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文檔簡介
2.1細(xì)胞中的元素和化合物我們的食物來自各種生物組織,那么怎樣檢測不同生物組織中的營養(yǎng)物質(zhì)呢?蔬果類動(dòng)物性食物奶及奶制品谷類制品油、糖類化學(xué)試劑+有機(jī)化合物→特定的顏色①還原糖+斐林試劑
磚紅色沉淀水浴加熱某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)原理:②脂肪+蘇丹Ⅲ染液→橘黃色③蛋白質(zhì)+雙縮脲試劑→紫色【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)1:還原糖的檢測和觀察常見還原糖葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖常見非還原糖蔗糖、淀粉、纖維素梨子梨子蘋果蘋果盡量選所檢測物質(zhì)含量高,且顏色淺的材料。(1)原理具有還原性的糖常見還原糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麥芽糖常見非還原糖:蔗糖、淀粉還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀50~65℃水浴加熱斐林試劑甲液:乙液:0.1g/mLNaOH0.05g/mLCuSO4等體積混合使用,現(xiàn)配現(xiàn)用。(3)反應(yīng)實(shí)質(zhì)還原糖將Cu2+還原,生成磚紅色的Cu2O(2)試劑3實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)論(1)還原糖的鑒定選材:含糖量高、白色或近于白色的植物組織制備樣液:制漿→過濾(一層紗布)→取液顏色反應(yīng):結(jié)論:組織樣液含有還原糖。注入2mL梨組織樣液振蕩、混合搖勻呈現(xiàn)藍(lán)色注入1mL剛配制好的斐林試劑甲乙液等量混勻變成磚紅色50-65℃的溫水注意:斐林試劑
要現(xiàn)配現(xiàn)用!淺藍(lán)色棕色磚紅色沉淀【還原糖檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果】
鑒定可溶性還原糖的實(shí)驗(yàn)材料是否可選擇西瓜、番茄、馬鈴薯、甘蔗組織樣液?
所以應(yīng)選顏色為白色或近白色、富含葡萄糖、果糖或麥芽糖等還原糖的植物組織,以蘋果、梨最好。
不行,西瓜和番茄樣液本身的顏色對于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩蓋作用,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯。馬鈴薯和甘蔗主要含淀粉,淀粉為非還原糖。(1)原理(2)材料:豆?jié){、新鮮肝臟研磨液(3)試劑:雙縮脲試劑A:0.1g/mL的NaOH溶液B:0.01g/mL的CuSO4溶液依次添加在堿性條件下,兩個(gè)及以上相鄰肽鍵與雙縮脲試劑中Cu2+作用,產(chǎn)生紫色絡(luò)合物(4)現(xiàn)象:紫色選材:含豐富的豆?jié){濾液或雞蛋清溶液。
(避免材料自身的顏色對實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋)蛋白質(zhì)豆?jié){濾液或蛋清稀釋液制備樣液呈色反應(yīng)組織樣液2mL雙縮脲試劑A液1mL雙縮脲試劑B液4滴搖勻后變成紫色結(jié)論:組織樣液中存在蛋白質(zhì)。(5)實(shí)驗(yàn)步驟:制備樣液呈色反應(yīng)結(jié)論:【蛋白質(zhì)檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果】項(xiàng)目斐林試劑雙縮脲試劑成分甲液乙液A液B液質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液質(zhì)量濃度為質(zhì)量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液質(zhì)量濃度為反應(yīng)原理加熱條件下,含醛基的可溶性還原糖將Cu(OH)2還原為Cu2O沉淀堿性條件下Cu2+與具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物發(fā)生反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物使用方法甲、乙兩液等量混勻后立即使用(現(xiàn)配現(xiàn)用)反應(yīng)條件反應(yīng)現(xiàn)象0.05g/mL的CuSO4溶液0.01g/mL的CuSO4溶液先加入A液1mL搖勻,再加B液4滴,搖勻50~65℃水浴加熱不需加熱藍(lán)色→棕色→磚紅色淺藍(lán)色→紫色完善表格,總結(jié)斐林試劑和雙縮脲試劑的異同【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)“三不同”“一同”是指都含有NaOH和CuSO?兩種成分,且所含NaOH的質(zhì)量濃度都是0.1g/mL①CuSO?溶液的質(zhì)量濃度不同②使用方法不同③反應(yīng)原理不同斐林試劑:混合均勻現(xiàn)配現(xiàn)用雙縮脲試劑:先加A液再加B液斐林試劑與雙縮脲試劑的比較【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)【3】檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)斐林試劑與雙縮脲試劑的比較1、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?時(shí)間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。2、為什么在蛋白質(zhì)檢測時(shí),雙縮脲試劑的加入順序是先加A液,再加B液,而且B只能加3~4滴不能過量?蛋白質(zhì)只有在堿性環(huán)境中才能與Cu2+發(fā)生顏色反應(yīng)。過量的雙縮脲試劑B會(huì)與試劑A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。實(shí)驗(yàn)原理:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織中的相關(guān)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色。脂肪+蘇丹Ⅲ染液----橘黃色脂肪蘇丹Ⅲ橘黃色方法二:取材:花生種子(浸泡,去種皮),將子葉切成薄片制片①取最薄的切片,放在載玻片中央②滴2~3滴蘇丹Ⅲ染液(染色3min)③去浮色:加1~2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液④制成臨時(shí)裝片:滴一滴蒸餾水,蓋上蓋玻片先低倍鏡下找著色顆粒,再高倍鏡觀察觀察:結(jié)論:圓形小顆粒呈橘黃色,證明有脂肪存在。脂肪微粒方法一:花生種子勻漿+3滴蘇丹Ⅲ染液→橘黃色3實(shí)驗(yàn)過程及結(jié)論馬鈴薯勻漿檢測組織樣液2mL碘液2滴結(jié)論:組織樣液中存在淀粉。搖勻后變成藍(lán)色取材:(4)淀粉的鑒定試劑現(xiàn)象原理還原糖蛋白質(zhì)脂肪斐林試劑雙縮脲試劑蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅳ磚紅色沉淀變紫色橘黃色紅色可溶性還原糖與Cu(OH)2反應(yīng)生成磚紅色沉淀Cu2O脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色脂肪可以被蘇丹Ⅳ染成紅色具有兩個(gè)以上肽鍵的化合物,在堿性條件下與Cu2+反應(yīng)生成紫色絡(luò)合物歸納比較課堂小結(jié)課堂小結(jié)課堂小結(jié)Summary細(xì)胞中的元素和化合物組成細(xì)胞的元素組成細(xì)胞的化合物檢測生物組織中的糖類、脂肪、蛋白質(zhì)大量元素微量元素:FeMnBZnMoCu基本元素:C、H、O、N最基本元素:C無機(jī)化合物:水、無機(jī)鹽有機(jī)化合物:糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、核酸糖類脂質(zhì)蛋白質(zhì)淀粉還原糖鑒定斐林試劑,磚紅色沉淀脂肪鑒定蘇丹III:橘黃色
雙縮脲試劑:紫色碘液:變藍(lán)甲液:0.1g/mLNaOH溶液乙液:0.05g/mLCuSO4溶液
A液:0.1g/mLNaOH溶液
B液:0.01g/mLCuSO4溶液新制的Cu(OH)21.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中,正確的是(
)A.用于鑒定還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B.脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的顆粒C.鑒定還原糖時(shí),要先加入斐林試劑甲液搖勻后再加入乙液D.用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,且必須現(xiàn)用現(xiàn)配×√××B2.以下關(guān)于實(shí)驗(yàn)的描述,正確的是(
)A.脂肪的鑒定中用體積分?jǐn)?shù)75%的酒精洗去浮色B.西瓜汁中含有豐富的葡萄糖和果糖,可作為還原糖鑒定的替代材料C.脂肪的鑒定中發(fā)現(xiàn)滿視野都呈現(xiàn)橘黃色,于是滴1~2滴體積分?jǐn)?shù)為50%的鹽酸洗去多余的染液D.在稀釋的蛋清液中加入雙縮脲試劑,振蕩搖勻,可看到溶液變?yōu)樽仙痢廖鞴现械纳貢?huì)干擾磚紅色的觀察體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液×√D
待測物質(zhì)檢測試劑預(yù)期顯色結(jié)果①葡萄糖蘇丹Ⅲ染液紅色②脂肪蘇丹Ⅲ染液橘黃色③淀粉斐林試劑藍(lán)色④蛋白質(zhì)雙縮脲試劑紫色3.對下表中所列待測物質(zhì)的檢測,所選用的試劑及預(yù)期結(jié)果都正確的是(
)A.①③
B.②③
C.①④
D.②④D4.油菜種子成熟過程中部分有機(jī)物的變化如下圖所示。將不同成熟階段的種子制成勻漿后檢測,檢測結(jié)果正確的是
(
)選項(xiàng)取樣時(shí)間檢測試劑檢測結(jié)果A第10d斐林試劑不顯色B第20d雙縮脲試劑不顯色C第30d蘇丹Ⅲ試劑橘黃色D第40d碘液藍(lán)色解析:第10d有可溶性糖,不排除有還原糖的可能,故加入斐林試劑,水浴加熱后可能出現(xiàn)磚紅色沉淀;種子中一定有蛋白質(zhì),加入雙縮脲試劑后會(huì)呈現(xiàn)紫色;第30d種子中有脂肪,與蘇丹Ⅲ染液發(fā)生反應(yīng),呈現(xiàn)橘黃色;第40d種子中無淀粉,加入碘液后不會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。C5.小麥種子萌發(fā)時(shí)產(chǎn)生淀粉酶,將淀粉水解為麥芽糖、葡萄糖等。小麥種子萌發(fā)的最適溫度為
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