血液一般檢查第二節(jié)紅細(xì)胞檢查

血液一般檢查第二節(jié)紅細(xì)胞檢查主要內(nèi)容一.紅細(xì)胞計數(shù)二.血紅蛋白測定三、血細(xì)胞比容測定四、紅細(xì)胞平均值的計算五.紅細(xì)胞形態(tài)檢查六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)七、嗜堿性點彩紅細(xì)胞計數(shù)八、紅細(xì)胞沉降率側(cè)定九、紅斑狼瘡細(xì)胞檢查第2頁,共88頁，2024年2月25日，星期天一.紅細(xì)胞計數(shù)（redbloodcell）【概述】【檢測原理】【方法學(xué)評價】【參考值】【質(zhì)量控制】【臨床意義】返回第3頁,共88頁，2024年2月25日，星期天

【概述】紅細(xì)胞在正常情況下幾乎占血容量的1/2，平均壽命是120天，每天約有8%的衰老和退化變性的紅細(xì)胞經(jīng)脾破壞，血紅蛋白降解，分解為鐵、膽色素、蛋白質(zhì)代謝和血紅蛋白的重新合成。紅細(xì)胞外形：雙凹圓盤形，平均直徑7.2μm，厚約2μm，無核主要成分（除水外）：主要是血紅蛋白，主要是O2和

CO2

，并協(xié)同維持酸堿平衡。返回第4頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【檢測原理】紅細(xì)胞計數(shù)：即測定單位體積血液中RBC的數(shù)量。有顯微鏡法和儀器法。

1、紅細(xì)胞顯微鏡計數(shù)法原理：用等滲的稀釋液將血液稀釋一定倍數(shù)后，滴入計數(shù)板，在顯微鏡下計數(shù)一定范圍的紅細(xì)胞數(shù)，經(jīng)過換算即可求得每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)紅細(xì)胞稀釋液

①Hayem液：

NaCl：調(diào)節(jié)滲透壓

Na2SO4：提高比重防止細(xì)胞粘連

HgCl2：防腐缺點：不適宜高球蛋白血癥患者。

②枸櫞酸鈉稀釋液：

③普通生理鹽水或加1%甲醛的生理鹽水：2、血細(xì)胞分析儀法：電阻抗和（或）光散射原理返回第5頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【方法學(xué)評價】1、手工顯微鏡法：

是傳統(tǒng)的紅細(xì)胞計數(shù)法，不需要特殊的設(shè)備，但操作復(fù)雜、費時，現(xiàn)雖不常用，但仍作為：①血液分析儀的校正。②與白細(xì)胞減少或血小板嚴(yán)重減少時的對照核實。③血小板受小紅細(xì)胞干擾時的校正2、血細(xì)胞分析儀法：儀器法已成為目前細(xì)胞計數(shù)的主要方法,儀器法比手工法更精確,且操作簡便、快速，已廣泛應(yīng)用。返回第6頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【參考值】

成年男性：(4.0～5.5)×1012/L

成年女性：(3.5～5.0)×1012/L

初生兒：

(6.0～7.0)×1012/L返回第7頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【質(zhì)量控制】1．計數(shù)誤差：同白細(xì)胞計數(shù)2．白細(xì)胞的影響：當(dāng)WBC＞100×109/L，RBC計數(shù)應(yīng)校正。方法以有兩種：（1）可直接將病人紅細(xì)胞數(shù)減去白細(xì)胞數(shù)。（2）直接在高倍鏡下區(qū)別紅白細(xì)胞。返回第8頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【臨床意義】1．生理性變化2．病理性變化（1）病理性增多（2）病理性減少返回第9頁,共88頁，2024年2月25日，星期天1、生理性變化①年齡與性別差異:②精神因素:③劇烈體力運動和體力勞動:④氣壓降低:⑤妊娠中后期:血紅蛋白紅細(xì)胞計數(shù)1201301405.04.84.64.44.2150102030405060返回第10頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（1）病理性增多①相對性增多：暫時性血液濃縮如嘔吐、高熱、腹瀉、多尿、多汗、大面積燒傷等。②絕對性增多：包括繼發(fā)性增多的組織缺氧EPO代償性增高，如嚴(yán)重慢性心肺疾病、發(fā)紺性先天性心臟病、異常血紅蛋白病等；EPO非代償性增高如與某些腫瘤和腎臟有關(guān)的疾病如腎癌、肝細(xì)胞癌、子宮肌瘤、卵巢癌、腎胚胎瘤、腎積水、多囊腎和腎移植后等。原發(fā)性如真性紅細(xì)胞增多癥、良性家族性紅細(xì)胞增多癥等。返回第11頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（2）病理性減少1）紅細(xì)胞生成減少

①骨髓功能衰竭

②造血物質(zhì)缺乏或利用障礙如腎性貧血2）紅細(xì)胞破壞過多

①紅細(xì)胞內(nèi)在缺陷如膜缺陷②紅細(xì)胞酶缺陷

③血紅蛋白異常

④不穩(wěn)定Hb和紅細(xì)胞外在異常等3）紅細(xì)胞丟失

急性、慢性失血性貧血返回第12頁,共88頁，2024年2月25日，星期天二、血紅蛋白測定【概述】【檢測原理】【方法學(xué)評價】【參考值】【質(zhì)量控制】【紅細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白測定的臨床意義】返回第13頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【概述】1.化學(xué)成分：珠蛋白（含兩條α鏈和兩條非α鏈）+亞鐵血紅素（Fe+2+原卟啉）

HbFe2++O2

稱氧合血紅蛋白（HbO2）。

HbFe2

+

CO碳氧血紅蛋白(HBCO)HbFe2+

（99%）稱還原Hb(Hbred).HbFe3+（1%）高鐵血紅蛋白(Hi)或正鐵血紅蛋白(MHB)2．空間結(jié)構(gòu)：四聚體3．血紅蛋白種類：正常成人：

HbA

（α2β2）占96~98%

HbA2（α2δ2

）占2%-3%HbF（α2γ2）占2%以下胎兒主要血紅蛋白返回第14頁,共88頁，2024年2月25日，星期天血紅蛋白結(jié)構(gòu)返回第15頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【檢測原理】

血紅蛋白是一種色素蛋白,可以用比色法測定.血液中血紅蛋白以各種形式存在,包括氧合血紅蛋白、碳氧血紅蛋白、高鐵血紅蛋白或其他衍生物。1、氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）測定法：在血液中各種血紅蛋白（HbS外）均可被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白，再和CN-結(jié)合生成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白（HiCN）．HiCN在540有一吸收波峰,用分光光度計測定該處的吸光度,再換算成每升血液中血紅蛋白的濃度,或制備標(biāo)準(zhǔn)曲線計算:HICN的最大吸收峰為540nm,消光系數(shù)為44Lmmol-1·cm-1。下一頁第16頁,共88頁，2024年2月25日，星期天計算公式可根據(jù)下式進(jìn)行計算：

Hb（g/L）=A/44×64458（mg）/1000×251=A×367.7=Hb（g/l）

A：為測定管吸光度

44：為毫摩爾消光系數(shù)

64458/1000：為1mmol/LHb溶液中所含Hb251：為稀釋倍數(shù)下一頁第17頁,共88頁，2024年2月25日，星期天2、其他方法1、十二烷基月桂酰硫酸鈉血紅蛋白測定法（SLS—Hb）

2、堿羥血紅蛋白（AHD575）

3、疊氮高鐵血紅蛋白（Hi）返回第18頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【方法學(xué)評價】1、氰化高鐵血紅蛋白測定法（HiCN）是國際血液血標(biāo)準(zhǔn)化委員會推薦的血紅蛋白國際標(biāo)準(zhǔn)參考方法。HiCN法操作簡單，顯色快且結(jié)果可靠，可檢測除硫化血紅蛋白（SHb）外的各種血紅蛋白，但強(qiáng)調(diào)儀器的標(biāo)準(zhǔn)化，在實際工作中，往往使用HiCN參考液，通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出K值來教正結(jié)果，HiCN法在國內(nèi)已經(jīng)普及但并非理想的方法，其致命的弱點是試劑氰化鉀有巨毒。

2、十二烷基硫酸鈉血紅蛋白測定法（SLS—Hb）突出優(yōu)點是試劑無毒，多用此法代替HiCN，但其摩爾消光系數(shù)還未最后測定，故其用HiCN法間接出結(jié)果。破壞白細(xì)胞，不能用此稀釋液做白細(xì)胞計數(shù)。返回第19頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【參考值】

成年男性：120~160g/L

成年女性：110~150g/L

新生兒：170~200g/L返回第20頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【質(zhì)量控制】1．技術(shù)誤差：稀釋倍數(shù)、分光光度計、比色杯2．HICN轉(zhuǎn)化液：置于棕色玻璃瓶3．HICN參考液：部級質(zhì)量參考標(biāo)準(zhǔn)4.質(zhì)控物：（1）ACD抗凝的全血（2）進(jìn)口的全血質(zhì)控物（3）醛化半固定的紅細(xì)胞（4）溶血液（5）凍干全血返回第21頁,共88頁，2024年2月25日，星期天下一頁【紅細(xì)胞計數(shù)和血紅蛋白測定的臨床意義】1．紅細(xì)胞和血紅蛋白增高標(biāo)準(zhǔn)：成年男性RBC＞6.0×1012/L,Hb＞170g/L

成年女性RBC＞5.5×1012/L,Hb＞160g/L(1)生理性變化：①年齡與性別差異:②精神因素:③劇烈體力運動和體力勞動:④氣壓降低:⑤妊娠中后期:（2)病理性增多：

相對增多：如嘔吐、大面積燒傷、嚴(yán)重腹瀉、大量出汗等。

絕對增多：慢性心肺疾病、真性紅細(xì)胞增多癥。血紅蛋白紅細(xì)胞計數(shù)1201301405.04.84.64.44.2150102030405060第22頁,共88頁，2024年2月25日，星期天2．紅細(xì)胞和血紅蛋白減低生理性貧血:

如妊娠中晚期、6個月至2歲、老年人。病理性貧血：1、骨髓造血功能低下：如再障、白血病、

2、造血原料不足：缺鐵性貧血、巨幼性貧

3、紅細(xì)胞破壞增加：

4、紅細(xì)胞的丟失過多貧血的分度輕度貧血：成年男性＜120g/L，成年女性＜110g/L

中度貧血：Hb＜90g/L

重度貧血：Hb＜60g/L

極度貧血：Hb＜30g/L返回第23頁,共88頁，2024年2月25日，星期天三.血細(xì)胞比容測定【概述】【檢測原理】【測定方法及方法學(xué)評價】【質(zhì)量控制】【參考值】【臨床意義】返回第24頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【概述】紅細(xì)胞比積：（hematocrit,Hct,Ht,HCT或packedcellvolume,PCV

）以前稱為紅細(xì)胞壓積指在一定條件下經(jīng)離心沉淀壓緊的紅細(xì)胞在全血標(biāo)本中所占體積的比值。其高低與紅細(xì)胞數(shù)量及大小有關(guān)。ISCH建議的縮寫符號是PCV表示。HCT常用于血細(xì)胞分析儀上的測定結(jié)果。PCV測定的常規(guī)方法分為：常量法（wintrobe法）微量法（microhematocrit）返回第25頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【檢測原理】1、wintrobe法和微量法：均屬于離心法。將抗凝的血液（全血）置于孔徑統(tǒng)一的溫氏管或標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管中，以一定轉(zhuǎn)速離心一定時間后，計算紅細(xì)胞層占全血的體積比。2、血液分析儀法：由紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞計數(shù)兩項指標(biāo)導(dǎo)出。HCT=紅細(xì)胞計數(shù)×紅細(xì)胞平均體積返回第26頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【測定方法及方法學(xué)評價】（一）手工法：

1、wintrobe法：方法：將EDTAK2抗凝血灌注于Wintrobe管，在一定條件下離心（2264g、３０min）得到紅細(xì)胞在全血中所占體積的百分比，稱為血細(xì)胞比容。離心后血細(xì)胞分五層：分別為血漿層（淡黃色）、血小板層（白色乳糜）、白細(xì)胞層（灰紅色）、有核紅細(xì)胞層（灰紅色）、還原紅細(xì)胞層（黑色）及帶氧紅細(xì)胞層，讀數(shù)紅細(xì)胞層（還原紅細(xì)胞層及帶氧紅細(xì)胞層）方法學(xué)評價：該法無法完全排除血細(xì)胞之間的殘存留的血漿，因此要比真實值要高（２~3％），標(biāo)本量多，耗時長，目前已被微量法代替．下一頁第27頁,共88頁，2024年2月25日，星期天2．微量法方法：微量法采用一次性的使用的毛細(xì)玻璃管（長：75mm內(nèi)徑：0.8~1.0mm厚:0.20~0.25mm),離心力為10000g5min方法學(xué)評價:

該法標(biāo)本用血量小、簡便、快捷、血細(xì)胞間殘留血漿量較溫氏法低，被WHO作為首推方法。下一頁第28頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（二）血細(xì)胞分析儀法：1．電阻抗微量比容法

原理:利用血漿是電的良導(dǎo)體,而相對血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體的原理方法學(xué)評價:自動化程度高、快速(15s~30s)、操作簡便、便于推廣，但血樣中白細(xì)胞和血小板明顯增加或有異常蛋白質(zhì)時會引起測量誤差。2．血細(xì)胞分析儀法

MCV和RBC導(dǎo)出,由于儀器測定數(shù)萬個血細(xì)胞體積產(chǎn)生的脈沖疊加后換算而來的,避免了血漿的殘留引起的誤差。返回第29頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【質(zhì)量控制】1、手工法：注意避免以下因數(shù)：抗凝劑量不準(zhǔn)確，混勻不充分，離心速度不夠均會產(chǎn)生誤差。紅細(xì)胞形態(tài)異常時可是血漿的殘留增加6%，紅細(xì)胞增多癥時，血細(xì)胞比容明顯增高是血漿殘留也會增高2、血液細(xì)胞分析儀法：返回第30頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【參考值】溫氏法：

男：0.40-0.50

女：0.37-0.47

微量法：

男：0.47±0.04;

女：0.42±0.05返回第31頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【臨床意義】1、紅細(xì)胞比積增高：

生理性增高：高原生活、劇烈運動、新生兒病理性增高：原發(fā)性和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥、脫水、燒傷2、紅細(xì)胞比積減低：各種貧血，心衰，輸血3、可用作真性紅細(xì)胞增多癥、臨床輸血及輸液療效觀察的一項指標(biāo)4、Hct是計算MCV、MCHC的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)之一5、Hct是影響全血粘度的決定性因素之一返回第32頁,共88頁，2024年2月25日，星期天四、

紅細(xì)胞平均值計算（一）平均紅細(xì)胞體積(MCV)（二）平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)（三）平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)（四）臨床意義返回第33頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（一）平均紅細(xì)胞體積平均紅細(xì)胞體積（meancorpuscularvolume,MCV）：指紅細(xì)胞群體中各個紅細(xì)胞體積的平均值單位：fl（10-15L）

MCV=每升血液中紅細(xì)胞比積/每升血液中紅細(xì)胞個數(shù)

MCV=HCT/RBC參考值

手工法：80-92fl1mL=1012fl返回第34頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（二）平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量

（meancorpuscularhemoglobin,MCH）指紅細(xì)胞群體中各個紅細(xì)胞血紅蛋白含量的平均值單位：pg（10-12g）

MCH=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞個數(shù)Hb×1012/RBC/L（皮克）參考值

手工法：27-31pg1g=1012pg返回第35頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（三）平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度.

(concentrationmeancorpuscularhemoglobin,MCHC)：指測Hct時被壓緊的RBC的血紅蛋白濃度（g/L）

MCHC=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞比積

MCHC=Hb/(g/L)/Hct參考值

320-360g/L返回第36頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（四）臨床意義類型

MCV(fl)

MCH(pg)

MCHC

常見疾病正常細(xì)胞

80～9426～32310～350AA、多數(shù)HA等性貧血大細(xì)胞

＞94＞32310～350MA性貧血單純小細(xì)

＜80＜26310～350胞性貧血

小細(xì)胞低

＜80＜26＜310IDA色素性貧血返回第37頁,共88頁，2024年2月25日，星期天五、紅細(xì)胞形態(tài)檢查（一）概述（二）正常紅細(xì)胞形態(tài)（三）異常紅細(xì)胞形態(tài)

1.大小異常

2.形態(tài)異常

3.染色異常

4.結(jié)構(gòu)異常返回第38頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（一）概述

貧血不僅與紅細(xì)胞數(shù)量有關(guān)，而且與紅細(xì)胞形態(tài)變化密切相關(guān)。各種病因作用于紅細(xì)胞生理進(jìn)程的不同階段引起相應(yīng)的病理變化，可從染色血涂片上紅細(xì)胞的大小、形態(tài)、染色等方面反映出來。此種形態(tài)學(xué)改變與血紅蛋白測定、紅細(xì)胞計數(shù)結(jié)果相結(jié)合可粗略地推斷貧血原因，對貧血的診斷和鑒別診斷有很重要的臨床意義。返回第39頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（二）正常紅細(xì)胞形態(tài)(圖)經(jīng)瑞氏染色后，血膜片中正常的紅細(xì)胞大小形態(tài)較為一致，直徑為6.7～7.7μm,呈淡紅色圓盤狀，中央著色較邊緣淡。見于健康人、再障、急性失血、白血病等。

返回第40頁,共88頁，2024年2月25日，星期天1.大小異常（圖）（1）小紅細(xì)胞直徑小于6μm者稱為小紅細(xì)胞.。見于缺鐵性貧血、地中海貧血，慢性炎癥引起的繼發(fā)性貧血、遺傳性球形紅細(xì)胞增多癥。（2）大紅細(xì)胞直徑大于10μm。見于溶血性貧血及巨幼細(xì)胞貧血。（3）巨紅細(xì)胞直徑大于15μm。最常見于巨幼細(xì)胞性貧血。（4）紅細(xì)胞大小不均是指紅細(xì)胞之間直徑相差一倍以上而言。常見于嚴(yán)重的增生性貧血血涂片中。而巨幼細(xì)胞性貧血時尤為明顯。返回第41頁,共88頁，2024年2月25日，星期天

2.形態(tài)異常（圖）（1）球形紅細(xì)胞（2）橢圓形紅細(xì)胞（3）靶形紅細(xì)胞（4）鐮形紅細(xì)胞（5）口形紅細(xì)胞（6）棘細(xì)胞（7）裂片紅細(xì)胞（8）紅細(xì)胞形態(tài)不齊返回第42頁,共88頁，2024年2月25日，星期天3.染色異常（圖）1)低色素性：紅細(xì)胞的生理性中心淺染色區(qū)擴(kuò)大，甚至成為環(huán)圈形紅細(xì)胞，提示其血紅蛋白含量明顯減少，常見于缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、鐵幼粒細(xì)胞性貧血，某些血紅蛋白病時也常見到。2)高色素性：指紅細(xì)胞內(nèi)生下性中心淺染區(qū)消失，整個紅細(xì)胞均染成紅色，而且胞體也大。最常見于巨幼細(xì)胞性貧血。3)嗜多色性：屬于尚未完全成熟的紅細(xì)胞，故細(xì)胞較大，由于胞質(zhì)中含人多少不等的嗜堿性物策RNA而被染成灰色藍(lán)色。嗜多色性紅細(xì)胞增多提示骨髓造紅細(xì)胞功能活躍。在增生性貧血時增多，溶血性貧血時最為多見。返回第43頁,共88頁，2024年2月25日，星期天

4.結(jié)構(gòu)異常（圖）1)染色質(zhì)小體：位于成熟或幼紅細(xì)胞的胞質(zhì)中紫紅色小體，呈圓形，有1-2μm大小，染紫紅色，可1至數(shù)個，已證實為核殘余物，常見于巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血及脾切除術(shù)后。2)堿性點彩紅細(xì)胞：在瑞氏染色條件下，紅細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)大小不一、多少不等的嗜堿紫黑色粒顆、正常人血涂片中很少見到，僅為萬分之一。有鉛、鉍、汞中毒時增多，常作為各種鉛中毒的診斷的篩選指標(biāo)。返回第44頁,共88頁，2024年2月25日，星期天3)卡波環(huán)：在嗜多色性或堿性點彩紅細(xì)胞的胞質(zhì)中出現(xiàn)的紫紅色細(xì)線圈狀結(jié)構(gòu)，有時繞成8字形?，F(xiàn)認(rèn)為可能是胞質(zhì)中脂蛋白變性所致常與染色質(zhì)小體同時存在。見于巨細(xì)胞性貧血和鉛中毒患者。4)有核紅細(xì)胞：正常成人外周血液中不能見到。1周之內(nèi)嬰兒的血涂片可見到少量。最常見于各種溶血性貧血，急、慢性白血病及紅白血病。第45頁,共88頁，2024年2月25日，星期天正常紅細(xì)胞形態(tài)返回第46頁,共88頁，2024年2月25日，星期天大小異常和染色異常小紅細(xì)胞

大紅細(xì)胞

大紅細(xì)胞

巨紅細(xì)胞

返回第47頁,共88頁，2024年2月25日，星期天形態(tài)異常球形紅細(xì)胞橢圓形紅細(xì)胞口形紅細(xì)胞棘形紅細(xì)胞下一頁第48頁,共88頁，2024年2月25日，星期天形態(tài)異常下一頁第49頁,共88頁，2024年2月25日，星期天異常紅細(xì)胞（淚滴狀）淚滴狀紅細(xì)胞下一頁第50頁,共88頁，2024年2月25日，星期天5、鐮形紅細(xì)胞返回第51頁,共88頁，2024年2月25日，星期天染色和結(jié)構(gòu)異常染色質(zhì)小體有核紅細(xì)胞染色質(zhì)小體嗜堿性點彩紅細(xì)胞卡波環(huán)下一頁第52頁,共88頁，2024年2月25日，星期天嗜堿性點彩紅細(xì)胞嗜堿性點彩紅細(xì)胞下一頁第53頁,共88頁，2024年2月25日，星期天14、豪—周小體Howell-Jollybody返回第54頁,共88頁，2024年2月25日，星期天主要內(nèi)容

一.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)二.血細(xì)胞比容測定三.紅細(xì)胞平均值計算

四.紅細(xì)胞平均直徑和直徑曲線測定（了解）五.嗜堿性點彩紅細(xì)胞計數(shù)六.嗜酸性粒細(xì)胞直接計數(shù)七.紅細(xì)胞沉降率測定八.紅斑狼瘡細(xì)胞檢查下一頁返回第55頁,共88頁，2024年2月25日，星期天六、網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)【概述】【檢測原理】【方法學(xué)評價】【質(zhì)量控制】【參考值】【臨床意義】

計算練習(xí)返回第56頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【概述】網(wǎng)織紅細(xì)胞（reticulocyte,RET）：是介于晚幼紅細(xì)胞脫核后到完全成熟紅細(xì)胞之間的過渡型的尚未完全成熟的紅細(xì)胞。其胞漿內(nèi)還殘存多少不等的嗜堿性物質(zhì)（RNA），經(jīng)燦爛甲酚藍(lán)、新亞甲藍(lán)等活體染色法染色，嗜堿物質(zhì)凝成顆粒，其顆粒又聯(lián)綴成線，而構(gòu)成淺藍(lán)或深藍(lán)的網(wǎng)織狀結(jié)構(gòu)，稱網(wǎng)織紅細(xì)胞。分型：O型（花冠型）、Ⅰ型（絲球型）、

Ⅱ型（網(wǎng)型）、Ⅲ型(破網(wǎng)型)Ⅳ型（點粒型），

Ⅳ型占外周血網(wǎng)織紅細(xì)胞的60%以上

O型為有核紅細(xì)胞。（演變圖）（圖）返回第57頁,共88頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞演變模型圖返回第58頁,共88頁，2024年2月25日，星期天網(wǎng)織紅細(xì)胞網(wǎng)型破網(wǎng)型點粒型返回第59頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【檢測原理】1、普通光學(xué)顯微鏡法：用活體染色（新亞甲或黃焦油藍(lán)等染料）方法顯示紅細(xì)胞內(nèi)網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，并在顯微鏡下計數(shù)1000個紅細(xì)胞中所占的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)，以百分比或分?jǐn)?shù)表示。2、網(wǎng)織細(xì)胞計數(shù)儀法：用熒光染料使含RNA的網(wǎng)織紅細(xì)胞著色，用流式細(xì)胞術(shù)（FCM）計算出網(wǎng)織紅細(xì)胞的百分比。3、血液分析儀法：和網(wǎng)織細(xì)胞計數(shù)儀相似。返回第60頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【方法學(xué)評價】一、顯微鏡計數(shù)法：1.新亞甲藍(lán)染色液（WHO推薦使用首選方法）特點：染色力強(qiáng)、穩(wěn)定。2..燦爛甲酚藍(lán)染色法特點：歷史長、范圍廣，但易產(chǎn)生沉淀。制片方法:

玻片法：容易使混合血液中的水分蒸發(fā)，染色時間偏短，因此結(jié)果偏低。試管法：容易掌握，重復(fù)性效好，必要時還可以從混合血液中再取標(biāo)本重新涂片復(fù)查，避免再次給被檢者穿刺造成不必要的痛苦，被列為手工法網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)的推薦方法。使用米勒窺盤進(jìn)行計數(shù)：規(guī)范了計算區(qū)域，減少了實驗誤差，使結(jié)果準(zhǔn)確性有所提高。（圖）下一頁第61頁,共88頁，2024年2月25日，星期天米勒窺盤返回網(wǎng)織紅細(xì)胞百分?jǐn)?shù)×100小方格內(nèi)需要計數(shù)紅細(xì)胞數(shù)（達(dá)到CV=10%）所計數(shù)目達(dá)到相當(dāng)于總的紅細(xì)胞數(shù)1～2100090003～550045006～10200180011～20100900第62頁,共88頁，2024年2月25日，星期天2．流式細(xì)胞儀測定法

流式細(xì)胞儀的應(yīng)用，為網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)提供了更先進(jìn)的測試手段。這類儀器采用熒光染色和激光測量的原理，不但能客觀地測量大量網(wǎng)織紅細(xì)胞，而且還能將其分為高熒光強(qiáng)度、中熒光強(qiáng)度、低熒光強(qiáng)度三類，這種分類法對估計化療后骨髓造血功能的恢復(fù)及骨髓移植效果有較重要的意義。具有測量多、避免主觀因素、方法易于標(biāo)準(zhǔn)化等特點，國外廣泛應(yīng)用。返回第63頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【質(zhì)量控制】1.用煌焦油藍(lán)乙醇染液時，應(yīng)待乙醇完全揮發(fā)干后方能加入血液，否則血液可使血液凝固。染色時間一定要充足。2.染色溫度控制在370C為宜。3.試管法測網(wǎng)織紅細(xì)胞染液與血液的比例以1：1為宜，嚴(yán)重貧血時，可適量增加血液的比例，制片不宜太薄太厚。返回第64頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【參考值】相對值：

成人：0.8%～2.0%

新生兒：2%～6%絕對值：成人：（25～75）×109/L返回第65頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【臨床意義】1.反映骨髓的造血功能的一個診斷指標(biāo)。對貧血的鑒別診斷和鑒別診斷有重要參考價值。（1）網(wǎng)織紅細(xì)胞增加：如溶血性貧血。急性失血后5-10天網(wǎng)織紅細(xì)胞達(dá)高峰，2周后恢復(fù)。網(wǎng)織紅細(xì)胞持續(xù)升高提示慢性失血。（2）網(wǎng)織紅細(xì)胞減少：如再障。臨床將貧血病人網(wǎng)織紅細(xì)胞絕對值低于15×109/L，作為急性再障的診斷指標(biāo)。2．評價療效（1）觀察貧血療效：IDA或MA經(jīng)有效治療后，2～3d后Ret開始上升，7～10d達(dá)到最高峰（約10%），2周后逐漸降至正常水平。（2）骨髓移植后監(jiān)測骨髓造血恢復(fù)：移植后第21天，如Ret大于15×109/L，常表示無并發(fā)癥；若骨髓開始恢復(fù)造血功能，首先表現(xiàn)為HFR和MFR的上升，其次為網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)值上升，3．放療和化療的監(jiān)測返回第66頁,共88頁，2024年2月25日，星期天計算練習(xí)1.網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)時,使用Miller氏窺盤,小方格數(shù)紅細(xì)胞111個時計數(shù)網(wǎng)織紅

細(xì)胞數(shù)8個,則此病人的網(wǎng)織紅細(xì)胞數(shù)百分比為多少?返回第67頁,共88頁，2024年2月25日，星期天

七、嗜堿性點彩紅細(xì)胞計數(shù)【概述】【參考值】【臨床意義】返回第68頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【概述】

是某些重金屬中毒時，胞質(zhì)中殘存的嗜堿性物質(zhì)RNA變性沉淀而形成的，用瑞氏染色，可見紅細(xì)胞的粉紅胞質(zhì)中含有粗細(xì)不等的藍(lán)黑色顆粒；如用堿性美藍(lán)染色，則點彩紅細(xì)胞的胞質(zhì)呈淡藍(lán)綠色，而顆粒為深藍(lán)色，色澤鮮明，易于識別。操作時用油鏡按網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)法，計數(shù)1000個紅細(xì)胞中，所見點彩紅細(xì)胞數(shù)，然后除以1000，即為堿性點彩紅細(xì)胞的百分率。（圖）返回第69頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【參考值】≤0.03%返回第70頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【臨床意義】

點彩紅細(xì)胞明顯增多可見于鉛、汞、硝基苯、苯胺等中毒病人。此外，溶血性貧血、巨幼細(xì)胞性貧血、白血病、惡性腫瘤等也可見增多。返回第71頁,共88頁，2024年2月25日，星期天嗜堿性點彩紅細(xì)胞嗜堿性點彩紅細(xì)胞返回第72頁,共88頁，2024年2月25日，星期天

八、紅細(xì)胞沉降率測定【概述】【測定方法及評價】【質(zhì)量控制】【參考值】【臨床意義】返回第73頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【概述】

紅細(xì)胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR）是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度而言，簡稱血沉。在健康人血沉數(shù)值波動于一個較狹窄范圍內(nèi)，在許多病理情況下血沉明顯增快。紅細(xì)胞沉降是多種因素互相作用的結(jié)果，是反映紅細(xì)胞聚集性的一個常用指標(biāo)血沉過程分為三期：

1、緡錢狀紅細(xì)胞形成期（圖），10min2、快速沉降期，40min3、細(xì)胞堆積期返回第74頁,共88頁，2024年2月25日，星期天紅細(xì)胞緡錢狀返回第75頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【測定方法及評價】1、魏氏（Westergren）法：

將一定量的抗凝血置于特制的血沉管中,垂直于血沉架上,

觀察紅細(xì)胞在一定時間內(nèi)沉降的距離,以mm/h報告.

此法為ICSH推薦的血沉測定方法.下一頁第76頁,共88頁，2024年2月25日，星期天影響血沉增快或減慢的主要因素：(1)血漿因素：在正常情況下，紅細(xì)胞膜表現(xiàn)的唾液酸帶有負(fù)電荷形成zeta電位，使紅細(xì)胞互相排斥而保持懸浮穩(wěn)定性，沉降很慢。但病理情況下，血漿纖維蛋白原或球蛋白增多，致使紅細(xì)胞zeta電位降低，彼此易于形成緡錢狀，此種聚集的紅細(xì)胞團(tuán)塊與血液接觸的總面積縮小，受到血漿的阻力減弱而使血沉加快，而白蛋白、糖蛋白等可使血沉減慢。此外血脂與血沉有關(guān)，膽固醇可使血沉加快，而卵磷脂可使血沉減慢。

下一頁第77頁,共88頁，2024年2月25日，星期天（2）紅細(xì)胞因素：①紅細(xì)胞的數(shù)量：數(shù)量↑血沉↓，數(shù)量↓血沉↑②紅細(xì)胞的形態(tài)：

③紅細(xì)胞的聚集狀態(tài)（3）其它因素：

①血沉管的位置：當(dāng)血沉管垂直而立時，紅細(xì)胞所受阻逆力最大。當(dāng)血沉管傾斜時，紅細(xì)胞多沿一側(cè)下降，而血漿在另一側(cè)上升，致使血沉加快。

②溫度：下一頁第78頁,共88頁，2024年2月25日，星期天2．血沉儀法：

一種是魏氏法自動血沉測定儀或類似儀器自動記錄后轉(zhuǎn)換成魏氏法測定值；

另一種是zeta紅細(xì)胞比值測定，前者其取血、抗凝、裝入血沉管等步驟均與常規(guī)操作相同，只是將血沉管垂直立于具有自動計時裝置的血沉架之后，可于30，60，120分鐘時分別自動記錄其結(jié)果。儀器按照傳統(tǒng)魏氏法的原理，將計算機(jī)和光電技術(shù)巧妙地結(jié)合在一起，動態(tài)地分析血細(xì)胞沉降的過程?？焖?、重復(fù)性好、不受環(huán)境溫度的影響。返回第79頁,共88頁，2024年2月25日，星期天【質(zhì)量控制】1.抗凝劑：使用分析純枸椽酸鈉抗凝劑，配制時濃度應(yīng)準(zhǔn)確，配成后液體不得出現(xiàn)渾濁或沉淀，保存期為2周?？鼓齽┡c血液比例為1:4，控制在±5%以內(nèi)。2.血沉裝置：血沉管清潔、干燥，內(nèi)徑要標(biāo)準(zhǔn)，放置要垂直，不得傾斜。3.血液標(biāo)本：不得有溶血和凝血，采血應(yīng)在3