DB32T 4972.8-2024傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范 第8部分：標本的采集、保存和運輸

CCSC50江蘇省地方標準傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第8部分：標本的采集、保存和運輸2024-12-27發(fā)布2025-01-27實施江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)發(fā)出布版Ⅰ前言 Ⅲ引言 Ⅳ 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4生物安全要求 5采集前準備 6標本采集 7標本保存、運輸和交接 附錄A（資料性）各癥候群對應(yīng)病原體及標本類型 附錄B（資料性）標本采集方法 Ⅲ本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件是DB32/T4972《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》的第8部分。DB32/T4972已經(jīng)發(fā)布了以下部分：——第1部分：監(jiān)測預(yù)警；——第2部分：事件報告和管理；——第3部分：風(fēng)險評估；——第4部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個人防護；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測、評估與控制；——第8部分：標本的采集、保存和運輸；——第9部分：應(yīng)急檢測流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測技術(shù)；——第11部分：細菌類應(yīng)急檢測技術(shù)。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康委員會提出并組織實施。本文件由江蘇省衛(wèi)生健康標準化技術(shù)委員會歸口。本文件起草單位：江蘇省疾病預(yù)防控制中心、東部戰(zhàn)區(qū)疾病預(yù)防控制中心。本文件主要起草人：王慎驕、張錦海、樊歡、呂恒、朱寶立、談忠鳴、付建光、鄧斐、孔筱筱、田華、Ⅳ引言傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件是公共衛(wèi)生安全的主要威脅，對社會、經(jīng)濟和人群健康存在巨大影響。本文件為貫徹落實《中華人民共和國傳染病防治法》《中華人民共和國突發(fā)事件應(yīng)對法》《突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急條例》等法律法規(guī)對傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置要求，提升江蘇省傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的應(yīng)急處置能力，保障人民群眾的生命安全和社會穩(wěn)定而制定。DB32/T4972《傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范》由以下11個部分構(gòu)成：——第1部分：監(jiān)測預(yù)警；——第2部分：事件報告和管理；——第3部分：風(fēng)險評估；——第4部分：現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查；——第5部分：恢復(fù)評估；——第6部分：應(yīng)急消毒處置及應(yīng)急人員個人防護；——第7部分：媒介生物應(yīng)急監(jiān)測、評估與控制；——第8部分：標本的采集、保存和運輸；——第9部分：應(yīng)急檢測流程；——第10部分：病毒類應(yīng)急檢測技術(shù)；——第11部分：細菌類應(yīng)急檢測技術(shù)。DB32/T4972的制定是對傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件處置工作相關(guān)國家標準、行業(yè)標準的有力補充，為開展傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件的監(jiān)測預(yù)警、報告和管理、風(fēng)險評估、現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查、恢復(fù)評估、應(yīng)急消毒處置和個人防護、媒介生物的應(yīng)急監(jiān)測評估與控制、標本的采集和檢測等應(yīng)急處置工作提供有力的科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐，對保障公眾健康和公共衛(wèi)生安全具有重要意義。1傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置技術(shù)規(guī)范第8部分：標本的采集、保存和運輸本文件規(guī)定了傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處置中微生物學(xué)檢驗標本的生物安全要求、標本采集前準備、標本采集、標本的保存、運輸和交接的技術(shù)要求。本文件適用于各級疾控機構(gòu)和醫(yī)療機構(gòu)在傳染病突發(fā)公共衛(wèi)生事件中開展標本的采集、保存和運輸。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T5750—2023生活飲用水標準檢測方法GB19489實驗室生物安全通用標準WS233—2017病原微生物實驗室生物安全通用準則WS/T640—2018臨床微生物學(xué)檢驗標本的采集和轉(zhuǎn)運WS/T799—2022污水中新型冠狀病毒富集濃縮和核酸檢測方法標準Doc9284危險物品航空安全運輸技術(shù)細則3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4生物安全要求4.1個人防護4.1.1實驗人員應(yīng)根據(jù)GB19489和風(fēng)險評估的要求，配備不同類型傳染病感染的個人防護裝備，包括但不限于防護服、手套、外科口罩或醫(yī)用防護口罩、防護面屏、防護帽。4.1.2個人防護裝備宜每隔4h更換一次。在發(fā)生意外暴露時，根據(jù)應(yīng)急處置預(yù)案采取必要措施。4.1.3采樣人員、采樣場所、感染性標本處置及消毒滅菌應(yīng)符合WS233—2017中的實驗室生物安全管理要求。4.2廢棄物處理4.2.1標本采集過程中產(chǎn)生的醫(yī)療廢物，包括且不限于一次性使用后廢棄的醫(yī)療器械、個人防護用品和被患者血液、體液、排泄物污染的廢棄物，將上述醫(yī)療廢棄物除銳器外密封收集于醫(yī)療廢物包裝袋中，銳2器需置于銳器桶中，再放入另一層醫(yī)療廢物包裝袋進行雙層包裝。4.2.2廢棄物密閉后用含有效氯2000mg/L的消毒液對醫(yī)療廢棄物包裝袋外表面噴灑消毒，消毒后移交醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)或醫(yī)療廢物集中處置單位進行集中處置。4.2.3工作人員全程做好防護，在處理完醫(yī)療廢棄物后應(yīng)立即采用75%的乙醇（酒精）或速干型手消毒劑進行手消毒，并采用含有效氯2000mg/L的消毒液對采樣場所進行噴灑消毒。廢棄物處理應(yīng)有書面記錄并存檔。4.3標本包裝容器。4.3.2航空運輸標本，應(yīng)視情況粘貼Doc9284中6.2項危險品標簽。4.3.3陸路運輸標本包裝標簽和標記可參照航空運檢要求。5采集前準備5.1標本采集方案制定5.1.1標本采集機構(gòu)應(yīng)有用于處理標本采集請求的程序，該程序包括書面和口頭采樣要求，根據(jù)現(xiàn)場流行病學(xué)調(diào)查納入疑似病例，篩選符合五大癥候群采樣要求的對象進行采樣，標本采樣方案流程圖見圖1。3圖1標本采樣方案流程圖5.1.2標本采集前應(yīng)該明確以下內(nèi)容：a）根據(jù)流行病學(xué)特征初步懷疑病原方向，擬定檢測項目；b）標本類型；c）采集方法；d）標本采集、轉(zhuǎn)運所需要的耗材、裝置/容器和轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基；e）轉(zhuǎn)運時限、儲存條件。5.1.3根據(jù)初步檢測結(jié)果，如有需要可根據(jù)病原體種類對病毒或者細菌采用特殊培養(yǎng)基或采樣液進行針對性采樣，以進一步明確病原體。5.1.4對采樣信息進行收集整理，包括不限于：標本名稱、標本類型、標本采集日期和時間、病例姓名、病例性別、病例年齡或出生日期、臨床診斷及主要臨床表現(xiàn)、采樣單位、采樣單位聯(lián)系人及聯(lián)系方式、檢驗項目和病例聯(lián)系電話（適用時）。5.1.5采樣機構(gòu)應(yīng)有標本采集方法、采樣信息填報、預(yù)防和控制感染、記錄任何偏差的程序，有發(fā)生生物安全意外事故（如采集咽拭子時發(fā)生受檢者嘔吐、采集標本時發(fā)生噴濺）的應(yīng)急處置程序和應(yīng)急演練；采4樣機構(gòu)應(yīng)按照程序要求備齊標本采集材料。6標本采集6.1一般要求6.1.1從事標本采集的技術(shù)人員應(yīng)具備相應(yīng)的采樣技能并經(jīng)過生物安全培訓(xùn)。6.1.2宜在發(fā)病早期和抗生素/抗病毒藥物使用前采集標本。針對不同病原體采用相應(yīng)標本的保存液。對已使用了抗生素/抗病毒藥物的患者，采集后的標本宜使用相關(guān)的中和液進行處理。6.1.3根據(jù)癥候群和檢測項目結(jié)合患者病程的不同階段采集不同標本。對于血液、腦脊液、胸腔積液、腹水、組織活檢和尸檢標本的采集，應(yīng)無菌操作。6.1.4標本采集時應(yīng)對標本信息進行登記并填寫樣品送檢單。6.1.5應(yīng)使用可靠的標記方法，包括但不限于耐凍記號筆、耐凍標簽。6.1.6標識內(nèi)容具有唯一性并與采樣記錄表格一一對應(yīng)。6.2標本類型6.2.1基于癥候群的病原體快速篩查方法確定采集標本類型。各癥候群主要病原體及需要采集的標本見附錄A。6.3標本采集方法各標本采集方法注意事項見附錄B。7標本保存、運輸和交接7.1保存運輸7.1.1根據(jù)病例流行病學(xué)特征進行標本采集前，應(yīng)當明確某些特殊病原體的保存和轉(zhuǎn)運方法，以保證采樣人員和標本運送人員能獲得有關(guān)標本的準確信息。7.1.2標本的保存和運輸應(yīng)由經(jīng)過培訓(xùn)的專人負責(zé)。提前評估劇烈震蕩和溫度對檢驗結(jié)果產(chǎn)生的影響，并采取干預(yù)措施。標本采集后，在規(guī)定時間內(nèi)運達實驗室，并盡可能縮短轉(zhuǎn)運時間。7.1.3用于細菌學(xué)檢驗的標本的保存運輸符合下列規(guī)定。a）用于普通細菌學(xué)檢驗的標本宜在2h內(nèi)送至實驗室。若轉(zhuǎn)運時間超過2h，宜使用轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基轉(zhuǎn)運；用于細菌培養(yǎng)的標本室溫下保存不能超過24h；用于血培養(yǎng)的標本不能冷藏轉(zhuǎn)運；僅用于分子診斷的標本，宜冷藏或冷凍保存（-70℃以下最佳，避免反復(fù)凍融）。b）對環(huán)境敏感的細菌標本采集后立即送檢。對周圍環(huán)境敏感的細菌包括但不限于百日咳鮑特菌、志賀菌屬、淋病奈瑟菌、腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌和厭氧菌。c）對低溫敏感的細菌標本采集后不宜冷藏。對低溫敏感的細菌包括但不限于腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌和肺炎鏈球菌。標本應(yīng)注意立即保溫運送（不可超過8h）。d）用于厭氧菌培養(yǎng)的標本在常溫下轉(zhuǎn)運，宜在采集后30min內(nèi)送至實驗室，轉(zhuǎn)運過程中標本隔絕空氣。7.1.4用于病毒學(xué)檢驗的標本的保存運輸符合下列規(guī)定。a）用于病毒核酸檢驗的標本：采集后在2h~4h內(nèi)送至實驗室。血液標本室溫運送，其他標本在2℃~8℃下轉(zhuǎn)運；若運送時間超過24h，標本宜在-70℃或更低的溫度下保存和轉(zhuǎn)運。b）用于病毒培養(yǎng)和抗原檢驗的標本在運送過程中宜保存在適當?shù)牟《巨D(zhuǎn)運液或其他相應(yīng)的緩沖5液中。c）液體標本包括但不限于血液、腦脊液、尿液和支氣管肺泡灌洗液可直接送檢，不需使用轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基。7.1.5用于真菌培養(yǎng)的標本（除頭發(fā)、皮膚和指甲宜干燥送檢外宜濕潤條件下送檢。7.1.6根據(jù)WS/T640—2018當標本需要進行多種微生物學(xué)檢驗（包括但不限于病毒檢測、細菌檢測和真菌檢測）時，選擇合適的采樣拭子、轉(zhuǎn)運培養(yǎng)基、培養(yǎng)液，分別采樣并將標本保存于合適的保存液及容器中。7.1.7疑似高致病性標本運輸由專人專車護送。任何單位及個人不得通過公共交通工具運輸。運輸過程應(yīng)保留完整的文件記錄，保證可回顧、可溯源。運輸過程中應(yīng)保護被采樣者個人信息不被泄露。運送者至少為兩人，應(yīng)接受培訓(xùn)，經(jīng)考核合格后方可上崗。7.1.8用于分子診斷的樣本或分離的毒株宜于-70℃以下長期保存，避免反復(fù)凍融。對樣本中分離到菌株短期采用甘油凍存，長期宜進行凍干保存。所有采集到的傳染性樣本應(yīng)保存于規(guī)范的樣本庫中，雙人雙鎖管理。標本在運輸送達后包裝的開啟，應(yīng)當在符合生物安全規(guī)定的場所中進行。標本交接的質(zhì)量控制要做到以下幾點。a）核查標本質(zhì)量：標本的基本性狀需符合要求，記錄有無嚴重溶血、微生物污染、血脂過多以及黃疸等情況；對照病人發(fā)病時間，檢查標本種類應(yīng)與病程相符合、送樣是否及時；判斷標本取材是否正確、是否采用合適容器、送樣過程是否提供標本適宜條件。b）核對標本信息：觀察標本上是否有標識，字跡是否能辨認，標本信息與送檢單是否一致。c）保留紙質(zhì)記錄：填寫標本接收單與回執(zhí)單，并注明交接時間、雙方姓名和聯(lián)系方式。d）妥善處置不合格標本：如樣品污染或其他原因認為樣品不合格，應(yīng)安全廢棄；與送樣人交接時填寫標本拒收單，寫明標本拒收原因，并及時補充采集標本。6（資料性）各癥候群對應(yīng)病原體及標本類型各癥候群對應(yīng)病原體及標本類型見表A.1。表A.1各癥候群對應(yīng)病原體及標本類型癥候群病毒類細菌類其他病原體標本類型發(fā)熱伴呼吸道癥候群流行性感冒病毒、冠狀病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病薩奇病毒等金黃色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、A組鏈球菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、肺炎支原體、肺炎衣原體和鸚鵡熱衣原體等抽吸物、支氣管肺泡灌洗液、胸腔穿刺液、抗凝血、急性期/恢復(fù)期血發(fā)熱伴出疹癥候群水痘-帶狀皰疹病毒、人類細小病毒B19、腸道病毒、風(fēng)疹病毒、麻疹病毒、EB病毒、人皰疹病毒6型、登革病毒、埃博拉病毒、猴痘病毒等鏈球菌、傷寒沙門菌、副傷寒沙門菌、立克次體和布氏疏螺旋體等抗凝血、急性期/恢復(fù)期液、皮膚化膿性病灶膿發(fā)熱伴出血癥候群漢坦病毒、登革病毒、出血熱病毒、大別班達病毒、埃博拉病毒等鼠疫耶爾森菌、腦膜炎奈瑟菌、鉤端螺旋體、豬鏈球菌、立克次體、查菲埃立克體、人嗜吞噬細胞無形體等抗凝血、急性期/恢復(fù)期腹瀉癥候群輪狀病毒、腸道腺病毒、諾如病毒、札如病毒、星狀病毒等致瀉性大腸埃希菌、致病性弧森菌（小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、假沙門菌、志賀菌、嗜水氣單胞菌、類志賀鄰單胞菌、艱難梭菌、阪崎克羅諾桿菌等溶組織內(nèi)阿米巴蟲、藍氏賈第鞭毛蟲、隱孢子蟲、環(huán)孢子蟲、微孢子蟲等糞便、肛拭子、抗凝血、嘔吐物腦炎腦膜炎癥候群腸道病毒、乙腦病毒、西尼羅病毒、蜱傳腦炎病毒、尼帕病毒、單純皰疹病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、呼吸道合胞病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒等腦膜炎奈瑟菌、B型流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、豬鏈球菌、大腸桿菌、B族鏈球菌、單增李斯特菌、克羅分枝桿菌等新型隱球菌、惡性瘧原蟲、弓形蟲、豬囊尾蚴、州管圓線蟲、裂頭蚴等腦脊液、抗凝血、急性期/恢復(fù)期血清、鼻/咽拭子、糞便標本注：可根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果，按照需要，采集相應(yīng)的環(huán)境的涂抹樣、水樣、空氣樣、嚙齒類及節(jié)肢動物等。7（資料性）標本采集方法標本采集方法見表B.1。表B.1標本采集方法序號采集種類采集方法采集要求1咽拭子1.核對患者信息。2.手部消毒。3.取出采樣拭子，囑被采集者頭稍后仰，張口充分暴露咽部。4.采集順序：用拭子輕柔快速地在被采集者咽后壁及扁桃體隱窩、側(cè)壁等處反復(fù)旋轉(zhuǎn)擦拭3次~5次，收集黏膜細胞。5.將咽拭子插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋。6.再次核對患者信息無誤嚴格規(guī)范手部衛(wèi)生，認真核對患者信息，采樣輕柔快速，避免觸及舌、口腔黏膜和唾液2鼻拭子1.核對患者信息。2.手部消毒。3.取出采樣拭子，囑被采集者頭部自然放松微仰，將采樣拭子貼鼻孔壁平行于上顎插入鼻孔觸及鼻腭處，停留片刻吸收分泌物后邊擦拭邊緩慢轉(zhuǎn)動退出，另取一個拭子以同樣方法采集另一側(cè)鼻孔。4.將咽拭子插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋。5.再次核對患者信息無誤嚴格執(zhí)行個人防護，核對患者信息，同一病人的鼻拭子和咽拭子可以分別保存，也可以放入同一采樣管中作為鼻咽拭子管3肛拭子1.核對患者信息。2.被采集者通常采用側(cè)臥屈膝姿勢或雙手支撐桌椅站立前屈姿勢或膝胸位（跪趴暴露肛門。3.將采樣拭子輕輕插入肛門3cm~5cm（小兒2cm~3cm輕輕旋轉(zhuǎn)3圈~5圈后旋轉(zhuǎn)拔出。4.立即插入采集管中，折斷棄去尾部，旋緊管蓋采樣拭子前端可先濕潤，即蘸取生理鹽水或采集管內(nèi)非刺激性保存液，擠去多余液體后插入，保證進入肛門內(nèi)部，旋轉(zhuǎn)時輕柔，盡量帶有部分糞便，增加檢出率4血液2.根據(jù)醫(yī)囑采集血標本，根據(jù)檢驗?zāi)康呐c要求確定采集時間、方法和試管，并通知患者準備。3.皮膚消毒程序：按常規(guī)方法進行。4.采血操作程序1）通常采血部位為肘靜脈，將止血帶扎在靜脈取血部位的上方，采血部位的局部皮膚用消毒液由采血部位向外周嚴格消毒，消毒后不可接觸采血部位，待消毒液揮發(fā)后，進行取血操作。（2）采用商品化的一次性注射器或真空采血管針不要回蓋針帽，直接將其放在銳器盒內(nèi)。5.采血后指導(dǎo)患者按壓穿刺點5min~10min，勿揉，凝血機制差的患者適當延長按壓時間。必須核對患者信息。應(yīng)嚴格執(zhí)行無菌操作，嚴禁在正在輸液或輸血的肢體或針頭、輸液或輸血穿刺點上方、皮管內(nèi)采血標本，應(yīng)在對側(cè)肢體采血。如同時采多個項目的標本，采血順序：血培養(yǎng)→不含添加劑的試管→凝血標本管→其他標本管，需抗凝的試管拔出后按要求輕輕搖勻。注意標本溶血問題，采樣后盡快送檢，用于血清學(xué)檢測的標本保存在4℃~8℃8表B.1標本采集方法（續(xù)）序號采集種類采集方法采集要求5糞便采集糞便應(yīng)使用無菌容器（如痰盂內(nèi)套無菌塑料袋自然排出新鮮糞便后，迅速挑取糞便盛入無菌的便盒或采樣杯。挑取的糞便標本，應(yīng)該選擇具有明顯性狀改變的部分，如有膿血或黏液應(yīng)挑取膿血、黏液部分；液體糞便則應(yīng)取絮狀物的部分。固體形態(tài)的糞便可用滅菌的壓舌板或棉簽挑??；液體糞便則需要使用吸管建議多點采集以提高檢出率，便盒中糞便量不少于5g（5mL由于癥候群病原學(xué)檢測要求同時進行多種病原體的檢測，因此采集的標本量大于一般進行單個病種檢測的量。在整個采集過程中注意不能有尿液混入6尿液可選擇下述方法中任一種，取約10mL~15mL尿標本于無菌容器中：1.清潔中段尿：不中止排尿，在排去數(shù)毫升尿液后用無菌寬口容器收集第二段尿，即為所需中段尿。2.恥骨上膀胱穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱吸取尿液。3.直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰部進行清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。4.小兒收集包：對于無控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液。5.留置導(dǎo)尿管收集尿液患者尿標本采集時盡量選擇晨尿。女性患者經(jīng)期應(yīng)避免尿標本采集。尿標本收集后應(yīng)及時送檢，及時接季保存時間應(yīng)適當縮短或冷藏保存4℃冷藏保存時間不得超過8h7嘔吐物在患者嘔吐時或中毒患者洗胃時，用彎盤或痰杯接取新鮮嘔吐物。用無菌壓舌板或拭子挑取少量嘔吐物（3g~5g）放入滅菌螺口塑料管中，密封同時采集可疑食物和中毒病人的嘔吐物8痰液1.自然咳痰法：晨痰最佳，患者清晨起床后，用清水或冷開水漱口數(shù)次，用力深咳出呼吸道深部的痰，直接吐入無菌采集容器中，標本量應(yīng)≥1mL，立即送檢。2.誘導(dǎo)咳痰法：對于痰量少、無痰或咳痰困難者可霧化吸入，使痰液易于排出。于超聲霧化器霧化杯中加入4%的NaCl溶液40mL，吸入高滲鹽溶液15min~25min，囑病人漱口，用力咳出深部痰，收集入無菌采集容器中送檢。3.支氣管鏡采集法：按常規(guī)支氣管鏡檢的方法進行，在有痰和病變部位用導(dǎo)管吸引直接取得標本，置于無菌采集容器中。4.小兒取痰法：用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物，將粘在拭子上的分泌物置于無菌采集容器中。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰痰標本應(yīng)進行合格痰液的判定：采用痰涂片觀察法，選取5個低倍鏡視野，計白細胞（WBC）數(shù)和鱗狀上皮細胞（SC）平均數(shù)，鱗狀上皮細胞<10個/低倍視野、白細胞>25個/低倍視野，或二者比例<12.5的痰標本為合格標本。凡不符合上述合格標準的痰標本應(yīng)重新采集。9肺泡灌洗液支氣管肺泡灌洗液標本的采集的操作規(guī)程如下：于局部麻醉后將纖維支氣管鏡插入右肺中葉或左肺舌段的支氣管，將其頂端契入支氣管分支開口，經(jīng)氣管活檢孔緩緩注入37℃滅菌生理鹽每次注液后以-13.3kPa~-19.95kPa負壓吸出回收灌洗液，要防止負壓過大，過猛。分別收集于用硅化處理過的容器中，容器周圍宜用冰塊包圍，并及時送檢灌洗液回收率>30%為宜。采集標本置入無菌采集容器中，標本量應(yīng)≥5mL，立即送檢，必須注意采集標本時盡可能避免咽喉部正常菌群的污染9表B.1標本采集方法（續(xù)）序號采集種類采集方法采集要求腦脊液1.患者側(cè)臥于硬板床上，背部與床面垂直，頭向前胸部屈曲，兩手抱膝緊貼腹部，使軀干呈弓形，或由助手立于術(shù)者對面，用一手摟住患者頭部，另一手摟住雙下肢腘窩處并用力抱緊，使脊柱盡量后突，以增加椎間隙寬度，便于進針。2.以髂后上棘連線與后正中線交會處為穿刺點，通常取第3~4腰椎棘突間隙，也可在上一個或下一個椎間隙進行。3.常規(guī)消毒皮膚，戴無菌手套、鋪消毒濕巾，以2%利多卡因自皮膚至椎間韌帶作局部浸潤麻醉。4.術(shù)者以左手拇、食二指固定穿刺點皮膚，右手持穿刺針以垂直背部方向緩慢刺入，當針頭穿過韌帶與硬脊膜時，可感到阻力突然消失（成人進針深度為4cm~6cm，兒童為2cm~4cm此時將針芯緩慢拔出，即可見無色透明腦脊液流出。5.當見到腦脊液即將流出時，接上測壓管測量壓力，準確讀數(shù)，亦可計數(shù)腦脊液滴數(shù)估計壓力（正常為70mmH2O~180mmH2O或40滴/min~50滴/min）。若壓力不高，可令助手壓迫一側(cè)頸靜脈約10s，然后再壓另一側(cè)，最后同時按壓雙側(cè)頸靜脈，若腦脊液壓力迅速升高一倍左右，解除壓迫后10s~20s，又迅速降至原來水平，表示蛛網(wǎng)膜下腔通暢，若壓迫靜脈后壓力不升高，表示蛛網(wǎng)膜下腔完全阻塞，若壓迫后壓力緩慢上升，放松后又緩慢下降，表示不完全阻塞。6.撤除測壓管，收集腦脊液，成人3mL，兒童1mL；送驗常規(guī)、生化及細菌培養(yǎng)等。7.術(shù)畢將針芯插入后一起拔出穿刺針，覆蓋消毒紗布，膠布固定。8.術(shù)后去枕仰臥4h~6h，可避免術(shù)后低顱壓性頭痛。9.采樣分裝：每份樣品分裝成250μL每管。1.嚴格無菌操作，穿刺時避免引起微血管損傷。2.穿刺時如患者出現(xiàn)呼吸、脈搏、面色蒼白等異常改變時，應(yīng)立即停止操作。3.如患者出現(xiàn)顱內(nèi)壓升高現(xiàn)象，需對患者先進行脫水處理后再進行采樣環(huán)境涂抹樣可選取地漏、養(yǎng)殖區(qū)域、食品加工工具、人體接觸物品或部位（如門把手）等，進行表面涂抹采樣，采集標本疑似為病毒污染的選擇放入病毒保存液保存，疑