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文檔簡介

動(dòng)物遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)六瓊脂糖凝膠電泳

一、實(shí)驗(yàn)原理

瓊脂糖是一種天然聚合長鏈狀分子，可以形成具有剛性的濾孔，凝膠孔徑的大小決定于瓊脂糖的濃度DNA分子在堿性緩沖液中帶負(fù)電荷，在外加電場作用下向正極泳動(dòng)DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動(dòng)時(shí)，有電荷效應(yīng)與分子篩效應(yīng)。不同DNA的分子量大小及構(gòu)型不同，電泳時(shí)的泳動(dòng)率就不同，從而分出不同的區(qū)帶二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

掌握瓊脂糖凝膠電泳分離DNA的原理和方法豬基因組DNA及PCR產(chǎn)物電泳儀，電泳槽，電子天平，移液器，槍頭，微波爐，紫外透射檢測儀等。

瓊脂糖，1XTAE電泳緩沖液，溴化乙錠（EB），6X載樣緩沖液：Ⅰ0.25%溴酚藍(lán)，0.25%二甲苯青，40%蔗糖水溶液;Ⅱ0.25%溴酚藍(lán)，0.25%二甲苯青，30%甘油水溶液三、實(shí)驗(yàn)材料、器具及藥品(4)用移液器吸取總DNA或質(zhì)粒樣品4μl于封口膜上，再加入2μl的6X載樣緩沖液，混勻后，小心加入點(diǎn)樣孔。⑸打開電源開關(guān)，調(diào)節(jié)電壓至3-5V/cm，可見到溴酚藍(lán)條帶由負(fù)極向正極移動(dòng)，電泳約30min-60min。⑹將凝膠放入EB染液中染色5-10min,用清水稍微漂洗。⑺將染色后的凝膠置于紫外透射檢測儀上，蓋上防護(hù)觀察罩，打開紫外燈，可見到發(fā)出熒光的DNA條帶。四、實(shí)驗(yàn)步驟(2)結(jié)果與分析

圖1豬基因組DNA1%瓊脂凝膠電泳圖結(jié)果與分析

圖2PCR產(chǎn)物瓊脂凝膠電泳圖

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