頂崗實(shí)習(xí)報(bào)告

河北化工醫(yī)藥職業(yè)技術(shù)學(xué)院頂崗實(shí)習(xí)的崗位技術(shù)總結(jié)報(bào)告石藥集團(tuán)河北中潤(rùn)制藥廠實(shí)習(xí)報(bào)告姓

名

朱亞娜

專(zhuān)業(yè)

生物化工工藝

班級(jí)生工30901

校內(nèi)指導(dǎo)教師

崔潤(rùn)麗

校外指導(dǎo)教師

王玉飛

實(shí)習(xí)時(shí)間

2011-08

制藥工程系實(shí)習(xí)單位:石藥集團(tuán)河北中潤(rùn)制藥有限公司前言石藥集團(tuán)河北中潤(rùn)制藥有限公司-簡(jiǎn)介石藥集團(tuán)河北中潤(rùn)制藥有限公司坐落于河北省省會(huì)石家莊市，注冊(cè)地址位于石家莊市豐收路47號(hào)，是世界最主要的抗生素原料供應(yīng)商。公司成立于1989年，是石藥集團(tuán)控股的香港中國(guó)制藥集團(tuán)有限公司的境內(nèi)投資子公司，屬于中外合資企業(yè)。公司現(xiàn)有員工3200余人，全部人員經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的GMP知識(shí)、制藥技能的培訓(xùn)，具有持續(xù)創(chuàng)新的工作能力。中潤(rùn)是中國(guó)國(guó)內(nèi)制藥企業(yè)外資投資額最大的公司。

公司擁有青霉素、頭孢菌素、生物酶、碳青霉烯四大系列40余個(gè)產(chǎn)品。青霉素系列產(chǎn)品主要包括青霉素鉀工業(yè)鹽、青霉素鉀、青霉素鈉、6-APA、阿莫西林、氨芐西林、氨芐西林鈉，產(chǎn)能和市場(chǎng)份額位居世界抗生素前列。頭孢菌素系列主要包括中間體7-ACA、頭孢曲松鈉、頭孢唑林鈉、頭孢哌酮鈉、頭孢噻肟鈉等。主打產(chǎn)品7-ACA年產(chǎn)能世界第一。中潤(rùn)也是唯一擁有鋅鹽化學(xué)法、鈉鹽化學(xué)法和酶法三種工藝生產(chǎn)7-ACA的企業(yè)工作范疇：原材料的入廠合格檢驗(yàn)、發(fā)酵過(guò)程每隔6小時(shí)總糖測(cè)定，發(fā)酵過(guò)程每隔6小時(shí)氨氮測(cè)定。配料的氨氮、總糖、還原糖、氨基氮的測(cè)定；霉菌組實(shí)驗(yàn)：測(cè)定生產(chǎn)過(guò)程發(fā)酵液的效價(jià)和雜質(zhì)等；提煉組實(shí)驗(yàn)：測(cè)定結(jié)晶崗位的脫脂液、稀釋液的水分、效價(jià)、PH值；提煉崗位的FAB、轉(zhuǎn)化崗位的鈉鹽母液、鈉鹽轉(zhuǎn)化液、鈉鹽溶解液等樣品的效價(jià)、水分和含量；無(wú)菌室的丁醇、丁醇水、乙酯、乙酯水、鈉鹽母液的水分、效價(jià)、PH值；還測(cè)定回收崗位的丁醇、丁酯、乙酯半成、品酯化成品、酯化割頭、廢乙酯的含量水分和含量；原材料：玉米漿、原材料、液糖聚合物等的含量、總氮、干物質(zhì)、折光率。目錄青霉素鈉中間體一.鈉鹽溶解液的測(cè)定………………………1二.鈉鹽轉(zhuǎn)化液的測(cè)定………………………1三.鈉鹽結(jié)晶母液的測(cè)定……………………1第二章提煉崗位一.提煉實(shí)驗(yàn)室需測(cè)定的項(xiàng)目………………2二.實(shí)驗(yàn)用到的儀器…………2三.成品丁酯的測(cè)定…………2四.硫酸含量的測(cè)定…………3五.Na2CO3含量的測(cè)定………………………3六.脫脂液的測(cè)定……………3七.稀釋液的測(cè)定……………3八.丁醇結(jié)晶母液的測(cè)定……………………4第三章青霉素效價(jià)和苯乙酸殘量的測(cè)定………………5一.儀器與材料………………5二.測(cè)定步驟…………………5三.儀器的維護(hù)及正確使用…………………7四.流動(dòng)相的配制……………11五.測(cè)定過(guò)程中所遇到的問(wèn)題………………11第四章結(jié)語(yǔ)…………………12第五章實(shí)習(xí)心得……………………13青霉素鈉中間體第一節(jié)鈉鹽溶解液的測(cè)定1.效價(jià)：吸取樣品10ml溶于100ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度搖勻，用制備好的樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式：效價(jià)（μ/ml）＝α×5580×102.水分：取樣20μl注入自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；第二節(jié)鈉鹽轉(zhuǎn)化液的測(cè)定1.效價(jià)：吸取樣品10ml溶于100ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度搖勻，用制備好的樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式:效價(jià)（μ/ml）＝α×5750×102.水分：取樣20μl注入自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；3.PH：純化水沖洗電極用濾紙拭干，放入樣品中測(cè)PH值，讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；4.K﹢:取兩滴樣品于滴定板上，加入一滴鈷亞硝酸鉀，判定：有黃色漂浮或黃色沉淀，證明有K﹢，判為不合格，沒(méi)有變化，證明沒(méi)有K﹢，判為合格；第三節(jié)鈉鹽結(jié)晶母液的測(cè)定1.效價(jià)：吸取樣品10ml溶于100ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度搖勻，用制備好的樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式：效價(jià)（μ/ml）＝α×55802.水分：取樣20μl注入自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；提煉崗位第一節(jié)提煉實(shí)驗(yàn)室測(cè)定的項(xiàng)目1.回收崗位：丁醇、丁酯、酯化成品、乙酯半成品、廢乙酯、酯化割頭；2.無(wú)菌室：丁醇、丁醇水、乙酯、乙酯水、結(jié)晶母液、轉(zhuǎn)化液；3.過(guò)濾：乙醇、乙酯；4.提煉：FBA、乙酯、硫酸；5.堿化：FBA、Na2CO3、K2CO3；6.結(jié)晶：脫脂液、稀釋液7.制氺：純化水；第二節(jié)所用到的儀器水分滴定儀、旋光儀、電導(dǎo)儀、高效氣相色譜儀；第三節(jié)成品丁酯的測(cè)定1.水分檢測(cè)：準(zhǔn)確吸取樣品20μL再按START鍵然后拔下進(jìn)樣口處塞子迅速將樣品注射到水分陽(yáng)極池中，滴定儀開(kāi)始滴定并顯示結(jié)果，水分滴定儀編號(hào)MEB08445，水分％＝0.01％水分％＝0.01％，兩次平均值＝0.01％。內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)水分≤0.5％，結(jié)論：合格。2色級(jí)測(cè)定：將澄清透明的樣品25ml加入到250ml比色管中，與鉑-鈷標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，得出結(jié)果，色級(jí)＝5號(hào)，鉑-鈷標(biāo)準(zhǔn)比色液批號(hào)13-S-Co-101201內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)色級(jí)≤20號(hào)，結(jié)論：合格。3含量測(cè)定：將液體注入到氣相色譜儀中分析，色譜條件：柱子溫度70℃以4℃/min的速率升溫到110℃，檢測(cè)器溫度200℃，進(jìn)樣口溫度200℃，進(jìn)樣量0.3μl，氣相色譜儀編號(hào)C11324010245，色譜柱編號(hào)us8802935H，色譜圖標(biāo)號(hào)丁醇12，正丁醇含量＝63.36％正丁醇乙酸丁酯含量之和＝99.72％，其他單雜含量＝0.06％，內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)丁醇含量≥第四節(jié)硫酸含量的測(cè)定操作過(guò)程：吸取樣品1ml加純化水約30ml加酚酞指示劑2滴，用氫氧化鈉滴定液滴至微紅色；計(jì)算公式：含量％＝×100％合格標(biāo)準(zhǔn)14.00～18.00％第五節(jié)Na2CO3含量的測(cè)定操作過(guò)程：精密吸取樣品1ml于三角瓶中，加純化水30ml加甲基橙指示劑2滴，用鹽酸滴定液滴定至棕紅色為終點(diǎn)；計(jì)算公式：含量％＝×100％合格標(biāo)準(zhǔn)：5.00～15.00％第六節(jié)脫脂液的測(cè)定1.效價(jià)：吸取樣品5ml溶于50ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度搖勻，用制備好的樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式：效價(jià)（μ/ml）＝α×5580×102.酯含量：取濾后樣品1ml，加入1mol/L氫氧化鈉和中性乙醇各10ml放20min后加0.5%酚酞2滴用0.500mol/L鹽酸滴定；公式;酯含量%＝×100%第七節(jié)稀釋液的測(cè)定1.效價(jià)：吸取樣品5ml溶于50ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度搖勻，用制備好的樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式：效價(jià)（μ/ml）＝α×5580×102.水分：取樣20μl注入自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；3.PH：純化水沖洗電極用濾紙拭干，放入樣品中測(cè)PH值，讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；第八節(jié)丁醇結(jié)晶母液1.效價(jià)：過(guò)濾用濾后樣品沖洗旋光管2～3次，裝滿(mǎn)樣品放入旋光儀測(cè)定旋光度；公式：效價(jià)（μ/ml）＝α×55802.水分：取樣20μl注入自動(dòng)水分滴定儀測(cè)定讀取顯示屏上的數(shù)據(jù)；第三章發(fā)酵液中青霉素效價(jià)及其苯乙酸殘量的測(cè)定（高效液相色譜法）第一節(jié)儀器與材料1.儀器安捷倫高效液相色譜儀、戴安高效液相色譜儀、Waters515液相色譜儀；2.材料401～415十五個(gè)大發(fā)酵罐的青霉素發(fā)酵液和307～310四個(gè)中級(jí)發(fā)酵罐中的青霉素發(fā)酵液，以及302、306小發(fā)酵罐中的青霉素發(fā)酵液；第二節(jié)測(cè)定步驟1．1原理：用高壓輸入液泵把流動(dòng)相泵入裝有固定相的色譜柱，經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入樣品。由流動(dòng)相帶入色譜柱內(nèi)，在柱內(nèi)各組分被分離后，依次進(jìn)入檢測(cè)器變成電信號(hào)，由化學(xué)工作站記錄為色譜峰和數(shù)據(jù)。1.2儀器與試劑：高效液相色譜儀、電子天平、超聲波清洗儀、溶劑過(guò)濾器、PH計(jì)、C18色譜柱、1ml移液管、2ml移液管、燒杯、量筒、50ml容量瓶、100ml容量瓶、注射器、0.45μm微孔濾膜、甲醇(色譜純)、磷酸二氫鉀（分析純）、磷酸（分析純）。1.3試劑配制磷酸鹽緩沖液：稱(chēng)68g磷酸二氫鉀于燒杯中加1000ml純化水使溶解，搖勻，用磷酸調(diào)節(jié)PH至3.5即得68g/L磷酸二氫鉀緩沖液。5%甲醇水：用量筒分別量取色譜純甲醇50ml和純化水950ml混合均勻，用0.45μm的濾膜過(guò)濾后備用。流動(dòng)相：以68g/L磷酸二氫鉀溶液-純化水-甲醇（100：500:400）為流動(dòng)相；經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后備用。1.4色譜條件色譜柱：0DS，5μm，250mm×4.6mm流速：1.0ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：225nm進(jìn)樣量：20μl柱溫：301.5系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：將對(duì)照品溶液連續(xù)5次注入高效液相色譜儀中，記錄色圖譜色譜峰流出順序?yàn)楸揭宜?、青霉素，而色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5，記錄峰面積計(jì)算RSD，苯乙酸峰面積的RSD小于10.0%，青霉素峰面積的RSD小于2.0%1.6操作過(guò)程1.6.1對(duì)照品溶液的制備：精密稱(chēng)定苯乙酸對(duì)照品25mg于50ml容量瓶中，加水稀釋至刻度搖勻，做儲(chǔ)備溶液A；精密稱(chēng)定青霉素對(duì)照品25mg于50mg容量瓶中，加純化水溶解；精密吸取0.5ml儲(chǔ)備液于該容量瓶中，然后加純化水稀釋至刻度，搖勻。1.6.2供試品溶液的制備：根據(jù)發(fā)酵液的生長(zhǎng)周期，參考下表取過(guò)濾好的發(fā)酵液，精密量取相應(yīng)量。置于規(guī)定體積的容量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻。估計(jì)單位（μ／ml）稀釋倍數(shù)取發(fā)酵液毫升數(shù)容量瓶容量（ml）60000以下50210060000以上1001100將對(duì)照品溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，取20μl注入液相色譜儀。連續(xù)進(jìn)樣兩次，記錄色譜峰面積，將供試品溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后，取20μl注入液相色譜儀記錄色譜峰面積。1.7計(jì)算結(jié)果1.7.1青霉素效價(jià)(μ/ml)效價(jià)=式中A對(duì)照：對(duì)照品溶液中青霉素的峰面積A樣品：發(fā)酵液樣品溶液中青霉素的峰面積W對(duì)照：青霉素鉀對(duì)照品的質(zhì)量g1598：青霉素鉀的理論效價(jià)1.1136：青霉素鉀與青霉素分子量的比值P：青霉素對(duì)照品的含量D樣品：樣品的稀釋倍數(shù)50：對(duì)照品溶液定容后的體積ml1.7.2苯乙酸含量（μg/ml）苯乙酸含量=A對(duì)照：對(duì)照品溶液中苯乙酸的峰面積A樣品：發(fā)酵液樣品溶液中苯乙酸的峰面積W對(duì)照：苯乙酸對(duì)照品的質(zhì)量mgP：苯乙酸對(duì)照品的含量D樣品：樣品的稀釋倍數(shù)5000：苯乙酸標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)1.8注意事項(xiàng)高效液相色譜儀的操作見(jiàn)《高效液相色譜儀使用維護(hù)操作規(guī)程》檢測(cè)效價(jià)用的樣品應(yīng)于氨氮，氨基氮用的樣品分析使用，用移液管轉(zhuǎn)移樣品時(shí)用濾紙擦后再定刻度。第三節(jié)儀器的維護(hù)及正確使用Waters515液相色譜儀使用維修操作規(guī)程1儀器簡(jiǎn)介1.1本儀器由515泵、waters2487檢測(cè)器、進(jìn)樣系統(tǒng)、微機(jī)色譜工作站、打印機(jī)等組成。1.2生產(chǎn)廠家：美國(guó)waters公司1.3技術(shù)指標(biāo)流量準(zhǔn)確度：±0.1％RSD流量精度：±0.1％（f＝1ml/min.甲醇，壓力為1000～2000psi的背壓）波長(zhǎng)精度：±n/m波長(zhǎng)重現(xiàn)性:±0.10nm漂移：1.0×10ˉ4AU/hour/℃(245nm預(yù)熱1小時(shí))噪音：?jiǎn)尾ㄩL(zhǎng)≤±0.35×10ˉ5AU（干電池，在254nm時(shí)間常數(shù)1.0）2waters液相色譜儀環(huán)境要求2.1通風(fēng)良好并嚴(yán)格禁止靜電；2.2避免陽(yáng)光直射；2.3一起放置的臺(tái)面應(yīng)水平無(wú)震動(dòng)；2.4環(huán)境溫度：10～30℃2.5相對(duì)濕度：20～90％3waters液相色譜儀使用3.1樣品準(zhǔn)備3.1.1液相色譜儀使用前應(yīng)準(zhǔn)備好0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，并經(jīng)脫氣處理的純化水，流動(dòng)相（下簡(jiǎn)稱(chēng)水、流動(dòng)相）及色譜純甲醇（簡(jiǎn)稱(chēng)甲醇）3.1.2調(diào)整好檢測(cè)器的檢測(cè)波長(zhǎng)3.2開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備3.2.1依次打開(kāi)泵、檢測(cè)器、顯示器、微機(jī)的電源；3.2.2將吸濾器放入盛有水的貯液瓶中并封好口；3.2.3打開(kāi)泵上的清洗旋鈕，用針管從液體出口處抽出約10ml液體關(guān)閉清洗旋鈕。3.2.4換洗柱用水，旋開(kāi)泵旋鈕按MENLV鍵，泵顯示PURGE時(shí)按RUN/STOP排氣。當(dāng)流路無(wú)氣泡時(shí)，按RUN/STOP鍵停止排氣關(guān)泵頭旋鈕。并按RUN/STOP鍵運(yùn)行泵，從泵的面板上按EDIT鍵，輸入流速值XXXml/min應(yīng)由小到大輸入。3.2.5待流速至設(shè)定流速后泵運(yùn)行約30min后應(yīng)由大到小降低流速至0.01ml/min將吸濾器從水中取出，放入盛有流動(dòng)相的貯液瓶。并封好瓶口，流速?gòu)?.0ml/min逐漸升至設(shè)定流速。3.3系統(tǒng)操作3.3.1微機(jī)進(jìn)入顯示系統(tǒng)，用鼠標(biāo)點(diǎn)擊startprogramsmillenniu32在文件中指向oracle打開(kāi)startdatabase,或直接輸入設(shè)定密碼，進(jìn)入主系統(tǒng)操作。3.3.2雙擊Millenmin32圖標(biāo)單擊login輸入usenamexxx及paswordxxx點(diǎn)擊ok待大圖標(biāo)又灰轉(zhuǎn)亮，且2487檢測(cè)器自檢完成。3.3.3在project中選中cfc，雙擊runsamples，在runsamples中選中waters-2487按ok3.3.4單擊single在samplename中輸入樣品號(hào)，function中選injectsamplemetheset中選2478，在RUNTIME中輸入預(yù)定測(cè)樣運(yùn)行時(shí)間，在injectionvocume設(shè)置10.03.3.5選右上角RUNandprocesscontinueonfault單擊monitor進(jìn)行基線(xiàn)預(yù)覽，等待泵顯示壓力穩(wěn)定，屏顯示的基線(xiàn)噪聲水平符合要求（約需30min）3.3.6點(diǎn)擊紅燈abrot待inject亮后點(diǎn)擊inject，當(dāng)儀器顯示singleinjectwaitting時(shí)即可開(kāi)始進(jìn)樣。3.4進(jìn)樣測(cè)定3.4.1將預(yù)分析的樣品按一定方法處理好后置于潔凈小瓶中，用此樣品清洗進(jìn)樣針數(shù)次，另取一定的樣品液，于手動(dòng)進(jìn)樣器處于inject位時(shí)插入進(jìn)樣針。扳手柄至load位推入樣品液，迅速扳手柄到inject位置3.4.2液相色譜儀即開(kāi)始測(cè)定樣品，自動(dòng)記錄譜圖3.5數(shù)據(jù)處理：帶測(cè)定結(jié)束后，打開(kāi)Milleenninm32主畫(huà)面，選擇Browseproject選YYY點(diǎn)擊ok。在channels中選樣品名后，擊rerenl出現(xiàn)圖譜擊integrecte積分，擊peaks得到處理后的結(jié)果，用于計(jì)算；3.6關(guān)機(jī)操作3.6.1測(cè)定結(jié)束后，關(guān)閉檢測(cè)器電源；3.6.2關(guān)閉色譜工作站，要將打開(kāi)的所有窗口逐項(xiàng)的關(guān)閉，然后關(guān)閉主機(jī)、顯示器電源；3.6.3將流動(dòng)相換成甲醇水，操作同3.2.4-3.2.5，洗柱約30min，更換為甲醇再洗柱60min，關(guān)閉515泵電源；3.6.4清理液相色譜儀及周?chē)l(wèi)生罩上機(jī)罩；3.6.5認(rèn)真填寫(xiě)《液相、氣相色譜儀使用記錄》和《檢驗(yàn)設(shè)備維護(hù)記錄》4waters液相色譜儀使用注意事項(xiàng)4.1儀器室內(nèi)要經(jīng)常保持通風(fēng)并保持清潔；4.2液相色譜儀使用過(guò)程中所用的各種液體（水、流動(dòng)相）和進(jìn)樣用的樣品溶液均需經(jīng)0.45微米微孔濾膜嚴(yán)格過(guò)濾，成用液體的貯液瓶定期清洗，保證清潔防止儀器污染；4.3不銹鋼吸濾器要經(jīng)常超聲波清洗保證清潔，濾頭要定期清洗。先用清潔的純化水超半小時(shí)，然后換洗柱用水超半小時(shí)，安裝濾頭時(shí)不要手碰，以免污染濾頭；4.4洗柱用水不能長(zhǎng)時(shí)間保存，如果水中有異物，應(yīng)新配置實(shí)用；4.5為延長(zhǎng)檢測(cè)器氘燈的使用壽命，測(cè)定結(jié)束后，宜先關(guān)閉檢測(cè)器電源且使用過(guò)程中電源不宜頻繁開(kāi)關(guān)，氘燈達(dá)到其使用壽命時(shí)要及時(shí)更換；4.6測(cè)定結(jié)束后應(yīng)分別用甲醇水和甲醇清洗色譜柱，防止出現(xiàn)結(jié)晶，延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命；4.7液相色譜儀使用過(guò)程中要隨時(shí)記錄使用情況，記錄內(nèi)容包括色譜柱的使用情況（如柱型號(hào)、柱壓）色譜柱的出峰情況(如保留時(shí)間，峰面積等)4.8液相色譜儀使用過(guò)程中要注意觀察如發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)盡快處理，如遇較大故障，儀器不能工作時(shí)要及時(shí)與廠商聯(lián)系；4.9液相色譜儀檢定周期為二年，檢定有效期前應(yīng)及時(shí)送檢；5常見(jiàn)故障處理和維護(hù)保養(yǎng)5.1泵的保養(yǎng)5.1.1使用流動(dòng)相盡量要清潔；5..1.2進(jìn)液處的砂芯過(guò)濾頭要經(jīng)常清洗；5.1.3流動(dòng)相交換時(shí)要防止沉淀；5.1.4避免泵內(nèi)堵塞和有氣泡；5.2進(jìn)樣器的保養(yǎng)：每次分析結(jié)束后，要反復(fù)沖洗進(jìn)樣口，防止樣品的交叉污染系統(tǒng)壓力過(guò)高；5.3柱的保養(yǎng)5.3.1柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強(qiáng)烈震動(dòng)；5.3.2當(dāng)柱子和色譜儀聯(lián)結(jié)時(shí)，闊件或管路要清洗干凈；5.3.3要注意流動(dòng)相的脫氣；5.3.4避免使用高粘度的溶劑作為流動(dòng)相；5.3.5進(jìn)樣樣品要提純；5.3.6嚴(yán)格控制進(jìn)樣量；5.3.7每天分析工作結(jié)束后，要清洗進(jìn)樣閥中殘留的樣品；5.3.8每天分析測(cè)定結(jié)束后，都要用適當(dāng)?shù)娜軇﹣?lái)清洗柱；5.3.9若分析柱長(zhǎng)期不使用，應(yīng)用適當(dāng)有機(jī)溶劑保存并封閉；5.4檢測(cè)器（UV）的保養(yǎng)5.4.1紫外燈的保養(yǎng)：在分析前，柱平衡的差不多時(shí)；打開(kāi)檢測(cè)器在分析完成后馬上關(guān)閉檢測(cè)器；5.4.2樣品也要保養(yǎng)6常見(jiàn)故障及處理6.1手動(dòng)進(jìn)樣閥的5.6口漏液時(shí)，應(yīng)檢查換轉(zhuǎn)子密閉圈是否損壞；6.2系統(tǒng)壓力超過(guò)設(shè)定值，系統(tǒng)停機(jī)。首先檢查流路中的管路是否有打析或液壓變形的情況，然后按由近及遠(yuǎn)的原則檢查流路各段確定堵塞位置。順序?yàn)楸玫竭M(jìn)樣器管路，進(jìn)樣器六通閥、色譜柱、檢測(cè)器出口管，可斷開(kāi)相應(yīng)接口后啟動(dòng)泵進(jìn)行測(cè)試；6.3系統(tǒng)壓力低，不穩(wěn)定或無(wú)壓力；6.3.1流路中存在氣泡執(zhí)行排氣泡操作，排除氣泡；6.3.2流路中有漏液，檢查并排除漏點(diǎn)。6.3.3進(jìn)出口單向閥污染，清洗或更換單向閥；6.3.4柱塞桿及密封圈磨損，更換柱塞密封或柱塞桿，建議兩個(gè)同時(shí)更換；6.3.5進(jìn)樣器六通閥定子或轉(zhuǎn)子密封面磨損，更換定子或轉(zhuǎn)子密封面；6.3.6流動(dòng)相打空色譜柱內(nèi)有氣體，設(shè)定0.2-0.5ml/min流速，用異丙醇清洗色譜柱直至壓力穩(wěn)定；6.3.7流通池內(nèi)存在氣泡，堵住排液管出口3～5秒迅速公開(kāi)，重復(fù)操作至壓力穩(wěn)定；6.4基線(xiàn)噪音大或基線(xiàn)不穩(wěn)定6.4.1流動(dòng)相或流路污染，檢查更換流動(dòng)相，沖洗流路可先斷開(kāi)色譜柱測(cè)試，如故障不能排除可判斷為流動(dòng)相或流路污染；6.4.2色譜柱污染，對(duì)色譜柱進(jìn)行清洗或更換，根據(jù)流動(dòng)相情況先置換色譜柱內(nèi)流動(dòng)相，按相似相溶原理選擇合適溶劑清洗色譜柱2～3小時(shí)測(cè)試；6.4.3流路或檢測(cè)器中存在氣泡，排除氣泡；6.4.4出現(xiàn)密集正負(fù)信號(hào)，流通池內(nèi)充滿(mǎn)空氣排除空氣；6.4.5壓力波動(dòng)，檢查排除，漏點(diǎn)清洗單閥；6.4.6基線(xiàn)漂移檢查室內(nèi)溫度或柱溫箱溫度，冷藏后的流動(dòng)相使用前應(yīng)放置室溫并脫氣；第四節(jié)流動(dòng)相的配制高效液相色譜儀使用的流動(dòng)相是純化水、甲醇、磷酸二氫鉀按5∶4∶1的比例配制而成的，通常實(shí)驗(yàn)室一天要配置2000ml流動(dòng)相，純化水和磷酸二氫鉀要經(jīng)過(guò)真空抽濾除去雜質(zhì)，首先用一1000ml的量筒量取1000ml純化水經(jīng)過(guò)真空抽濾后倒入5000ml的試劑瓶中，然后在量取200ml的磷酸二氫鉀經(jīng)過(guò)真空抽濾后倒入試劑瓶中，最后量取800ml的甲醇水倒入試劑瓶中，充分搖動(dòng)試劑瓶使其充分混勻；第五節(jié)測(cè)定過(guò)程中多遇到的問(wèn)題1.測(cè)定過(guò)程中首先要進(jìn)行青霉素標(biāo)準(zhǔn)品的稱(chēng)量，在稱(chēng)量前電子天平一定要先進(jìn)行校準(zhǔn)，如果校準(zhǔn)不得當(dāng)會(huì)導(dǎo)致青霉素標(biāo)準(zhǔn)品稱(chēng)量不準(zhǔn)確，青霉素標(biāo)準(zhǔn)品要精確至小數(shù)點(diǎn)后四位，標(biāo)準(zhǔn)品偏高會(huì)導(dǎo)致測(cè)定的發(fā)酵液效價(jià)偏低，標(biāo)準(zhǔn)品偏高會(huì)導(dǎo)致測(cè)定的發(fā)酵液偏高；2.測(cè)定過(guò)程中要嚴(yán)格控制好實(shí)驗(yàn)室的溫度，溫度對(duì)樣品在色譜儀的出峰時(shí)間有影響，溫度偏高會(huì)導(dǎo)致樣品的出峰時(shí)間偏后，溫度過(guò)低會(huì)導(dǎo)致樣品的出峰時(shí)間提前，所以實(shí)驗(yàn)室溫度一般保持在25℃3.流動(dòng)相對(duì)樣品出峰時(shí)間的影響，流動(dòng)相是甲醇、純