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文檔簡介
如何養(yǎng)好細(xì)胞——污染的防治狀態(tài)好的細(xì)胞是做好一切實(shí)驗(yàn)的基石好的細(xì)胞狀態(tài)是好的結(jié)果重復(fù)性的保證污染——細(xì)胞培養(yǎng)的大敵影響細(xì)胞狀態(tài)影響細(xì)胞的生長與細(xì)胞競爭營養(yǎng)最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡對于新手,細(xì)胞污染幾乎是無法避免的問題!什么是細(xì)胞污染?凡混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染細(xì)胞污染不能完全被消除,但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性細(xì)胞污染的分類物理污染化學(xué)污染生物污染物理污染
危害引起細(xì)胞代謝發(fā)生改變,如細(xì)胞同步化、細(xì)胞生長受抑制甚至細(xì)胞死亡化學(xué)污染
危害化學(xué)物質(zhì)并不總是抑制細(xì)胞的生長,某些化學(xué)物質(zhì)如激素就可促進(jìn)細(xì)胞的生長。不同細(xì)胞對化學(xué)物質(zhì)污染的反應(yīng)是不一樣的。金屬離子、有機(jī)分子、細(xì)胞內(nèi)毒素等物質(zhì)對水的污染。超純水放置過久其純度會下降血清又是潛在的生物及化學(xué)污染的來源/血清采集于多個動物,而且不同廠商的生產(chǎn)工藝及質(zhì)量各不相同,因此血清中許多成分的濃度存在很大的變異培養(yǎng)液、培養(yǎng)附加成分、試劑培養(yǎng)液、培養(yǎng)附加成分、試劑都可能成為化學(xué)性污染的來源。采取標(biāo)準(zhǔn)的操作步驟,避免液體體積計(jì)算錯誤,培養(yǎng)器皿的大小,構(gòu)形設(shè)計(jì)可能會影響到培養(yǎng)中氣體交換、濕度、培養(yǎng)液的pH值和細(xì)胞生長密度。培養(yǎng)器皿的工藝及滅菌過程中的差異可能對培養(yǎng)體系產(chǎn)生影響。生物污染來源1環(huán)境:細(xì)胞房以及內(nèi)部設(shè)施;培養(yǎng)箱;超凈工作臺;保存細(xì)胞的液氮2操作者本身3操作器械4血清5培養(yǎng)液及的試劑6運(yùn)輸生物污染的種類:1細(xì)菌(金黃色葡萄球菌、大腸桿菌),真菌(霉菌、白色念珠菌、酵母),黑焦蟲2支原體、病毒3其他細(xì)胞交叉污染細(xì)菌污染
——293細(xì)胞50X100X細(xì)菌污染
——293細(xì)胞200X細(xì)菌污染
——293細(xì)胞,正常霉菌污染
——sk-hep-1細(xì)胞50X100X霉菌污染
——sk-hep-1細(xì)胞,正常50X100X支原體污染
——MHCC-LM6細(xì)胞50X100X支原體污染
——MHCC-LM6細(xì)胞,正常50X100X支原體污染
——T-47D細(xì)胞200X400X支原體污染
——T
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