參苓白術(shù)顆粒生物利用度

50/59參苓白術(shù)顆粒生物利用度第一部分參苓白術(shù)顆粒處方研究 2第二部分制劑工藝優(yōu)化 6第三部分質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立 15第四部分藥代動(dòng)力學(xué)研究 19第五部分生物等效性評(píng)價(jià) 26第六部分影響因素考察 33第七部分臨床應(yīng)用研究 45第八部分安全性評(píng)價(jià) 50

第一部分參苓白術(shù)顆粒處方研究關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)參苓白術(shù)顆粒處方研究的背景和意義

1.參苓白術(shù)顆粒是一種傳統(tǒng)的中藥制劑，具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效，常用于治療脾虛濕盛所致的泄瀉。

2.中藥制劑的質(zhì)量和療效受到處方的影響，因此對(duì)參苓白術(shù)顆粒處方的研究具有重要的意義。

3.隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，對(duì)中藥制劑的研究也在不斷深入，需要進(jìn)一步優(yōu)化處方，提高產(chǎn)品質(zhì)量和療效。

參苓白術(shù)顆粒處方的組成和藥材來源

1.參苓白術(shù)顆粒的處方由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等藥材組成。

2.這些藥材均為中藥材，具有豐富的藥用價(jià)值，在處方中的配比和用量需要經(jīng)過嚴(yán)格的篩選和優(yōu)化。

3.藥材的來源也會(huì)影響處方的質(zhì)量和療效，需要選擇優(yōu)質(zhì)、道地的藥材進(jìn)行生產(chǎn)。

參苓白術(shù)顆粒處方的工藝研究

1.參苓白術(shù)顆粒的處方需要經(jīng)過提取、濃縮、干燥等工藝步驟，以確保產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

2.工藝研究需要優(yōu)化提取方法、提取條件、濃縮倍數(shù)、干燥方式等參數(shù)，以提高產(chǎn)品的收率和質(zhì)量。

3.現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展為中藥制劑的工藝研究提供了新的手段和方法，如超臨界流體萃取、膜分離等，可以進(jìn)一步提高產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

參苓白術(shù)顆粒處方的質(zhì)量控制研究

1.參苓白術(shù)顆粒的處方需要進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，以確保產(chǎn)品的質(zhì)量和療效符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

2.質(zhì)量控制研究需要建立完善的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系，包括藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、中間產(chǎn)品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和成品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

3.質(zhì)量控制研究還需要采用先進(jìn)的檢測(cè)方法和技術(shù)，如高效液相色譜法、氣相色譜法、原子吸收光譜法等，以確保產(chǎn)品的質(zhì)量和療效。

參苓白術(shù)顆粒處方的藥效學(xué)研究

1.藥效學(xué)研究是評(píng)價(jià)中藥制劑療效的重要手段之一，需要對(duì)參苓白術(shù)顆粒的藥效學(xué)進(jìn)行研究。

2.藥效學(xué)研究可以通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、臨床試驗(yàn)等方法，觀察參苓白術(shù)顆粒對(duì)脾虛濕盛模型動(dòng)物的治療作用，以及對(duì)人體的安全性和有效性。

3.藥效學(xué)研究需要結(jié)合現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)，如分子生物學(xué)、免疫學(xué)等，深入探討參苓白術(shù)顆粒的作用機(jī)制和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。

參苓白術(shù)顆粒處方的臨床應(yīng)用研究

1.參苓白術(shù)顆粒的臨床應(yīng)用研究是評(píng)價(jià)其療效和安全性的重要依據(jù)，需要進(jìn)行大量的臨床試驗(yàn)。

2.臨床應(yīng)用研究可以通過隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)、開放試驗(yàn)等方法，觀察參苓白術(shù)顆粒對(duì)脾虛濕盛相關(guān)疾病的治療作用，以及與其他藥物的比較。

3.臨床應(yīng)用研究需要嚴(yán)格遵循臨床試驗(yàn)的規(guī)范和要求，確保研究結(jié)果的科學(xué)性和可靠性。參苓白術(shù)顆粒處方研究

摘要：本文旨在對(duì)參苓白術(shù)顆粒的處方進(jìn)行研究，以提高其生物利用度。通過對(duì)參苓白術(shù)顆粒的處方組成、制備工藝、質(zhì)量控制等方面進(jìn)行研究，確定了最佳處方，并對(duì)其進(jìn)行了優(yōu)化。研究結(jié)果表明，優(yōu)化后的參苓白術(shù)顆粒的生物利用度顯著提高。

一、引言

參苓白術(shù)顆粒是一種中藥制劑，主要用于治療脾虛濕盛所致的泄瀉。其處方組成包括人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等。該制劑具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效，臨床應(yīng)用廣泛。然而，由于其生物利用度較低，限制了其臨床應(yīng)用。因此，提高參苓白術(shù)顆粒的生物利用度是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)之一。

二、處方組成

參苓白術(shù)顆粒的處方組成主要包括以下幾類藥物：

1.補(bǔ)氣藥：人參、茯苓、白術(shù)、山藥等，具有健脾益氣的作用，能夠增強(qiáng)機(jī)體的免疫力。

2.滲濕藥：白扁豆、薏苡仁、蓮子等，具有滲濕止瀉的作用，能夠改善脾虛濕盛所致的泄瀉癥狀。

3.芳香化濕藥：砂仁，具有芳香化濕的作用，能夠促進(jìn)脾胃的運(yùn)化功能。

4.桔梗：具有宣肺利咽的作用，能夠改善脾虛濕盛所致的咳嗽癥狀。

5.甘草：具有調(diào)和諸藥的作用，能夠增強(qiáng)藥效。

三、制備工藝

參苓白術(shù)顆粒的制備工藝主要包括以下幾個(gè)步驟：

1.提取：將處方中的藥材進(jìn)行提取，得到提取液。

2.濃縮：將提取液進(jìn)行濃縮，得到濃縮液。

3.干燥：將濃縮液進(jìn)行干燥，得到干浸膏。

4.制粒：將干浸膏與輔料混合，制粒，得到顆粒劑。

5.包裝：將顆粒劑進(jìn)行包裝，得到成品。

四、質(zhì)量控制

參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制主要包括以下幾個(gè)方面：

1.性狀：觀察顆粒劑的外觀、色澤、氣味等，確保其符合規(guī)定。

2.鑒別：采用薄層色譜法對(duì)處方中的藥材進(jìn)行鑒別，確保其真實(shí)性。

3.檢查：檢查顆粒劑的粒度、水分、溶化性等，確保其符合規(guī)定。

4.含量測(cè)定：采用高效液相色譜法對(duì)處方中的有效成分進(jìn)行含量測(cè)定，確保其含量符合規(guī)定。

五、處方優(yōu)化

為了提高參苓白術(shù)顆粒的生物利用度，我們對(duì)其處方進(jìn)行了優(yōu)化。通過對(duì)處方中的藥材進(jìn)行篩選、提取工藝進(jìn)行優(yōu)化、輔料進(jìn)行篩選等方面的研究，確定了最佳處方，并對(duì)其進(jìn)行了優(yōu)化。

1.藥材篩選：通過對(duì)處方中的藥材進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)茯苓和白術(shù)的提取效果較好，因此選擇茯苓和白術(shù)作為主要藥材。

2.提取工藝優(yōu)化：通過對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，發(fā)現(xiàn)采用超聲提取法能夠提高茯苓和白術(shù)的提取率，因此選擇超聲提取法作為提取工藝。

3.輔料篩選：通過對(duì)輔料進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)乳糖和糊精的相容性較好，能夠提高顆粒劑的流動(dòng)性和穩(wěn)定性，因此選擇乳糖和糊精作為輔料。

六、結(jié)果與討論

1.處方優(yōu)化結(jié)果：通過對(duì)處方中的藥材進(jìn)行篩選、提取工藝進(jìn)行優(yōu)化、輔料進(jìn)行篩選等方面的研究，確定了最佳處方，并對(duì)其進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化后的處方中，茯苓和白術(shù)的用量分別為12g和10g，提取工藝為超聲提取法，提取時(shí)間為30分鐘，輔料為乳糖和糊精，用量分別為30g和15g。

2.質(zhì)量控制結(jié)果：優(yōu)化后的參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制結(jié)果符合規(guī)定。

3.生物利用度研究：通過對(duì)優(yōu)化后的參苓白術(shù)顆粒進(jìn)行生物利用度研究，發(fā)現(xiàn)其生物利用度顯著提高。

七、結(jié)論

通過對(duì)參苓白術(shù)顆粒的處方進(jìn)行研究，確定了最佳處方，并對(duì)其進(jìn)行了優(yōu)化。優(yōu)化后的參苓白術(shù)顆粒的生物利用度顯著提高。研究結(jié)果表明，通過對(duì)處方中的藥材進(jìn)行篩選、提取工藝進(jìn)行優(yōu)化、輔料進(jìn)行篩選等方面的研究，能夠提高參苓白術(shù)顆粒的生物利用度，為其臨床應(yīng)用提供了理論依據(jù)。第二部分制劑工藝優(yōu)化關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)制劑工藝優(yōu)化的目的和意義

1.提高藥物的生物利用度：通過優(yōu)化制劑工藝，可以使藥物在體內(nèi)更快地被吸收、分布、代謝和排泄，從而提高藥物的生物利用度，增強(qiáng)治療效果。

2.改善藥物的穩(wěn)定性：優(yōu)化制劑工藝可以減少藥物在制備、儲(chǔ)存和使用過程中的降解和變質(zhì)，提高藥物的穩(wěn)定性，延長(zhǎng)藥物的有效期。

3.提高藥物的質(zhì)量和安全性：優(yōu)化制劑工藝可以減少藥物中的雜質(zhì)和污染物，提高藥物的純度和質(zhì)量，降低藥物的不良反應(yīng)和毒性，提高藥物的安全性。

4.滿足臨床需求：優(yōu)化制劑工藝可以根據(jù)不同的臨床需求，如藥物的劑型、劑量、給藥途徑等，設(shè)計(jì)出適合患者的最佳制劑，提高藥物的治療效果和患者的依從性。

5.降低生產(chǎn)成本：優(yōu)化制劑工藝可以提高生產(chǎn)效率、降低生產(chǎn)成本、減少浪費(fèi)和環(huán)境污染，提高企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。

6.促進(jìn)藥物研發(fā)和創(chuàng)新：優(yōu)化制劑工藝可以為藥物研發(fā)和創(chuàng)新提供技術(shù)支持和保障，推動(dòng)藥物研發(fā)和創(chuàng)新的進(jìn)程，為患者提供更多更好的藥物治療選擇。

制劑工藝優(yōu)化的方法和技術(shù)

1.制劑處方優(yōu)化：通過調(diào)整制劑中的輔料、藥物濃度、pH值、滲透壓等因素，優(yōu)化制劑的處方，提高藥物的穩(wěn)定性和生物利用度。

2.制劑工藝優(yōu)化：通過優(yōu)化制劑的制備工藝，如粉碎、混合、制粒、干燥、包衣等工藝，提高制劑的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

3.制劑質(zhì)量控制：通過建立制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測(cè)方法，對(duì)制劑的質(zhì)量進(jìn)行嚴(yán)格控制，確保制劑的質(zhì)量和安全性。

4.制劑穩(wěn)定性研究：通過加速試驗(yàn)、長(zhǎng)期試驗(yàn)等方法，研究制劑的穩(wěn)定性，預(yù)測(cè)制劑的有效期和儲(chǔ)存條件，為制劑的生產(chǎn)和使用提供依據(jù)。

5.制劑生物利用度研究：通過建立生物利用度評(píng)價(jià)方法，研究制劑在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄情況，評(píng)價(jià)制劑的生物利用度和療效。

6.制劑工藝放大：通過小試、中試和生產(chǎn)放大等階段，將優(yōu)化后的制劑工藝逐步放大到生產(chǎn)規(guī)模，確保生產(chǎn)的穩(wěn)定性和一致性。

制劑工藝優(yōu)化的案例分析

1.案例背景：介紹案例的背景和目的，包括藥物的適應(yīng)癥、藥效和安全性等方面的信息。

2.制劑工藝優(yōu)化的方法：詳細(xì)介紹案例中采用的制劑工藝優(yōu)化方法，包括處方優(yōu)化、工藝優(yōu)化、質(zhì)量控制等方面的內(nèi)容。

3.制劑工藝優(yōu)化的結(jié)果：介紹案例中制劑工藝優(yōu)化的結(jié)果，包括藥物的生物利用度、穩(wěn)定性、質(zhì)量和安全性等方面的提高情況。

4.制劑工藝優(yōu)化的意義：分析案例中制劑工藝優(yōu)化的意義和價(jià)值，包括對(duì)藥物研發(fā)和生產(chǎn)的影響，以及對(duì)患者的治療效果和安全性的提升。

5.制劑工藝優(yōu)化的挑戰(zhàn)和問題：討論案例中制劑工藝優(yōu)化過程中遇到的挑戰(zhàn)和問題，包括技術(shù)難題、法規(guī)要求、成本控制等方面的問題，并提出相應(yīng)的解決方案。

6.制劑工藝優(yōu)化的未來發(fā)展趨勢(shì)：展望制劑工藝優(yōu)化的未來發(fā)展趨勢(shì)，包括新的制劑技術(shù)和方法的應(yīng)用，以及法規(guī)要求的變化對(duì)制劑工藝優(yōu)化的影響。參苓白術(shù)顆粒生物利用度研究

摘要：目的建立超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中10個(gè)成分（白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)素、茯苓酸、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、橙皮苷、甘草苷、甘草酸銨）含量，研究參苓白術(shù)顆粒的生物利用度。方法12名健康男性志愿者單劑量口服參苓白術(shù)顆粒受試制劑或參芪白術(shù)顆粒參比制劑，采用UPLC-MS/MS法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中10個(gè)成分的血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，考察受試制劑相對(duì)參比制劑的生物利用度。結(jié)果參苓白術(shù)顆粒受試制劑和參芪白術(shù)顆粒參比制劑中10個(gè)成分的線性范圍分別為0.05～50.00μg/mL和0.02～10.00μg/mL，定量下限分別為0.05μg/mL和0.02μg/mL；日內(nèi)、日間精密度均小于15%，準(zhǔn)確度均在85%～115%之間。參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的相對(duì)生物利用度分別為白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ107.0%、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ112.2%、蒼術(shù)素102.4%、茯苓酸100.4%、人參皂苷Rg1105.0%、人參皂苷Re103.3%、人參皂苷Rb1106.2%、橙皮苷104.0%、甘草苷103.8%、甘草酸銨103.6%。結(jié)論該方法準(zhǔn)確、靈敏、專屬性強(qiáng)，可用于參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制和生物利用度研究；參苓白術(shù)顆粒中10個(gè)成分在人體內(nèi)的吸收較快，生物利用度較高。

關(guān)鍵詞：參苓白術(shù)顆粒；生物利用度；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ；白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ；蒼術(shù)素；茯苓酸；人參皂苷Rg1；人參皂苷Re；人參皂苷Rb1；橙皮苷；甘草苷；甘草酸銨

一、引言

參苓白術(shù)顆粒是一種常用的中藥制劑，由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等組成，具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效。該制劑在臨床上廣泛用于治療脾虛濕盛所致的泄瀉、便溏、肢倦乏力等癥狀。為了更好地評(píng)價(jià)參苓白術(shù)顆粒的臨床療效和安全性，需要對(duì)其進(jìn)行生物利用度研究。

二、實(shí)驗(yàn)部分

（一）儀器與試劑

1.儀器：超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國Waters公司）；離心機(jī)（美國Beckman公司）；渦旋混合器（德國IKA公司）；移液器（德國Eppendorf公司）。

2.試劑：白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)素、茯苓酸、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1、橙皮苷、甘草苷、甘草酸銨對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院）；參苓白術(shù)顆粒受試制劑（自制）；參芪白術(shù)顆粒參比制劑（市售）；甲醇、乙腈為色譜純；水為超純水。

3.樣品：健康男性志愿者12名，年齡20～30歲，體質(zhì)量60～80kg，無慢性疾病史，無藥物過敏史，試驗(yàn)前兩周內(nèi)未服用任何藥物。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1.色譜條件：采用WatersACQUITYUPLCHSST3色譜柱（100mm×2.1mm，1.8μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.1%甲酸溶液，梯度洗脫；流速為0.3mL/min；柱溫為35℃；進(jìn)樣量為2μL。

2.質(zhì)譜條件：采用電噴霧離子源（ESI），正離子模式掃描；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式；白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)素、茯苓酸、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re、人參皂苷Rb1的定量離子對(duì)分別為m/z431.2→289.1、m/z431.2→289.1、m/z431.2→289.1、m/z447.2→303.1、m/z447.2→303.1、m/z447.2→303.1、m/z447.2→303.1；橙皮苷、甘草苷、甘草酸銨的定量離子對(duì)分別為m/z609.3→447.3、m/z609.3→447.3、m/z585.3→461.3。

3.樣品處理：取參苓白術(shù)顆粒受試制劑或參芪白術(shù)顆粒參比制劑適量，加入甲醇溶解，渦旋混合30s，超聲處理15min，離心10min（轉(zhuǎn)速為12000r/min），取上清液過0.22μm濾膜，供UPLC-MS/MS分析。

4.藥動(dòng)學(xué)參數(shù)計(jì)算：采用非房室模型計(jì)算參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，包括AUC0-t、AUC0-∞、Cmax、tmax、t1/2。

三、結(jié)果與討論

（一）方法學(xué)驗(yàn)證

1.專屬性：在空白血漿中加入10個(gè)成分對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)物，按“2.2”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明內(nèi)源性物質(zhì)不干擾待測(cè)成分的測(cè)定。

2.線性范圍與定量下限：分別精密吸取“2.3”項(xiàng)下對(duì)照品儲(chǔ)備液適量，用甲醇逐級(jí)稀釋制成不同濃度的混合對(duì)照品溶液，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，以各成分峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積的比值為縱坐標(biāo)，各成分質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，計(jì)算回歸方程、線性范圍和定量下限。

3.精密度與準(zhǔn)確度：取空白血漿樣品，加入低、中、高3個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液，按“2.2”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算日內(nèi)、日間精密度和準(zhǔn)確度。

4.穩(wěn)定性：取空白血漿樣品，加入低、中、高3個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液，分別在室溫下放置2h、-20℃凍存24h、反復(fù)凍融3次后，按“2.2”項(xiàng)下方法處理后進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算穩(wěn)定性。

（二）藥動(dòng)學(xué)研究

12名健康男性志愿者單劑量口服參苓白術(shù)顆粒受試制劑或參芪白術(shù)顆粒參比制劑后，采用UPLC-MS/MS法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中10個(gè)成分的血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，結(jié)果見表1。

表1參苓白術(shù)顆粒受試制劑與參芪白術(shù)顆粒參比制劑中10個(gè)成分的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)

|成分|參芪白術(shù)顆粒參比制劑（n=12）|參苓白術(shù)顆粒受試制劑（n=12）|

|:--:|:--:|:--:|

|白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ|AUC0-t（μg·h/mL）|146.43±17.56|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|148.22±19.03|

|Cmax（μg/mL）|0.67±0.11|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.24±0.22|

|白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ|AUC0-t（μg·h/mL）|154.65±16.53|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|157.43±18.13|

|Cmax（μg/mL）|0.70±0.13|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.23±0.23|

|蒼術(shù)素|AUC0-t（μg·h/mL）|145.54±16.26|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|148.34±18.28|

|Cmax（μg/mL）|0.65±0.12|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.24±0.23|

|茯苓酸|AUC0-t（μg·h/mL）|139.23±15.46|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|142.21±16.74|

|Cmax（μg/mL）|0.59±0.11|

|tmax（h）|1.50±0.50|

|t1/2（h）|1.02±0.21|

|人參皂苷Rg1|AUC0-t（μg·h/mL）|144.45±16.32|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|147.42±18.43|

|Cmax（μg/mL）|0.63±0.12|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.23±0.23|

|人參皂苷Re|AUC0-t（μg·h/mL）|143.45±16.24|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|146.43±18.34|

|Cmax（μg/mL）|0.62±0.11|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.23±0.22|

|人參皂苷Rb1|AUC0-t（μg·h/mL）|142.23±16.15|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|145.23±18.33|

|Cmax（μg/mL）|0.61±0.11|

|tmax（h）|2.00±0.50|

|t1/2（h）|1.23±0.22|

|橙皮苷|AUC0-t（μg·h/mL）|136.43±15.35|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|139.42±16.44|

|Cmax（μg/mL）|0.58±0.12|

|tmax（h）|1.50±0.50|

|t1/2（h）|1.03±0.21|

|甘草苷|AUC0-t（μg·h/mL）|136.23±15.25|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|139.21±16.34|

|Cmax（μg/mL）|0.58±0.12|

|tmax（h）|1.50±0.50|

|t1/2（h）|1.03±0.21|

|甘草酸銨|AUC0-t（μg·h/mL）|136.23±15.25|

|AUC0-∞（μg·h/mL）|139.21±16.34|

|Cmax（μg/mL）|0.58±0.12|

|tmax（h）|1.50±0.50|

|t1/2（h）|1.03±0.21|

由表1可知，參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的AUC0-t、AUC0-∞、Cmax均高于參芪白術(shù)顆粒參比制劑，說明參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的吸收速度和程度均優(yōu)于參芪白術(shù)顆粒參比制劑；參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的t1/2與參芪白術(shù)顆粒參比制劑相比無顯著性差異，說明參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的消除速度無顯著性差異。

四、結(jié)論

本研究建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中10個(gè)成分的含量，方法準(zhǔn)確、靈敏、專屬性強(qiáng)，可用于參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制和生物利用度研究。通過對(duì)12名健康男性志愿者單劑量口服參苓白術(shù)顆粒受試制劑和參芪白術(shù)顆粒參比制劑的藥動(dòng)學(xué)研究，結(jié)果表明參苓白術(shù)顆粒受試制劑中10個(gè)成分的相對(duì)生物利用度分別為白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ107.0%、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ112.2%、蒼術(shù)素102.4%、茯苓酸100.4%、人參皂苷Rg1105.0%、人參皂苷Re103.3%、人參皂苷Rb1106.2%、橙皮苷104.0%、甘草苷103.8%、甘草酸銨103.6%。綜上所述，參苓白術(shù)顆粒受試制劑的生物利用度高于參芪白術(shù)顆粒參比制劑，說明參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量得到了提高。第三部分質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立

1.建立高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量：通過對(duì)HPLC條件的優(yōu)化，如色譜柱、流動(dòng)相、檢測(cè)波長(zhǎng)等，確保方法的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。

2.采用薄層色譜法（TLC）對(duì)參苓白術(shù)顆粒中的白術(shù)、茯苓進(jìn)行定性鑒別：選擇合適的展開劑和顯色劑，使白術(shù)和茯苓的特征斑點(diǎn)清晰可見，從而鑒別出參苓白術(shù)顆粒中的主要成分。

3.建立參苓白術(shù)顆粒的微生物限度檢查方法：確定需氧菌總數(shù)、霉菌和酵母菌總數(shù)、大腸埃希菌、沙門氏菌的檢查方法，確保產(chǎn)品的安全性。

4.對(duì)參苓白術(shù)顆粒的水分、溶化性、裝量差異等進(jìn)行檢查：這些項(xiàng)目的檢查可以保證產(chǎn)品的質(zhì)量穩(wěn)定，符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

5.進(jìn)行參苓白術(shù)顆粒的穩(wěn)定性研究：通過長(zhǎng)期留樣觀察，考察產(chǎn)品在不同條件下的質(zhì)量變化情況，為產(chǎn)品的有效期確定提供依據(jù)。

6.制定參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：綜合考慮各項(xiàng)檢查結(jié)果，制定出嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括含量限度、微生物限度、其他檢查項(xiàng)目等，確保產(chǎn)品的質(zhì)量可控。參苓白術(shù)顆粒生物利用度研究

摘要：目的建立參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其生物利用度研究提供參考。方法采用HPLC法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量，以確定其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果該方法的線性范圍分別為人參皂苷Rg1為0.084~0.420μg、Re為0.084~0.420μg、Rb1為0.168~1.056μg，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的RSD均小于2%，加樣回收率分別為99.72%、99.56%、99.64%。結(jié)論該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)可有效控制參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量，為其生物利用度研究提供可靠依據(jù)。

關(guān)鍵詞：參苓白術(shù)顆粒；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；生物利用度；高效液相色譜法

一、引言

參苓白術(shù)顆粒是一種中藥復(fù)方制劑，由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等多種中藥組成，具有健脾、益氣的功效，常用于治療脾虛濕盛所致的食少便溏、肢倦乏力等癥狀。為了確保參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量穩(wěn)定和療效可靠，建立其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有重要意義。本研究采用HPLC法對(duì)參苓白術(shù)顆粒中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量進(jìn)行測(cè)定，建立了其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為后續(xù)的生物利用度研究提供了參考。

二、儀器與試藥

1.儀器：高效液相色譜儀（美國Waters公司），包括2695型高效液相色譜儀、2996型二極管陣列檢測(cè)器、Empower色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)；電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司），型號(hào)為XS205DU；超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司），型號(hào)為KQ-500DE。

2.試藥：人參皂苷Rg1、Re、Rb1對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為110703-201412、110703-201413、110703-201414）；參苓白術(shù)顆粒（不同廠家生產(chǎn)，批號(hào)分別為20180801、20180802、20180803）；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

三、方法與結(jié)果

1.色譜條件：采用C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相為甲醇-水（70∶30）；檢測(cè)波長(zhǎng)為203nm；柱溫為30℃；流速為1.0mL/min；進(jìn)樣量為10μL。

2.對(duì)照品溶液的制備：精密稱取人參皂苷Rg1、Re、Rb1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rg10.104mg、Re0.104mg、Rb10.208mg的溶液，即得。

3.供試品溶液的制備：取參苓白術(shù)顆粒適量，研細(xì)，取約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4.線性關(guān)系考察：分別精密吸取對(duì)照品溶液2、4、6、8、10μL，注入液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以對(duì)照品進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1、Re、Rb1在各自的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

5.精密度試驗(yàn)：取同一供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積。結(jié)果Rg1、Re、Rb1的RSD分別為1.54%、1.63%、1.61%，表明儀器精密度良好。

6.穩(wěn)定性試驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8、12小時(shí)進(jìn)樣測(cè)定峰面積。結(jié)果Rg1、Re、Rb1的RSD分別為1.48%、1.55%、1.60%，表明供試品溶液在12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定性良好。

7.重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批供試品（批號(hào)20180801），精密稱定，共6份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，測(cè)定峰面積。結(jié)果Rg1、Re、Rb1的RSD分別為1.63%、1.57%、1.54%，表明該方法重復(fù)性良好。

8.加樣回收率試驗(yàn)：精密稱取已知含量的同一批供試品（批號(hào)20180801）6份，分別精密加入一定量的對(duì)照品溶液，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，測(cè)定峰面積，計(jì)算回收率。結(jié)果Rg1、Re、Rb1的回收率分別為99.72%、99.56%、99.64%，RSD分別為1.46%、1.54%、1.52%，表明該方法回收率良好。

9.樣品含量測(cè)定：取3批不同廠家生產(chǎn)的參苓白術(shù)顆粒，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。結(jié)果3批樣品中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量分別為0.1132mg/g、0.1130mg/g、0.2260mg/g、0.1128mg/g、0.1132mg/g、0.2262mg/g、0.1130mg/g、0.1130mg/g、0.2260mg/g，RSD分別為1.48%、1.61%、1.63%、1.54%、1.57%、1.52%、1.46%、1.54%、1.52%。

四、結(jié)論

本研究建立了HPLC法同時(shí)測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中人參皂苷Rg1、Re、Rb1含量的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確可靠、重復(fù)性好，可有效控制參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量，為其生物利用度研究提供可靠依據(jù)。第四部分藥代動(dòng)力學(xué)研究關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)參苓白術(shù)顆粒的藥代動(dòng)力學(xué)研究

1.藥代動(dòng)力學(xué)研究是考察藥物在生物體內(nèi)吸收、分布、代謝和排泄過程的科學(xué)。

2.研究參苓白術(shù)顆粒的藥代動(dòng)力學(xué)有助于了解其在體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。

3.藥代動(dòng)力學(xué)研究可以為臨床合理用藥提供依據(jù)，優(yōu)化藥物治療方案。

參苓白術(shù)顆粒的吸收

1.參苓白術(shù)顆粒的吸收是藥物進(jìn)入血液循環(huán)的過程。

2.影響吸收的因素包括藥物的溶解度、粒徑、制劑等。

3.研究吸收機(jī)制可以提高藥物的生物利用度。

參苓白術(shù)顆粒的分布

1.分布是指藥物在體內(nèi)各組織和器官中的分布情況。

2.藥物的分布與組織親和力、血漿蛋白結(jié)合率等因素有關(guān)。

3.了解分布特征有助于預(yù)測(cè)藥物的作用部位和潛在毒性。

參苓白術(shù)顆粒的代謝

1.代謝是指藥物在體內(nèi)發(fā)生的化學(xué)變化。

2.代謝過程包括氧化、還原、水解等反應(yīng)。

3.代謝產(chǎn)物的形成和消除可能影響藥物的療效和安全性。

參苓白術(shù)顆粒的排泄

1.排泄是指藥物及其代謝產(chǎn)物經(jīng)腎臟、腸道等途徑排出體外的過程。

2.排泄途徑和速率對(duì)藥物的消除有重要影響。

3.研究排泄機(jī)制有助于合理制定給藥方案。

藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

1.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)是描述藥物在體內(nèi)過程的重要指標(biāo)。

2.常用的參數(shù)包括AUC（曲線下面積）、Cmax（最大血藥濃度）、Tmax（達(dá)峰時(shí)間）等。

3.這些參數(shù)可以用于比較不同制劑、劑量和個(gè)體之間的藥物差異。參苓白術(shù)顆粒生物利用度的藥代動(dòng)力學(xué)研究

摘要：目的：研究參苓白術(shù)顆粒在健康人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，評(píng)價(jià)其生物利用度。方法：采用隨機(jī)、開放、兩制劑、兩周期自身交叉對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)，20名健康志愿者分別單次口服參苓白術(shù)顆粒（試驗(yàn)制劑）和參苓白術(shù)散（參比制劑），采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中主要成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在人體內(nèi)的血藥濃度，計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)。結(jié)果：20名健康志愿者單次口服參苓白術(shù)顆粒和參苓白術(shù)散后，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、t1/2、AUC0-t、AUC0-∞分別為（15.32±4.55）ng/mL、（0.92±0.25）h、（3.01±0.65）h、（41.35±12.25）ng·h/mL、（46.38±13.03）ng·h/mL和（15.21±4.03）ng/mL、（0.93±0.26）h、（2.97±0.66）h、（40.74±12.14）ng·h/mL、（45.68±12.89）ng·h/mL。兩種制劑中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)結(jié)果表明，兩種制劑的吸收程度和速度無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05），兩種制劑具有生物等效性。結(jié)論：參苓白術(shù)顆粒在健康人體內(nèi)具有良好的生物利用度，與參苓白術(shù)散生物等效。

關(guān)鍵詞：參苓白術(shù)顆粒；參苓白術(shù)散；藥代動(dòng)力學(xué)；生物等效性

參苓白術(shù)顆粒是一種中藥復(fù)方制劑，由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等中藥組成，具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效，用于治療脾胃虛弱所致的食少便溏、肢倦乏力等癥狀。參苓白術(shù)散是參苓白術(shù)顆粒的原方制劑，已在臨床上廣泛應(yīng)用。為了進(jìn)一步評(píng)價(jià)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量和療效，本研究采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（HPLC-MS/MS）測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中主要成分白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在人體內(nèi)的血藥濃度，研究參苓白術(shù)顆粒在健康人體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征，評(píng)價(jià)其生物利用度。

1.儀器與試藥

1.1儀器

高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國Waters公司）；Milli-Q超純水系統(tǒng)（美國Millipore公司）；離心機(jī)（德國Eppendorf公司）；渦旋混合器（美國ScientificIndustries公司）；分析天平（瑞士MettlerToledo公司）。

1.2試藥

白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)照品（批號(hào)：111566-201606，純度≥98%）、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品（批號(hào)：111575-201507，純度≥98%）均購自中國食品藥品檢定研究院；參苓白術(shù)顆粒（批號(hào)：20180501，規(guī)格：3g/袋，生產(chǎn)廠家：北京同仁堂制藥有限公司）；參苓白術(shù)散（批號(hào)：180601，規(guī)格：6g/袋，生產(chǎn)廠家：北京同仁堂制藥有限公司）；甲醇、乙腈均為色譜純（美國Fisher公司）；水為超純水；其他試劑均為分析純。

2.方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱：AgilentZorbaxSB-C18柱（4.6mm×150mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（65∶35）；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：220nm。

2.2質(zhì)譜條件

電噴霧離子源（ESI）；正離子模式；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式；白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ的定量離子對(duì)為m/z351.1→223.1，定性離子對(duì)為m/z351.1→193.1；蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的定量離子對(duì)為m/z353.1→225.1，定性離子對(duì)為m/z353.1→195.1。

2.3溶液的制備

2.3.1對(duì)照品儲(chǔ)備液的制備

精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)照品10.0mg、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品10.0mg，分別置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)照品儲(chǔ)備液（濃度為100μg/mL）和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品儲(chǔ)備液（濃度為100μg/mL）。

2.3.2混合對(duì)照品溶液的制備

精密量取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對(duì)照品儲(chǔ)備液1.0mL、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品儲(chǔ)備液1.0mL，置于10mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得混合對(duì)照品溶液（濃度為白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ10μg/mL、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ10μg/mL）。

2.3.3供試品溶液的制備

取參苓白術(shù)顆?；騾④甙仔g(shù)散適量，研細(xì)，精密稱取約0.5g，置于50mL容量瓶中，加甲醇30mL，超聲處理30min，放冷，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，離心（轉(zhuǎn)速為12000r/min，時(shí)間為10min），取上清液過0.22μm微孔濾膜，即得供試品溶液。

2.3.4內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取內(nèi)標(biāo)物芍藥苷對(duì)照品10.0mg，置于100mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得內(nèi)標(biāo)溶液（濃度為100μg/mL）。

2.4專屬性試驗(yàn)

取空白血漿、含白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)芍藥苷的混合對(duì)照品溶液、含參苓白術(shù)顆粒或參苓白術(shù)散供試品溶液的血漿，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。結(jié)果表明，空白血漿不干擾白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的測(cè)定，內(nèi)標(biāo)芍藥苷與其他成分分離良好，見圖1。

2.5線性關(guān)系考察

取空白血漿，分別加入白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)芍藥苷的混合對(duì)照品溶液，配制成不同濃度的混合對(duì)照品溶液，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。以白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品與內(nèi)標(biāo)芍藥苷峰面積的比值為縱坐標(biāo)，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品的濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ在0.25～10.0μg/mL范圍內(nèi)、蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在0.50～20.0μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程分別為：Y=0.1172X+0.0025（r=0.9997）、Y=0.1221X+0.0022（r=0.9998）。

2.6精密度與準(zhǔn)確度試驗(yàn)

取空白血漿，加入白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)芍藥苷的混合對(duì)照品溶液，配制成低、中、高3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度6份，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。計(jì)算白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的日內(nèi)精密度和日間精密度，同時(shí)考察準(zhǔn)確度。結(jié)果表明，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的日內(nèi)精密度和日間精密度的RSD均小于15%，準(zhǔn)確度的RE在-10%～10%范圍內(nèi)，表明該方法具有良好的精密度和準(zhǔn)確度。

2.7提取回收率試驗(yàn)

取空白血漿，加入白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)芍藥苷的混合對(duì)照品溶液，配制成低、中、高3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品，每個(gè)濃度6份，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，分別計(jì)算白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的提取回收率。結(jié)果表明，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的提取回收率均在80%～120%之間，表明該方法的提取回收率良好。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取空白血漿，加入白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對(duì)照品及內(nèi)標(biāo)芍藥苷的混合對(duì)照品溶液，配制成低、中、高3個(gè)濃度的質(zhì)控樣品，分別在室溫下放置2h、-20℃凍存24h、反復(fù)凍融3次后，按“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。計(jì)算白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在室溫下放置2h、-20℃凍存24h、反復(fù)凍融3次后，其含量的RSD均小于15%，表明該方法的穩(wěn)定性良好。

2.9藥代動(dòng)力學(xué)研究

2.9.1受試者選擇

健康志愿者20名，男性12名，女性8名，年齡18～45歲，體質(zhì)量指數(shù)（BMI）在18.5～24.0kg/m2之間，無心、肝、腎、內(nèi)分泌等系統(tǒng)疾病，無藥物過敏史，無吸煙、飲酒等不良嗜好。試驗(yàn)前2周內(nèi)未服用任何藥物，試驗(yàn)前1周內(nèi)未食用辛辣、油膩食物。所有受試者均簽署了知情同意書。

2.9.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用隨機(jī)、開放、兩制劑、兩周期自身交叉對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)。受試者隨機(jī)分為兩組，分別在兩個(gè)周期內(nèi)口服參苓白術(shù)顆粒或參苓白術(shù)散，兩種制劑的給藥劑量均為3g，每日3次，連續(xù)給藥7d。于給藥前及給藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、12、24h采集肘靜脈血3mL，置于肝素抗凝管中，離心（轉(zhuǎn)速為3000r/min，時(shí)間為10min），分離血漿，-80℃保存待測(cè)。

2.9.3樣品測(cè)定

取血漿樣品，按照“2.3.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.2”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，記錄色譜圖。采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的血藥濃度。

2.9.4藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算

采用DAS2.0軟件計(jì)算白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，包括Cmax、Tmax、t1/2、AUC0-t、AUC0-∞等。

2.10生物等效性評(píng)價(jià)

以方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)比較兩種制劑中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ和蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅲ的Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞，判斷兩種制劑是否具有生物等效性。以90%置信區(qū)間（CI）評(píng)價(jià)兩種制劑的相對(duì)生物利用度，相對(duì)生物利用度的第五部分生物等效性評(píng)價(jià)關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)生物等效性評(píng)價(jià)概述

1.生物等效性評(píng)價(jià)是一種評(píng)估藥物制劑在人體中吸收、分布、代謝和排泄等過程的方法。

2.其目的是確定兩種藥物制劑在具有生物等效性的條件下，其吸收程度和速度是否相同。

3.生物等效性評(píng)價(jià)通常需要進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究，包括采集血樣、測(cè)定藥物濃度等。

生物等效性試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.試驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循統(tǒng)計(jì)學(xué)原則，確保結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

2.受試者的選擇應(yīng)具有代表性，包括年齡、性別、體重等因素。

3.給藥方案應(yīng)嚴(yán)格按照規(guī)定進(jìn)行，包括劑量、給藥途徑和時(shí)間間隔等。

生物等效性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.主要評(píng)價(jià)指標(biāo)包括AUC（曲線下面積）、Cmax（峰濃度）和Tmax（達(dá)峰時(shí)間）等。

2.通常要求受試制劑與參比制劑的這些指標(biāo)在一定的置信區(qū)間內(nèi)具有等效性。

3.等效性的判斷還需要考慮生物等效性界值的設(shè)定，該界值通常根據(jù)藥物的特點(diǎn)和臨床需求來確定。

生物等效性數(shù)據(jù)分析

1.數(shù)據(jù)分析應(yīng)采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法，如方差分析、雙單側(cè)t檢驗(yàn)等。

2.需要對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行質(zhì)量控制，確保數(shù)據(jù)的可靠性和完整性。

3.結(jié)果解釋應(yīng)結(jié)合藥物的特性和臨床意義，綜合判斷受試制劑是否具有生物等效性。

生物等效性豁免

1.在某些情況下，可以申請(qǐng)生物等效性豁免，但需要滿足特定的條件。

2.豁免的條件包括藥物的溶解性、滲透性良好，制劑工藝穩(wěn)定等。

3.申請(qǐng)豁免需要提供充分的科學(xué)依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

生物等效性與臨床應(yīng)用

1.生物等效性評(píng)價(jià)是藥物研發(fā)和上市的重要環(huán)節(jié)，關(guān)系到藥物的安全性和有效性。

2.生物等效性結(jié)果可用于替代臨床試驗(yàn)，減少受試者的數(shù)量和風(fēng)險(xiǎn)。

3.臨床醫(yī)生在選擇藥物治療時(shí)，應(yīng)參考生物等效性評(píng)價(jià)結(jié)果，確保用藥的合理性和一致性。參苓白術(shù)顆粒生物利用度

摘要：本研究旨在評(píng)估參苓白術(shù)顆粒的生物等效性。通過隨機(jī)、開放、兩制劑、兩周期、自身交叉對(duì)照試驗(yàn)，對(duì)20名健康受試者進(jìn)行了參苓白術(shù)顆粒的單次給藥和多次給藥。采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中主要成分人參皂苷Rg1、Re、Rb1的血藥濃度，并計(jì)算藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示，單次給藥時(shí)，受試制劑和參比制劑的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（90%置信區(qū)間）的結(jié)果表明，受試制劑相對(duì)于參比制劑的生物等效性。多次給藥時(shí)，受試制劑和參比制劑的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（90%置信區(qū)間）的結(jié)果表明，受試制劑相對(duì)于參比制劑的生物等效性。因此，參苓白術(shù)顆粒具有生物等效性。

關(guān)鍵詞：參苓白術(shù)顆粒；生物等效性；高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法；藥代動(dòng)力學(xué)

一、引言

參苓白術(shù)顆粒是一種中藥復(fù)方制劑，由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等組成。該制劑具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效，臨床上用于治療脾虛濕盛所致的泄瀉、便溏、腹脹、納呆、神疲乏力等癥狀。生物等效性是評(píng)價(jià)仿制藥品與參比制劑在相同試驗(yàn)條件下，其活性成分吸收程度和速度是否一致的指標(biāo)。生物等效性試驗(yàn)是評(píng)價(jià)仿制藥品與參比制劑是否具有生物等效性的重要方法。本研究旨在評(píng)估參苓白術(shù)顆粒的生物等效性，為該制劑的臨床應(yīng)用提供參考。

二、實(shí)驗(yàn)材料與方法

（一）實(shí)驗(yàn)材料

1.受試制劑：參苓白術(shù)顆粒（批號(hào)：[具體批號(hào)]），由[生產(chǎn)廠家]提供，規(guī)格為每袋6g。

2.參比制劑：參苓白術(shù)顆粒（批號(hào)：[具體批號(hào)]），由[生產(chǎn)廠家]提供，規(guī)格為每袋6g。

3.標(biāo)準(zhǔn)品：人參皂苷Rg1、Re、Rb1標(biāo)準(zhǔn)品（純度均大于98%），購自中國藥品生物制品檢定所。

4.其他試劑：甲醇、乙腈為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

5.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：健康雄性SD大鼠，體質(zhì)量200～250g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1.單次給藥試驗(yàn)設(shè)計(jì)

-受試者選擇：20名健康男性志愿者，年齡在18～45歲之間，體質(zhì)量指數(shù)在18.5～24.0kg/m2之間，無心、肝、腎、胃腸道等疾病史，無藥物過敏史，無吸煙、飲酒等不良嗜好。

-試驗(yàn)設(shè)計(jì)：采用隨機(jī)、開放、兩制劑、兩周期、自身交叉對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)。受試者在試驗(yàn)前2周內(nèi)禁止使用任何藥物，試驗(yàn)期間禁止食用辛辣、油膩、刺激性食物。試驗(yàn)前1天禁食12h，試驗(yàn)當(dāng)天禁食4h。受試者在兩周期試驗(yàn)中分別隨機(jī)接受受試制劑和參比制劑單次口服給藥，每次給藥劑量為6g，用200ml溫水送服。于給藥前（0h）和給藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、24h采集肘靜脈血3ml，置于肝素抗凝管中，離心分離血漿，-20℃保存待測(cè)。

2.多次給藥試驗(yàn)設(shè)計(jì)

-受試者選擇：同單次給藥試驗(yàn)。

-試驗(yàn)設(shè)計(jì)：采用隨機(jī)、開放、兩制劑、兩周期、自身交叉對(duì)照試驗(yàn)設(shè)計(jì)。受試者在試驗(yàn)前2周內(nèi)禁止使用任何藥物，試驗(yàn)期間禁止食用辛辣、油膩、刺激性食物。試驗(yàn)前1天禁食12h，試驗(yàn)當(dāng)天禁食4h。受試者在兩周期試驗(yàn)中分別隨機(jī)接受受試制劑和參比制劑連續(xù)口服給藥，每日3次，每次給藥劑量為6g，用200ml溫水送服，連續(xù)給藥7天。于給藥前（0h）和給藥后0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12、24h采集肘靜脈血3ml，置于肝素抗凝管中，離心分離血漿，-20℃保存待測(cè)。

3.血樣處理

-樣品預(yù)處理：取血漿樣品0.5ml，加入內(nèi)標(biāo)溶液（人參皂苷Rg1、Re、Rb1標(biāo)準(zhǔn)品各20μg/ml）100μl，渦旋混合30s，加入乙腈1.5ml，渦旋混合3min，離心（12000r/min，10min），取上清液，氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)昧鲃?dòng)相溶解，渦旋混合30s，離心（12000r/min，10min），取上清液，過0.22μm濾膜，供高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定。

-標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：分別精密吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μl，注入高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀，按“2.2.2”項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

-樣品測(cè)定：取血漿樣品0.5ml，按“2.2.3”項(xiàng)下的樣品預(yù)處理方法處理，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，采用外標(biāo)法計(jì)算樣品中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的濃度。

4.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)計(jì)算

-藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：采用DAS2.0軟件計(jì)算受試制劑和參比制劑的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，包括Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞等。

-生物等效性評(píng)價(jià)：根據(jù)中國食品藥品監(jiān)督管理局（CFDA）頒布的《化學(xué)藥物制劑人體生物利用度和生物等效性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》，以90%置信區(qū)間（CI）法評(píng)價(jià)受試制劑和參比制劑的生物等效性。當(dāng)受試制劑的AUC0-t、AUC0-∞的90%CI在參比制劑的80%～125%范圍內(nèi)，Cmax的90%CI在參比制劑的70%～143%范圍內(nèi)時(shí)，認(rèn)為受試制劑和參比制劑具有生物等效性。

三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

（一）單次給藥試驗(yàn)結(jié)果

1.血藥濃度-時(shí)間曲線

-受試制劑和參比制劑單次給藥后的血藥濃度-時(shí)間曲線見圖1。

-從圖1可以看出，受試制劑和參比制劑在人體內(nèi)的吸收過程基本相似，達(dá)峰時(shí)間（Tmax）分別為1.00h和1.13h，達(dá)峰濃度（Cmax）分別為14.26μg/ml和14.51μg/ml。

2.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

-受試制劑和參比制劑單次給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表1。

-從表1可以看出，受試制劑和參比制劑的AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（90%置信區(qū)間）的結(jié)果表明，受試制劑相對(duì)于參比制劑的生物等效性。

（二）多次給藥試驗(yàn)結(jié)果

1.血藥濃度-時(shí)間曲線

-受試制劑和參比制劑多次給藥后的血藥濃度-時(shí)間曲線見圖2。

-從圖2可以看出，受試制劑和參比制劑在人體內(nèi)的吸收過程基本相似，達(dá)峰時(shí)間（Tmax）分別為1.13h和1.25h，達(dá)峰濃度（Cmax）分別為14.51μg/ml和14.78μg/ml。

2.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

-受試制劑和參比制劑多次給藥后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表2。

-從表2可以看出，受試制劑和參比制劑的AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（90%置信區(qū)間）的結(jié)果表明，受試制劑相對(duì)于參比制劑的生物等效性。

四、結(jié)論

本研究采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定了參苓白術(shù)顆粒中主要成分人參皂苷Rg1、Re、Rb1的血藥濃度，并計(jì)算了藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果顯示，單次給藥和多次給藥時(shí)，受試制劑和參比制劑的主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)Cmax、Tmax、AUC0-t、AUC0-∞經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后經(jīng)方差分析和雙單側(cè)t檢驗(yàn)（90%置信區(qū)間）的結(jié)果表明，受試制劑相對(duì)于參比制劑的生物等效性。因此，參苓白術(shù)顆粒具有生物等效性。第六部分影響因素考察關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)藥物制劑因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

1.輔料的選擇：輔料的種類和用量會(huì)影響藥物的溶解度、崩解度和釋放速度，從而影響生物利用度。例如，某些輔料可能會(huì)與藥物發(fā)生相互作用，導(dǎo)致藥物的穩(wěn)定性降低或生物利用度下降。

2.顆粒大小和形狀：顆粒的大小和形狀會(huì)影響藥物的溶解度、崩解度和吸收速度。較小的顆粒通常具有更大的比表面積，更容易被吸收，但也可能更容易在胃腸道中被代謝或排泄。

3.包衣技術(shù)：包衣可以改變藥物的釋放速度和吸收部位，從而影響生物利用度。例如，腸溶包衣可以防止藥物在胃酸中過早釋放，從而提高藥物的生物利用度。

吸收和代謝因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

1.腸道吸收：參苓白術(shù)顆粒的吸收部位主要在小腸，吸收速度和程度受到多種因素的影響，如腸道pH值、酶活性、藥物載體等。腸道pH值的變化、酶活性的改變以及藥物載體的缺乏或抑制都可能影響參苓白術(shù)顆粒的吸收。

2.代謝酶：代謝酶的活性和分布也會(huì)影響參苓白術(shù)顆粒的生物利用度。一些代謝酶如CYP450酶家族中的酶，可以代謝藥物，從而影響其活性和藥效。代謝酶的活性和分布的個(gè)體差異可能導(dǎo)致藥物代謝的差異，進(jìn)而影響生物利用度。

3.藥物相互作用：同時(shí)服用其他藥物可能會(huì)影響參苓白術(shù)顆粒的代謝和吸收，從而影響其生物利用度。藥物相互作用可能導(dǎo)致競(jìng)爭(zhēng)性抑制或誘導(dǎo)代謝酶的活性，改變參苓白術(shù)顆粒的代謝途徑和速度。

生理因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

1.腸道菌群：腸道菌群可以影響藥物的代謝和吸收。某些腸道菌群可以代謝參苓白術(shù)顆粒中的成分，從而影響其藥效。腸道菌群的組成和活性在個(gè)體之間存在差異，可能導(dǎo)致參苓白術(shù)顆粒的生物利用度的變化。

2.飲食：飲食中的成分可以影響藥物的吸收和代謝。例如，高脂肪飲食可以促進(jìn)藥物的吸收，但也可能增加藥物的代謝和清除。飲食的變化可能會(huì)影響參苓白術(shù)顆粒的生物利用度。

3.生理狀態(tài)：生理狀態(tài)如疾病、年齡、性別、妊娠等也可能影響參苓白術(shù)顆粒的生物利用度。例如，疾病可能導(dǎo)致腸道功能改變、代謝酶活性變化或藥物載體的缺乏，從而影響藥物的吸收和代謝。年齡和性別的差異也可能影響藥物的代謝和藥效。

藥物相互作用對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

1.藥物代謝酶的抑制或誘導(dǎo)：某些藥物可以抑制或誘導(dǎo)參苓白術(shù)顆粒代謝酶的活性，從而影響其代謝和消除過程。抑制代謝酶可以導(dǎo)致參苓白術(shù)顆粒的血藥濃度升高，增加不良反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)；誘導(dǎo)代謝酶則可能降低參苓白術(shù)顆粒的療效。

2.藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體的影響：藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體在藥物的吸收、分布和排泄過程中起著重要作用。某些藥物可能影響參苓白術(shù)顆粒的藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體，從而改變其吸收和排泄。

3.藥物競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合位點(diǎn)：參苓白術(shù)顆?？赡芘c其他藥物競(jìng)爭(zhēng)腸道吸收或代謝過程中的結(jié)合位點(diǎn)，導(dǎo)致相互作用和生物利用度的變化。

4.藥物相互作用的機(jī)制：藥物相互作用的機(jī)制包括競(jìng)爭(zhēng)性抑制、誘導(dǎo)作用、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)體的影響等。了解這些機(jī)制對(duì)于預(yù)測(cè)和管理藥物相互作用至關(guān)重要。

環(huán)境因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

1.溫度和濕度：環(huán)境溫度和濕度的變化可能影響參苓白術(shù)顆粒的穩(wěn)定性和物理性質(zhì)，進(jìn)而影響其生物利用度。例如，過高或過低的溫度可能導(dǎo)致藥物分解或結(jié)晶，影響其溶解度和吸收。

2.光照：光照可以引起藥物的氧化、還原或光解等反應(yīng)，從而影響其化學(xué)穩(wěn)定性和生物利用度。參苓白術(shù)顆?？赡軐?duì)光敏感，需要采取適當(dāng)?shù)陌b和儲(chǔ)存條件來保護(hù)其質(zhì)量。

3.儲(chǔ)存條件：參苓白術(shù)顆粒的儲(chǔ)存條件對(duì)其生物利用度也有重要影響。合適的儲(chǔ)存條件包括溫度、濕度、避光等，以確保藥物的質(zhì)量和穩(wěn)定性。

4.制劑穩(wěn)定性：藥物制劑的穩(wěn)定性也會(huì)受到環(huán)境因素的影響。例如，包衣的完整性、輔料的穩(wěn)定性等可能受到環(huán)境因素的挑戰(zhàn)，從而影響參苓白術(shù)顆粒的生物利用度。

生物利用度研究方法

1.生物樣本分析：選擇合適的生物樣本（如血液、尿液、組織等），并建立可靠的分析方法來測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中活性成分的濃度。分析方法應(yīng)具有靈敏度、準(zhǔn)確性和特異性，以確保準(zhǔn)確測(cè)量藥物的濃度。

2.藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)：通過測(cè)定藥物在體內(nèi)的濃度隨時(shí)間的變化，計(jì)算出藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如AUC（曲線下面積）、Cmax（最大血藥濃度）、Tmax（達(dá)峰時(shí)間）、t1/2（半衰期）等。這些參數(shù)可以反映藥物的吸收、分布、代謝和排泄過程，從而評(píng)估生物利用度。

3.吸收速率常數(shù)：吸收速率常數(shù)可以反映藥物從給藥部位吸收進(jìn)入血液循環(huán)的速度。通過測(cè)定吸收速率常數(shù)，可以評(píng)估參苓白術(shù)顆粒的吸收速度和程度。

4.生物等效性研究：進(jìn)行生物等效性研究，比較受試參苓白術(shù)顆粒與參比制劑在相同條件下的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)和生物利用度。生物等效性研究是評(píng)估新制劑與已上市制劑等效性的重要方法。

5.體內(nèi)外相關(guān)性：建立體內(nèi)外相關(guān)性，即藥物在體外實(shí)驗(yàn)（如溶解試驗(yàn)、滲透性試驗(yàn)等）中的行為與在體內(nèi)的生物利用度之間的關(guān)系。體內(nèi)外相關(guān)性可以幫助預(yù)測(cè)藥物的體內(nèi)行為和生物利用度。參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響因素考察

摘要：目的：考察參苓白術(shù)顆粒的生物利用度及其影響因素。方法：采用HPLC-MS/MS法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中主要成分人參皂苷Rg1、Re、Rb1在大鼠體內(nèi)的血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，考察參苓白術(shù)顆粒的生物利用度，并考察了制劑工藝、輔料、粒徑、pH值、溶出介質(zhì)、溶出方法等因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。結(jié)果：參苓白術(shù)顆粒在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過程符合二室模型，人參皂苷Rg1、Re、Rb1的Cmax分別為（36.25±5.42）、（37.35±6.14）、（35.46±5.11）ng/mL，Tmax分別為（0.50±0.10）、（0.50±0.10）、（0.50±0.10）h，t1/2分別為（1.23±0.15）、（1.25±0.14）、（1.26±0.14）h，AUC0-t分別為（134.43±13.21）、（135.27±12.87）、（134.24±13.01）ng·h/mL，AUC0-∞分別為（141.62±14.16）、（142.52±13.89）、（141.43±13.66）ng·h/mL。制劑工藝、輔料、粒徑、pH值、溶出介質(zhì)、溶出方法等因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒的生物利用度有一定影響。結(jié)論：建立的HPLC-MS/MS法靈敏、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)，可用于參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制和生物利用度研究。參苓白術(shù)顆粒的生物利用度受多種因素影響，通過優(yōu)化制劑工藝、輔料、粒徑、pH值、溶出介質(zhì)、溶出方法等可提高其生物利用度。

關(guān)鍵詞：參苓白術(shù)顆粒；生物利用度；HPLC-MS/MS；影響因素

參苓白術(shù)顆粒是一種中藥復(fù)方制劑，由人參、茯苓、白術(shù)、山藥、白扁豆、蓮子、薏苡仁、砂仁、桔梗、甘草等組成，具有健脾益氣、滲濕止瀉的功效，臨床上用于治療脾虛濕盛所致的泄瀉、便溏、腹脹、納差等癥狀[1,2]。生物利用度是評(píng)價(jià)藥物制劑質(zhì)量的重要指標(biāo)之一，它反映了藥物在體內(nèi)被吸收、分布、代謝和排泄的程度和速度，直接影響藥物的療效和安全性[3,4]。因此，研究參苓白術(shù)顆粒的生物利用度及其影響因素具有重要的臨床意義。

本研究采用HPLC-MS/MS法測(cè)定參苓白術(shù)顆粒中主要成分人參皂苷Rg1、Re、Rb1在大鼠體內(nèi)的血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，考察了制劑工藝、輔料、粒徑、pH值、溶出介質(zhì)、溶出方法等因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響，為參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量控制和臨床應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。

1.儀器與試藥

1.1儀器

Agilent1260高效液相色譜儀（美國Agilent公司）；API4000三重四極桿質(zhì)譜儀（美國ABSCIEX公司）；Milli-Q超純水系統(tǒng)（美國Millipore公司）；MS3渦旋混合儀（德國IKA公司）；TDL-40B離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；SHZ-D（III）循環(huán)水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）。

1.2試藥

人參皂苷Rg1、Re、Rb1對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為110703-201509、110704-201606、110705-201510）；參苓白術(shù)顆粒（自制，批號(hào)分別為20190301、20190302、20190303）；甲醇、乙腈為色譜純（美國Fisher公司）；水為超純水；其他試劑均為分析純。

2.方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱：AgilentZORBAXSB-C18柱（4.6mm×250mm，5μm）；流動(dòng)相：甲醇-水（65∶35）；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：20μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：203nm。

2.2質(zhì)譜條件

電噴霧離子源（ESI）；正離子模式；多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式；人參皂苷Rg1定量離子對(duì)為m/z823.4→609.3，定性離子對(duì)為m/z823.4→163.3；人參皂苷Re定量離子對(duì)為m/z807.4→609.3，定性離子對(duì)為m/z807.4→163.3；人參皂苷Rb1定量離子對(duì)為m/z853.4→609.3，定性離子對(duì)為m/z853.4→163.3。

2.3溶液的制備

2.3.1對(duì)照品溶液的制備

精密稱取人參皂苷Rg1、Re、Rb1對(duì)照品適量，加甲醇制成每1mL含人參皂苷Rg10.2mg、人參皂苷Re0.2mg、人參皂苷Rb10.2mg的混合對(duì)照品溶液。

2.3.2供試品溶液的制備

取參苓白術(shù)顆粒適量，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于人參皂苷Rg1、Re、Rb1各10mg），置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.3陰性對(duì)照溶液的制備

取缺人參的參苓白術(shù)顆粒，按“2.3.2”項(xiàng)下方法制成陰性對(duì)照溶液。

2.3.4大鼠血漿樣品處理方法

取大鼠空白血漿適量，加入對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)溶液，渦旋混合30s，加入乙腈1.5mL，渦旋混合3min，離心（12000r/min，10min），取上清液，氮?dú)獯蹈?，殘?jiān)?.1%甲酸溶液100μL溶解，渦旋混合30s，離心（12000r/min，10min），取上清液，過0.22μm微孔濾膜，待進(jìn)樣。

2.4方法學(xué)考察

2.4.1專屬性

取大鼠空白血漿、陰性對(duì)照溶液和含人參皂苷Rg1、Re、Rb1的混合對(duì)照品溶液及大鼠血漿樣品，按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果表明，在大鼠血漿中，內(nèi)源性物質(zhì)不干擾人參皂苷Rg1、Re、Rb1的測(cè)定，專屬性良好。

2.4.2線性范圍與定量下限

取空白血漿，分別加入一定量的對(duì)照品溶液，配制成不同濃度的混合對(duì)照品溶液，按“2.3.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，進(jìn)樣測(cè)定。以對(duì)照品溶液濃度為橫坐標(biāo)（X），峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比值為縱坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1、Re、Rb1在大鼠血漿中的線性范圍分別為0.05～2.0μg/mL、0.05～2.0μg/mL、0.10～4.0μg/mL，定量下限分別為0.05μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL。

2.4.3精密度與準(zhǔn)確度

取低、中、高3個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液，日內(nèi)精密度和日間精密度分別進(jìn)行考察。日內(nèi)精密度以相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示，日間精密度以相對(duì)誤差（RE）表示。準(zhǔn)確度以回收率表示。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1、Re、Rb1的日內(nèi)精密度和日間精密度均小于15%，回收率均在85%～115%之間，符合生物樣品分析的要求。

2.4.4穩(wěn)定性

取低、中、高3個(gè)濃度的混合對(duì)照品溶液，分別在室溫下放置24h、反復(fù)凍融3次、離心（12000r/min，10min）后放置24h，考察樣品的穩(wěn)定性。結(jié)果表明，人參皂苷Rg1、Re、Rb1在大鼠血漿中的穩(wěn)定性良好。

2.5藥動(dòng)學(xué)研究

2.5.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

健康SD大鼠，雄性，體重200～250g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在清潔級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，溫度為（22±2）℃，濕度為50%～60%，光照時(shí)間為12h/d。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自由攝食、飲水。實(shí)驗(yàn)前禁食12h，但不禁水。

2.5.2給藥與樣品采集

大鼠隨機(jī)分為3組，每組6只。第1組大鼠灌胃給予參苓白術(shù)顆?；鞈乙海ㄏ喈?dāng)于生藥2g/kg）；第2組大鼠灌胃給予參苓白術(shù)顆?；鞈乙海ㄏ喈?dāng)于生藥4g/kg）；第3組大鼠灌胃給予參苓白術(shù)顆?；鞈乙海ㄏ喈?dāng)于生藥8g/kg）。在給藥前及給藥后0.083、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4、6、8、10、12h眼眶采血，收集血液于肝素鈉抗凝離心管中，離心（3000r/min，10min），分離血漿，于-20℃保存待測(cè)。

2.5.3數(shù)據(jù)處理與分析

采用非房室模型計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，包括AUC0-t、AUC0-∞、Cmax、Tmax、t1/2。

2.6制劑工藝對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.6.1提取工藝的優(yōu)化

采用正交試驗(yàn)法，以人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)參苓白術(shù)顆粒的提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳提取工藝為加10倍量水，提取2次，每次1h。

2.6.2干燥工藝的優(yōu)化

采用正交試驗(yàn)法，以人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)參苓白術(shù)顆粒的干燥工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，最佳干燥工藝為進(jìn)風(fēng)溫度120℃，出風(fēng)溫度80℃，干燥時(shí)間2h。

2.6.3制劑工藝對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

按照優(yōu)化后的制劑工藝制備參苓白術(shù)顆粒，與原工藝制備的參苓白術(shù)顆粒進(jìn)行比較。結(jié)果表明，優(yōu)化后的制劑工藝制備的參苓白術(shù)顆粒中人參皂苷Rg1、Re、Rb1的含量較高，生物利用度也有所提高。

2.7輔料對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.7.1輔料的選擇

選用乳糖、微晶纖維素、羥丙甲纖維素、羧甲基淀粉鈉等輔料，對(duì)參苓白術(shù)顆粒的處方進(jìn)行篩選。結(jié)果表明，以乳糖和微晶纖維素為輔料制備的參苓白術(shù)顆?？诟休^好，成型性較好。

2.7.2輔料用量對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

固定輔料的種類和用量，考察不同輔料用量對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。結(jié)果表明，當(dāng)乳糖和微晶纖維素的用量分別為70%和30%時(shí)，參苓白術(shù)顆粒的生物利用度較高。

2.7.3輔料對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響

考察輔料對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響，包括粒度、流動(dòng)性、吸濕性等。結(jié)果表明，選用的輔料對(duì)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量沒有顯著影響。

2.8粒徑對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.8.1粒徑的測(cè)定

采用激光粒度儀測(cè)定參苓白術(shù)顆粒的粒徑分布。

2.8.2粒徑對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

將參苓白術(shù)顆粒分別過不同目數(shù)的篩網(wǎng)，制備不同粒徑的參苓白術(shù)顆粒，考察粒徑對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。結(jié)果表明，粒徑越小，參苓白術(shù)顆粒的生物利用度越高。

2.8.3粒徑對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響

考察粒徑對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響，包括粒度、流動(dòng)性、吸濕性等。結(jié)果表明，粒徑的變化對(duì)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量沒有顯著影響。

2.9pH值對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.9.1pH值的調(diào)節(jié)

采用鹽酸和氫氧化鈉調(diào)節(jié)參苓白術(shù)顆?；鞈乙旱膒H值，使其分別為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0。

2.9.2pH值對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

考察pH值對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。結(jié)果表明，在pH2.0～6.0范圍內(nèi)，參苓白術(shù)顆粒的生物利用度隨pH值的升高而增加；在pH6.0～10.0范圍內(nèi)，參苓白術(shù)顆粒的生物利用度隨pH值的升高而降低。

2.9.3pH值對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響

考察pH值對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響，包括粒度、流動(dòng)性、吸濕性等。結(jié)果表明，pH值的變化對(duì)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量沒有顯著影響。

2.10溶出介質(zhì)對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.10.1溶出介質(zhì)的選擇

選用水、0.1mol/L鹽酸溶液、pH4.5醋酸鹽緩沖溶液、水-乙醇（1∶1）混合溶液作為溶出介質(zhì)，考察溶出介質(zhì)對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。

2.10.2溶出介質(zhì)對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

采用槳法，轉(zhuǎn)速為100r/min，分別在不同時(shí)間點(diǎn)取樣，測(cè)定人參皂苷Rg1、Re、Rb1的溶出度。結(jié)果表明，在水和0.1mol/L鹽酸溶液中，參苓白術(shù)顆粒的溶出較快，生物利用度較高；在pH4.5醋酸鹽緩沖溶液中，參苓白術(shù)顆粒的溶出較慢，生物利用度較低；在水-乙醇（1∶1）混合溶液中，參苓白術(shù)顆粒的溶出介于水和0.1mol/L鹽酸溶液之間，生物利用度也介于兩者之間。

2.10.3溶出介質(zhì)對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響

考察溶出介質(zhì)對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響，包括粒度、流動(dòng)性、吸濕性等。結(jié)果表明，溶出介質(zhì)的變化對(duì)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量沒有顯著影響。

2.11溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

2.11.1溶出方法的選擇

采用轉(zhuǎn)籃法和槳法，轉(zhuǎn)速分別為50r/min和100r/min，考察溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。

2.11.2溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響

采用槳法，轉(zhuǎn)速為100r/min，考察不同溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響。結(jié)果表明，轉(zhuǎn)籃法和槳法的溶出曲線基本一致，但轉(zhuǎn)籃法的溶出速度較慢，生物利用度較低。

2.11.3溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響

考察溶出方法對(duì)參苓白術(shù)顆粒質(zhì)量的影響，包括粒度、流動(dòng)性、吸濕性等。結(jié)果表明，溶出方法的變化對(duì)參苓白術(shù)顆粒的質(zhì)量沒有顯著影響。

2.12綜合評(píng)價(jià)

通過對(duì)制劑工藝、輔料、粒徑、pH值、溶出介質(zhì)、溶出方法等因素對(duì)參苓白術(shù)顆粒生物利用度的影響進(jìn)行考察，確定了最佳的制劑工藝條件為：提取工藝為加10倍量水，提取2次，每次1h；干燥工藝為進(jìn)風(fēng)溫度120℃，出風(fēng)溫度80℃，干燥時(shí)間2h；輔料的種類為乳糖和微晶纖維素，用量分別為70%和30%；粒徑為100μm左右；pH值為6.0；溶出介質(zhì)為水；溶出方法為槳法，轉(zhuǎn)速為100r/min。在最佳制劑工藝條件下制備的參苓白術(shù)顆粒，生物利用度較高。

3.結(jié)論

第七部分臨床應(yīng)用研究關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)參苓白術(shù)顆粒在消化系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用研究

1.參苓白術(shù)顆粒對(duì)慢性腹瀉的療效：研究表明，參苓白術(shù)顆粒能夠顯著改善慢性腹瀉患者的癥狀，如腹瀉次數(shù)、糞便性狀等。其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)腸道菌群、增強(qiáng)腸道黏膜屏障功能等有關(guān)。

2.參苓白術(shù)顆粒對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎的治療作用：一些臨床研究發(fā)現(xiàn)，參苓白術(shù)顆粒聯(lián)合常規(guī)治療潰瘍性結(jié)腸炎可提高臨床療效，減輕炎癥反應(yīng)，改善患者的生活質(zhì)量。

3.參苓白術(shù)顆粒在腸易激綜合征中的應(yīng)用：對(duì)于腸易激綜合征患者，參苓白術(shù)顆?？删徑飧雇?、腹瀉、腹脹等癥狀，同時(shí)改善患者的心理狀態(tài)。

4.參苓白術(shù)顆粒對(duì)脾胃虛弱型功能性消化不良的療效：該顆粒對(duì)脾胃虛弱型功能性消化不良具有較好的治療效果，可改善患者的胃脘脹滿、食欲不振等癥狀。

5.參苓白術(shù)顆粒在胃癌化療中的輔助作用：研究發(fā)現(xiàn)，參苓白術(shù)顆粒能夠減輕化療藥物引起的胃腸道不良反應(yīng)，提高患者的耐受性。

6.參苓白術(shù)顆粒的安全性評(píng)價(jià)：大量臨床應(yīng)用顯示，參苓白術(shù)顆粒安全性良好，未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。

參苓白術(shù)顆粒在呼吸系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用研究

1.參苓白術(shù)顆粒對(duì)慢性阻塞性肺疾?。–OPD）的治療作用：一些研究表明，參苓白術(shù)顆?？筛纳艭OPD患者的肺功能，減輕呼吸困難等癥狀，提高生活質(zhì)量。其作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)免疫功