南京地區(qū)健康青年驗(yàn)健康青年驗(yàn)健康人群鼻咽部肺炎鏈球菌的分離鑒定

南京地區(qū)健康青年驗(yàn)健康青年驗(yàn)健康人群鼻咽部肺炎鏈球菌的分離鑒定

1968年首次報道并確認(rèn)了抗青霉（pmi）菌，世界上也發(fā)現(xiàn)了pmi菌。1997年第20屆國際化療會議資料顯示,PRSP感染占肺炎鏈球菌分離比例,美國為40%,西班牙為50%,南非為55%,日本為37%,韓國為77%,中國香港為45%。PRSP的發(fā)生率在不同國家甚至在同一國家的不同地區(qū)均有明顯差異。我國尚無全國性統(tǒng)一監(jiān)測。對于健康人群鼻咽部肺炎鏈球菌定植狀況的調(diào)查資料也非常有限,僅有北京等個別地區(qū)的監(jiān)測報告,且研究對象大多局限于兒童。及時掌握本地區(qū)人群上呼吸道的肺炎鏈球菌的定植率和耐藥率對于制訂合理的抗生素應(yīng)用策略和指導(dǎo)臨床治療均有重要意義。為此,我們調(diào)查了南京地區(qū)部隊(duì)健康青年軍人鼻咽部肺炎鏈球菌的定植情況及耐藥狀況。材料和方法一、材料表面(一)慢性呼吸道疾病2002年3月-2003年7月采集南京市城(郊)區(qū)的部隊(duì)和軍事院校健康青年軍人,男女不限。所有受試者均無慢性呼吸道疾病;采集前3個月內(nèi)均無呼吸道感染,未使用抗生素。(二)抗菌、抗氧等三九集團(tuán)無菌鼻咽拭子、Columbia基礎(chǔ)、Mueller-Hinton培養(yǎng)基和奧普托辛(OP)紙片均購自英國OXOID公司。青霉素和阿莫西林為蘇州第二制藥廠產(chǎn)品;頭孢噻肟為三九集團(tuán)深圳九新藥業(yè)產(chǎn)品;紅霉素為大連美羅大藥廠產(chǎn)品;氧氟沙星為蘇州長征-欣凱制藥廠產(chǎn)品;萬古霉素為美國禮來公司產(chǎn)品。二、方法(一)columinia羊血接種將一次性無菌鼻咽拭子輕輕伸入采集對象的鼻咽部位輕拭數(shù)下,并立即接種到培養(yǎng)基上(Columbia基礎(chǔ)+5%脫纖維羊血)。37℃過夜孵育。通過典型菌落,α-溶血,膽汁溶菌,OP敏感,菊糖分解和肉湯混濁等指標(biāo)鑒定肺炎鏈球菌。(二)蘑菇保存使用菌種保存培養(yǎng)基(脫脂奶粉100g+蒸餾水100ml,高壓滅菌后0.5ml/安瓿分裝)保存分離菌株于-70℃冰箱中。(三)檢測方法規(guī)范采用瓊脂稀釋法測定青霉素、阿莫西林、頭孢噻肟、紅霉素、氧氟沙星和萬古霉素等6種抗菌藥物的MIC。瓊脂稀釋法嚴(yán)格按照NCCLS推薦的方法進(jìn)行,判定價值參照NCCLS2002年標(biāo)準(zhǔn)。其中,青霉素MIC標(biāo)準(zhǔn),敏感:≤0.06mg/L;中介:0.12～1mg/L;耐藥≥2mg/L。質(zhì)控株肺炎鏈球菌ATCC49619跟隨整個實(shí)驗(yàn)過程,結(jié)果完全合格。三、統(tǒng)計(jì)分析所有數(shù)據(jù)均輸入Excel表格并作分析。結(jié)果一、肺炎球形分離共采集南京市散布于7個城(郊)區(qū)的22個連隊(duì)健康軍人鼻咽拭子共1022份。其中,男999份,女23份,平均年齡(22±4)歲(16～39歲)。每個連隊(duì)抽取40～50名軍人為受試對象。從1022份鼻咽拭子中,共分離出112株肺炎鏈球菌,分離率為10.9%。22個連隊(duì)中,18個連隊(duì)檢出肺炎鏈球菌,分離率介于2%～38%之間;4個連隊(duì)未檢出肺炎鏈球菌。二、廣告過敏的結(jié)果(一)高耐激素菌株用瓊脂稀釋法測定,2/112(1.8%)的菌株低耐青霉素(MIC為0.125和0.5mg/L),青霉素對其他110株菌的MIC在0.004～0.062mg/L之間,未發(fā)現(xiàn)高耐青霉素菌株。所有菌株對阿莫西林、頭孢噻肟和萬古霉素均敏感。3/112(2.7%)的菌株低耐氧氟沙星(MIC均為4mg/L)。47/112(42%)的菌株高耐紅霉素,其中僅1株MIC為1mg/L,其余均>512mg/L,見表1。2株青霉素低耐菌株宿主來自2個不同連隊(duì),均為男性戰(zhàn)士,20歲,軍齡分別為15個月和5個月。一般資料及各種抗菌藥物藥敏結(jié)果見表2。(二)抗菌藥物的耐藥112株菌中,42.0%(47/112)的菌株對所測的6種抗菌藥物中的1種耐藥。其中,40.2%(45/112)的菌株單耐紅霉素,并廣泛分布于15個連隊(duì)。2株青霉素耐藥株中,有1株同時耐紅霉素和氧氟沙星。耐藥肺炎鏈球菌鼻模擬菌株肺炎鏈球菌通常定植在人的鼻咽部。據(jù)國外文獻(xiàn)報道,肺炎鏈球菌的定植率,健康成人約5%～10%,健康兒童約20%～40%。在幼兒園、軍營和監(jiān)獄中,個體之間的菌株傳播要比一般人群更容易發(fā)生。本研究以青年健康軍人為對象,在1022份鼻咽拭子標(biāo)本中,共分離出肺炎鏈球菌112株,分離率為10.9%。由此可知,南京地區(qū)健康青年軍人鼻咽部肺炎鏈球菌定植率處于中等水平。某些連隊(duì)分離率高達(dá)38%,其連隊(duì)內(nèi)部可能存在個體間菌株傳播。用瓊脂稀釋法進(jìn)行6種抗菌藥物的MIC測定,結(jié)果表明,2/112(1.8%)的菌株低耐青霉素(MIC,0.125和0.5mg/L),青霉素對其他110株菌的MIC在0.004～0.062mg/L之間,未發(fā)現(xiàn)高耐青霉素菌株。據(jù)文獻(xiàn)報道,發(fā)生耐藥肺炎鏈球菌鼻咽部定植的獨(dú)立風(fēng)險因子如下:3個月內(nèi)接受過抗生素治療者;年齡<5歲兒童;進(jìn)入托兒所的兒童;中耳或鼻竇來源的肺炎鏈球菌菌株等。本研究對象很少具備以上風(fēng)險因子,這可能是本試驗(yàn)?zāi)颓嗝顾胤窝祖溓蚓嚷实偷脑?。所有菌株對阿莫西林、頭孢噻肟和萬古霉素均敏感。2.7%的菌株低耐氧氟沙星,與歐美及國內(nèi)研究結(jié)果類似。42%的菌株高耐紅霉素,涉及范圍廣,耐藥嚴(yán)重度高于許多歐美國家(耐藥率介于15%到49%),而與國內(nèi)文獻(xiàn)報道相似,這種現(xiàn)象的發(fā)生可能與大環(huán)內(nèi)酯類