針刺時(shí)間對機(jī)體一氧化氮含量的影響

針刺時(shí)間對機(jī)體一氧化氮含量的影響

子午流注納甲法是臨床上常用的針灸方法。根據(jù)許多臨床報(bào)道，采用子下午流注納甲法進(jìn)行針灸治療的臨床療效比通常辨證治療更好。一氧化氮(NO)作為一種參與機(jī)體功能調(diào)節(jié)的重要信使分子和免疫調(diào)節(jié)分子,在人體的生理和病理活動中起著非常重要的作用。NO合成過多或不足與許多疾病的發(fā)生機(jī)制有關(guān)。有研究表明,針刺可調(diào)節(jié)機(jī)體組織內(nèi)NO含量及一氧化氮合酶(NOS)的活性,為針刺機(jī)理的研究開辟新的方法。在此基礎(chǔ)上,本研究擬通過測量NO在體表穴位的含量,探討時(shí)間因素對針刺效應(yīng)影響的作用機(jī)制。1數(shù)據(jù)和方法1.1平均性別和年齡于2006年分別對20例提供了知情同意書的健康志愿受試者進(jìn)行測試,均為本單位職工。隨機(jī)分為針刺組和非針刺組。針刺組10例,男5例,女5例;年齡25~45歲。非針刺組10例,男5例,女5例;年齡25~45歲。1.2針刺前準(zhǔn)備和no收集根據(jù)子午流注納甲法開穴時(shí)間表選取穴位。分別選取上肢、陰經(jīng)代表穴——手厥陰心包經(jīng)的間使和下肢、陽經(jīng)代表穴——足太陽膀胱經(jīng)的委中,在開穴時(shí)給予針刺;同時(shí)選取同側(cè)同一經(jīng)脈上的郄門和承筋作為NO的微透析部位,見圖1。針刺選用0.25mm×25mm毫針,輕刺入每個(gè)穴位約5~10mm,以60次/min的頻率捻轉(zhuǎn)行針2min,直到得氣。留針20min,每5min行針1次。停針后立即進(jìn)行NO收集,收集時(shí)間為20min。非針刺組不予針刺,NO采集和測定方法同針刺組。1.3no的檢測方法所有受試者在收集承筋穴位透析液時(shí),采取俯臥位于診療臺上。在收集郄門穴位透析液時(shí),身體保持坐姿,手臂與心臟維持在同一水平。室溫保持在25~27℃。女性受試者避開月經(jīng)期。針刺前所有受試者需靜坐30min,心情放松。針刺前和針刺后各測量2次血壓和心率,所有受試者的血壓和心率經(jīng)2次測量均在正常范圍。收集前先用無菌蒸餾水擦拭郄門和承筋,以保證穴位清潔,然后將自行研制的無菌收集管(0.5cm×3cm,縱向開口)分別貼附在受試者郄門和承筋上。注意塑料管兩端要密封,管壁要與皮膚緊密接觸,避免液體滲出。然后將NO清除化合物4甲基3氧化二苯(PTIO)以1∶9的比例溶解于透析底液VanadiumⅢ/HCl中進(jìn)行稀釋,再將稀釋后的溶液注入無菌塑料管內(nèi)。無菌管貼附于皮膚穴位表面20min以吸收局部皮下NO,然后將收集管中的透析液抽出注入另一無菌管內(nèi)保存待測。采用化學(xué)發(fā)光法,使用NO測定儀(NOA280i,美國通用電氣公司生產(chǎn)),通過測定NO的穩(wěn)定代謝終產(chǎn)物硝酸根(NO3-)和亞硝酸根(NO2-)的含量來間接反映NO含量的變化。此方法具有較高靈敏度,是目前常用的檢測方法之一。1.4計(jì)軟件的數(shù)據(jù)處理及顯著性分析所有數(shù)據(jù)采用表示。使用通用的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,以獨(dú)立t檢驗(yàn)對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析,以P<0.05作為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的檢測標(biāo)準(zhǔn)。2兩組no含量比較2組NO含量的比較見表1。可見,針刺組穴位NO含量普遍高于非針刺組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。承筋在合穴時(shí),針刺組NO含量高于非針刺組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。穴位在“開”/“合”狀態(tài)下NO含量比較,針刺組穴位的NO含量在“開穴”時(shí)高于“合穴”,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t郄門=1.55,t承筋=1.03,均P<0.05),而非針刺組“開穴”與“合穴”比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t郄門=0.26,t承筋=0.43,均P>0.05)。3子+流注針刺子午流注針法是中國古代醫(yī)家提出的一種按照時(shí)間規(guī)律進(jìn)行取穴的針刺療法,是根據(jù)人體氣血臟腑經(jīng)絡(luò)的日、時(shí)開穴規(guī)律配合天干、地支、陰陽五行,由五腧穴組成的一種逐日按時(shí)開穴治病的方法。影響針灸療效有許多因素,其中重要的因素之一就是時(shí)間因素。中醫(yī)認(rèn)為,時(shí)間因素對于機(jī)體最基本的調(diào)節(jié)作用在于,經(jīng)氣沿著經(jīng)絡(luò)每日按著一定的時(shí)間規(guī)律循環(huán)往復(fù),有時(shí)虧(acupointebb),有時(shí)盈(acupointflow),猶如潮漲潮落,調(diào)控著人體陰陽平衡。現(xiàn)代時(shí)間生物醫(yī)學(xué)研究表明,人體機(jī)體內(nèi)各種生理、生化活動幾乎都近似晝夜節(jié)律,人體對相同強(qiáng)度的刺激也隨著晝夜節(jié)律的周期而反應(yīng)有所不同。多年來關(guān)于子午流注不斷有臨床應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道及理論和實(shí)驗(yàn)研究,特別是近年來,這一理論越來越多地受到人們的關(guān)注。大量臨床報(bào)道證實(shí),按照子午流注時(shí)間取穴法針刺,對于臨床治療痛證,如原發(fā)性痛經(jīng)、頭痛、胃痛及其他以疼痛為主要癥狀的疾病時(shí),以及在治療中風(fēng)后遺癥、周圍性面神經(jīng)麻痹、慢性胃炎等疾病時(shí),均取得了較好效果。因此,子午流注針法的療效及對臨床的指導(dǎo)意義是應(yīng)該肯定的。NO是一種具有生物活性的氣體小分子,一種可高度彌散的自由基,其化學(xué)性質(zhì)活潑,在常溫下極易和空氣或氧氣反應(yīng)生成棕色的NO2。NO具有高脂溶性,極易穿過細(xì)胞膜擴(kuò)散到機(jī)體的各個(gè)部位,參與機(jī)體生理與病理功能的調(diào)節(jié),是一種重要的信使分子和效應(yīng)分子。有研究表明,NO在治療疾病過程中具有復(fù)雜的雙相調(diào)節(jié)作用。它參與血管舒縮狀態(tài)的調(diào)節(jié)、免疫功能的調(diào)制以及神經(jīng)信息的傳遞等。不僅如此,NO可能是一種致敏性生物活性化學(xué)物質(zhì),在針刺治療中,由于NO的參與和適度的表達(dá),可提高組織敏感度,因而增強(qiáng)針刺的治療作用。本研究根據(jù)中醫(yī)經(jīng)絡(luò)氣血的盈虧理論,采用子午流注納甲法擇時(shí)取穴,運(yùn)用NO微量透析法,以人體體表穴位NO含量為指標(biāo),觀察不同時(shí)間針刺機(jī)體穴位上的反應(yīng)。結(jié)果顯示,針刺組體表穴位NO含量普遍高于非針刺組。由于NO可參與神經(jīng)細(xì)胞間的信號轉(zhuǎn)導(dǎo),因此,機(jī)體穴位NO表達(dá)的增加,使穴位相對敏感化,功能活性增強(qiáng),從而發(fā)揮針刺的治療和調(diào)節(jié)作用。從結(jié)果還可以看出,針刺可以使“開穴”穴位上的NO含量明顯升高,與“合穴”比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),說明穴位在“開”的狀態(tài)時(shí),穴位點(diǎn)的機(jī)能狀態(tài)比較“活躍”,針刺效應(yīng)比較強(qiáng),而在“合”的狀態(tài)時(shí)則表現(xiàn)得相對較弱。在非針刺對照組,“開穴”與“合穴”之間的差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此,我們認(rèn)為,穴位在處于“開穴”時(shí),相對于“合穴”是保持一種基礎(chǔ)性活躍態(tài)勢。當(dāng)不給予針刺時(shí),“開穴”上的活躍態(tài)勢表現(xiàn)為“隱