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全自動(dòng)生化分析儀吸光度限設(shè)置方法的研究
0總結(jié)自動(dòng)生物化學(xué)分析儀通過(guò)測(cè)量吸收熱量來(lái)計(jì)算反應(yīng)溶液中待測(cè)物的濃度。當(dāng)待測(cè)物濃度高于檢測(cè)系統(tǒng)的線(xiàn)性范圍上限時(shí),結(jié)果并不可靠。1吸收極限配置方法1.1最終法的吸收限制的確定終點(diǎn)法測(cè)定時(shí),待測(cè)物濃度與吸光度大小相關(guān),當(dāng)待測(cè)物濃度過(guò)高時(shí)吸光度異常升高(上升反應(yīng))或降低(下降反應(yīng))1.2、-谷氨?;D(zhuǎn)移酶、肌酸激酶實(shí)際上,吸光度限值在速率(連續(xù)監(jiān)測(cè))法中應(yīng)用更廣泛,更具實(shí)用價(jià)值:在進(jìn)行酶類(lèi)項(xiàng)目測(cè)定時(shí),如谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、堿性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨?;D(zhuǎn)移酶(GGT)、肌酸激酶(CK),當(dāng)酶活度過(guò)高導(dǎo)致底物耗盡時(shí),反應(yīng)速度快,吸光度每分鐘的變化率急劇增大。全自動(dòng)生化分析儀設(shè)定在固定循環(huán)點(diǎn)(時(shí)間)讀取吸光度,在進(jìn)行ALT測(cè)定時(shí)系統(tǒng)在24~32點(diǎn)讀點(diǎn),由于酶活度高,22點(diǎn)加入的底物迅速耗盡,吸光度每分鐘變化率(ΔA/min)過(guò)大、吸光度值(A)迅速下降,至25點(diǎn)下降到低點(diǎn),反應(yīng)結(jié)束進(jìn)入平臺(tái)期采用速率法時(shí),西門(mén)子ADVIA系列全自動(dòng)生化分析儀通過(guò)sample(u)(上升反應(yīng))或sample(d)(下降反應(yīng))2在確定吸收極限后,應(yīng)采取的進(jìn)一步措施應(yīng)采取以下措施正確設(shè)置吸光度限值后,當(dāng)樣本中的待測(cè)物濃度過(guò)高、吸光度超過(guò)限值時(shí),計(jì)算結(jié)果附帶“u”或“d”的標(biāo)志2.1不調(diào)整吸收極限報(bào)告審核時(shí)通過(guò)查看反應(yīng)曲線(xiàn),參考?xì)v史結(jié)果、其他非特異警示標(biāo)志2.2設(shè)置吸收極限,但不分析儀器警告信息目前,國(guó)內(nèi)大多數(shù)LIS只接收儀器結(jié)果而不能解析、顯示結(jié)果附帶的報(bào)警信息。技師在LIS端審核報(bào)告時(shí)還須同步瀏覽儀器結(jié)果2.3及時(shí)發(fā)現(xiàn)異常高值并進(jìn)行確認(rèn)吸光度超限標(biāo)志“u”或“d”在LIS端顯示,技師審核報(bào)告的同時(shí)可以發(fā)現(xiàn)異常高值結(jié)果,必要時(shí)查閱反應(yīng)曲線(xiàn)進(jìn)行確認(rèn)。這種篩選方式效率提高且不易遺漏,但仍需檢索樣本、手動(dòng)稀釋重測(cè)。2.4設(shè)置吸光度限值,設(shè)置自動(dòng)稀釋重測(cè)具備自動(dòng)稀釋重測(cè)的全自動(dòng)生化分析儀,設(shè)置吸光度限值、自動(dòng)稀釋重測(cè)倍數(shù)及重測(cè)條件后,儀器可自動(dòng)篩選異常結(jié)果并按照設(shè)定的條件自動(dòng)稀釋重測(cè)2.5las測(cè)定條件隨著LAS的普及和應(yīng)用,可在儀器項(xiàng)目參數(shù)中設(shè)置吸光度限值,在LAS中間件軟件設(shè)置稀釋比例和重測(cè)條件,出現(xiàn)超限結(jié)果時(shí)LAS會(huì)自動(dòng)將原始樣本轉(zhuǎn)運(yùn)至儀器進(jìn)行自動(dòng)稀釋重測(cè)。這種方式通過(guò)LAS自動(dòng)檢索、運(yùn)送樣本,篩選和重測(cè)效率高,出現(xiàn)差錯(cuò)的可能也最小。3吸收限制設(shè)置的重要性3.1確保測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,并提高檢驗(yàn)質(zhì)量由于方法學(xué)及檢測(cè)系統(tǒng)的限制,全自動(dòng)生化分析儀對(duì)高于檢測(cè)線(xiàn)性上限的結(jié)果可能出現(xiàn)誤報(bào)3.2基本原因及局限性志由于缺乏有效的控制措施,實(shí)驗(yàn)室需對(duì)疑似超限結(jié)果采取諸如查閱歷史結(jié)果、查看儀器反應(yīng)曲線(xiàn)、查看儀器警示標(biāo)志、查看臨床診斷結(jié)合經(jīng)驗(yàn)決定是否重測(cè)或稀釋重測(cè),篩選、確認(rèn)效率低且易遺漏,加之樣本檢索、稀釋重測(cè),導(dǎo)致工作效率低下。設(shè)置吸光度限值后,可自動(dòng)篩選出高于限值的檢測(cè)結(jié)果,結(jié)合自動(dòng)稀釋重測(cè),有效減少繁復(fù)、不必要的工作,縮短樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間(turnaroundtime,TAT),提高檢驗(yàn)工作效率。3.3采用自動(dòng)稀釋重測(cè)法,減少可疑樣本檢測(cè)的成本設(shè)置吸光度限值后,只對(duì)高于限值的樣本進(jìn)行稀釋重測(cè),不盲目稀釋重測(cè)所有可疑樣本,結(jié)合自動(dòng)稀釋重測(cè),有效減少不必要的復(fù)檢及手工稀釋重測(cè),節(jié)約成本。4吸光度限值的設(shè)定吸光度限值既可以通過(guò)理論計(jì)算也可以通過(guò)測(cè)定臨界值樣本獲得,而檢測(cè)臨界值樣本讀取吸光度值更直觀、更方便。初步設(shè)置吸光度限值后還需要監(jiān)測(cè)反應(yīng)曲線(xiàn),微調(diào)所設(shè)置吸光度限值,篩選出超出線(xiàn)性范圍高值結(jié)果(不能遺漏)的同時(shí)使得線(xiàn)性范圍之內(nèi)的檢測(cè)結(jié)果不被過(guò)多攔截重測(cè)而浪費(fèi)試劑,保證攔截的有效性。每個(gè)項(xiàng)目設(shè)置完成后均要選取高值樣本做系統(tǒng)的驗(yàn)證與評(píng)價(jià),確保設(shè)定無(wú)誤后方可投入使用。采用速率法設(shè)定吸光度限值后,超限讀點(diǎn)被視為無(wú)效而舍棄,導(dǎo)致有效讀點(diǎn)減少。有效讀點(diǎn)個(gè)數(shù)應(yīng)≥4,且均位于反應(yīng)曲線(xiàn)線(xiàn)性段,以確保計(jì)算結(jié)果準(zhǔn)確可靠。臨界狀態(tài)下,有效讀點(diǎn)個(gè)數(shù)<4且均位于反應(yīng)曲線(xiàn)線(xiàn)性段,無(wú)異常波動(dòng)、變形,后續(xù)讀點(diǎn)線(xiàn)性良好,則儀器計(jì)算結(jié)果仍準(zhǔn)確可靠。不是所有全自動(dòng)生化分析儀都具有自動(dòng)稀釋重測(cè)功能,使用LAS的實(shí)驗(yàn)室也是少數(shù),因此設(shè)置吸光度限值后還需要考慮后續(xù)使用的便捷性:開(kāi)發(fā)LIS解析、顯示吸光度限值警告標(biāo)志的功能,配合必要的樣本檢索和手動(dòng)稀釋是大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室的最佳選擇。正
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