克氏原螯蝦卵巢發(fā)育過(guò)程中組織脂肪含量及脂肪酸組成的變化

克氏原螯蝦卵巢發(fā)育過(guò)程中組織脂肪含量及脂肪酸組成的變化

克氏原始錨狀蝦，也被稱為紅沼澤錨狀蝦和淡水龍眼，屬于甲殼類、軟甲殼類、頭足目、科海倫、上升科和原始錨狀蝦。原產(chǎn)于美國(guó)南部和墨西哥北部,20世紀(jì)30年代末期由日本引入中國(guó)南京附近?，F(xiàn)已分布至十幾個(gè)省市,成為歸化于中國(guó)自然水體的一個(gè)物種。由于肉質(zhì)鮮美,營(yíng)養(yǎng)豐富,近幾年克氏原螯蝦作為一種經(jīng)濟(jì)水產(chǎn)物種開(kāi)始在一些省市地區(qū)大力推廣試養(yǎng)。對(duì)克氏原螯蝦進(jìn)行全面深入的了解迫在眉睫。目前,有關(guān)克氏原螯蝦發(fā)育生物學(xué)1材料和方法1.1肝胰腺、卵巢稱重實(shí)驗(yàn)所用雌性克氏原螯蝦于2009年5月至9月采自上海崇明沐雨生態(tài)有限公司稻蝦養(yǎng)殖基地,為散養(yǎng)群體,餌食以屠宰下腳料為主。每月中旬采樣一次,每次60只,體質(zhì)量為(28.54±3.05)g,體長(zhǎng)為(8.51±0.31)cm。取蝦的肝胰腺、卵巢稱重后立即保存在-20℃冰箱內(nèi)備用。參考李勝等肝胰腺指數(shù)(HSI,%)=肝胰腺質(zhì)量/體質(zhì)量×100卵巢指數(shù)(GSI,%)=卵巢質(zhì)量/體質(zhì)量×100脂肪含量(LC,%)=脂肪質(zhì)量/組織干重質(zhì)量×100組織干重百分含量(DM,%)=組織干重質(zhì)量/組織質(zhì)量×1001.2液相色譜分析將肝胰腺、卵巢組織冷凍干燥后,參照Folch法采用室溫脂肪酸快速甲酯化法,即用石油醚:苯(1:1,V/V)溶解脂肪并稀釋至20~50mg/mL,加入2mL0.4mol/L氫氧化鉀-甲醇溶液,混勻后室溫靜置10min,加蒸餾水、振蕩、離心,取上層清液,進(jìn)行氣相色譜分析。儀器為Agilent-6890,毛細(xì)管柱型號(hào)為Omegawax320(30.0m×0.32mm,USA),FID檢測(cè)器,程序升溫1.3統(tǒng)計(jì)分析方法采用SPSS13.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,方差分析用ANOVA法,單因子多重比較用Duncan’s法,當(dāng)P≤0.05認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果與分析2.1干重百分含量表1顯示的是克氏原螯蝦肝胰腺指數(shù)、卵巢指數(shù)、組織干重百分含量及脂肪含量在卵巢發(fā)育不同時(shí)期的變化。隨著卵巢的發(fā)育,肝胰腺指數(shù)由7.95%降到5.31%,卵巢指數(shù)由0.12%升到6.64%。肝胰腺干重百分含量總體表現(xiàn)為先升后降的變化趨勢(shì),在Ⅲ期達(dá)到最大,為50.80%;Ⅴ期最小,為47.31%;卵巢干重百分含量在整個(gè)時(shí)期呈顯著增加趨勢(shì),由22.29%升到55.16%,增加近2.5倍。就脂肪含量而言,其在肝胰腺中的含量較大,最高可占組織干重的74.49%,在整個(gè)卵巢發(fā)育過(guò)程中并沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的變化趨勢(shì);在卵巢中,脂肪含量?jī)H在Ⅱ期到Ⅲ期有一個(gè)顯著的增加過(guò)程(P≤0.05),在后期變化不明顯。2.2大鼠肝臟脂肪酸表2、表3分別顯示的是克氏原螯蝦卵巢發(fā)育各時(shí)期肝胰腺和卵巢中脂肪酸的組成及相對(duì)含量。從表2中可知,各時(shí)期肝胰腺中主要脂肪酸有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9,C18:1n7、C18:2n6和C與肝胰腺不同,卵巢中主要脂肪酸不僅有C16:0、C16:1n7、C18:0、C18:1n9,C18:1n7、C18:2n6和C18:3n3,還包括ARA和EPA,特別是在早期,這2種脂肪酸所占比例較大;主要脂肪酸中的C3討論3.1組織脂肪含量隨著卵巢的發(fā)育,克氏原螯蝦卵巢指數(shù)由Ⅰ期的0.12%增加到Ⅴ期的6.64%,卵巢干重百分含量由22.29%升到55.16%,增加近2.5倍,意味著在這過(guò)程中卵巢發(fā)育以及胚胎發(fā)育所需要的各類結(jié)構(gòu)、營(yíng)養(yǎng)和功能物質(zhì)在大量積累。雖然水分也是生物體中重要的組成部分,但對(duì)于克氏原螯蝦來(lái)說(shuō),卵巢在發(fā)育過(guò)程中更多積累的是有機(jī)物、無(wú)機(jī)鹽等,水分可在排卵后從水體環(huán)境中攝取。作者在隨后的實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),克氏原螯蝦早期胚胎中的干物質(zhì)百分含量又降至40.99%,相關(guān)數(shù)據(jù)另文發(fā)表。值得注意的是,雖然卵巢干重百分含量一直在增加,但卵巢干物質(zhì)中的脂肪含量并不是一直增加,僅在Ⅱ期到Ⅲ期之間有顯著增加的過(guò)程。卵巢脂肪含量的增加在其他蝦類研究中也有發(fā)現(xiàn),與克氏原螯蝦不同的是,某些蝦類脂肪含量的增加一直持續(xù)到卵巢完全成熟在整個(gè)卵巢發(fā)育過(guò)程中,克氏原螯蝦肝胰腺指數(shù)呈顯著降低趨勢(shì)。肝胰腺作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收器官被認(rèn)為是甲殼動(dòng)物脂肪主要的儲(chǔ)存和加工場(chǎng)所比較肝胰腺干重,在Ⅲ期達(dá)到最大,在Ⅴ期含量最小,有先增加后減少的變化趨勢(shì)。可知在卵巢發(fā)育早期,其需求的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還較少,肝胰腺中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)依然呈積累趨勢(shì),但在后期,由于卵細(xì)胞的急劇增長(zhǎng),卵黃物質(zhì)的大量積累,導(dǎo)致肝胰腺中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)加速向卵巢轉(zhuǎn)移。因此,從這一方面來(lái)講,確保母蝦營(yíng)養(yǎng)充足是至關(guān)重要的,也是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程。3.2組織中hufa的含量克氏原螯蝦肝胰腺和卵巢脂肪酸相對(duì)含量的差異是由組織間生理功能的差異所決定的。肝胰腺作為消化吸收器官,有儲(chǔ)存并向其他組織提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的功能,其組織內(nèi)脂肪酸組成容易受食物中脂肪酸組成的影響克氏原螯蝦屬淡水種,其肝胰腺和卵巢中的主要脂肪酸有CHUFA在對(duì)蝦卵巢發(fā)育以及胚胎發(fā)育中起著重要作用從整個(gè)卵巢發(fā)育過(guò)程來(lái)講,∑HUFA在肝胰腺和卵巢中都呈下降趨勢(shì),但∑HUFA在卵巢各期的含量比在肝胰腺中的含量要高,說(shuō)明卵巢有優(yōu)先選擇HUFA的可能,意味著雖然其在卵巢中的含量較低,但HUFA依然對(duì)克氏原螯蝦卵巢發(fā)育和胚胎發(fā)育有重要作用。卵巢中HUF