葡萄酒產(chǎn)地技術(shù)的追溯

葡萄酒產(chǎn)地技術(shù)的追溯

隨著中國經(jīng)濟的快速發(fā)展，中國居民的消費能力日益增強。葡萄酒作為一種有益的酒精飲料,越來越受到國內(nèi)消費者的青睞。根據(jù)海關(guān)總署數(shù)據(jù)統(tǒng)計,2011年,我國葡萄酒進口量為3.25億L,同比增長30.9%,進口金額達12.65億美元。雖然我國人均葡萄酒消費只有世界平均水平的6%,但在全球葡萄酒行業(yè)發(fā)展增速趨緩的背景下,我國進口葡萄酒數(shù)量仍出現(xiàn)了迅速上升的趨勢,說明國內(nèi)葡萄酒市場發(fā)展?jié)摿κ志薮?。葡萄酒的產(chǎn)地在很大程度上決定了其價值,葡萄酒消費者習慣于根據(jù)葡萄酒標簽來判定葡萄酒是否值得購買,卻鮮有能通過葡萄酒內(nèi)在品質(zhì)來選擇,因此一些不法葡萄酒廠商通過仿造酒標、舊瓶裝新酒等手段冒充高價值產(chǎn)區(qū)的葡萄酒來獲取暴利。歐洲是世界葡萄酒的主要產(chǎn)地,在葡萄酒鑒定方面的研究全球領(lǐng)先。為了更好地控制歐洲本地市場葡萄酒產(chǎn)品的真實性,歐盟(EuropeanUnion)2002年發(fā)起建立“第三國葡萄酒分析參數(shù)數(shù)據(jù)庫”),旨在建立全球葡萄酒原產(chǎn)地參數(shù)數(shù)據(jù)庫,為進一步鑒定葡萄酒真?zhèn)翁峁?shù)據(jù)基礎(chǔ)。與歐洲相比,我國葡萄酒產(chǎn)地溯源的基礎(chǔ)信息還很薄弱,僅在香氣成分和近紅外分析方面有些初步的研究。由于缺乏可靠的真實酒樣,國內(nèi)的研究還局限于國產(chǎn)葡萄酒產(chǎn)地溯源。因此,發(fā)展進口葡萄酒的產(chǎn)地溯源與鑒定技術(shù)是規(guī)范當前我國葡萄酒市場以及完善葡萄酒相關(guān)法規(guī)的前提條件。葡萄酒鑒定最核心的問題是對其葡萄酒原產(chǎn)地的識別?，F(xiàn)代化學分析方法建立以前,葡萄酒的鑒定最初是由專業(yè)品酒師完成,雖然在一定程度上能為葡萄酒提供專業(yè)的真?zhèn)舞b別,但是必定帶有很多主觀因素。因此,建立客觀標準化的鑒定方法是未來葡萄酒鑒定的發(fā)展趨勢。為推動我國葡萄酒安全追溯制度的建立與完善,促進進口名牌葡萄酒產(chǎn)地溯源技術(shù)的研發(fā),本文從檢測指標和方法等方面來綜述葡萄酒產(chǎn)地溯源技術(shù)的最新研究進展與應用現(xiàn)狀,并指出我國葡萄酒產(chǎn)地溯源未來研究的一些重點。1國外葡萄酒產(chǎn)地溯源研究對葡萄酒進行產(chǎn)地溯源首先需要了解世界葡萄酒產(chǎn)區(qū)的相關(guān)信息。產(chǎn)地的氣候條件、土壤質(zhì)量和適宜種植的葡萄品種是影響葡萄酒品質(zhì)的重要因素。即使是同一品種的葡萄在不同產(chǎn)地的陽光、溫度、濕度等條件下所產(chǎn)出的葡萄酒也風格迥異,正是由于這些特定因素構(gòu)成了葡萄酒的多元化以及原產(chǎn)地價值。因此,葡萄酒的產(chǎn)地在一定程度上決定了葡萄酒品質(zhì)。由圖1可知,全球主要葡萄酒產(chǎn)區(qū)主要分布在北緯30°~45°和南緯30°~45°附近,其中歐洲南部的葡萄酒產(chǎn)區(qū)分布最為密集,也是葡萄酒產(chǎn)地溯源研究的關(guān)鍵點。歐盟為了保護本地葡萄酒產(chǎn)品,設(shè)立了嚴格的葡萄酒原產(chǎn)地保護法規(guī),奠定了葡萄酒產(chǎn)地溯源的法律基礎(chǔ)。表1列舉了世界主要葡萄酒生產(chǎn)國以及主要葡萄酒品牌,不難發(fā)現(xiàn)繁雜的葡萄酒產(chǎn)地和品牌給葡萄酒的產(chǎn)地溯源帶來了巨大的技術(shù)挑戰(zhàn)。英國葡萄酒作家Johnson率先將世界上所有的葡萄酒產(chǎn)區(qū)分為舊世界(oldworld)與新世界(newworld)?！芭f世界”主要指法國、意大利、西班牙等有著幾百年歷史的傳統(tǒng)葡萄酒釀造國家,而“新世界”則指美國、加拿大、阿根廷、澳大利亞等新大陸的新興葡萄酒釀造國家。在歐洲的傳統(tǒng)葡萄酒產(chǎn)區(qū),眾多品種的葡萄經(jīng)過上千年的選擇和培育能夠很好地適應當?shù)氐臍夂蚝屯寥?。釀造過程也盡量遵循自然條件醞釀酒的滋味與風華,這樣的理念一直是歐洲高級葡萄酒的精神。新世界葡萄酒的發(fā)展始于哥倫布發(fā)現(xiàn)新大陸,歐洲的葡萄品種隨新移民潮帶到當?shù)胤N植,陸續(xù)傳抵至南美洲和澳洲,開啟了新世界的葡萄栽種與釀造。近代釀造業(yè)技術(shù)不斷創(chuàng)新,從原初的單純保護葡萄發(fā)酵過程的順利進行,到現(xiàn)今采用高科技不斷提升葡萄酒質(zhì)量。因此,新世界葡萄酒更注重消費者的體驗,釀造過程會更傾向于一些人為添加或者加工,以保證最大的消費者認可度。2葡萄酒生產(chǎn)源的技術(shù)方法2.1icp-ms測定葡萄酒含有豐富的礦質(zhì)元素,其中包括K、Ca、Na、Mg等常見元素,也包括Fe、Cu、Zn、Mn等微量元素以及Pb、Sr、Cr等痕量重金屬元素。這些礦物質(zhì)元素主要依靠葡萄從種植地土壤吸收,因而不同產(chǎn)地土壤礦質(zhì)元素種類和含量比例的差異具有地理地質(zhì)特異性,導致葡萄酒的礦質(zhì)元素組成也具有明顯的地理差異。礦質(zhì)元素的分析主要是利用無機質(zhì)譜進行定量分析(表2),常用的有電感耦合等離子體質(zhì)譜(inductivelycoupledplasmamassspectrometry,ICP-MS)、電感耦合等離子發(fā)射光譜儀(inductivelycoupledplasmaatomicemissionspectrometry,ICP-AES)、石墨爐原子吸收分光光度法(graphitefurnaceatomicabsorptionspectrometry,GF-AAS)和火焰原子吸收光譜儀(fireatomicabsorptionspectrometry,F-AAS)。與其他方法相比,ICP-MS,特別是多接收電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(multi-collectorinductivelycoupledplasmamassspectrometry,MC-ICP-MS),由于其操作簡便、檢測限低(10-12~10-9級別)、測定范圍廣、具備同位素分析能力等優(yōu)點被廣泛運用于葡萄酒礦質(zhì)元素的指紋分析。礦質(zhì)元素指紋分析應用于葡萄酒產(chǎn)地溯源的研究非常多。例如,Galgano等利用61種元素含量結(jié)合規(guī)范變量分析(canonicalvariateanalysis,CVA)成功的對意大利3個省生產(chǎn)的葡萄酒進行分類,并且找出了提供主要區(qū)分能力的礦質(zhì)元素。Gonzalvez等通過38種重礦質(zhì)含量分析西班牙瓦倫西亞受法律保護的原產(chǎn)地(protecteddesignationoforigin,PDO)葡萄酒來源,結(jié)果表明借助不同的多元分析模型(PCA、DA和分類回歸樹(classificationandregressiontree,CARTs)以及利用特定的礦質(zhì)元素也能有效區(qū)分出不同產(chǎn)地的葡萄酒,并且大部分的礦質(zhì)元素都可以用來進行產(chǎn)地溯源分析。Rodrigues等通過測定17種礦質(zhì)元素對葡萄牙4個葡萄酒產(chǎn)區(qū)的白葡萄酒和紅葡萄酒進行鑒定,調(diào)查葡萄酒產(chǎn)地和酒種(白葡萄酒和紅葡萄酒)是否與酒標標稱的信息相符,結(jié)果表明某些礦質(zhì)元素不僅能區(qū)分產(chǎn)地而且還能區(qū)分酒種。這些研究均顯示礦質(zhì)元素能提供強大的葡萄酒產(chǎn)地溯源能力,具有很好的應用前景。然而,Trujillo等的調(diào)查研究發(fā)現(xiàn),很多時候葡萄酒礦質(zhì)元素含量的差異并不一定來源于土壤,而可能是釀酒設(shè)備或者加工過程中引入的,產(chǎn)地溯源計算時需加以甑別。因此,在利用礦質(zhì)元素進行產(chǎn)地鑒定之前,必須考慮種植、釀造和加工過程中的信息,篩選適宜的元素進行指紋分析才能保證產(chǎn)地溯源結(jié)果的可靠性。2.2點特異性天然同位素及其衍生物的應用很多情況下,單一利用礦質(zhì)元素指紋分析并不能很好地區(qū)分出葡萄酒的特定產(chǎn)區(qū),特別是土壤性質(zhì)比較接近的相鄰產(chǎn)區(qū)。由于土壤組成成分類似,葡萄酒中的礦質(zhì)元素就不能提供產(chǎn)地相關(guān)的信息。隨著同位素質(zhì)譜技術(shù)(元素分析儀-穩(wěn)定同位素比例質(zhì)譜儀(elementaryanalyzer-stableisotoperatiomassspectrometers,EA-IRMS)、氣相色譜-燃燒-同位素比例質(zhì)譜計(gaschromatography-combustionIRMS,GC-C-IRMS)、液相色譜-同位素比例質(zhì)譜計(liquidchromatography-combustion-IRMS,LC-IRMS)以及點特異性天然同位素分餾核磁共振技術(shù)(site-specificnaturalisotopefractionation-nuclearmagneticresonance,SNIF-NMR)等)的發(fā)展和普及,利用穩(wěn)定同位素方法進行產(chǎn)地溯源已取得了很好的效果。例如,Capron等利用歐盟葡萄酒數(shù)據(jù)庫成功地將匈牙利、羅馬利亞、捷克共和國和南非的葡萄酒區(qū)分開,準確率達到97%。穩(wěn)定同位素具有整合(integration)、示蹤(tracing)和指示(indication)的功能,可以從生理生態(tài)角度提供更準確、更高效的葡萄酒產(chǎn)地溯源能力。以下詳述幾種常見的穩(wěn)定同位素分析方法。2.2.1甲基位點上的氫同位素差異SNIF-NMR能提供有機分子特定位點氫同位素比值。有機分子中的氫同位素比值通常與產(chǎn)地氣候和地理條件密切相關(guān),同時也受到植物代謝方式的影響。因此,2H-NMR被廣泛用于葡萄酒的鑒定,且早在1990年歐盟就采用該方法作為官方方法來檢測葡萄酒釀造過程中的摻糖行為。葡萄生長過程中利用空氣中的二氧化碳和當?shù)氐乃?H2O、HDO)進行光合作用合成糖,再通過發(fā)酵產(chǎn)生酒精。這個過程中氫(H)同位素在有機分子中的分布變化并不是隨機的(圖2)。酒精的氫同位素主要有以下幾種形式CH2DCH2OH、CH3CHDOH和CH3CH2OD等3種形式。通常甲基位點(—CH3)上的氫原子比較保守,主要來源于光合作用產(chǎn)生的葡萄糖;亞甲基(—CH2—)位點上的氫則可能來自于糖酵解過程或者是葡萄汁中的水產(chǎn)生的氫原子;而羥基(—OH)上的氫來源于葡萄汁中的水。因此,甲基位點上的氫同位素差異包含了不同地理起源的葡萄酒信息。最新研究指出,NMR分析不僅能區(qū)分較大尺度葡萄酒產(chǎn)地(不同產(chǎn)區(qū)),對更小尺度(酒莊)的葡萄酒產(chǎn)地的溯源也具有較好的應用前景。Lopez-Rituerto等通過1H-NMR技術(shù)結(jié)合區(qū)間擴展標準變量分析法(iECVA)區(qū)分了西班牙里奧哈產(chǎn)區(qū)3個小產(chǎn)區(qū)的葡萄酒,并且指出異戊醇和異丁醇是很好的指示化合物。Viggiani等利用1H-NMR對意大利Basilicata地區(qū)不同產(chǎn)區(qū)葡萄酒進行鑒定和溯源,得到了較好的區(qū)分效果。通過結(jié)合2H-和13C-NMR測定丙三醇特定位點的2H和13C比率,不僅可為葡萄酒的鑒定和產(chǎn)地溯源提供更加豐富的產(chǎn)地信息,也可提高更小尺度的產(chǎn)地溯源能力,還能同時鑒定葡萄酒加水摻糖等非法行為。雖然SNIF-NMR在研究葡萄酒產(chǎn)地溯源方面具有準確、高效的特點,但由于NMR設(shè)備昂貴,且操作要求高,限制了NMR方法的廣泛應用。此外,葡萄代謝組學和發(fā)酵過程方面的研究相對滯后,對結(jié)果的解釋往往會產(chǎn)生誤差。已有研究指出,使用2H-NMR測定酒精D/H比率對葡萄酒進行產(chǎn)地溯源和鑒定的過程中并沒有考慮發(fā)酵過程中不同酵母和不同發(fā)酵溫度所帶來的影響,可能對結(jié)果造成50%的誤差。以上原因大大限制了NMR方法在葡萄酒品質(zhì)鑒定與產(chǎn)地溯源方面的應用。2.2.2葡萄酒中13c與產(chǎn)物的質(zhì)譜分析碳(C)和氧(O)是組成生物體的最主要也是含量最多的元素。不同物種具有不同的生理反應過程,導致了不同的同位素分餾效應。葡萄酒的釀造過程是個復雜的生物化學過程,其同位素組成與葡萄品種、種植方法、釀造工藝以及當?shù)氐刭|(zhì)氣候狀況密切相關(guān)。葡萄汁和葡萄酒中的O可能來自于大氣氧、二氧化碳以及植物吸收的水分,其同位素比值(δ18O)受到產(chǎn)地大氣和水文條件的影響。同樣地,葡萄酒中的碳同位素比值(δ13C)取決于光合作用固定二氧化碳的過程,與植物的光合途徑(C3、C4)、環(huán)境因子(溫度、濕度、降雨)以及生理因素(氣孔導度、胞間二氧化碳濃度)等密切相關(guān)。這些因素的差異使得葡萄酒中的C和O同位素帶有葡萄酒產(chǎn)地的指紋信息,可以用來進行葡萄酒產(chǎn)地溯源。葡萄與甜菜等大部分蔬菜水果植物通過C3光合途徑(即Calvin循環(huán))固定CO2,而玉米、甘蔗等利用C4光合途徑(Hatch-Slack循環(huán))固定CO2。由于兩種光合途徑固定CO2的酶(RUPB羧化酶和PEP羧化酶)產(chǎn)生的動力分餾值不同,導致C3植物的δ13C值分布在-36‰~-20‰之間,而C4光合作用的植物δ13C值分布在-15‰~-7‰之間。由于這兩種類型的植物δ13C值沒有重疊,因此碳同位素分析還可用來對葡萄酒發(fā)酵過程中摻C4糖的行為進行甄別。目前,用于測定葡萄酒產(chǎn)品δ13C和δ18O的目標化合物主要有乙醇、丙三醇和水。葡萄酒發(fā)酵過程中92%的糖通過乙醇發(fā)酵生成酒精,剩下8%的糖通過丙三醇-丙酮酸的發(fā)酵生成丙三醇。歐盟已將葡萄酒乙醇和丙三醇δ13C以及葡萄酒中水的δ18O值作為葡萄酒鑒定的主要指標。早期測定乙醇的δ13C需要特殊的裝置和復雜的方法來獲得至少92%的乙醇體積分數(shù),而葡萄酒中水的氧同位素比值測定也需要進行充分的樣品提取與純化才能進行,如此復雜的前處理過程限制了該方法的推廣應用。隨著同位素質(zhì)譜儀和色譜分離技術(shù)的發(fā)展,20世紀70年代末Sano等嘗試將氣相色譜與同位素比率質(zhì)譜儀聯(lián)用測定有機物的δ13C值,即GC-C-IRMS法。1997年歐盟決定采用該方法用于測定葡萄酒中的乙醇和丙三醇δ13C值,即將GC分離后的乙醇通過氦氣流送入燃燒室先轉(zhuǎn)化為CO2后再進入IRMS分析其碳同位素比值。此方法省略了復雜的樣品前處理步驟,因而得到更廣泛的應用。GC-C-IRMS僅能對葡萄酒中易揮發(fā)的組分進行分析(如乙醇、丙三醇),但對于一些難揮發(fā)或者汽化點過高的有機組分(如氨基酸、糖類以及酚類)物質(zhì)則不能直接測定其同位素組成,必須將目標化合物衍生,通過GC分離再測定其同位素組成。衍生化過程會帶來新加入C的干擾,因此大大降低了該方法的準確性和重現(xiàn)性。高效液相色譜儀(highperformanceliquidchromatograph,HPLC)能分離葡萄酒中大部分的有機小分子,但是由于有機流動相的干擾,使得HPLC很難與IRMS在線聯(lián)用,必須將HPLC分離的目標化合物離線氣化成CO2再進入IRMS分析,并且前處理過程不能發(fā)生同位素分餾。隨著同位素質(zhì)譜新一代技術(shù)的發(fā)展,現(xiàn)在可以利用商業(yè)化的質(zhì)譜組件如FinniganLCIsoLink模塊將HPLC和IRMS聯(lián)用。IsoLink模塊能將HPLC分離的目標化合物完全氧化成CO2,脫水后通過氦氣流直接進入IRMS測定同位素比值。由于此過程為完全化學反應,因此不會產(chǎn)生同位素分餾。Cabanero等比較了EA-IRMS、GC-IRMS和HPLC-IRMS法測定葡萄酒中乙醇δ13C值,發(fā)現(xiàn)3種方法測定結(jié)果沒有顯著差異,并且HPLC法測試精度達到0.15‰。此后該作者又同時測定葡萄酒中乙醇和丙三醇的δ13C值,精度達到0.25‰,第一次實現(xiàn)了利用HPLC-IRMS同時測定乙醇和丙三醇的δ13C值。Guyon等還利用HPLC-IRMS法嘗試測定葡萄酒中葡萄糖、果糖、酒精以及丙三醇的δ13C值,并認為相同來源的葡萄酒中以上4種成分的δ13C的比值應為常數(shù)。由此可見,HPLC-IRMS方法技術(shù)既省去了傳統(tǒng)方法復雜的前處理過程,同時還能分析GC-C-IRMS法不能測定的組分,為葡萄酒產(chǎn)地溯源和鑒定方法提供更有力的技術(shù)支撐和新的思路,勢必會展現(xiàn)出更大的葡萄酒產(chǎn)地溯源應用能力。2.2.3葡萄酒中pb同位素組成硼(B)在自然界中主要以10B和11B兩種形式存在,由于不同的地球化學過程引起硼同位素的分餾,從而導致巖石、海洋沉積物和自然水體中11B/10B的變異。硼也是植物體必須的微量元素,通過根系從土壤中吸收,因此植物體內(nèi)的硼同位素組成帶有原產(chǎn)地的信息。Coetzee等通過測定比較了南非(Stellenbosch)、法國(Bergerac)和意大利(Valpolicella)地區(qū)葡萄11B/10B值,不同產(chǎn)地間葡萄酒硼同位素值之間的差異為0.5%~1.5%,而測定精度(相對標準偏差(relativestandarddeviation,RSD))為0.1%~0.25%,因此可以用來區(qū)分產(chǎn)地。鍶(Sr)有84Sr、86Sr、87Sr和88Sr4種同位素,其中87Sr是由87Rb放射衰變產(chǎn)生的,并且在地殼中逐步積累。自然生長的葡萄通過根系吸收Sr,并通過疏導組織轉(zhuǎn)運到果實,最終存在于葡萄酒中。Marisa等研究證明,葡萄酒中87Sr/86Sr比率與原產(chǎn)地土壤中87Sr/86Sr比值沒有統(tǒng)計差異,說明葡萄種植以及發(fā)酵過程并不會引起Sr同位素比率的改變,顯示出了良好的應用前景。但該方法現(xiàn)階段還存在一些測試技術(shù)上的問題。現(xiàn)在測定Sr同位素多用MC-ICP-MS,比起傳統(tǒng)的熱電離質(zhì)譜技術(shù)(thermalionizationmassspectrometry,TIMS)具有價格便宜,測定方便的優(yōu)點,但同時也容易受到各種干擾而引起測定誤差。Choi等在用Sr同位素對人參原產(chǎn)地進行溯源研究的時候,所測出的87Sr/86Sr比值低于自然界比值的下限,這個結(jié)果顯然是不合理的。自然界87Sr/86Sr比值介于0.702~0.740之間,而根據(jù)文獻報告的紅酒中87Sr/86Sr比值范圍介于0.71~0.73之間。因此在利用該方法時必須確保測試的準確性和精度能達到溯源的標準。鉛(Pb)共有4種天然同位素:204Pb、206Pb、207Pb和208Pb。其中204Pb的半衰期非常長為1.4×107年,因此一般作為鉛穩(wěn)定同位素的參考物。但由于204Pb在自然界豐度較低,因此測定精度較差。206Pb、207Pb和208Pb分別為238U、235U和232Th放射性衰變的最終產(chǎn)物,一般以206Pb/207Pb和208Pb/207Pb作為檢測指標。因此年代不同,Pb、U和Th含量不同的天然物質(zhì),其Pb同位素組成也不同。因此可以將Pb同位素作為一種“指紋”信息區(qū)分不同產(chǎn)地來源的產(chǎn)品。Dean等比較了澳大利亞和歐洲葡萄酒Pb同位素組成,表明不同地點葡萄酒中的鉛具有不同的同位素組成。也有學者指出,大氣沉降過程中攜帶的鉛也能被葡萄植物吸收,而且來源于大氣的鉛可能要高于植物從沉積物吸收的。因此,葡萄酒中Pb同位素組成不僅包含原產(chǎn)地地質(zhì)、氣候信息,而且還能反應這一地區(qū)的污染。因此,需要更多地了解當?shù)氐沫h(huán)境背景才能更好地利用Pb作為產(chǎn)地溯源的指紋信息。穩(wěn)定同位素在不同方面為葡萄酒的產(chǎn)地溯源提供了非?？煽康闹讣y信息。利用多元統(tǒng)計方法可以將不同穩(wěn)定同位素的溯源能力進行有機結(jié)合,能提供更高效、更強大的小產(chǎn)區(qū)溯源能力(圖3)。例如通過測定葡萄酒的(D/H)II、13C以及18O3種同位素能很好的區(qū)分斯洛文尼亞的Drava和Sava兩個內(nèi)陸的小產(chǎn)區(qū)。Horn等探討了利用87Sr/86Sr和δ18O在葡萄酒產(chǎn)地溯源上的應用,并認為這兩種同位素的結(jié)合能得到最優(yōu)的產(chǎn)地溯源效果。這說明結(jié)合不同同位素在葡萄酒產(chǎn)地溯源方面的特殊能力,探索最優(yōu)化的指標組合,從而獲得最佳的溯源效果。2.3其他方法論2.3.1不同產(chǎn)地葡萄酒香氣成分檢測分析方法葡萄酒的香氣主要來源于葡萄成熟以及釀造過程中產(chǎn)生的揮發(fā)性物質(zhì)。揮發(fā)性物質(zhì)的主要來自于3個階段:第一階段為葡萄成熟后原葡萄香氣,主要與品種和成熟度有關(guān);第二階段是酒精發(fā)酵過程中由酶化學反應和熱力學反應產(chǎn)生的香氣,主要與發(fā)酵菌種以及釀造方法有關(guān);最后在陳化過程中產(chǎn)生的香氣,陳化年份為主要影響因素。因此葡萄酒香氣主要與葡萄品種、成熟度、釀造方式以及年份有關(guān)。利用這些特定信息能對不同產(chǎn)地的葡萄酒進行分類和溯源。常用的測定葡萄酒香氣成分的方法有氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用以及電子鼻法。GC-MS法主要前處理方法有靜態(tài)頂空、動態(tài)頂空、固相微萃取等,主要分離分析方法有GC、GC-MS、GC×GC-MS、GC-O、電子傳感器等。通過對所測得的特征香氣成分進行定量,結(jié)合方差分析(analysisofvariance,ANOVA)、PCA、LDA等統(tǒng)計方法對葡萄酒產(chǎn)地進行溯源。不同產(chǎn)地的葡萄酒除香氣濃度具有差異外,成分組成上也具有明顯的不同,因此,利用陣列氣體傳感器可以區(qū)分出不同葡萄酒產(chǎn)品頂空中香氣成分含量差異,這種方法被稱為電子鼻法。電子鼻具有檢測快速,所需樣品量少等優(yōu)點,但是由于氣體傳感器對特定氣體的選擇度并不特別專一,因此可能引起錯誤的判定。盡管如此,電子鼻技術(shù)還是有一些成功的應用。例如Guadarrama等結(jié)合電子鼻技術(shù)以及PCA分析方法成功區(qū)分出了西班牙紅葡萄酒、白葡萄酒以及玫瑰葡萄酒,而Penza等成功地區(qū)分了意大利不同產(chǎn)地的葡萄酒,正確率達到100%。2.3.2穩(wěn)定同位素組成的檢測由于每種分子都有由其組成和結(jié)構(gòu)決定的獨有的紅外吸收光譜,據(jù)此可利用紅外光譜對分子進行結(jié)構(gòu)分析和鑒定。利用這個原理,不同葡萄酒樣品能獲得不同的紅外光譜。在實際應用中,近紅外線(nearinfra-red,NIR)和中紅外線(middleinfra-red,MIR)光譜分析已獲得了很好的效果。例如,Arana等利用NIR光譜對夏埃頓白葡萄酒的產(chǎn)地和葡萄品種、成熟度進行研究,得到了較好的結(jié)果。Liu等利用NIR和可見光譜結(jié)合多元分析區(qū)分了西班牙和澳大利亞紅葡萄酒,準確率達到72%~85%。Picque等利用MIR對紅酒的產(chǎn)地和葡萄采摘年份進行了區(qū)分。Fernández等利用傅里葉變換中紅外線光譜儀(Fouriertransforminfraredspectrometer,FT-MIR)對紅酒中的單寧含量進行定量分析,并嘗試對紅酒質(zhì)量進行評估。雖然紅外光譜法具有快速高效、多組分測定以及無損分析等優(yōu)勢,但是紅外光譜法也有一定的局限性,比如大多數(shù)目標化合物具有相似的紅外吸收光譜,并且容易受到葡萄酒中主要成分(水、乙醇)的影響。特別是對葡萄酒中多酚進行檢測時,以上兩種情況都會影響到葡萄酒產(chǎn)地判別的準確性?？傊?目前為止還沒有一種方法能獨立對市場中的葡萄酒進行產(chǎn)地溯源。多方法多技術(shù)的結(jié)合,相互取長補短將是對小產(chǎn)區(qū)葡萄酒產(chǎn)地進行溯源的有效方案,特別是多元素同位素組成分析。此外,穩(wěn)定同位素技術(shù)由于其精度高、無需復雜前處理過程等特點,有望成為產(chǎn)地溯源與鑒定的標準方法。HPLC-IRMS技術(shù)的發(fā)展大大擴展了特定分子的同位素組成的測定,具有廣