農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座

農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第1頁(yè)目標(biāo)要求經(jīng)過本章學(xué)習(xí)，目標(biāo)是使學(xué)生掌握農(nóng)藥殘留定義、分類、起源；農(nóng)藥殘留毒性；農(nóng)藥殘留分析目標(biāo)；農(nóng)藥殘留各種分析方法等相關(guān)知識(shí)。學(xué)習(xí)關(guān)鍵點(diǎn)普通掌握：農(nóng)藥殘留起源；農(nóng)藥殘留定義、分類；農(nóng)藥殘留毒性等重點(diǎn)掌握：農(nóng)藥殘留前處理及分析檢測(cè)方法。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第2頁(yè)一、農(nóng)藥和農(nóng)藥殘留1、農(nóng)藥廣義：農(nóng)業(yè)上使用化學(xué)品狹義：主要是指用于預(yù)防、毀滅或控制危害農(nóng)、林、牧、漁業(yè)生產(chǎn)有害生物（害蟲、害螨、線蟲、病原菌、雜草及鼠害等）和有目標(biāo)地調(diào)整植物、昆蟲生長(zhǎng)化學(xué)藥品及生物藥品。第一節(jié)概論農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第3頁(yè)2、農(nóng)藥殘留指農(nóng)藥使用后殘余在生物體、食品（農(nóng)副產(chǎn)品）和環(huán)境中微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)總稱。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第4頁(yè)3、農(nóng)藥殘留限量世界衛(wèi)生組織和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（WHO/FAO）定義為：按照良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范，直接或間接使用農(nóng)藥后，在食品和飼料中形成農(nóng)藥殘留物最大濃度。（表示為mg/kg或μg/kg）在世界貿(mào)易一體化今天，農(nóng)藥最高殘留限量也成為各貿(mào)易國(guó)之間主要技術(shù)壁壘。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第5頁(yè)最大殘留限量是按各地居民膳食習(xí)慣，每日食用食品種類和數(shù)量計(jì)算，其量不超出該農(nóng)藥日許量。計(jì)算公式：MRL=[ADI×平均體重(kg)÷(人每日食物總量(kg)×食物系數(shù)(%)]每日允許攝入量(acceptabledailyintake,ADI)是指人或動(dòng)物每日攝入某種化學(xué)物質(zhì)（食品添加劑、農(nóng)藥等），對(duì)健康無任何已知不良效應(yīng)劑量。以相當(dāng)人或動(dòng)物千克體重毫克數(shù)表示,單位普通是mg/Kg,或個(gè)g/Kg。比如某化學(xué)物質(zhì)對(duì)人體ADI值為5mg/Kg，按體重50Kg計(jì)算，則每日攝入該化學(xué)物質(zhì)在250mg以內(nèi)是安全。ADI值越高，說明該化學(xué)物質(zhì)毒性越低。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第6頁(yè)×：為不得檢出

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第7頁(yè)×：為不得檢出

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第8頁(yè)二、農(nóng)藥分類1、按農(nóng)藥起源分類：可分為礦物源農(nóng)藥、生物源農(nóng)藥與有機(jī)合成農(nóng)藥礦物源農(nóng)藥：有是無機(jī)礦物原料經(jīng)加工，有是用礦物油加工成乳劑。ex：砷制劑、氟制劑、銅制劑與硫制劑生物源農(nóng)藥：主要有植物源農(nóng)藥和微生物源農(nóng)藥。除蟲菊素、阿維菌素、蘇云金桿菌有機(jī)合成農(nóng)藥：占農(nóng)藥品種絕大部分，它們是經(jīng)過化學(xué)工業(yè)，用有機(jī)合成工藝生產(chǎn)出來。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第9頁(yè)2、按防治對(duì)象分類

殺蟲劑、殺螨劑、殺菌劑、殺線蟲劑、除草劑、殺鼠劑、殺軟體動(dòng)物劑、植物生長(zhǎng)調(diào)整劑等。

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第10頁(yè)3、按化學(xué)成份分類

可分為有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類等。常見有機(jī)氯類農(nóng)藥：666、DDT、狄氏劑、艾氏劑、毒殺芬、氯丹、七氯、五氯酚鈉等含有高度物理、化學(xué)、生物學(xué)穩(wěn)定性，在自然界不易分解，高殘留。脂溶性強(qiáng)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第11頁(yè)常見有機(jī)磷農(nóng)藥：對(duì)硫磷（1605.）、內(nèi)吸磷（1509）、甲拌磷（3911）、馬拉硫磷（4049）、樂果、敵百蟲、敵敵畏（DDVP）、殺螟松屬于磷酸酯或硫代磷酸酯類化合物。大多為無色或黃色油狀液體，部分為低熔點(diǎn)固體如敵百蟲、樂果等。可溶于有機(jī)溶劑，性質(zhì)不穩(wěn)定，易光解、堿解和水解。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第12頁(yè)氨基甲酸酯類：分為五大類：①萘基氨基甲酸酯類，如西維因；②苯基氨基甲酸酯類，如葉蟬散；③氨基甲酸肟酯類，如涕滅威；④雜環(huán)甲基氨基甲酸酯類，如呋喃丹；⑤雜環(huán)二甲基氨基甲酸酯類，如異索威。除少數(shù)品種如呋喃丹等毒性較高外，大多數(shù)屬中、低毒性。

擬除蟲菊酯類：一類仿生合成殺蟲劑，是改變天然除蟲菊酯化學(xué)結(jié)構(gòu)衍生合成酯類。多達(dá)19種，氰戊菊酯、甲氰菊酯、氯氰菊酯等。擬除蟲菊酯是一類能防治各種害蟲廣譜殺蟲劑，其殺蟲毒力比老一代殺蟲劑如有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類提升10～100倍。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第13頁(yè)4、按作用方式分類1、殺蟲劑胃毒劑觸殺劑熏蒸劑內(nèi)吸劑

2、殺菌劑保護(hù)作用治療劑鏟除劑3、除草劑觸殺性除草劑內(nèi)吸性除草劑農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第14頁(yè)三、農(nóng)藥殘留起源

直接污染間接污染由食物鏈和生物富集作用造成污染意外事故造成食品污染農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第15頁(yè)年2月9日，第二屆名古屋中國(guó)春節(jié)祭在當(dāng)?shù)鼐梦荽笸ü珗@盛大開幕，專程從東京趕來中國(guó)駐日大使崔天凱在春節(jié)祭上品嘗了展臺(tái)上“老三餃子”。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第16頁(yè)四、農(nóng)藥殘留危害農(nóng)藥殘留對(duì)健康影響①對(duì)神經(jīng)影響；②致癌作用；③對(duì)肝臟影響；④誘發(fā)突變；⑤慢性中毒。藥害影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)農(nóng)藥殘留影響進(jìn)出口貿(mào)易農(nóng)藥殘留污染環(huán)境、破壞生態(tài)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第17頁(yè)五、農(nóng)藥殘留樣品采集1、樣品種類主觀樣品為研究農(nóng)藥殘留量與各種原因關(guān)系，從設(shè)計(jì)試驗(yàn)區(qū)域內(nèi)采集樣品?？陀^樣品監(jiān)測(cè)樣品和執(zhí)法樣品，測(cè)定農(nóng)藥殘留種類是未知或施藥背景不清楚樣品。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第18頁(yè)1、試驗(yàn)室樣品從群體采集送到殘留分析試驗(yàn)室樣品。2、檢測(cè)樣品試驗(yàn)室經(jīng)過縮分減量或經(jīng)過精制后樣品。3、檢測(cè)樣份從檢測(cè)樣品中稱取用于分析樣品。4、檢測(cè)溶液經(jīng)過提取、凈化后進(jìn)入待測(cè)狀態(tài)。知識(shí)窗農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第19頁(yè)2、取樣方法監(jiān)測(cè)調(diào)查取樣：隨機(jī)、概率、分布水平執(zhí)法取樣：強(qiáng)制性、超標(biāo)是否3、商品取樣量要求

①小或輕產(chǎn)品→1.0~1.5Kg②中等大小產(chǎn)品→2.0~2.5Kg③大產(chǎn)品→4.0~5.0Kg④肉、禽、魚→1.0~1.5Kg⑤谷物和制品→0.5~1.0Kg農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第20頁(yè)4、不一樣品采集要求

①根莖類蔬菜→采集整個(gè)果實(shí)②葉類蔬菜→除去腐爛和枯萎部分③豆類→整個(gè)果實(shí)④果類蔬菜→去除莖部⑤谷物→整個(gè)籽粒⑥肉類→整體農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第21頁(yè)5、樣品包裝、統(tǒng)計(jì)和貯存標(biāo)簽（2個(gè)）編號(hào)：樣品名稱：采樣時(shí)間：地點(diǎn)：要求：溫度濕度光照單獨(dú)存放農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第22頁(yè)6、樣品預(yù)處理①粉狀物②谷物③小體積水果和蔬菜④大致積水果和蔬菜⑤液體樣品⑥土壤農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第23頁(yè)對(duì)含水量較高樣品預(yù)處理方法

①肉：放入鉸肉機(jī)中鉸勻②水果蔬菜等，放入高速組織搗碎器攪勻③蛋類食品，去殼后用打蛋器打勻。④對(duì)于包裝食品，取出各種調(diào)味品后，再制備均勻。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第24頁(yè)第二節(jié)樣品前處理技術(shù)

樣品前處理：采樣技術(shù)和樣品制備技術(shù)。樣品處理標(biāo)準(zhǔn)：①制備過程中防止組分發(fā)生化學(xué)改變；②要預(yù)防和防止欲測(cè)定組分沾污；③盡可能降低無關(guān)化合物引入制備過程；④盡可能簡(jiǎn)單易行。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第25頁(yè)樣品制備原理

利用殘留農(nóng)藥與樣品基質(zhì)物理化學(xué)差異，使其從檢測(cè)系統(tǒng)有干擾作用樣品基質(zhì)中提取分離出來（相同相溶）。

極性-溶解度、分配系數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第26頁(yè)分子極性和水溶性1、極性提取、凈化條件依據(jù)。相同相溶原理：使用與農(nóng)藥極性相近溶劑為提取劑，使殘留農(nóng)藥在溶劑中到達(dá)最大溶解度。極性判斷：電負(fù)性、雙鍵、對(duì)稱性表示：氧化鋁吸附劑上洗脫供試溶質(zhì)能力農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第27頁(yè)2、水溶性農(nóng)藥極性決定其在溶劑中溶解性。影響溶解性其它原因①溫度：高→溶解性高②含鹽量：鹽會(huì)降低有機(jī)物溶解度。③pH：影響可解離農(nóng)藥溶解度農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第28頁(yè)分配定律：在一對(duì)互不相溶兩相溶劑系統(tǒng)中，因?yàn)槲镔|(zhì)在非極性相和極性相中溶解度不一樣，當(dāng)?shù)竭_(dá)平衡時(shí)，物質(zhì)在該兩相中濃度比在一定條件下為常數(shù)定律。KD

（分配系數(shù)）=[A]非極性相

/[B]極性相

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第29頁(yè)揮發(fā)性：液態(tài)或固態(tài)物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)闅鈶B(tài)物理性能。揮發(fā)性決定：物質(zhì)在氣-液或氣-固兩相中分布。分為沸點(diǎn)和蒸汽壓。蒸汽壓：固態(tài)、液態(tài)→氣態(tài)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第30頁(yè)樣品制備（提取）提取:是指經(jīng)過溶解、吸附（吸著）或揮發(fā)等方式將樣品中殘留農(nóng)藥分離出來操作步驟，也叫萃取。防止：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、高溫、猛烈操作極性-溶解度、分配系數(shù)；揮發(fā)性-蒸汽壓。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第31頁(yè)慣用樣品制備技術(shù)溶劑萃取蒸餾技術(shù)固相萃取微波萃取衍生化超臨界萃取樣品制備農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第32頁(yè)一、溶劑萃取技術(shù)溶劑萃取：溶解性差異，選取對(duì)殘留農(nóng)藥溶解度大溶劑，將分析物從樣品基質(zhì)中提取出來方法。關(guān)鍵：選擇適當(dāng)提取溶劑。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第33頁(yè)1、分類液-液萃取液-固萃取液-氣萃取（溶液吸收）萃取對(duì)象

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第34頁(yè)2、液-液萃取兩種不相容液體水溶劑：親水化合物進(jìn)入到水相中。有機(jī)溶劑：疏水性化合物將進(jìn)入有機(jī)相中程度就越大。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第35頁(yè)液-液萃取原理利用樣品中不一樣組分分配在兩種不混溶溶劑中溶解度或分配比不一樣來到達(dá)分離、提取或純化目標(biāo)。有機(jī)相水相農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第36頁(yè)Nernst分配定律（1）KD=co／caq有機(jī)物質(zhì)在有機(jī)溶劑中溶解度普通比在水相中溶解度大，分配系數(shù)越大，水相中有機(jī)物可被萃取。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第37頁(yè)Nernst分配定律（2）式中：m0是被萃取溶液中溶質(zhì)（X）總含量，

mn是經(jīng)過n次萃取后，X在溶劑中剩下量，V是被萃取溶液體積，

VB是每次萃取所用溶劑B體積（均為VB），

n是等量萃取次數(shù)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第38頁(yè)液-液萃取步驟（1）溶劑體積為樣品溶液30％～35％。振蕩幾次打開活塞Gas蒸氣逸出（也叫放氣）農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第39頁(yè)液-液萃取步驟（2）絮狀物（乳化）有機(jī)相水相水相和絮狀物靜置分層激烈振搖1～2

min農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第40頁(yè)液-液萃取步驟（3）有機(jī)相3～5次農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第41頁(yè)產(chǎn)生乳化原因因?yàn)橐?液萃取過程中猛烈振動(dòng)，經(jīng)常發(fā)生乳化現(xiàn)象，尤其是那些含脂肪樣品。原因：體系性質(zhì)、離子濃度、有機(jī)相粘度、萃取溫度、pH等。溫度越低，有機(jī)相粘度越大，離子濃度越高越易產(chǎn)生乳化。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第42頁(yè)破乳慣用方法經(jīng)過改變KD;改變?nèi)軇┗蚧瘜W(xué)平衡作用添加劑;緩沖劑調(diào)整pH;鹽調(diào)整離子強(qiáng)度等。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第43頁(yè)①離心法破乳，r/min，2min；②無水硫酸鈉研磨法破乳；③蒸干法，蒸干后，再用有機(jī)溶劑萃取。不適用揮發(fā)性物質(zhì)萃取。A、高度乳化（即全部乳化）農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第44頁(yè)B、中度乳化（乳化率達(dá)50％）①電解質(zhì)破乳。加入無機(jī)鹽，經(jīng)過提升體系中水相比重使兩相分層；破乳率與加入電解質(zhì)量成正比。②l

mol/L鹽酸；③無水乙醇溶解兩相液滴；④無水硫酸鈉漏斗過濾。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第45頁(yè)C、輕度乳化（兩相間形成一薄乳化層）①玻璃棒攪動(dòng)，減弱吸附作用；②靜置一定時(shí)間后，可自然分層。因?yàn)槿闈嵋菏且后w雜質(zhì)以微小珠滴散布在液體溶劑中一個(gè)分散體系，是熱力學(xué)不穩(wěn)定體系。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第46頁(yè)3、液-固萃取固體→萃取溶劑→振蕩（加熱）→離心/過濾→分離→欲萃取組分進(jìn)入溶劑。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第47頁(yè)萃取過程

溶解和擴(kuò)散過程

分子擴(kuò)散：固體樣品表面/溶劑接解處影響原因：溫度、分子大小和液體介質(zhì)黏度。對(duì)流擴(kuò)散：遠(yuǎn)離固體樣品表面處擴(kuò)散影響原因：流動(dòng)液體速度和狀態(tài)，液體黏度、樣品表面性質(zhì)等。②①農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第48頁(yè)

索氏萃取裝置和K-D濃縮器萃取裝置農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第49頁(yè)4、萃取劑選擇1、萃取劑選擇性（極性）2、穩(wěn)定性、毒性3、沸點(diǎn)：40~80℃者為宜

4、萃取劑回收難易與經(jīng)濟(jì)性5、色譜檢測(cè)器響應(yīng)

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第50頁(yè)二、固相萃取(SPE)SPE：SolidPhaseExtraction是一個(gè)液相色譜分離，利用固體吸附劑將液體樣品中目標(biāo)化合物與干擾化合物分離，到達(dá)分離和富集目標(biāo)化合物目標(biāo)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第51頁(yè)慢中等快淋洗液農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第52頁(yè)1、固相萃取模式反相固相萃取正相固相萃取離子交換固相萃?、訇庪x子交換②陽(yáng)離子交換農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第53頁(yè)A反相固相萃取流動(dòng)相：極性（水溶液）或中等極性固定相：非極性。分離對(duì)象：中等到非極性物質(zhì)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第54頁(yè)分析物中CH鍵+硅膠表面官能團(tuán)→吸附→極性溶液中有機(jī)分析物→保留在SPE。用非極性溶劑解吸吸附在固定相中目標(biāo)物質(zhì)。反相固相萃取原理農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第55頁(yè)慣用反相固相萃取柱LC-18、LC-8：標(biāo)準(zhǔn)單鍵合硅膠ENVI-18、ENVI-8：聚合鍵合類填料ENVI-ChromP：苯乙烯：疏水

ENVI-Carb：含碳

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第56頁(yè)B正相固相萃取流動(dòng)相：非極性、中等極性固定相：極性。分析物質(zhì)：極性、中等極性、非極性農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第57頁(yè)正相固相萃取原理

保留取決于分析物極性官能團(tuán)與吸附劑表面極性官能團(tuán)之間相互作用。用比樣品本身更極性溶劑洗脫吸附分析物質(zhì)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第58頁(yè)①極性官能團(tuán)鍵合硅膠

LC-CN，LC-NH2，

LC-Diol②極性吸附物質(zhì)

LC-Si，LC-Florisil，

ENVI-Florisil，LC-Alumina慣用正相固相萃取柱農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第59頁(yè)知識(shí)窗流動(dòng)相①②農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第60頁(yè)C.離子交換固相萃取適合用于帶有電荷化合物（水溶液、有機(jī)溶液）。原理：靜電吸引，化合物上帶電荷基團(tuán)與鍵合硅膠上帶電荷基團(tuán)之間吸引。分為：陰離子交換和陽(yáng)離子交換。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第61頁(yè)陰離子（負(fù)電荷）交換LC-SAX、LC-NH2：脂肪族季銨類鹽+硅膠農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第62頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第63頁(yè)陽(yáng)離子交換LC-SCX：磺酸基；LC-WCX：羧酸基團(tuán)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第64頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第65頁(yè)2、溶劑極性影響①目標(biāo)化合物在極性/非極性溶劑中溶解度，這主要包括淋洗液選擇。②目標(biāo)化合物有沒有可能離子化（可用調(diào)整pH值實(shí)現(xiàn)離子化）。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第66頁(yè)溶劑極性影響③目標(biāo)化合物有沒有可能與吸附劑形成共價(jià)鍵。④在吸附劑上吸附點(diǎn)競(jìng)爭(zhēng)程度，關(guān)系到能否很好分離。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第67頁(yè)3、固相萃取裝置及操作程序固相萃取裝置篩板篩板篩板農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第68頁(yè)

固相萃取裝置農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第69頁(yè)

固相萃取裝置農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第70頁(yè)操作程序（1）活化吸附劑

萃取之前要用適當(dāng)溶劑淋洗小柱，以使吸附劑保持濕潤(rùn)，能夠吸附目標(biāo)化合物或干擾化合物。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第71頁(yè)（2）上樣（吸附）樣品倒入活化后固相萃取小柱，然后利用抽真空，加壓或離心方法使樣品進(jìn)入吸附劑。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第72頁(yè)

（3）洗滌（去除雜質(zhì)）在樣品進(jìn)入吸附劑，目標(biāo)化合物被吸附后，可先用較弱溶劑將弱保留干擾化合物洗掉。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第73頁(yè)（4）洗脫和搜集再用較強(qiáng)溶劑將目標(biāo)化合物洗脫下來，加以搜集。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第74頁(yè)活化吸附劑進(jìn)樣洗滌洗脫我來說！農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第75頁(yè)4、固相微萃取

SPME不是將待測(cè)物質(zhì)全部分離出來，經(jīng)過在樣品與固相涂層間平衡來到達(dá)分離。方法：玻璃纖維浸入樣品中→殘留農(nóng)藥→擴(kuò)散→吸附→平衡→取出玻璃纖維→洗脫→分析。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第76頁(yè)

固相微萃取裝置

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第77頁(yè)

固相微萃取裝置

關(guān)鍵：石英纖維上涂吸附劑標(biāo)準(zhǔn)：目標(biāo)化合物是非極性時(shí)選擇非極性涂層；目標(biāo)化合物是極性時(shí)選擇極性涂層。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第78頁(yè)

使用方法農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第79頁(yè)三、超臨界流體萃取技術(shù)超臨界流體萃取技術(shù)是以超臨界狀態(tài)下流體作為溶劑，利用該狀態(tài)下流體所含有高滲透能力和高溶解能力萃取分離混合物過程。

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第80頁(yè)超臨界流體物體處于其臨界溫度和臨界壓力以上時(shí)狀態(tài)。氣體：粘稠度、表面張力低，溶解能力強(qiáng)，萃取功效高。壓力↑，溶解能力↑。液體：體積小。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第81頁(yè)流體名稱分子式臨界壓力(bar)臨界溫度(℃)臨界密度(g/cm3)二氧化碳CO272.931.20.433水H2O217.6374.20.332氨NH3112.5132.40.235乙烷C2H648.132.20.203氧化二氮N2O71.736.50.450農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第82頁(yè)⑴在35～40℃下提取⑵潔凈提取方法⑶CO2是一個(gè)不活潑氣體。⑷循環(huán)使用，降低成本。⑸參數(shù)能夠調(diào)整特點(diǎn)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第83頁(yè)流動(dòng)相農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第84頁(yè)四、微波萃取技術(shù)微波金屬水分農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第85頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第86頁(yè)吸收微波、反射微波、透過微波農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第87頁(yè)頻率：300—300000MHz電磁波。穿透：玻璃、塑料、陶瓷等絕緣體。當(dāng)微波作用于水和酸性物質(zhì)時(shí)，將被極性分子所吸收，因而物質(zhì)很快被加熱。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第88頁(yè)吸收微波→細(xì)胞內(nèi)部溫度↑，→細(xì)胞內(nèi)部壓力超出細(xì)胞壁膨脹承受能力→細(xì)胞破裂→有效成份自由流出。微波所產(chǎn)生電磁場(chǎng)加速被萃取部分成份向萃取溶劑界面擴(kuò)散速率農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第89頁(yè)影響原因㈠萃取溫度影響㈡萃取溶劑影響㈢樣品杯：聚四氟乙烯農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第90頁(yè)微波萃取被譽(yù)為“綠色分析化學(xué)”。是因?yàn)槲⒉ㄝ腿≡噭┯昧可伲?jié)能、省時(shí)，污染小。使用更少溶劑，更加快時(shí)間，更加好回收率，處理批量大，萃取效率高。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第91頁(yè)五、超聲波輔助萃取能量→外部向內(nèi)部→傳遞。超聲波使溶液形成氣泡（空化效應(yīng)）→爆裂→溫度和壓力↑，→增強(qiáng)化學(xué)反應(yīng)能力。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第92頁(yè)優(yōu)點(diǎn)：價(jià)廉快速，簡(jiǎn)便安全，批量處理樣品。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第93頁(yè)六、衍生化技術(shù)化學(xué)反應(yīng)→定量生成→適于分析。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第94頁(yè)1、衍生化目標(biāo)①靈敏度與選擇性②改進(jìn)色譜分離：③理化穩(wěn)定性農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第95頁(yè)2、分類柱前衍生化：為了分離柱后衍生化：為了檢測(cè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第96頁(yè)3、氣相色譜衍生化（1）硅烷化衍生化方法（2）酯化衍生化方法（3）鹵化衍生化方法（4）酚化衍生化方法方法農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第97頁(yè)（1）硅烷化衍生化方法利用醇、酚、酸、胺等與硅烷化試劑反應(yīng)，形成揮發(fā)性硅烷衍生物R3Si—X+H—R`R3Si—R`+H—X農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第98頁(yè)（2）酯化衍生化方法大多數(shù)有機(jī)酸揮發(fā)性、熱穩(wěn)定性差。在GC分析之前衍生為對(duì)應(yīng)酯。①甲醇法②重氮甲烷法③三氟乙酸配法農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第99頁(yè)①甲醇法甲醇法有機(jī)酸與甲醇在催化劑存在下加熱，能夠發(fā)生酯化反應(yīng)，生成有機(jī)酸甲酯RCOOH+CH3OH催化劑RCOOCH3+H2O△農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第100頁(yè)②重氮甲烷法與有機(jī)酸反應(yīng)，生成有機(jī)酸甲酯，重氮甲烷不穩(wěn)定，有爆炸性，有毒。RCOOH+CH2N2RCOOCH3+N2農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第101頁(yè)（3）鹵化衍生化方法引入鹵原子→ECD檢測(cè)器→也改進(jìn)揮發(fā)性和穩(wěn)定性。

鹵素作用是加成或取代

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第102頁(yè)4、液相色譜衍生化1.紫外衍生化反應(yīng)2．熒光衍生化反應(yīng)3．電化學(xué)衍生化反應(yīng)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第103頁(yè)（1）紫外衍生化反應(yīng)苯甲酰氯+胺、醇、酚→苯甲酸酯類衍生物（200-360ｎｍ）

苯甲?；磻?yīng)

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第104頁(yè)（2）熒光衍生化反應(yīng)在目標(biāo)化合物上接上能發(fā)出熒光生色基團(tuán)，如熒光素。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第105頁(yè)5、制備衍生物反應(yīng)罐瓶農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第106頁(yè)農(nóng)藥殘留檢測(cè)是微量或超微量分析，普通可分為化學(xué)檢測(cè)、生化檢測(cè)和生物檢測(cè)。當(dāng)前使用較多有儀器分析法、免疫分析法、生物傳感器法、活體檢測(cè)法、酶抑制法等。第三節(jié)農(nóng)藥殘留檢測(cè)慣用技術(shù)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第107頁(yè)1、儀器分析農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第108頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第109頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第110頁(yè)凡是沸點(diǎn)大約在500℃，分子量在400以下農(nóng)藥，標(biāo)準(zhǔn)上都能夠用氣相色譜法分離和分析，當(dāng)前80％以上農(nóng)藥能夠用它檢測(cè)。我國(guó)農(nóng)藥檢測(cè)現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)多采取氣相色譜法。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第111頁(yè)②高效液相色譜法（HPLC）適合于非揮發(fā)性、大分子、強(qiáng)極性和熱穩(wěn)定性差農(nóng)藥分離分析。。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第112頁(yè)高效液相色譜儀基本裝置流動(dòng)相進(jìn)樣閥注入樣品液色譜柱檢測(cè)器色譜處理機(jī)高壓泵流出液農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第113頁(yè)③薄層色譜又叫薄板層析是以涂布于支持板上支持物作為固定相，以適當(dāng)溶劑為流動(dòng)相，對(duì)混合樣品進(jìn)行分離、判定和定量、定性一個(gè)層析分離技術(shù)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第114頁(yè)④氣相色譜－質(zhì)譜連用⑤二級(jí)串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS-MS）聯(lián)用⑥液相色譜－質(zhì)譜連用⑦超臨界色譜技術(shù)⑧高效毛細(xì)管電泳⑨毛細(xì)管區(qū)帶電泳法⑩毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第115頁(yè)2、免疫分析法放射免疫法：是利用同位素標(biāo)識(shí)方法檢測(cè)。酶免疫法：是將抗原、抗體特異性免疫反應(yīng)和酶高效催化作用有機(jī)結(jié)合起來一個(gè)免疫分析方法。熒光免疫法：是利用熒光素標(biāo)識(shí)待測(cè)農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第116頁(yè)3、酶抑制法是將酶加入待測(cè)溶液中，依據(jù)酶不一樣活性，用分光光度計(jì)測(cè)量吸光值大小，計(jì)算農(nóng)藥殘留高低。4、免疫親和色譜其利用抗原－抗體反應(yīng)專一性，使分離、凈化和濃縮同時(shí)進(jìn)行，一步柱色譜就可使復(fù)雜樣品提取液中目標(biāo)組分得到高純度與富集。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第117頁(yè)5、生物傳感器法生物傳感器通常是指由一個(gè)分子識(shí)別元件（生物敏感部件）與信號(hào)轉(zhuǎn)換器緊密配合，對(duì)特定種類化合物或生物活性物質(zhì)含有選擇和可逆響應(yīng)分析工具。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第118頁(yè)分子識(shí)別元件：酶、抗體、受體、細(xì)胞及組織器官等信號(hào)轉(zhuǎn)換器：電極、半導(dǎo)體、光導(dǎo)纖維、壓電晶體、表面聲波、熱敏電阻等生物傳感器農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第119頁(yè)（1）酶生物傳感器：（2）免疫生物傳感器：利用抗體和抗原之間免疫化學(xué)反應(yīng)來制作生物傳感器。（3）微生物傳感器

：利用活微生物代謝功效檢測(cè)污染物農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第120頁(yè)換能器（Transducer）感受器（Receptor）測(cè)量信號(hào)（MeasurableSignal）=分析物（Analyte）溶液（Solution）選擇性膜（Thinselectivemembrane）識(shí)別元件（RECOGNITION）生物傳感器工作機(jī)理農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第121頁(yè)6、流動(dòng)注射免疫分析法7、活體檢測(cè)法，8、細(xì)菌發(fā)光細(xì)菌生物發(fā)光反應(yīng)是由分子氧作用，胞內(nèi)熒光酶催化，將還原態(tài)黃素單核苷酸(FMNH2)及長(zhǎng)鏈脂肪醛氧化為FMN及長(zhǎng)鏈脂肪酸，同時(shí)釋放出最大發(fā)光強(qiáng)度在波長(zhǎng)為450-490nm處藍(lán)綠光。

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第122頁(yè)缺點(diǎn)：細(xì)胞發(fā)光強(qiáng)度本質(zhì)差異較大檢測(cè)期間發(fā)光自然改變幅度較寬，重現(xiàn)性不佳，誤差較大等。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第123頁(yè)因?yàn)檗r(nóng)藥品種多、化學(xué)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)各異、待測(cè)組分復(fù)雜，尤其是近年來，高效、低毒、低殘留農(nóng)藥品種不停涌現(xiàn)，在農(nóng)產(chǎn)品和環(huán)境中殘留量很低，給農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)提出了更高要求。

農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)朝著快速、方便、靈敏可靠方向發(fā)展。

生物技術(shù)與當(dāng)代理化分析伎倆相結(jié)合。

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第124頁(yè)第四節(jié)各種農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法因?yàn)檗r(nóng)藥分析目標(biāo)各不相同，所以必須采取適合于所要處理問題詳細(xì)分析方法。如：特定活性成份殘留檢測(cè)或同一批次產(chǎn)品中任一農(nóng)藥殘留水平。多殘留分析方法用來檢測(cè)和測(cè)定系列食品中各種農(nóng)藥殘留，可對(duì)各種農(nóng)藥殘留量進(jìn)行評(píng)定以確定其是否處于或低于要求允許殘留水平；單一殘留分析方法是用于測(cè)定單一殘留物，而且測(cè)定殘留物主要代謝物和轉(zhuǎn)化產(chǎn)物半定量和定性方法（篩選法）能夠估算樣品中某種農(nóng)藥殘留水平。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第125頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第126頁(yè)一、食品中有機(jī)磷類農(nóng)殘檢測(cè)方法有機(jī)磷農(nóng)藥是指在組成上含有磷有機(jī)殺蟲劑、殺菌劑等。主要類型有：磷酸酯型，如久效磷、磷胺等二硫代磷酸酯型，如馬拉硫磷、樂果、甲拌磷、亞胺硫磷硫酮磷酸酯型，如對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、內(nèi)吸磷、殺螟松硫醇磷酸酯型，如氧化樂果、伏地松磷酰胺型，如甲胺磷、乙酰甲胺磷膦酸酯型，如敵百蟲、苯脯磷農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第127頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第128頁(yè)有機(jī)磷農(nóng)藥種類很多，按毒性分為高毒（劇毒）、中毒、低毒三類；溶解性：多數(shù)難溶于水，可溶于有機(jī)溶劑水解性：在堿性介質(zhì)中易水解氧化性：硫代磷酸酯類在溴、紫外線等作用下其中S可被O取代。酶抑制活性：可抑制羧酸酯酶、膽堿酯酶活性農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第129頁(yè)有機(jī)磷農(nóng)藥限量標(biāo)準(zhǔn)號(hào)農(nóng)藥名稱糧食蔬菜、水果食用植物油GB5127樂果1.00.1敵敵畏0.2對(duì)硫磷0.1不得檢出馬拉硫磷3GB4788甲拌磷0.02不得檢出不得檢出殺螟硫磷50.5不得檢出倍硫磷0.050.050.01GB14868辛硫磷0.050.05GB14872乙酰甲胺磷0.2蔬菜0.2水果0.5農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第130頁(yè)續(xù)上表標(biāo)準(zhǔn)號(hào)農(nóng)藥名稱糧食蔬菜、水果食用植物油GB14873甲胺硫0.1GB14874甲基對(duì)硫磷0.10.1GB14928.1地亞農(nóng)0.10.5GB14928.3甲基嘧啶硫磷5GB14928.8水胺硫磷0.10柑橘0.02GB14928.10喹硫磷大米0.2蔬菜0.2水果0.5GB14969克線磷甘蔗0.005柑橘0.005農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第131頁(yè)（一）國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第132頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第133頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第134頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第135頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第136頁(yè)農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第137頁(yè)試驗(yàn)步驟1、樣品處理選取有代表性蔬菜樣品，去掉不可食部分后稱取蔬菜試樣，沖洗掉表面泥土，剪成1cm左右碎片。取樣品1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5mL緩沖液，振蕩1~2min，倒出提取液，靜置3~5min，待用。2、對(duì)照溶液測(cè)試先于試管中加入2.5mL緩沖液，再加入0.1mL酶液、0.1mL顯色劑。搖勻后于37℃放置15min以上（每批樣品控制時(shí)間應(yīng)一致）。加入0.1mL低物搖勻，此時(shí)檢液開始顯色反應(yīng)，應(yīng)馬上放入比色皿中，統(tǒng)計(jì)反應(yīng)3min吸光度改變值ΔA0。3、樣品溶液測(cè)定先于試管中加入2.5mL樣品提取液，其它操作與對(duì)照測(cè)定相同，統(tǒng)計(jì)反應(yīng)3min吸光度改變值ΔAt。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第138頁(yè)結(jié)果計(jì)算

抑制率（%）=式中ΔA0——對(duì)照液反應(yīng)3min吸光度改變值；

ΔAt——樣品溶液反應(yīng)3min吸光度改變值。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第139頁(yè)酶抑制率法對(duì)部分農(nóng)藥檢出限農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第140頁(yè)注意蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響次生物質(zhì)，輕易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí)，可采取整棵蔬菜萃取或采取表面測(cè)定法。對(duì)一些含葉綠素較高蔬菜，也可采取整株蔬菜萃取方法，降低色素干擾。當(dāng)溫度條件低于37度，酶反應(yīng)速度隨之放慢，加入酶液和顯色劑后放置反應(yīng)時(shí)間應(yīng)對(duì)應(yīng)延長(zhǎng)，延長(zhǎng)時(shí)間確實(shí)定，應(yīng)以膽堿酯酶空白對(duì)照測(cè)試3min吸光度改變差值在0.3以上，即可往下操作。注意樣品放置時(shí)間應(yīng)與空白對(duì)照溶液放置時(shí)間一致才有可比性。膽堿酯酶空白對(duì)照測(cè)試3min吸光度改變差值在0.3以下原因：一是酶活性不夠，二是溫度太低。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第141頁(yè)（二）免疫分析技術(shù)酶聯(lián)免疫分析技術(shù)①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不一樣步驟與固相載體表面抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌方法使固相載體上形成抗原抗體復(fù)合物與其它物質(zhì)分開，最終結(jié)合在固相載體上酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)量成一定百分比。加入酶反應(yīng)底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)量直接相關(guān)，故可依據(jù)顏色反應(yīng)深淺刊物定性或定量分析。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第142頁(yè)ELISA可用于測(cè)定抗原，也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要試劑：①固相抗原或抗體，②酶標(biāo)識(shí)抗原或抗體，③酶作用底物。依據(jù)試劑起源和標(biāo)本性狀以及檢測(cè)具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不一樣類型檢測(cè)方法。雙抗體夾心法

雙抗原夾心法測(cè)抗體

雙位點(diǎn)一步法

間接法測(cè)抗體

競(jìng)爭(zhēng)法捕捉法測(cè)IgM抗體

應(yīng)用親和素和生物素ELISA

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第143頁(yè)對(duì)硫磷酶聯(lián)免疫分析有機(jī)磷農(nóng)藥屬于小分子物質(zhì)，必須與大分子聯(lián)結(jié)，才能作為免疫原。免疫抗原合成濃鹽酸金屬還原劑（Zn/Fe）H3-N重氮化氨基對(duì)硫磷

亞硝酸鈉低溫1605與牛血清蛋白酪氨酸上羥基鄰位結(jié)合BSABSA免疫抗原（載體蛋白）農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第144頁(yè)當(dāng)前，國(guó)外已研制出幾十種農(nóng)藥酶免疫檢測(cè)試劑盒，包含有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、有機(jī)氯類、擬除蟲菊酯類以及酰胺類等。有機(jī)磷20ug/kg氨基甲酸酯類300ug/kg農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第145頁(yè)它含有專一性強(qiáng)、靈敏度高、快速、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，試劑盒可廣泛用于現(xiàn)場(chǎng)樣品和大量樣品快速檢測(cè)，可準(zhǔn)確定性、定量。但因?yàn)槭艿睫r(nóng)藥種類多，抗體制備難度大農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第146頁(yè)（二）生物化學(xué)測(cè)定法酶抑制活性：可抑制羧酸酯酶、膽堿酯酶活性。速測(cè)卡農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第147頁(yè)速測(cè)卡（1）原理膽堿酯酶可催化靛酚乙酸酯（紅色）水解為乙酸和靛酚（藍(lán)色）。有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶有抑制作用，使催化、水解、變色過程發(fā)生改變，由此可判斷樣品中是否由有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥存在。

農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第148頁(yè)（2）試劑固化有膽堿酯酶和靛酚乙酸酯試劑紙片（速測(cè)卡）。pH7.5緩沖溶液：分別取15.0g磷酸氫二鈉[Na2HPO4·12H2O]與1.59g無水磷酸二氫鉀[KH2PO4]，用500mL蒸餾水溶解。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第149頁(yè)（4）分析步驟整體測(cè)定法：選取有代表性蔬菜樣品，擦去表面泥土，→1cm左右碎片→

5g放入帶蓋瓶中→

10mL緩沖溶液→震搖50次→靜置2min以上→用白色藥片沾取提取液→放置10min→預(yù)反應(yīng)（37℃，10min，預(yù)反應(yīng)后藥片表面必須保持濕潤(rùn)）→將速測(cè)卡對(duì)折→

3min→使紅色藥片與白色藥片疊合→反應(yīng)。表面測(cè)定法（粗篩法）：擦去蔬菜表面泥土→滴2~3滴緩沖溶液→表面→用另一片蔬菜在滴液處摩擦→取速測(cè)卡→將蔬菜上液滴滴在白色藥片上→放置10min→將速測(cè)卡對(duì)折→3min→使紅色藥片與白色藥片疊合反應(yīng)。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第150頁(yè)（5）結(jié)果判斷以酶被有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥抑制（為陽(yáng)性）、未抑制（為陰性）表示。與空白對(duì)照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽(yáng)性結(jié)果。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同，為陰性結(jié)果。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果樣品，可用其它分析方法深入確定詳細(xì)農(nóng)藥品種和含量。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第151頁(yè)（6）注意事項(xiàng)韭菜、蔥、蒜、蘿卜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響次生物質(zhì)，輕易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí)，可采取整棵蔬菜萃取或采取表面測(cè)定法。對(duì)一些含葉綠素較高蔬菜，也可采取整株蔬菜萃取方法，降低干擾原因。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第152頁(yè)

部分農(nóng)藥檢出限（速測(cè)卡）符合率：在檢出50份以上陽(yáng)性樣品中，經(jīng)氣相色譜法驗(yàn)證，陽(yáng)性結(jié)果符合率應(yīng)該在80％以上。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第153頁(yè)生物化學(xué)測(cè)定法檢測(cè)時(shí)，蔬菜中水份、碳水化合物、蛋白質(zhì)、脂等物質(zhì)不會(huì)對(duì)農(nóng)藥殘留物檢測(cè)造成干擾，無須進(jìn)行分離去雜，節(jié)約了大量預(yù)處理時(shí)間，從而能到達(dá)快速檢測(cè)目標(biāo)。所以該方法含有快速方便、前處理簡(jiǎn)單、無需儀器或儀器相對(duì)簡(jiǎn)單，適合用于現(xiàn)場(chǎng)定性和半定量測(cè)定。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第154頁(yè)（三）化學(xué)方法1、氣相色譜2、有機(jī)磷農(nóng)藥速測(cè)靈法（金屬離子催化顯色表面皿法）農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第155頁(yè)1、氣譜方法是當(dāng)前比較權(quán)威方法，能夠準(zhǔn)確定量，可測(cè)出各種不一樣種類農(nóng)藥。但檢測(cè)成本高，儀器操作須專業(yè)人員，前處理要求較高，時(shí)間長(zhǎng)。按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB5009.20-農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第156頁(yè)2、有機(jī)磷農(nóng)藥速測(cè)靈法原理含有強(qiáng)催化作用金屬離子催化劑，使各類有機(jī)磷農(nóng)藥（磷酸酯、二硫代酸酯、磷酸胺）在催化作用下水解為磷酸與醇，水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，使顯色劑變色。檢測(cè)方法：顯色液2滴↓取農(nóng)藥溶液3~4mL→測(cè)試皿→混勻→靜置→↑催化液→5~10min→觀察改變。農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第157頁(yè)主要針正確是有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)，尤其是甲胺磷、對(duì)硫磷農(nóng)藥。這種方法采取化學(xué)反應(yīng)原理，防止了通常所使用生化方法（酶法）缺點(diǎn)（酶制備、保留以及反應(yīng)需比較嚴(yán)格條件），靈敏度也到達(dá)一定要求農(nóng)藥殘留量的檢驗(yàn)專家講座第158頁(yè)二、氨基甲酸酯類農(nóng)藥