsAg陰性。

乙型肝炎核心抗體（抗-HBc）操作步驟：配液：濃縮洗滌液配置前充分混勻（如有結(jié)晶析出應(yīng)充分溶解），將濃縮洗滌液（25*）用蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰陽性對照各2孔和空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑）加樣：將待測樣本用生理鹽水1:30稀釋。（稀釋樣本檢測結(jié)果為臨床意義；樣本原液加樣，檢測結(jié)果為流行病學(xué)意義。用戶可根據(jù)實(shí)際情況選擇。）分別在相應(yīng)孔中加入稀釋樣本50微升和陰，陽對照50微升及質(zhì)控血清。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶結(jié)合物50微升，輕輕振蕩混勻。溫育：置37oc溫育30分鐘。洗滌：手工：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20秒，扣去洗滌液，重復(fù)5次在吸水紙上拍干。洗板機(jī)：將孔內(nèi)液體甩干。選擇4次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色15分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。測定：用用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長450nm（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm）測定各孔OD值先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。結(jié)果判斷目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，有明顯黃色者為乙型肝炎表面抗體（HBcAb）陽性；無色者為乙型肝炎表面抗體（HBcAb）陰性。酶標(biāo)儀檢測：臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：未稀釋樣品CUT/OFF=陰性對照孔OD均值N×0.3。1:30稀釋樣品CUT/OFF=陰性對照孔OD均值N×0.5。陽性判定：樣品OD值小于COV，說明該樣品HBcAb陽性。陰性判定：樣品OD值大于或等于COV,說明該樣品HBcAb陰性。

乙型肝炎e抗原（HBeAg）操作步驟：配液：濃縮洗滌液配置前充分混勻（如有結(jié)晶析出應(yīng)充分溶解），將濃縮洗滌液（25*）用蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰陽性對照各2孔和空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑）加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品50微升和陰，陽對照50微升及質(zhì)控血清。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶結(jié)合物50微升，輕輕振蕩混勻。溫育：置37oc溫育30分鐘。洗滌：手工：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置浸泡30-60秒，扣去洗滌液，重復(fù)5次在吸水紙上拍干。洗板機(jī)：將孔內(nèi)液體甩干。選擇4次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色15分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。測定：用用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長450nm（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm）測定各孔OD值先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。結(jié)果判斷目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，有明顯黃色者為乙型肝炎e抗原（HBeAg）陽性；無色者為乙型肝炎e抗原（HBeAg）陰性。酶標(biāo)儀檢測：臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：CUT/OFF=陰性對照孔OD均值N×2.1。（陰性對照孔OD值低于0.05者按0.05計(jì)算，高于0.05按實(shí)際OD值計(jì)算）陽性判定：樣品OD值大于或等于COV值時(shí)，說明該樣品HBeAg陽性。陰性判定：樣品OD值小于COV值時(shí)，說明該樣品HBeAg陰性。

乙型肝炎e抗體（抗-HBe）操作步驟：配液：濃縮洗滌液配置前充分混勻（如有結(jié)晶析出應(yīng)充分溶解），將濃縮洗滌液（25*）用蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰陽性對照各2孔和空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑）加樣：分別在相應(yīng)孔中加入待測樣品50微升和陰，陽對照50微升及質(zhì)控血清。加酶標(biāo)抗體：空白對照孔不加酶標(biāo)試劑，每孔加入酶結(jié)合物50微升，輕輕振蕩混勻。溫育：置37oc溫育30分鐘。洗滌：手工：扣去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20秒，扣去洗滌液，重復(fù)5次在吸水紙上拍干。洗板機(jī)：將孔內(nèi)液體甩干。選擇4次洗滌程序，洗板后在吸水紙上拍干。顯色：每孔加入顯色劑A，B液各1滴（50微升），輕輕振蕩勻，37oc避光顯色15分鐘。終止：每孔加終止液1滴（50微升），混勻。測定：用用酶標(biāo)儀讀數(shù)，取波長450nm（建議使用雙波長的酶標(biāo)儀比色，參考波長630nm）測定各孔OD值先用空白孔校零，然后讀取各孔OD值。結(jié)果判斷目測：在白色背景下觀察各孔顯色情況，無色者為乙型肝炎e抗體（HBeAb）陽性；黃色者為乙型肝炎e抗體（HBeAb）陰性。（2）酶標(biāo)儀檢測：臨界值（CUT/OFF）計(jì)算：COV=(陰性對照平均OD值+陽性對照平均OD值)×0.5陽性判定：樣品OD值S/CO≤1者判為HBeAb陽性。 陰性判定：樣品OD值S/CO＞1者判為HBeAb陰性。

實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理制度及結(jié)果判讀質(zhì)量管理制度1、根據(jù)省臨檢中心的有關(guān)規(guī)定，開展實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)的質(zhì)量控制，繪制艾滋病實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制圖，包括20次OD值、S、靶值、CV%值。對室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)每日有記錄，有每月的S、靶值、CV%值。對失控情況有糾正方法，有預(yù)防性措施。2、積極參加省臨檢中心組織的室間質(zhì)控活動，對每次質(zhì)控評價(jià)應(yīng)有記錄。3、計(jì)量儀器應(yīng)定期校正，每年一次。4、精密分析儀器由專人負(fù)責(zé)，有使用記錄和維修記錄。5、商品化的試劑盒的申購由專業(yè)組長負(fù)責(zé)申報(bào)，每月一次報(bào)科主任審批，不得使用過期，無批準(zhǔn)文號的劣質(zhì)試劑，進(jìn)貨統(tǒng)一由科室管理，自配試劑須嚴(yán)格校正后方可使用。6、建立完整的艾滋病篩查實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序，并應(yīng)嚴(yán)格按程序執(zhí)行。7、當(dāng)日發(fā)出的全部檢驗(yàn)報(bào)告單須經(jīng)當(dāng)日科室總值班人員嚴(yán)格審核后方可發(fā)出。8、科室在完成嚴(yán)格的室內(nèi)、室間質(zhì)量控制體系的同時(shí)，應(yīng)逐步建立全面質(zhì)量控制體系，對標(biāo)本的采集，運(yùn)送，保存等納入嚴(yán)格的管理之中。

室內(nèi)質(zhì)控失控分析管理制度室內(nèi)質(zhì)控出現(xiàn)失控時(shí)，應(yīng)填寫失控報(bào)告單，并上交專業(yè)主管，由專業(yè)主管做出是否發(fā)出與測定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本檢驗(yàn)報(bào)告并分析及登記失控原因。失控信號的出現(xiàn)受多種因素的影響，這些因素包括操作上的失誤、試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控品的失效，儀器維護(hù)不良以及采用的質(zhì)控規(guī)則、質(zhì)控限范圍、一次測定的質(zhì)控標(biāo)本數(shù)等等。失控信號一旦出現(xiàn)就意味著與測定質(zhì)控品相關(guān)的那批患者標(biāo)本報(bào)告可能作廢。此時(shí)，首先要盡量查明導(dǎo)致的原因，然后再隨機(jī)挑選出一定比例(例如5-10％)的患者標(biāo)本進(jìn)行重新測定，最后根據(jù)既定標(biāo)準(zhǔn)判斷先前測定結(jié)果是否可接受，對失控做出恰當(dāng)?shù)呐袛唷ε袛酁檎媸Э氐那闆r，應(yīng)該在重做質(zhì)控結(jié)果在控以后，對相應(yīng)的所有失控患者標(biāo)本進(jìn)行重新測定。如失控信號被判斷為假失控時(shí)，常規(guī)測定報(bào)告可以按原先測定結(jié)果發(fā)出，不必重做。當(dāng)?shù)玫绞Э匦盘枙r(shí)，可以采用如下步驟去尋找原因：立即重測定同一質(zhì)控品。此步是主要是用以查明人為誤差，每一步都認(rèn)真仔細(xì)操作，以查明質(zhì)控的原因；另外，這一步還可以查出偶然誤差，如是偶然誤差，則重測的結(jié)果應(yīng)控。如果重測結(jié)果仍不在允許范圍，則可以進(jìn)行下一步操作。新開一瓶質(zhì)控品，重測失控項(xiàng)目。如果質(zhì)控品結(jié)果正常，那么原來那瓶質(zhì)控血清可能過期或在室溫放置時(shí)間過長而變質(zhì)或者被污染。如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。進(jìn)行儀器維護(hù)，重測失控項(xiàng)目。檢查儀器狀態(tài)，查明光源是否需要更換，比色杯是否需要清洗或更換，對儀器進(jìn)行清洗等維護(hù)。另外還要檢查試劑，此時(shí)可更換試劑以查明原因。如果結(jié)果仍不在允許范圍，則進(jìn)行下一步。重新校準(zhǔn)，重測失控項(xiàng)目。用新的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)儀器，排除校準(zhǔn)液的原因。請實(shí)際工作經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員或?qū)＜业膸椭?。如果前五步都未能得到在控結(jié)果，那可能是儀器或試劑的原因，只有向儀器或試劑廠家聯(lián)系請求技術(shù)支援。

外部質(zhì)控血清的制備和保存1、質(zhì)控血清的制備和保存（以ELISA試驗(yàn)檢測艾滋病抗體為例）在每次實(shí)驗(yàn)中必須包含有內(nèi)部對照質(zhì)控血清和外部對照質(zhì)控血清。（1）、內(nèi)部對照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)提供的陽性和陰性對照血清。內(nèi)部對照是質(zhì)量控制的基礎(chǔ)。每一次檢測必須使用內(nèi)部對照，而且只能在同批號的試劑盒中使用。（2）、外部對照質(zhì)控血清是為了監(jiān)控檢測的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及試劑盒批間或孔間差異而由實(shí)驗(yàn)室設(shè)置的一套對照血清，包括強(qiáng)陽性、弱陽性和陰性對照血清。也可以只設(shè)置一個(gè)弱陽性對照，以該試劑盒臨界值（Cut-off）的2～3倍為宜。2、外部對照質(zhì)控血清的制備艾滋病抗體陽性和陰性血清，56℃30min滅活，3000r/min，離心15min。弱陽性對照可以用艾滋病抗體陰性血清梯度稀釋艾滋病抗體強(qiáng)陽性血清并標(biāo)定后得到。按一年使用量配制（可加入不影響檢測結(jié)果的防腐劑）用0.2μm濾膜過濾除菌。3、外部對照質(zhì)控血清的保存（1）、按一周實(shí)驗(yàn)用量分裝、分類、標(biāo)記、封口、-20℃凍存于非自動除霜冰箱中。（2）、外部對照血清不可反復(fù)凍融，一旦融化后應(yīng)該存放28℃，供一周內(nèi)使用。4、外部對照質(zhì)控血清的使用每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)定性。同時(shí)可以了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)量控制圖。5、外部對照質(zhì)控物的質(zhì)量要求質(zhì)控物的管間或瓶間變異必須小于監(jiān)測系統(tǒng)預(yù)期的變異（CV＜20%），并且質(zhì)控物的成分應(yīng)在穩(wěn)定狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無菌，并不含有影響ELISA反應(yīng)的防腐劑。

室內(nèi)質(zhì)量控制程序目的：保證ELISA檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠,充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。該SOP變動程序：本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的變動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報(bào)經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽字：專業(yè)主管、科主任。方法1、分析前質(zhì)控人員培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)是人操作的，因此檢驗(yàn)人員需經(jīng)過培訓(xùn)，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術(shù)知識：檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA原理）；臨床意義；熟悉檢測技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；熟悉檢測儀器的原理及性能；掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識。某些特殊項(xiàng)目檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。室內(nèi)質(zhì)控血清的制備：質(zhì)控血清每年列出計(jì)劃報(bào)質(zhì)控組采購，一般采用CutOff值附近的陽性質(zhì)控血清-20℃凍存?zhèn)溆茫皇褂们笆覝貜?fù)融。試劑盒選擇衛(wèi)生部規(guī)定乙肝試劑，丙肝試劑，艾滋病試劑，梅毒試劑及血型試劑必須使用經(jīng)衛(wèi)生部生物制品檢定所檢定合格，并貼有防偽標(biāo)簽的產(chǎn)品。試劑盒評價(jià)：根據(jù)該試劑生物制品鑒定所的批批檢定報(bào)告，了解其質(zhì)量水平，按照質(zhì)量計(jì)劃選擇靈敏度高的或特異性高的試劑；通過詢問試劑包被物的組成，如原料來源（基因工程或合成多肽），片段的組合（按比例混合或化學(xué)合成），片段的長短等判斷試劑的優(yōu)劣；參考室間質(zhì)評報(bào)告中對試劑的評價(jià)結(jié)果，了解不同試劑的質(zhì)控成績。臨床實(shí)驗(yàn)室根據(jù)權(quán)威部門發(fā)布的試劑評價(jià)結(jié)果，了解市場上試劑的質(zhì)量優(yōu)劣。儀器質(zhì)控為使儀器保持最佳工作狀態(tài)應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），所要控制的儀器包括移液器（加樣槍），水浴箱（溫箱）和酶標(biāo)儀。移液器：ELISA加樣量?。?-100ｕl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱重法檢查：吸取刻度指示量的水，萬分之一天平稱重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±10%以內(nèi)；水浴箱：經(jīng)常檢查水浴箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測溫度是否一致，允許有±1℃的誤差；酶標(biāo)儀：經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，定期檢測校正，使其保持良好的工作性能。酶標(biāo)儀的主要性能指標(biāo)有：測讀速度、讀數(shù)的準(zhǔn)確性、重復(fù)性、精確度和可測范圍、線性等等。優(yōu)良的酶標(biāo)儀的讀數(shù)一般可精確到0.001，準(zhǔn)確性為±1%，重復(fù)性達(dá)0.5%。酶標(biāo)儀校正程序：a)濾光片波長精度檢查：將不同波長的濾光片從酶標(biāo)儀上卸下，用UV-2201型紫外-可見分光光度計(jì)（波長精度±0.3nm）于可見光區(qū)對每個(gè)濾光片進(jìn)行掃描，其檢測值與標(biāo)定值之差為濾光片波長精度。一般酶標(biāo)儀無585nm濾光片，可選用550nm或630nm濾光片。450nm濾光片的檢定選用普魯蘭溶液（校正波長為630nm）。b)通道差與孔間差檢測：通道差檢測是取一只酶標(biāo)板小孔杯（杯底須光滑，透明，無污染以酶標(biāo)板架作載體，將其（內(nèi)含200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.500A左右）置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，蒸溜水調(diào)零，于490nm處連續(xù)測三次,觀察其不同通道的檢測器測量結(jié)果的一致性，可用極差值來表示?？组g差的測量是選擇同一廠家，同一批號酶標(biāo)2板條（8條共96孔）分別加入200ul甲基橙溶液（吸光度調(diào)至0.100A左右）先后置于同一通道，蒸溜水調(diào)零,于490nm處檢測，其誤差大小用±1.96s衡量。c)零點(diǎn)飄移（穩(wěn)定性觀察）：取8只小孔杯分別置于8個(gè)通道的相應(yīng)位置，均加入200ul蒸餾水并調(diào)零，于490nm處每隔30分鐘測一次，觀察各個(gè)通道4小時(shí)內(nèi)吸光度的變化。d)精密度評價(jià)：每個(gè)通道3只小杯分別加入200ul高中低3種不同濃度的甲基橙溶解，蒸餾水調(diào)零，于490nm作雙份平行測定，每日測二次（上下午各一次），連續(xù)測定20天。分別計(jì)算其批內(nèi)精密度，日內(nèi)批精密度,日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。e)線性測定：用電子天平精確稱取甲基橙配制5個(gè)系列的溶液，于490nm平行測8次，取其均值。計(jì)算其回歸方程，相關(guān)系數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)估計(jì)誤差s，并用±1.96s表示樣品測量的誤差范圍.雙波長測定評價(jià)：取一分甲基橙溶液，分別加入3種不同濃度的溶血液（測定波長為490nm，校正波長為585nm），先后于8個(gè)通道檢測，每個(gè)通道測3次，比較各組之間是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，以考察雙波長消除干擾組分的效果。標(biāo)本的采集和保存標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)盡量避免溶血，因紅細(xì)胞破裂可釋放過氧化物酶活性物質(zhì)干擾立可讀方法的結(jié)果，以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中，溶血標(biāo)本會增加非特異性顯色造成假陽性。臨床實(shí)驗(yàn)室長菌的標(biāo)本同樣的道理也易產(chǎn)生假陽性，因菌體中可能含有內(nèi)源性HRP也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。臨床實(shí)驗(yàn)室抗凝不完全的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是不使用用肝素抗凝劑。標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長易導(dǎo)致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深，一般血清置4℃冰箱5天內(nèi)完成測試。如需保存一周以上則要-20℃冰凍保存，凍結(jié)血清融解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分布不均，融解時(shí)應(yīng)上下顛倒充分混勻，同時(shí)避免氣泡。可上下顛倒混和，不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。反復(fù)凍融會使抗體效價(jià)跌落，如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。ELISA的靈敏度>1ng/ml水平上,標(biāo)本間的污染要盡量避免，尤其不應(yīng)與生化試驗(yàn)用同一管標(biāo)本。2、分析中質(zhì)控臨床實(shí)驗(yàn)室ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果受操作影響很大，每個(gè)步驟包括加樣，溫育，洗滌，顯色，酶標(biāo)儀讀數(shù)均應(yīng)認(rèn)真負(fù)責(zé)才能充分發(fā)揮ELISA的高靈敏，強(qiáng)特異的優(yōu)點(diǎn)。因此,應(yīng)建立實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)加樣應(yīng)用微量移液器（加樣槍）按規(guī)定的量加入微孔板底部，避免加在孔壁上部，不可濺出，不可產(chǎn)生氣泡。每次加樣應(yīng)更換吸嘴，做到一人一吸頭，以免發(fā)生交叉污染；干吸頭預(yù)先在血清中抽吸三次。樣本稀釋，目的是為了減少非特異性反應(yīng)，所以一定要先加稀釋液后加樣本，特別注意加樣后要在微量振蕩器上振蕩30秒鐘，同時(shí)注意防止液體溢出。如后面操作步驟中加二種以上試劑時(shí)均需振蕩混勻。如用滴瓶滴加試劑應(yīng)先將滴瓶搖勻并擠去第一滴有氣泡的試劑后加樣。溫育抗原抗體反應(yīng)需要在一定溫度下（37°C），經(jīng)過一定的時(shí)間才能達(dá)到反應(yīng)的平衡點(diǎn)，ELISA邊緣效應(yīng)是由溫育形成的。所以溫育一般采用能使反應(yīng)液溫度迅速達(dá)到平衡的水浴法。水要浸至板條的1/3處。反應(yīng)板不宜疊放，注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定控制，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板同時(shí)測定。洗滌⑴手工洗滌一般采用浸泡方法：1）甩去孔內(nèi)反應(yīng)液；2）用洗滌液過洗一遍（即注滿孔后即甩去）；3）微孔重新注滿洗液后浸泡2-3分鐘，間歇搖動；4）甩去孔內(nèi)液體，拍板，用紙吸干。重復(fù)以上操作至少5次。注意各種試劑盒的洗滌液盡量不要混用。⑵洗板機(jī)洗板一定要預(yù)先把板架放平，使洗板機(jī)上的每個(gè)放液和吸液纖孔都能一致地插入孔底，將孔內(nèi)液體全部吸干，同時(shí)要設(shè)置一定的浸泡時(shí)間。如出現(xiàn)機(jī)洗后拍板有較多殘留液時(shí)應(yīng)再用手工洗2次以上。關(guān)機(jī)前要用蒸溜水沖洗管道，避免堵孔。臨床實(shí)驗(yàn)室顯色⑴HRP催化底物的一步呈色反應(yīng)，同樣需要一定的時(shí)間和溫度，一定要按照說明書規(guī)定的時(shí)間溫度（一般為37°C，10-15分鐘）恒定反應(yīng)后終止；⑵或根據(jù)臨界值質(zhì)控血清吸光度值達(dá)0.2左右使的時(shí)間而恒定反應(yīng)時(shí)間。3、酶標(biāo)儀判讀結(jié)果a)顯色反應(yīng)終止后應(yīng)立刻比色（30分鐘內(nèi)）。b)常見的顯色系統(tǒng)有OPD和TMB二種，以后者最為常見，而TMB酸不易終止因此必須盡快比色以免影響結(jié)果。OPD終止后顯棕色，測定波長為490nm；TMB終止后顯黃色，測定波長為450nm，二種底物的校正波長均用630nm。c)使用雙波長的優(yōu)點(diǎn)可以消除反應(yīng)板條上的劃痕手印的干擾。同時(shí)要注意反應(yīng)板應(yīng)用紙吸干后才能置酶標(biāo)儀中比色，否則吸光度易出現(xiàn)負(fù)值或損壞濾光片。3.3分析后質(zhì)控4、報(bào)告方式定性試驗(yàn)：國內(nèi)外為便于統(tǒng)一計(jì)算，一律按S/COV方式報(bào)告，S為標(biāo)本A值，COV即CutOff值（或COV）⑴夾心法和間接法以S/COV≥1為陽性；競爭法與中和法以S/COV﹤1為陽性⑵COV的計(jì)算公式以試劑盒說明書的為準(zhǔn)常見的有：a)COV=2.1×N（當(dāng)N不足0.05時(shí)按0.05計(jì)），此公式由P/N>2.1換算而來，常用于夾心法。b)COV=0.5×N，從抑止率公式換算而來，常用于競爭，中和法。c)COV=N+C（C為常數(shù)），用于間接法。d)COV=C×P+N（C為常數(shù)），用于間接法。此公式最客觀，但對廠家要求很高，陰陽性對照測定值要基本恒定。定量分析：嚴(yán)禁用定性試劑盒做定量分析。⑴用已知量的系列標(biāo)準(zhǔn)品，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以絕對量或單位表示。ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線每次都要和待測標(biāo)本做在同一塊板上。⑵現(xiàn)有的ELISA定量試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線只有在較窄的濃度范圍內(nèi)成直線，要得到精確的結(jié)果實(shí)屬不易。⑴所有實(shí)驗(yàn)的原始資料均應(yīng)存檔；所有的記錄均應(yīng)規(guī)范登記在冊；原始登記表應(yīng)記錄試劑來源、批號；質(zhì)控血清的來源及測定值并注明是否在控；簽上實(shí)驗(yàn)者姓名及審核者姓名。⑵如試驗(yàn)結(jié)果對臨床診斷有決定意義，其樣本應(yīng)保留，至少與病歷保存期一致。a)定性試驗(yàn)ELISA定性試驗(yàn)的臨床意義在于是否檢出病原體，與檢出量無關(guān)，因此QC要保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。生化的質(zhì)控圖方法僅能觀察靈敏度而無法監(jiān)控特異性。建議使用臨界值血清界定法：將試劑盒所設(shè)的陰陽性對照作為內(nèi)對照指示反應(yīng)；另設(shè)臨界值、高值質(zhì)控血清，正常人血清作為外對照，與標(biāo)本同時(shí)檢測，臨界值S/C.O≥1，高值質(zhì)控血清S/C.O≥10，正常人血清A值在0.05-0.07之間。陽性質(zhì)控血清失控（臨界值為靈敏度，高值為“HOOK”效應(yīng)監(jiān)控）應(yīng)重做陰性標(biāo)本；陰性對照失控應(yīng)重做陽性標(biāo)本。以表格式記錄每塊板的外對照實(shí)驗(yàn)結(jié)果，作為QC資料存檔。b)定量試驗(yàn)ELISA定量試驗(yàn)常見于腫瘤因子（如AFP，CEA，CA系列），激素類，免疫球蛋白類，這些物質(zhì)在體內(nèi)有一定的量（正常范圍），超出這個(gè)量才呈病理情況，故需定量測定。定量試驗(yàn)的質(zhì)控方法可參考生化方式。c)“即刻性”質(zhì)控在開始進(jìn)行質(zhì)控時(shí)，只需要有3個(gè)質(zhì)控血清測定值即可進(jìn)行質(zhì)控。當(dāng)這組數(shù)據(jù)擴(kuò)大到20次有效值時(shí)就可以計(jì)算RCV的X，s。方法：⑴先將測定值從小到大排列，X1最小，Xn最大；⑵計(jì)算X和s；⑶計(jì)算SI上限值和下限值。SI上=（X最小-X）/S，SI下=（X最大-X）/S⑷對照SI表，檢查是否出控，SI上、下限≤規(guī)定值，在控；SI上或下限>規(guī)定值，失控。

室間質(zhì)量控制程序目的采用一系列的辦法連續(xù)地、客觀地評價(jià)各實(shí)驗(yàn)室的試驗(yàn)結(jié)果，并發(fā)現(xiàn)室內(nèi)質(zhì)控不易發(fā)現(xiàn)的不準(zhǔn)確性，了解各實(shí)驗(yàn)室之間結(jié)果的差異，并幫助校正，使具有可比性。?；靖拍钯|(zhì)量控制是監(jiān)視ELISA操作全過程，排除誤差，維持標(biāo)準(zhǔn)化操作的一個(gè)管理過程。這一過程是通過一個(gè)反饋環(huán)路進(jìn)行的：確定控制的對象；規(guī)定控制對象的標(biāo)準(zhǔn)（預(yù)期值）；制定或選擇控制方法和手段；測量實(shí)際數(shù)據(jù)；