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PCR基本原理示意圖1精選2021版課件待擴增目的DNA片段(紅色區(qū)域)氫鍵3’5’3’5’2精選2021版課件加熱變性后氫鍵被破壞,模板分成兩條單鏈。5’5’3’3’加熱變性5’5’3’3’3精選2021版課件退火(迅速降溫)退火后,由于引物分子小,濃度又高,在模板之間還未復(fù)性前就迅速與模板匹配結(jié)合。5’5’3’3’引物2引物1引物是人工設(shè)計并合成的脫氧核苷酸短鏈。4精選2021版課件5’5’3’3’引物2引物1升溫至Taq酶最適溫度3’3’新鏈延伸方向總是從5’→3’在Taq酶最適溫度下,新鏈合成,不斷延伸;在終止延伸時,新鏈的長度可能長于目的片段,延伸至目的片段外側(cè)區(qū)域。5精選2021版課件升溫至Taq酶最適溫度在Taq酶最適溫度下,新鏈合成,不斷延伸;在終止延伸時,新鏈的長度可能長于目的片段,延伸至目的片段外側(cè)區(qū)域。5’5’3’3’引物2引物13’3’5’5’新鏈延伸方向總是從5’→3’6精選2021版課件變性溫度下鏈間氫鍵又被破壞,雙鏈分開成單鏈。5’3’3’再次升溫至變性溫度5’5’3’3’7精選2021版課件退火后,引物又與模板匹配結(jié)合。5’5’3’3’退火(迅速降溫)5’5’3’3’引物1引物1引物2引物2注意引物與模板匹配的位置8精選2021版課件在Taq酶最適溫度下,新鏈合成,不斷延伸。新鏈的長度不會超過模板。5’5’3’3’升溫至Taq酶最適溫度5’5’3’3’引物1引物1引物2引物25’新鏈延伸方向總是從5’→3’9精選2021版課件反復(fù)經(jīng)過變性、退火、延伸等步驟,經(jīng)過約30~40次循環(huán),下面這種產(chǎn)物將以指數(shù)級方式遞增,成為主要產(chǎn)物。5’3’5’3’難點???!10精選2021版課件在PCR循環(huán)過程中,以下雙鏈形式的DNA只能以算術(shù)級方式擴增

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