生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座

第十四章生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂與控制第一節(jié)影響生藥品質(zhì)自然原因第二節(jié)生藥質(zhì)量控制與生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第1頁第一節(jié)影響生藥品質(zhì)自然原因影響生藥品質(zhì)自然原因：一、生藥品種二、植物生長發(fā)育三、植物遺傳與變異四、植物環(huán)境原因生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第2頁一、生藥品種對(duì)品質(zhì)影響不一樣品種其主含化學(xué)成份普通有差異。二、植物生長發(fā)育對(duì)生藥品質(zhì)影響不一樣生長階段其所含化學(xué)成份有差異。三、植物遺傳與變異原因?qū)ι幤焚|(zhì)影響主要是化學(xué)變型。四、環(huán)境原因?qū)ι幤焚|(zhì)影響１、光照２、環(huán)境溫度３、降水量４、土壤條件５、其它條件，如海拔生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第3頁第二節(jié)生藥質(zhì)量控制與生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂●藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)是一個(gè)國家或地域?qū)λ幤焚|(zhì)量和檢驗(yàn)方法所作技術(shù)要求，是藥品生產(chǎn)、供給、使用以及管理部門共同遵照法律依據(jù)，對(duì)保障人民用藥安全有效起著主要作用，它是藥品當(dāng)代化生產(chǎn)和質(zhì)量管理主要組成部分。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第4頁一、生藥質(zhì)量控制依據(jù)●我國生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要有：國家藥典標(biāo)準(zhǔn)、局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)。１、國家藥典標(biāo)準(zhǔn)（生藥和成藥）２、局（部）頒標(biāo)準(zhǔn)（生藥和成藥）３、地方標(biāo)準(zhǔn)（指生藥，不包含成藥）二、生藥質(zhì)量控制主要內(nèi)容及方法1.生藥質(zhì)量控制主要內(nèi)容:生藥真實(shí)性判定,生藥純度檢定,生藥品質(zhì)優(yōu)良度檢定。①生藥真實(shí)性判定：基源、性狀、顯微、理化、生物檢定。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第5頁②生藥純度檢定：是否有雜質(zhì)以及是否超出要求程度。雜質(zhì)包含：非藥用部分、有機(jī)雜質(zhì)和無機(jī)雜質(zhì)。③生藥品質(zhì)優(yōu)良度檢定：水分、浸出物、有效成份含量測(cè)定。2.依據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目性質(zhì)，可人為地分為限量檢驗(yàn)和定量檢驗(yàn)?！裣蘖繖z驗(yàn)：水分、有害物質(zhì)、雜質(zhì)等?！穸繖z驗(yàn)：有效成份含量，生物活性強(qiáng)度。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第6頁（一）生藥質(zhì)量限量控制1.水分測(cè)定：是為了確保生物不因所含水分超出程度而發(fā)霉變質(zhì)。水分測(cè)定方法慣用有烘干法和甲苯法。供測(cè)定用生藥樣品，普通先破碎成直徑不超出3mm顆粒或碎片，直徑和長度在3mm以下花類、種子類、果實(shí)類藥材，可不破碎。(1)烘干法適合用于不含或少含揮發(fā)性成份生藥。取樣品2～5g，平鋪于干燥至恒重扁形稱量瓶中，厚度不超出5mm，疏松樣品不超出10mm，精密稱定，打開瓶蓋在100～105℃干燥5小時(shí)，將瓶蓋蓋好，移置干燥器中，冷卻30分鐘，精密稱定重量，再在上述溫度干燥1小時(shí)，冷卻，稱重，至連續(xù)兩次稱重差異不超出5mg為止。依據(jù)減失重量，計(jì)算供試品中含有水分百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第7頁(2)甲苯法適合用于含揮發(fā)性成份生藥，用化學(xué)純甲苯直接測(cè)定，必要時(shí)甲苯可先加少許蒸餾水，充分振搖后放置，將水層分離棄去，經(jīng)蒸餾后使用。儀器裝置如圖1。A為500ml短頸圓底燒瓶；B為水分測(cè)定管；C為直形冷凝管，外管長40cm。使用前，全部儀器應(yīng)清潔，并置烘箱中烘干。測(cè)定時(shí)取樣品適量（約相當(dāng)于含水量1～4ml），精密稱定，置A瓶中，加甲苯約200ml，必要時(shí)加入玻璃珠數(shù)粒。將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管狹細(xì)部分，將A瓶置電熱套中或用其它適宜方法緩緩加熱，待甲苯開始沸騰時(shí)，調(diào)整溫度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，即測(cè)定管刻度部分水量不再增加時(shí)，將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗，再用飽蘸甲苯長刷或其它適宜方法，將管壁上附著甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水粘附在B管管壁上，可用蘸甲苯銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍(lán)粉末少許，使水染成藍(lán)色，方便分離觀察）。檢讀水量，改算成供試品中含有水分百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第8頁(3)減壓干燥法適合用于含有揮發(fā)性成份珍貴藥品。減壓干燥器裝置：取直徑12cm左右培養(yǎng)皿，加入新鮮五氧化二磷干燥劑適量，使鋪成0.5～1cm厚度，放入直徑30cm減壓干燥器中。測(cè)定時(shí)取供試品2～4g，混合均勻。分取約0.5～1g，置已在供試品一樣條件下干燥并稱重稱瓶中，精密稱定，打開瓶蓋，放入上述減壓干燥器中，減壓至2.67kPa(20mmHg)以下連續(xù)半小時(shí)，室溫放置24小時(shí)。在減壓干燥器出口連接新鮮無水氯化鈣干燥管，打開活塞，待內(nèi)外壓一致，關(guān)閉活塞，打開干燥器，蓋上瓶蓋，取出稱瓶快速精密稱定重量，計(jì)算供試品中含有水分百分?jǐn)?shù)?！褚部蓱?yīng)用紅外線干燥法和導(dǎo)電法測(cè)定水分含量，快速而簡便?，F(xiàn)多用鹵素水分快速測(cè)定儀。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第9頁2.灰分測(cè)定：包含總灰分和酸不溶灰分?！窨偦曳郑菏侵干幈旧斫?jīng)過灰化后遺留不揮發(fā)性無機(jī)成份以及生藥表面附著不揮發(fā)性無機(jī)成份總和?！袼岵蝗芑曳郑菏侵缚偦曳种屑?0%鹽酸處理，得到不溶于10%鹽酸灰分?！褚笊幙偦曳殖潭?，對(duì)于確保生藥品質(zhì)和純凈程度有一定意義。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第10頁(1)總灰分測(cè)定法供測(cè)定樣品須粉碎，使能經(jīng)過二號(hào)篩，混合均勻后，稱取樣品2～3g（如需測(cè)定酸不溶性灰分，可取3～5g），置熾灼至恒重坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），緩緩熾熱，注意防止燃燒，至完全碳化時(shí)，逐步升高溫度至500～600℃，使完全灰化并至恒重。依據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中含總灰分百分?jǐn)?shù)。如樣品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱蒸餾水或10%硝酸銨溶液2ml，使殘?jiān)鼭駶?，然后置水浴上蒸干，殘?jiān)涨胺ㄗ茻?，至坩堝?nèi)容物完全灰化。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第11頁(2)酸不溶灰分測(cè)定法取上項(xiàng)所得灰分，在坩堝中加入稀鹽酸10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱蒸餾水5ml沖洗，洗液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)殘?jiān)谜麴s水洗于濾紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止，濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。依據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中含酸不溶性灰分百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第12頁3.浸出物測(cè)定●對(duì)于有效成份尚不明確或尚無準(zhǔn)確定量方法生藥，普通可依據(jù)已知成份溶解性質(zhì)，選取水或其它適當(dāng)溶劑為溶媒，測(cè)定一藥中可溶性物質(zhì)含量，以示中藥品質(zhì)。通常選取水，一定濃度乙醇（或甲醇）、乙醚作浸出物測(cè)定。供測(cè)定中藥樣品須粉碎，使能經(jīng)過二號(hào)篩，并混合均勻。a.水溶性浸出物測(cè)定b.醇溶性浸出物測(cè)定c.醚溶性浸出物測(cè)定生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第13頁a.水溶性浸出物測(cè)定有冷浸法和熱浸法兩種。(1)冷浸法：取樣品約4g，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），置250～300ml錐形瓶中，精密加入水100ml，塞緊，冷浸，前6小時(shí)內(nèi)時(shí)時(shí)振搖，再靜置18小時(shí)，用干燥濾器快速濾過，精密量取濾液20ml，置已干燥至恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，移置干燥器中，冷卻30分鐘，快速精密稱定重量，以干燥品計(jì)算供試品中含水溶性浸出物百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第14頁(2)熱浸法：取樣品約2～4g，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），置250～300ml錐形瓶中，精密加入水50～100ml，塞緊，稱定重量，靜止1小時(shí)后，連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1小時(shí)。放冷后，取下錐形瓶，塞緊，稱定重量，用水補(bǔ)足減失重量，搖勻，用干燥濾器濾過。精密量取濾液25ml，置已干燥至恒重蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3小時(shí)，移置干燥器中，冷卻30分鐘，快速精密稱定重量，以干燥品計(jì)算供試品中含水溶性浸出物百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第15頁b.醇溶性浸出物測(cè)定取適當(dāng)濃度乙醇或甲醇代替水為溶媒。照水溶性浸出物測(cè)定法進(jìn)行（熱浸法須在水浴上加熱）。c.醚溶性浸出物測(cè)定取樣品2～4g，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01g），置于已恒重?zé)恐居统槌銎髦校靡颐炎魅軇?，水浴加?～6小時(shí)，放冷，以少許乙醚沖洗回流器，洗液接入蒸餾瓶中，低溫蒸去乙醚，于105℃干燥3小時(shí)，移置干燥器中，冷卻30分鐘，快速稱定重量，以干燥品計(jì)算供試品中含醚溶性浸出物百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第16頁4.揮發(fā)油測(cè)定：

適合用于含較多量揮發(fā)油生藥。測(cè)定用樣品，普通須粉碎使能經(jīng)過二號(hào)至三號(hào)篩，并混合均勻，儀器裝置如圖2。（注：裝置中揮發(fā)油測(cè)定支管分岔處應(yīng)與基準(zhǔn)線平行）常規(guī)方法有：甲法和乙法兩種。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第17頁甲法：適合用于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以下?lián)]發(fā)油。取樣品適量（約相當(dāng)于含揮發(fā)油0.5～1.0ml），穩(wěn)定重量（準(zhǔn)確至0.01g），置1000ml燒瓶中，加水300～500ml(或適量)與玻璃珠數(shù)粒，振搖混合后，連接揮發(fā)油測(cè)定器與回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充滿揮發(fā)油測(cè)定器（有0.1ml刻度）刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止，置電熱套中或用其它適宜方法緩緩加熱至沸，并保持微沸約5小時(shí)，至測(cè)定器中油量不再增加，停頓加熱，放置片刻，開啟測(cè)定器下端活塞，將水緩緩放出，至油層上端抵達(dá)刻度0線上面5mm處為止。放置1小時(shí)以上，再開啟活塞使油層下降至其上端恰與刻度0線平齊，讀取揮發(fā)油量，并計(jì)算供試品中含揮發(fā)油百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第18頁乙法：適合用于測(cè)定相對(duì)密度在1.0以上揮發(fā)油。取水約300ml與玻璃珠數(shù)粒，置燒瓶中，連接揮發(fā)油測(cè)定器，自測(cè)定器上端加水便充滿刻度部分，并溢流入燒瓶時(shí)為止，再用移液管加入二甲苯1ml，然后連接回流冷凝管。將燒瓶內(nèi)容物加熱至沸騰，并繼續(xù)蒸餾，其速度以保持冷凝管中部呈冷卻狀態(tài)為度，30分鐘后，停頓加熱，放置15分鐘以上，讀取二甲苯容積。然后照甲法自"取樣品適量"起，依法測(cè)定，自油層量中減去二甲苯量，即為揮發(fā)油量，再計(jì)算供試品含有揮發(fā)油百分?jǐn)?shù)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第19頁5.有害物質(zhì)控制主要是指農(nóng)藥殘留過量和重金屬含量超標(biāo)。有害物質(zhì)起源和步驟主要有：生境污染（土壤、地質(zhì)背景、水源、大氣等）、栽培和倉儲(chǔ)過程中施用農(nóng)藥和驅(qū)蟲劑污染、加工炮制過程中輔料污染、包裝材料有害物質(zhì)污染。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第20頁(1)農(nóng)藥殘量測(cè)定中國藥典選取氣相色譜法測(cè)定有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量。普通控制在百萬分之零點(diǎn)幾。(2)重金屬系指在試驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色金屬雜質(zhì)，包含鉛、汞、鎘等。普通控制在百萬分之二十以內(nèi)。(3)砷鹽檢驗(yàn)采取古蔡氏法或二乙基硫代氨基甲酸銀法。普通控制在百萬分之十以內(nèi)。生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第21頁(4)其它有害物質(zhì)檢驗(yàn)如黃曲霉毒素等。6.其它檢驗(yàn)項(xiàng)目（1）雜質(zhì)：（2）藥用部分百分比：如穿心蓮要求葉不得少于35%。（3）酸敗度：（4）膨脹度：生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和控制專家講座第22頁（二）生藥質(zhì)量定量控制1.以化學(xué)成份為對(duì)象：有效成份含量2.化學(xué)成份定量分析3.生物檢定●生物檢定又稱生物測(cè)定，是利用藥品對(duì)于生物（整體和離體組織）所起作用，以測(cè)定藥品效價(jià)或作用強(qiáng)度一個(gè)方法。它以藥理