TBPMA 20-2024 蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質譜法

ICS67.050CCSX04BPMA北 京 預 防 醫(yī) 學 會 團 體 標 準T/BPMA20—2024蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法Determinationofchloramphenicolandmetronidazoleresiduesinhoneybyliquidchromatography-tandemmassspectrometrymethod2024-04-23發(fā)布 2024-04-23實施北京預防醫(yī)學會 發(fā)布T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前 言 II范圍 1規(guī)性用件 1術和義 1原理 1試和料 1儀設備 2試的備 2測步驟 2結計算 3法測靈度確度精度 4附錄 A （料）甲硝、霉及標中英通名、學子和CAS號 5附錄 B （料）標準液空基加樣品甲唑氯素特征子量譜圖 6前 言本文件按GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第部分：標準化文件的和起草規(guī)則》的起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由北京市通州區(qū)疾病預防控制中心提出。本文件由北京預防醫(yī)學會歸口。T/BPMA20—2024T/BPMA20—2024PAGEPAGE2蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質譜法范圍本文件描述了蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的液相色譜-串聯(lián)質譜測定的方法。本文件適用于蜂蜜中氯霉素和甲硝唑殘留量的測定。（GB/T6682GB/T27404本文件沒有需要界定的術語和定義。原理試樣用乙腈提取后經C18-氨基復合固相萃取柱凈化，液相色譜-串聯(lián)質譜法檢測，內標法定量。GB/T6682乙腈-水溶液（1：9，V/V）。5mmol/L乙酸銨溶液：準確稱取0.385g乙酸銨，用水溶解并稀釋至1L。氯霉素、甲硝唑、氯霉素-D5、甲硝唑-D4標準品，純度≥98%，具體見附錄A。或經國家認證并授予標準物質證書的一定濃度的標準溶液。100mg/L的氯霉0℃~56-D5-D4100mg/L的氯霉素-D5的內標儲備液和甲硝唑-D4內標儲備液。0℃~5℃保存，有效期6個月。1.00mg/L100mg/L100mg/L0.50mL50mL1.00mg/L0℃~51.00mg/L100mg/L-D5100mg/L唑-D40.50mL50mL1.00mg/L0℃~5℃保3100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L100μg/L1.00mg/L5.00mL50mL容量瓶中，100μg/L混合標準系列溶液：分別準確吸取一定量的混合標準使用液和混合內標使用液，用乙腈0.20.51.0μg/L2.05.0μg/L10.0、20.0μg/L、50.0μg/L的混合標準系列溶液，混合內標濃度為2.0μg/L。臨用現(xiàn)配。有機相微孔濾膜：0.22μm。C18-氨基復合固相萃取柱，1.75g/12mL，或相當者。液相色譜-三重四極桿質譜儀：配有電噴霧離子源。分析天平：感量0.01mg和0.01g。（C18，100mm，1.7μm）冷凍離心機：轉速10000r/min。按照GB/T27404實驗室質量控制規(guī)范食品理化檢測附錄E食品樣品的抽取、制備和保存進行。提取5001于040L100g（.，加水5102min，3030min，410000r/min離心8min凈化準確移取5mL上清液直接上樣于C18-氨基復合小柱，使樣品自然通過，接收全部流出樣液，將樣液在40℃水浴條件下氮氣吹至近干，用乙腈水溶液（5.3）定容至1mL，過0.22μm濾膜，上機測定。液相色譜-質譜參考條件C181001.7μmA=5mmol/LB=1；c)柱溫：40℃；流速：0.3mL/min；5。表1 流動梯程序時間（min)A%B%095.05.00.595.05.03.001004.001005.095.05.0（ESI+）；3kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。（ESI-）；2.8kV；5001000L/h；150L/h；700kpa；（MRM）。表2 MRM化合物模式母離子（m/z）子離子（m/z）錐孔電壓（V）碰撞電壓（V）氯霉素ESI-321.0152.0*4020321.0257.04015氯霉素-D5ESI-326.1157.0*4020326.1262.14015甲硝唑ESI+172.1128.1*2020172.182.12015甲硝唑-D4ESI+176.182.12020176.1128.1*2015注：*為定量離子3表3相對離子豐度（%）≤10＞10～20＞20～50＞50允許相對偏差（%）±50±30±25±20在液相色譜(（5.12），B。結果按式（1）計算：式中：

??=(1)??×??2×1000X ——μg/kg；C ——μg/L；——（10mL），——（5mL），——（1mL），1000——換算系數(shù)；m ——g。靈敏度取樣量按5.00g計算，方法檢出限為：氯霉素0.10μg/kg，甲硝唑0.10μg/kg。方法定量限為：氯霉素0.30μg/kg，甲硝唑0.30μg/kg。準確度0.30μg/kg~5.0μg/kg71.0%~119%。精密度本方法批內相對標準偏差≤20%，批間相對標準偏差≤30%。附錄A（資料性）甲硝唑、氯霉素及內標的中英文通用名稱、化學分子式和CAS號甲硝唑、氯霉素及內標的中英文通用名稱、化學分子式和CAS號見表A.1。表A.1甲硝唑、氯霉素及內標的中英文通用名稱、化學分子式和CAS號中文通用名稱英文通用名稱化學分子式CAS號甲硝唑MetronidazoleC6H9N3O3443-48-1甲硝唑-D4Metronidazole--D4（ethyleneD4）C6H5D4N3O31261392-47-5氯霉素ChloramphenicolC11H12Cl2N2O556-75-7氯霉素-D5Chloramphenicol-D5（RingD4，BenzylD）C11D5H7Cl2N2O5202480-68-0附錄B（資料性）標準溶液和空白基質加標樣品中甲硝唑和氯霉素的特征離子質量色譜圖A.1A