干擾素釋放試驗ppt【完整版】PPT

干擾素釋放試驗pptY干擾素釋放試驗(interferon．1releaseassays），IGRA是檢測結(jié)核分枝桿菌(MTB)特異性抗原刺激T細胞產(chǎn)生的Y干擾素，以判斷是否存在MTB的感染。IGRAs可彌補PPD試驗的不足，目前多個國家已將其用于診斷MTB潛伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我國部分醫(yī)院也已常規(guī)開展此項檢測目前國際上較成熟的IGRAs有2種：(1)全血法：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測全血中致敏T細胞再次受到MTB特異性抗原刺激后釋放的1．干擾素水平，稱之為全血檢測或結(jié)核感染T細胞免疫檢測；(2)細胞法：采用酶聯(lián)免疫斑點技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)測定在MTB特異性抗原刺激下，外周血單個核細胞中能夠釋放1一干擾素的效應(yīng)T細數(shù)量，稱之為細胞檢測或結(jié)核感染T細胞檢測。上述2種檢測方法的原理類似，檢測技術(shù)和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl區(qū)基因編碼抗原多肽作為特異性抗原，主要相對分子質(zhì)量為6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相對分子質(zhì)量為10000的培養(yǎng)濾液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽T-SPOT試驗γ干擾素檢測陰性γ干擾素檢測陽性TB抗原多肽T細胞活化T細胞γ干擾素30IGRAs的結(jié)核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB復(fù)合群，而在卡介苗和大多數(shù)NTM中缺失，因此IGRAs的特異度較好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少數(shù)幾種NTM中，如堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、轉(zhuǎn)黃分枝桿菌和胃分枝桿，故IGRAs陽性不能排除上述幾種NTM感染的可能。PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳統(tǒng)方法，具有操作簡便、成本低廉的特點，至今仍廣泛使用，但該方法使用的PPD抗原成分復(fù)雜，易受卡介苗接種和非結(jié)核分枝桿菌(nontuberculosismyeobacterium，NTM)的影響，特異度較低，且對人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重癥疾病患者等免疫功能受損人群的敏感度不足。薈萃分析結(jié)果顯示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD試驗，但IGRAs(尤其是細胞檢測)受CD4+T細胞數(shù)量的影響小于PPD試驗，這可能因為IGRAs檢測過程已對單個核細胞數(shù)量進行了標準化，即在檢測程序上消除了淋巴細胞數(shù)量減少對檢測結(jié)果的影響PPD陽性對以下情況無法區(qū)分卡介苗預(yù)防接種√非結(jié)核分枝桿菌感染√LIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)核病治愈、自愈后√IGRAs陽性卡介苗預(yù)防接種ⅹ大多數(shù)非結(jié)核分枝桿菌感染ⅹLIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)核病治愈、自愈后√2021年全國結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群77.1%，非結(jié)核分枝桿菌22.9%2021年廣州結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查：非結(jié)核分枝桿菌19.3%，且其中前5位IGRAs為陰性的IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數(shù)據(jù)：經(jīng)培養(yǎng)確診的結(jié)核病患者樣本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特異性97.1%（297∕306）對活動性結(jié)核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區(qū)分LTBI和活動性結(jié)核病患者。國內(nèi)IGRAs的研究數(shù)據(jù)顯示其敏感度和特異度差別較大，敏感度為53％一98％，特異度為60％～90％(或以上)，但多數(shù)文獻報道的敏感度和特異度>70％，提示IGRAs的特異度優(yōu)于PPD試驗。IGRA用于診斷肺結(jié)核：深圳第三人民醫(yī)院的結(jié)果例數(shù)（n）ELISPOT(+)n(%)結(jié)核患者24461846（75.47）急性播散型肺結(jié)核5851（87.93）繼發(fā)性肺結(jié)核18381389（75.97）結(jié)核性胸膜炎538428（79.55）結(jié)核性腦膜炎5940（67.80）其他肺外結(jié)核356275（77.25）陳舊性肺結(jié)核5624（42.86）健康對照42265（14.20）新發(fā)肺結(jié)核密切接觸者384136（35.4）

中國的國情適用IGRAs嗎？Y-干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用的建議IGRAs可以有考慮到我國肺結(jié)核患者中菌陰肺結(jié)核所占比例較高，在診斷這類患者缺乏細菌學(xué)依據(jù)時，IGRAs可發(fā)揮其輔助作用應(yīng)用于活動性結(jié)核病的輔助診斷應(yīng)用于LTBI診斷中IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內(nèi)有IGRAs(僅限于ELISPOT方法)輔助診斷結(jié)核性胸膜炎和結(jié)核性腹膜炎等肺外結(jié)核的報道，其中采用胸腔積液和腹水等體液或組織標本檢測的IGRAs的敏感度和特異度高達90％以上，采用血液標本檢測時IGRAs則并未顯示出優(yōu)勢。此類研究報道數(shù)量不多，病例數(shù)也不足，且國家食品藥品監(jiān)督管理總局批準的IGRAs僅限于血液樣本的檢測，即IGRAs對體液或組織標本的研究尚未經(jīng)過充分驗證，不能得出可靠的結(jié)論。IGRAs對兒童結(jié)核病的輔助診斷兒童結(jié)核病的臨床癥狀不典型，重癥及肺外結(jié)核病比例較高，且結(jié)核病患兒的細菌載量低，咳嗽反射和氣管纖毛運動能力差，病原學(xué)檢查陽性率很低，PPD試驗和IGRAs聯(lián)合診斷有一定的輔助作用。IGRAs在LTBI診斷中的應(yīng)用1．活動性肺結(jié)核患者密切接觸者和醫(yī)務(wù)工作者中LTBI的診斷2．IGRAs在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI診斷中的應(yīng)用活動性肺結(jié)核患者密切接觸者和醫(yī)務(wù)工作者中LTBI的診斷1.PPD試驗和IGRAs均可用于LTBI的診斷和追蹤，若考慮到PPD試驗檢測結(jié)果可能受卡介苗接種或NTM影響時，可對PPD試驗陽性者進一步采用IGRAs幫助確認；(2)不宜采用IGRAs對大范圍人群進行LTBI篩查；(3)PPD試驗仍是在健康人群中動態(tài)篩查LTBI的首選。(1)對HIV感染人群進行LTBI篩查，單用PPD試驗的敏感度不高，應(yīng)單用IGRAs或聯(lián)合使用PPD試驗，在方法選擇上優(yōu)先考慮細胞檢測技術(shù)。(2)自身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮質(zhì)激素或TNF-拮抗劑治療前，應(yīng)單用IGRAs或聯(lián)合使用PPD試驗篩查LTBI。除HIV感染者外，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病、器官移植等免疫功能受損患者及糖尿病等特殊患者，因其自身原因，或接受糖皮質(zhì)激素或腫瘤壞死因子TNF拮抗劑等免疫抑制藥物治療導(dǎo)致免疫功能缺陷，這類患者是LTBI發(fā)展為結(jié)核病的高風(fēng)險人群，對這類患者也有必要進行LTBI篩查。應(yīng)行IGRAs和PPD檢測的6種情況（WHO2021）HIV陽性者肺結(jié)核病人的接觸者擬進行抗TNF治療的患者擬透析的患者擬行器官及造血細胞移植者矽肺患者結(jié)語(1)IGRAs可用于診斷MTB感染，但不能區(qū)分活動性結(jié)核病和LTBI，也不能準確預(yù)測LTBI發(fā)展為活動性結(jié)核病的風(fēng)險(2)IGRAs對疑似結(jié)核病患者具有輔助診斷作用，IGRAs陰性結(jié)果對排除MTB感染有一定幫助(3)IGRAs用于篩查LTBI時不受卡介苗接種的影響，較少受到NTM感染的影響，但IGRAs不適用于流行病學(xué)篩查(4)IGRAs在HIV感染人群中篩查LTBI的敏感度優(yōu)于PPD試驗，但在其他人群中的檢測效率尚需進一步研究。Thankyou干擾素釋放試驗ppt干擾素釋放試驗pptY干擾素釋放試驗(interferon．1releaseassays），IGRA是檢測結(jié)核分枝桿菌(MTB)特異性抗原刺激T細胞產(chǎn)生的Y干擾素，以判斷是否存在MTB的感染。IGRAs可彌補PPD試驗的不足，目前多個國家已將其用于診斷MTB潛伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我國部分醫(yī)院也已常規(guī)開展此項檢測目前國際上較成熟的IGRAs有2種：(1)全血法：采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測全血中致敏T細胞再次受到MTB特異性抗原刺激后釋放的1．干擾素水平，稱之為全血檢測或結(jié)核感染T細胞免疫檢測；(2)細胞法：采用酶聯(lián)免疫斑點技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)測定在MTB特異性抗原刺激下，外周血單個核細胞中能夠釋放1一干擾素的效應(yīng)T細數(shù)量，稱之為細胞檢測或結(jié)核感染T細胞檢測。上述2種檢測方法的原理類似，檢測技術(shù)和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl區(qū)基因編碼抗原多肽作為特異性抗原，主要相對分子質(zhì)量為6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相對分子質(zhì)量為10000的培養(yǎng)濾液蛋白(CFP一10)抗原或抗原多肽T-SPOT試驗γ干擾素檢測陰性γ干擾素檢測陽性TB抗原多肽T細胞活化T細胞γ干擾素30IGRAs的結(jié)核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB復(fù)合群，而在卡介苗和大多數(shù)NTM中缺失，因此IGRAs的特異度較好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少數(shù)幾種NTM中，如堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、轉(zhuǎn)黃分枝桿菌和胃分枝桿，故IGRAs陽性不能排除上述幾種NTM感染的可能。PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳統(tǒng)方法，具有操作簡便、成本低廉的特點，至今仍廣泛使用，但該方法使用的PPD抗原成分復(fù)雜，易受卡介苗接種和非結(jié)核分枝桿菌(nontuberculosismyeobacterium，NTM)的影響，特異度較低，且對人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重癥疾病患者等免疫功能受損人群的敏感度不足。薈萃分析結(jié)果顯示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD試驗，但IGRAs(尤其是細胞檢測)受CD4+T細胞數(shù)量的影響小于PPD試驗，這可能因為IGRAs檢測過程已對單個核細胞數(shù)量進行了標準化，即在檢測程序上消除了淋巴細胞數(shù)量減少對檢測結(jié)果的影響PPD陽性對以下情況無法區(qū)分卡介苗預(yù)防接種√非結(jié)核分枝桿菌感染√LIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)核病治愈、自愈后√IGRAs陽性卡介苗預(yù)防接種ⅹ大多數(shù)非結(jié)核分枝桿菌感染ⅹLIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)核病治愈、自愈后√2021年全國結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群77.1%，非結(jié)核分枝桿菌22.9%2021年廣州結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查：非結(jié)核分枝桿菌19.3%，且其中前5位IGRAs為陰性的IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數(shù)據(jù)：經(jīng)培養(yǎng)確診的結(jié)核病患者樣本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特異性97.1%（297∕306）對活動性結(jié)核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區(qū)分LTBI和活動性結(jié)核病患者。國內(nèi)IGRAs的研究數(shù)據(jù)顯示其敏感度和特異度差別較大，敏感度為53％一98％，特異度為60％～90％(或以上)，但多數(shù)文獻報道的敏感度和特異度>70％，提示IGRAs的特異度優(yōu)于PPD試驗。IGRA用于診斷肺結(jié)核：深圳第三人民醫(yī)院的結(jié)果例數(shù)（n）ELISPOT(+)n(%)結(jié)核患者24461846（75.47）急性播散型肺結(jié)核5851（87.93）繼發(fā)性肺結(jié)核18381389（75.97）結(jié)核性胸膜炎538428（79.55）結(jié)核性腦膜炎5940（67.80）其他肺外結(jié)核356275（77.25）陳舊性肺結(jié)核5624（42.86）健康對照42265（14.20）新發(fā)肺結(jié)核密切接觸者384136（35.4）

中國的國情適用IGRAs嗎？Y-干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用的建議IGRAs可以有考慮到我國肺結(jié)核患者中菌陰肺結(jié)核所占比例較高，在診斷這類患者缺乏細菌學(xué)依據(jù)時，IGRAs可發(fā)揮其輔助作用應(yīng)用于活動性結(jié)核病的輔助診斷應(yīng)用于LTBI診斷中IGRAs用于體液或組織標本？近幾年來國內(nèi)有IGRAs(僅限于ELISPOT方法)輔助診斷結(jié)核性胸膜炎和結(jié)核性腹膜炎等肺外結(jié)核的報道，其中采用胸腔積液和腹水等體液或組織標本檢測的IGRAs的敏感度和特異度高達90％以上，采用血液標本檢測時IGRAs則并未顯示出優(yōu)勢。此類研究報道數(shù)量不多，病例數(shù)也不足，且國家食品藥品監(jiān)督管理總局批準的IGRAs僅限于血液樣本的檢測，即IGRAs對體液或組織標本的研究尚未經(jīng)過充分驗證，不能得出可靠的結(jié)論。IGRAs對兒童結(jié)核病的輔助診斷兒童結(jié)核病的臨床癥狀不典型，重癥及肺外結(jié)核病比例較高，且結(jié)核病患兒的細菌載量低，咳嗽反射和氣管纖毛運動能力差，病原學(xué)檢查陽性率很低，PPD試驗和IGRAs聯(lián)合診斷有一定的輔助作用。IGRAs在LTBI診斷中