生物技術(shù)實(shí)踐-2021屆高三生物模擬試卷分類匯編（2月刊）

2021屆河北省衡水中學(xué)高三上學(xué)期21.某課題組擬從馬鈴薯中分離出內(nèi)生固氮菌（內(nèi)有固

氮酶），并對(duì)其相關(guān)特性進(jìn)行研究，實(shí)驗(yàn)步驟大致如下?；卮鹣铝袉?wèn)題。

（1）上述選擇培養(yǎng)基_______（填“需要”或“不需要”）加入瓊脂，在營(yíng)養(yǎng)成分上最大的

特點(diǎn)是。進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意將培養(yǎng)基____放置。

（2）該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要在超凈工作臺(tái)進(jìn)行操作的原因是馬鈴薯表面除菌不能選擇高

壓蒸汽滅菌的原因是一。

（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，課題組成員得出土豆中存在幾種內(nèi)生固氮菌，他們的判斷依據(jù)是—。

為進(jìn)一步驗(yàn)證上述培養(yǎng)基上的菌落為固氮菌，還應(yīng)進(jìn)行—檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

【答案】（1）.需要（2）.不含氮源（3）.倒立（4）.防止雜菌污染，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)

果（5）.防止殺死馬鈴薯內(nèi)生固氮菌（6）.實(shí)驗(yàn)得到的菌落存在不同特征（7）.形

態(tài)特征和理化性質(zhì)

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基的成分應(yīng)包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及生長(zhǎng)因子，且為選擇出所需要菌種，需要控

制培養(yǎng)基條件，使其他微生物不能生長(zhǎng)，同時(shí)目的菌能生長(zhǎng)良好，本實(shí)驗(yàn)擬從馬鈴薯中分離

出內(nèi)生固氮菌（內(nèi)有固氮酶），故應(yīng)控制氮源。

【詳解】（1）本實(shí)驗(yàn)需要觀察菌落，故應(yīng)在固體培養(yǎng)基進(jìn)行，則需要加入瓊脂以形成固體培

養(yǎng)基；在營(yíng)養(yǎng)成分上最大的特點(diǎn)是不含氮源，該種培養(yǎng)基上目標(biāo)菌種內(nèi)生固氮菌（內(nèi)有固氮

酶）可以利用此合成含氮有機(jī)物，其它微生物則無(wú)法存活；為防止冷凝水珠落入培養(yǎng)皿污

染培養(yǎng)基，進(jìn)行選擇培養(yǎng)時(shí)應(yīng)注意將培養(yǎng)基倒立放置。

（2）為避免雜菌污染，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，需要在超凈工作臺(tái)進(jìn)行操作；同時(shí)為

防止殺死馬鈴薯內(nèi)生固氮菌，馬鈴薯表面除菌不能選擇高壓蒸汽滅菌。

（3）不同菌落有光滑、粗糙、波形、鋸齒形等不同的形態(tài)特征，根據(jù)這些特征課題組成員

可得出土豆中存在幾種內(nèi)生固氮菌；在上述培養(yǎng)基上存活的除固氮菌，可能存在依賴于固氮

菌產(chǎn)生的含氮有機(jī)物生存的菌種，故為進(jìn)一步驗(yàn)證菌落為固氮菌，還需將上述菌落純化，分

別在不含氮源的條件下培養(yǎng)，對(duì)其形態(tài)特征和理化性質(zhì)進(jìn)行鑒定檢測(cè)，并用乙烘還原法測(cè)定

固氮能力。

【點(diǎn)睛】本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生識(shí)記培養(yǎng)基的成分以及配制

原則，微生物的分離和培養(yǎng)方法，同時(shí)具有一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和操作能力。

二、綜合題

2021屆上海市虹口區(qū)高三（高二）一模（一）微生物與人體健康

為了解某種醫(yī)用防護(hù)口罩（經(jīng)滅菌）佩戴時(shí)間對(duì)防護(hù)功能的影響，進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究，參加實(shí)

驗(yàn)的醫(yī)務(wù)人員隨機(jī)分為ABC三組，在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室佩戴不同時(shí)間后取樣。

取樣過(guò)程：分別剪取口罩內(nèi)層（與口和皮膚接觸面）和外層6cmx6cm紗布，剪碎后加入5mL

培養(yǎng)基X中，震蕩2分鐘，待紗布碎片自然沉降后，取上清液1mL接種于培養(yǎng)基Y上，37℃

培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)后在放大鏡下統(tǒng)計(jì)每cm2培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，每組取平均值。濾菌率=（內(nèi)

層菌落數(shù)-外層菌落數(shù)）/內(nèi)層菌落數(shù)。結(jié)果見表。

培養(yǎng)基上每cm?菌落數(shù)（個(gè)）

組別佩戴時(shí)間濾菌率％

內(nèi)層外層

A20分鐘23.670.9596.13

B2小時(shí)73.932.9196.06

C4小時(shí)129.7510.1692.17

21.上述實(shí)驗(yàn)中，需要進(jìn)行高壓滅菌處理的是o

A.剪刀B.培養(yǎng)基C.放大鏡D.取樣的

口罩紗布

22.實(shí)驗(yàn)中“取上清液1mL接種于培養(yǎng)基Y上”，此操作采用的接種方法是。

23.培養(yǎng)基X與Y在成分及功能上的特點(diǎn)是。

AX不含瓊脂，Y含瓊脂

B.X為通用培養(yǎng)基，Y為選擇培養(yǎng)基

C.X和Y都只需碳源、無(wú)機(jī)鹽和水

D.X用于分離菌落，Y用于純化菌落

24.口罩上細(xì)菌可能的來(lái)源有o

A.人體皮膚B.人體呼出氣體C.口罩D.外界空

氣

25.從表中數(shù)據(jù)可知，口罩內(nèi)層細(xì)菌數(shù)量較多，且隨著佩戴時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)菌數(shù)量增長(zhǎng)顯著。

根據(jù)你的生活經(jīng)驗(yàn)和所學(xué)知識(shí)，分析口罩內(nèi)層細(xì)菌數(shù)量增長(zhǎng)的可能原因是。

26.我國(guó)規(guī)定醫(yī)用防護(hù)口罩對(duì)細(xì)菌的濾菌率達(dá)到95%為合格。根據(jù)表2數(shù)據(jù)，醫(yī)務(wù)人員佩

戴此類一次性口罩較為合理的時(shí)間是。

【答案】21.AB22.涂布法23.A24.AB

25.溫度較高，比較潮濕及唾液等提供營(yíng)養(yǎng)，有利于細(xì)菌的繁殖；人體呼出的細(xì)菌隨時(shí)間積

累

26.2小時(shí)

【解析】

【分析】

1、培養(yǎng)基的成分包括水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長(zhǎng)因子。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，

接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延

伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大

量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【21題詳解】

A、剪刀作為取材工具，要防止取材時(shí)雜菌污染，需要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，A正確：

B、培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的培養(yǎng)，需要高壓蒸汽滅菌，B正確：

C、放大鏡為觀察器具，不需要滅菌，C錯(cuò)誤；

D、取樣的口罩紗布是待觀察活菌數(shù)的實(shí)驗(yàn)材料，不能進(jìn)行高壓滅菌，D錯(cuò)誤。

故選AB。

[22題詳解】

Y培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，又要觀察細(xì)菌菌落總數(shù)目，故要采用稀釋涂布平板法。

【23題詳解】

A、X培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基分離菌落，Y為固體培養(yǎng)基，故兩者在成分上的區(qū)別是X不含瓊

脂，Y含瓊脂，A正確；

B、該實(shí)驗(yàn)要計(jì)算所有口罩上的細(xì)菌，故不是選擇培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、Y培養(yǎng)基要滿足所有口罩上細(xì)菌的繁殖，故Y培養(yǎng)基上還要含有某些特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，C

錯(cuò)誤；

D、X用來(lái)分離菌落，丫用來(lái)繁殖菌落，純化菌落是選擇培養(yǎng)基的作用。

故選Ao

【24題詳解】

A、口罩內(nèi)層與人體皮膚接觸，人體表面存在細(xì)菌，A正確；

B、人體口腔內(nèi)也有細(xì)菌，會(huì)隨呼吸到達(dá)口罩，B正確；

C、口罩是經(jīng)消毒滅菌后才銷售的，故口罩本身不應(yīng)含有細(xì)菌，C錯(cuò)誤；

D、實(shí)驗(yàn)在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，空氣中無(wú)細(xì)菌，D錯(cuò)誤。

故選ABo

【25題詳解】

溫度較高，比較潮濕及唾液等提供營(yíng)養(yǎng)，有利于細(xì)菌的繁殖；人體呼出的細(xì)菌隨時(shí)間積累，

故從表中數(shù)據(jù)可知，口罩內(nèi)層細(xì)菌數(shù)量較多，且隨著佩戴時(shí)間的延長(zhǎng)細(xì)菌數(shù)量增長(zhǎng)顯著。

【26題詳解】

據(jù)表格數(shù)據(jù)可知：佩戴20分鐘和2小時(shí)候?yàn)V菌率相差不大且都高于95%,而佩戴4小時(shí)后

會(huì)低于95%,不合格。故醫(yī)務(wù)人員佩戴此類一次性口罩較為合理的時(shí)間是2小時(shí)。

【點(diǎn)睛】本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無(wú)菌技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的

知識(shí)準(zhǔn)確答題。

2021屆四川省成都市七中高三一診模擬11.微生物培養(yǎng)是指借助人工配制的培養(yǎng)基和人為

創(chuàng)造的培養(yǎng)條件，使某些做生物快速生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程。它可以對(duì)己純化的單一菌種進(jìn)行培養(yǎng)

和利用，也可以對(duì)混合菌種或自然樣品（如土壤）中的微生物進(jìn)行培養(yǎng)，然后根據(jù)培養(yǎng)基上所

生長(zhǎng)微生物的種類和數(shù)量，可在一定程度上估算微生物的多樣性與數(shù)量。請(qǐng)分析回答下列問(wèn)

題。

（1）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時(shí)間，過(guò)濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中

加入一定量蔗糖和瓊脂用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。馬鈴薯浸出液為微生物生長(zhǎng)提供

了多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有o若在M培養(yǎng)基中

用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后可通過(guò)加入（顯色劑）

篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是

（2）為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中的細(xì)菌含量。

在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是

然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法

分別接種入0.1mL稀釋液。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此

可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

(3)用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都

不間斷地長(zhǎng)滿了涂，第二劃線區(qū)域的第一條線上無(wú)涂落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌

落可能的操作失誤有

____________________________________________________________________(答出兩條)。

若將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快，分析其原因是。

【答案】(1).碳源、水和無(wú)機(jī)鹽(2).碘液(3).淀粉遇碘液呈藍(lán)色，產(chǎn)淀粉酶的

微生物能分解淀粉，在菌落周圍會(huì)形成透明圈(4).檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格(5).

3.8X107⑹.接種環(huán)灼燒后沒有冷卻就開始劃線劃線未從第一區(qū)域末端開始⑺.

振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液的含氧量，同時(shí)可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用

率

【解析】

【分析】

1、微生物培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)成分有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等。

2、微生物常用的接種方法有平板劃線法、稀釋涂布平板法。

3、每克樣品中的菌株數(shù)=(C+V)xM,其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù),

V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml),M代表稀釋倍數(shù)。

【詳解】(1)微生物生長(zhǎng)繁殖所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要包括碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽等；淀粉

遇碘變藍(lán)色，若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長(zhǎng)出菌落后

可通過(guò)加入碘液篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物，產(chǎn)生淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，可根據(jù)

是否形成透明圈來(lái)判斷。

(2)在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后空白平板先培養(yǎng)一段時(shí)間，這樣做的目的是檢測(cè)

培養(yǎng)基滅菌是否合格：若空白平板上無(wú)菌落形成，則說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌合格；平均每個(gè)平板上

的菌落數(shù)為(39+38+37)方=38,稀釋了100倍，取樣0.1ml,則每毫升水中的活菌數(shù)為

38x100+0.1=38000個(gè)，則每升水中的活菌數(shù)為38000x1000=3.8x107個(gè)。

(3)接種時(shí)常用接種環(huán)，平板劃線法要求灼燒的接種環(huán)冷卻后再劃線，否則會(huì)灼傷菌株甚

至死亡，且劃線時(shí)要從上一次劃線的末端開始劃線，這樣接種環(huán)上才有菌株；靜置培養(yǎng)時(shí)，

只有表層營(yíng)養(yǎng)液中的溶解氧較高，大部分細(xì)菌不能得到充足的氧氣，同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也不能得

到充分的利用，故細(xì)菌生長(zhǎng)速度較慢，而震蕩培養(yǎng)可以提高培養(yǎng)液中溶解氧的含量，同時(shí)可

使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，故細(xì)菌生長(zhǎng)速度較快。

【點(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，掌握無(wú)

菌技術(shù)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。

2021屆四川省成都市石室中學(xué)高三一診模擬11.阿特拉津是一種針對(duì)玉米、甘蔗等農(nóng)作物

的專用化學(xué)除草劑，是一種含氮有機(jī)物。阿特拉津?qū)λ镉袠O強(qiáng)的毒性，在土壤中可被

微生物分解。因此從土壤中篩選出能高效降解阿特拉津的微生物，能夠應(yīng)用于污染土壤和水

體的修復(fù)。

（1）為了獲得能降解阿特拉津的微生物菌利，，可在被阿特拉津污染的土壤中取樣，原因是

（2）為了確保能從土壤樣品中分離到所需要的微生物，可以通過(guò)選擇培養(yǎng)增加降解阿特拉

津的微生物菌種的濃度。將10g土壤樣品添加到以為唯一氮源和碳源的

（填“固體”或“液體”）培養(yǎng)基中。培養(yǎng)時(shí)需將培養(yǎng)基置于搖床上，原因是

______________________________________________________________________________________________________O

（3）將樣品稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上，涂布平板時(shí)的工具是,整個(gè)過(guò)程都應(yīng)在

附近進(jìn)行。待平板長(zhǎng)出菌落后，選擇所需菌種。

（4）對(duì)阿特拉津降解微生物的降解能力進(jìn)行測(cè)定。將選出的菌種接入培養(yǎng)基中培養(yǎng)，每24h

采樣一次，測(cè)定培養(yǎng)基中,計(jì)算降解率。

【答案】（1）.因?yàn)樵诒话⑻乩蛭廴镜耐寥乐蟹纸獍⑻乩虻奈⑸锞N數(shù)量高（2）.

阿特拉津（3）.液體（4）.進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，提高培養(yǎng)基中溶解氧的含量，使菌體和培養(yǎng)

液充分接觸（5）.涂布器⑹.酒精燈火焰（7）.殘留阿特拉津濃度

【解析】

【分析】

在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，

稱作選擇培養(yǎng)基，稀釋涂布平板法是常用的種接種方法，稀釋涂布平板法還可以用來(lái)計(jì)數(shù)，

接種過(guò)程中需要在酒精燈附件進(jìn)行，以防雜菌污染。

【詳解】（1）在尋找目的菌株時(shí)，要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找，在

尋找能降解阿特拉津的微生物菌種時(shí)，在被阿特拉津污染的土壤中取樣，因?yàn)樵诒话⑻乩?/p>

污染的土壤中分解阿特拉津的微生物菌種數(shù)量高；

(2)要篩選出能夠降解阿特拉津的微生物，應(yīng)該以阿特拉津?yàn)槲ㄒ坏春吞荚?，使只有?/p>

特拉津能夠在該培養(yǎng)基存活從而篩選出來(lái)，要增加可降解阿特拉津的生物菌種，應(yīng)該使用液

體培養(yǎng)基，將培養(yǎng)基置于搖床上進(jìn)行震蕩培養(yǎng)，提高培養(yǎng)基中溶解氧的含量，使菌體和培養(yǎng)

液充分接觸；

(3)將樣品稀釋涂布到鑒別培養(yǎng)基上，涂布平板時(shí)的工具是涂布器，整個(gè)過(guò)程應(yīng)該在酒精

燈附件進(jìn)行，保證沒有其他雜菌污染；

(4)進(jìn)行阿特拉津降解微生物的降解能力測(cè)定時(shí)，可以把菌種接入阿特拉津?yàn)槲ㄒ惶荚吹?/p>

液體培養(yǎng)基，每24h采樣一次，測(cè)定培養(yǎng)液中殘留阿特拉津濃度，計(jì)算降解率。

【點(diǎn)睛】解答本題學(xué)生要熟知如何運(yùn)用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行目的菌的培養(yǎng)和分離，并能掌握稀釋

涂布平板法的操作步驟，題目難度一般。

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學(xué)期第一次聯(lián)考15.圖為利用樹脂顆粒將酶進(jìn)行固定化,

隨后將固定化酶裝入反應(yīng)柱，頂部注入化合物，反應(yīng)后的產(chǎn)物從下部流出，則圖中表示酶的

是()

A.①B.②C.③D.④

【答案】C

【解析】

【分析】

1、固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)的方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技

術(shù)。

2、固定化酶或固定化細(xì)胞的方法：包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。

3、固定化酶優(yōu)點(diǎn)是使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反復(fù)利用。固定化

細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)是成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化學(xué)反應(yīng)。

【詳解】A、圖中①為反應(yīng)物，A錯(cuò)誤；

B、②表示固定化酶的載體，B錯(cuò)誤；

C、③表示被固定的酶，C正確；

D、④表示產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。

故選C。

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學(xué)期第一次聯(lián)考29.回答下列（一）（二）小題

（-）回答有關(guān)微生物培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題：

（1）MP培養(yǎng)基的成分為：KH2Po42.25g/L、K2HPO42.75g/L、（NH4）2SO4I.Og/L、

MgChO.2g/L、NaCI0.Ig/L、FeChO.02g/L、CaChO.Olg/Lo在制作苯酚降解菌（好氧

菌）的富集培養(yǎng)基和分離培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上前者添加；后者添加—

然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為。

（2）將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖

床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是。兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度較低的培

養(yǎng)基是原因是。將富集培養(yǎng)基中的菌液

稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)，在平板培養(yǎng)基上長(zhǎng)出一些形態(tài)、大小和顏色不

完全相同的菌落，這說(shuō)明。

（3）實(shí)驗(yàn)中科研人員利用海藻酸鈉為載體固定苯酚降解菌，說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)是用來(lái)固定細(xì)

胞的，而該方法一般不用于酶固定化的原因是用該方法固定細(xì)胞時(shí)要在溶化好的海藻

酸鈉中加入苯酚降解菌后進(jìn)行充分?jǐn)嚢璧哪康氖恰?/p>

（二）回答與基因工程及植物育種有關(guān)的問(wèn)題：

某研究小組為研究水稻B基因表達(dá)對(duì)其卵細(xì)胞的影響，設(shè)計(jì)了如下過(guò)程：（Luc基因表達(dá)的

熒光素前能夠催化熒光素產(chǎn)生熒光；啟動(dòng)子和終止子分別是重組質(zhì)粒中啟動(dòng)和終止基因轉(zhuǎn)錄

的序列）。

水稻B基因

編碼蛋白的序列及屋因

水稻

愈傷組織

潮霉素

抗性基因

轉(zhuǎn)有

卡那霉素

植，

抗性基因，*啟動(dòng)子可在水稻卵細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄

（1）若水稻B基因的核甘酸序列已知，可采用化學(xué)合成或（中文名稱）的方法。為

了提高目的基因和Ti質(zhì)粒重組的成功率，選擇使用對(duì)含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒

進(jìn)行處理形成不同的黏性末端，然后用DNA連接酶連接構(gòu)建重組載體。酶切位點(diǎn)能否選在

潮霉素抗性基因中?理由是。

（2）過(guò)程①中，應(yīng)在培養(yǎng)基中加入以篩選含有目的基因的農(nóng)桿菌。過(guò)程②中應(yīng)向培養(yǎng)

愈傷組織的培養(yǎng)基中加入____,以初篩染色體上含有目的基因的愈傷組織。

（3）從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含有一個(gè)染色體組，判定該胚

是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的，而普通水稻的卵細(xì)胞是不進(jìn)行發(fā)育的，這表明

【答案】（1）.苯酚（2）.苯酚和瓊脂（3）.高壓蒸汽滅菌（4）.使菌體與培養(yǎng)液、

空氣充分接觸，利于菌體獲得更多營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)（5）.MP培養(yǎng)基（6）.MP培養(yǎng)基中缺少

苯酚降解菌生長(zhǎng)所需的碳源（7）.能降解苯酚的菌有多種⑻.包埋法（9）.酶分

子小，容易從包埋材料中漏出（10）.使其混合均勻（11）.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（12）.

不同的限制性核酸內(nèi)切酶（13）.不能（14）.由于潮霉素抗性基因位于啟動(dòng)子前面，若

將酶切位點(diǎn)選在此處，則插入的融合基因不會(huì)表達(dá)（15）.卡那霉素或潮霉素（16）.潮

霉素（17）.B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚

【解析】

【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)

的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出

mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)；終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾

端；標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞

篩選出來(lái)，常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。

【詳解】（一）

（1）MP培養(yǎng)基的成分為:KH2Po42.25g/L、K2HpeW.75g/L、（NH4）2soS.Og/L、

MgChO.2g/L、NaCl0.Ig/L,FeCh0.02g/L、CaCl2O.Olg/L,在制作苯酚降解菌（好氧

菌）的富集培養(yǎng)基和分離培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上前者添加苯酚成分，后者添加

苯酚和瓊脂成分，然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為高壓蒸汽滅菌。

（2）將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖

床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是使菌體與培養(yǎng)液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多營(yíng)養(yǎng)和

生長(zhǎng)。兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度降低的培養(yǎng)基是MP培養(yǎng)基，原因是MP培養(yǎng)基中

缺少苯酚降解菌生長(zhǎng)所需的碳源。將富集培養(yǎng)基中的菌液稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)

間的培養(yǎng)，在平板上長(zhǎng)出一些形態(tài)、大小和顏色不完全相同的菌落，這說(shuō)明能降解苯酚的菌

有許多種。

（3）海藻酸鈉包埋法固定菌體，酶分子很小，易采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定。用該方

法固定細(xì)胞時(shí)要在溶化好的海藻酸鈉中加入苯酚降解菌后進(jìn)行充分?jǐn)嚢璧哪康氖浅浞謹(jǐn)嚢?/p>

使菌體混合均勻分布在網(wǎng)格中。

（-）

（1）若已知核甘酸序列，則可以利用化學(xué)合成法或PCR技術(shù)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）合成擴(kuò)增

目的基因；不同的黏性末端可以有效防止目的基因之間的連接、質(zhì)粒之間的連接，故用不同

的限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒進(jìn)行處理。不能將酶切位點(diǎn)選在潮霉

素抗性基因中，因?yàn)閱?dòng)子位于潮霉素抗性基因后邊，而轉(zhuǎn)錄是從啟動(dòng)子開始，若插入到潮

霉素抗性基因中，則重組的目的基因不會(huì)表達(dá)。

（2）質(zhì)粒上有抗卡那霉素標(biāo)記基因和抗潮霉素標(biāo)記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是卡那

霉素，起作用的是抗卡那霉素標(biāo)記基因，如果選擇培養(yǎng)基中加入的是潮霉素，起作用的是抗

潮霉素標(biāo)記基因。過(guò)程②是農(nóng)桿菌侵染愈傷組織的過(guò)程，此時(shí)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的

T—DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。由

于T—DNA中含有潮霉素抗性基因，應(yīng)向培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中加入潮霉素來(lái)進(jìn)行篩選。

（3）由于B基因在水稻卵細(xì)胞中不能表達(dá)，一般情況下卵細(xì)胞未受精時(shí)不能發(fā)育成胚，而

轉(zhuǎn)基因植株的卵細(xì)胞能發(fā)育成胚，說(shuō)明B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚。

【點(diǎn)睛】目的基因的獲取方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲?。虎谌斯ず铣桑ǚ崔D(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法）;

③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

2021屆浙江省金麗衢十二校高三上學(xué)期第一次聯(lián)考（一）回答有關(guān)微生物培養(yǎng)相關(guān)問(wèn)題：

（1）MP培養(yǎng)基的成分為：KH2P042.25g/L、K2HPO42.75g/L>（NH4）2SO4I.Og/L、

MgChO.2g/L、NaCl0.Ig/L、FeCh0.02g/L、CaChO.Olg/L?在制作苯酚降解菌（好氧

菌）的富集培養(yǎng)基和分離培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上前者添加；后者添加

然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為。

（2）將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖

床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是,兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度較低的培

養(yǎng)基是原因是。將富集培養(yǎng)基中的菌液

稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)，在平板培養(yǎng)基上長(zhǎng)出一些形態(tài)、大小和顏色不

完全相同的菌落，這說(shuō)明。

（3）實(shí)驗(yàn)中科研人員利用海藻酸鈉為載體固定苯酚降解菌，說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)是用來(lái)固定細(xì)

胞的，而該方法一般不用于酶固定化的原因是用該方法固定細(xì)胞時(shí)要在溶化好的海藻

酸鈉中加入苯酚降解菌后進(jìn)行充分?jǐn)嚢璧哪康氖恰?/p>

【答案】（1）.苯酚（2）.苯酚和瓊脂（3）.高壓蒸汽滅菌（4）.使菌體與培養(yǎng)液、空

氣充分接觸，利于菌體獲得更多營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)（5）.MP培養(yǎng)基（6）.MP培養(yǎng)基中缺少苯

酚降解菌生長(zhǎng)所需的碳源（7）.能降解苯酚的菌有多種⑻.包埋法（9）.酶分子

小，容易從包埋材料中漏出（10）.使其混合均勻

【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)

的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出

mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)；終止子也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾

端；標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞

篩選出來(lái)，常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。

【詳解】（-）

（1）MP培養(yǎng)基的成分為：KH2Po42.25g/L、K2HPO42.75g/L、（NH4）2SO4I.Og/L、

MgChO.2g/L、NaCl0.Ig/L,FeChO.02g/L、CaChO.Olg/L?在制作苯酚降解菌（好氧

菌）的富集培養(yǎng)基和分離培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)在MP培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上前者添加苯酚成分，后者添加

苯酚和瓊脂成分，然后對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，滅菌的方法為高壓蒸汽滅菌。

(2)將等量的污泥樣液均分兩份，分別接種在相同體積的MP培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基中，搖

床振蕩培養(yǎng)，振蕩培養(yǎng)的目的是使菌體與培養(yǎng)液、空氣充分接觸，利于菌體獲得更多營(yíng)養(yǎng)和

生長(zhǎng)。兩種培養(yǎng)中，苯酚降解菌菌體密度降低的培養(yǎng)基是MP培養(yǎng)基，原因是MP培養(yǎng)基中

缺少苯酚降解菌生長(zhǎng)所需的碳源。將富集培養(yǎng)基中的菌液稀釋并涂布在平板上，經(jīng)過(guò)一段時(shí)

間的培養(yǎng)，在平板上長(zhǎng)出一些形態(tài)、大小和顏色不完全相同的菌落，這說(shuō)明能降解苯酚的菌

有許多種。

(3)海藻酸鈉包埋法固定菌體，酶分子很小，易采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定。用該方

法固定細(xì)胞時(shí)要在溶化好的海藻酸鈉中加入苯酚降解菌后進(jìn)行充分?jǐn)嚢璧哪康氖浅浞謹(jǐn)嚢?/p>

使菌體混合均勻分布在網(wǎng)格中。

【點(diǎn)睛】目的基因的獲取方法：①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲??；②人工合成(反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法);

③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。

2021屆重慶市八中高考適應(yīng)性月考35.某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出具有高效降解纖維素

能力的菌株，實(shí)驗(yàn)流程如圖：

①土壤取樣一②選擇培養(yǎng)一③梯度稀釋f④鑒別纖維素分解菌一⑤挑選產(chǎn)生透明圈的菌落

(1)纖維素分解菌能合成并分泌纖維素酶，纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包含。

(2)過(guò)程①取樣時(shí)應(yīng)該選取富含的環(huán)境。過(guò)程②的選擇培養(yǎng)基是培養(yǎng)基

(填“液體”或“固體”)，在操作過(guò)程中“選擇培養(yǎng)”的目的是

(3)該實(shí)驗(yàn)小組在剛果紅培養(yǎng)基上篩選到產(chǎn)生透明圈的菌落，如圖甲，并將篩選到的菌株

Jt和L在不同的溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測(cè)得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果如圖乙、丙：

纖維素酶活性(U?g,protein)纖維素醒活性(U?g'prolein)

50

降解圈4()

菌落①3。

20

菌落②1()

051525354555657502345678910

菌落③溫度(七)pH

甲丙

經(jīng)過(guò)分析，實(shí)驗(yàn)小組應(yīng)該選取圖甲所示的菌落(填“①”“②”或“③”)為目的

菌，結(jié)合圖乙、丙分析，菌株更適合用于人工瘤胃發(fā)酵(填"JJ或"J」)。

【答案】（1）.G酶、Cx酶和葡萄糖甘酶（2）.纖維素（3）.液體（4）.增加纖維

素分解菌的濃度，確保能夠從樣品中分離出纖維素分解菌（5）.①（6）」4

【解析】

【分析】

從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株。

從土壤中篩選纖維素分解菌應(yīng)該使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，用剛果紅染液進(jìn)行

鑒定。纖維素分解菌培養(yǎng)液中的纖維素酶產(chǎn)量需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶分解菌葡萄糖的實(shí)驗(yàn)

進(jìn)行測(cè)定。酒精發(fā)酵使用的微生物是酵母菌。

2、剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，而不與水解后的纖維二塘和葡

萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。

3、微生物產(chǎn)生的纖維素酶是一種復(fù)合酶，包括內(nèi)切酶（Cx酶）、外切酶（Ci酶）和葡萄糖

甘酶。內(nèi)切酶作用于無(wú)定型的纖維素區(qū)域，使纖維素?cái)嗔殉善?；外切酶又叫纖維二糖水解

酶，它可以作用于纖維素的結(jié)晶區(qū)或小片段纖維素，從糖鏈末端開始切掉兩個(gè)葡萄糖分子，

產(chǎn)生纖維二糖；葡萄糖甘醐則將纖維二糖分解成葡萄糖。

【詳解】（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括Ci酶、Cx酶和葡萄糖昔前三種

組分。

（2）過(guò)程①取樣時(shí)應(yīng)該選取富含纖維素的環(huán)境。選擇培養(yǎng)纖維素分解菌的過(guò)程中所用的培

養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離

到所需的微生物。

（3）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)

生這種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落，降解圈大

小與纖維素酶的多少和活性有關(guān)。纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明

降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是①；由于胃中的pH值較低，根據(jù)題圖

信息分析可知，發(fā)酵過(guò)程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，所

以推測(cè)菌株J4更適合用于人工瘤胃發(fā)酵。

【點(diǎn)睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，關(guān)鍵要求考生識(shí)記土壤中分解纖維素的微生物的分

離的原理和實(shí)驗(yàn)操作，并結(jié)合題圖信息完成試題的解答。

長(zhǎng)春市第二實(shí)驗(yàn)中學(xué)2020~2021學(xué)年高三年級(jí)上學(xué)期期中考試45.回答下列問(wèn)題：

I,紅細(xì)胞含有大量血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功

能是攜帶02和C02。我們可以選用豬、牛、羊或其他哺乳動(dòng)物的血液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，來(lái)提取和

分離血紅蛋白。

(1)實(shí)驗(yàn)前取新鮮血液，要在采血器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來(lái)，馬上進(jìn)行破碎離心,

收集血紅蛋白溶液。加入檸檬酸鈉的目的是。

(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)，主要包括、血紅蛋白的釋放；對(duì)樣品進(jìn)行粗分離

時(shí)主要包括：分離血紅蛋白溶液、透析等步驟。其中透析技術(shù)的原理是。

(3)同學(xué)甲利用瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)，將得到的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，在電泳過(guò)程中，影響蛋

白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的以及分子的形狀等。而加入SDS后，

使得蛋白質(zhì)的遷移率只取決于。

II.下面是制備固定化酹母細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)步驟。

酵母細(xì)胞活化一配制CaCl2溶液->配制海藻酸鈉溶液-海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合-?

固定化酵母細(xì)胞。

(1)活化前應(yīng)選擇足夠大的容器，因?yàn)榻湍讣?xì)胞活化時(shí).O

(2)該實(shí)驗(yàn)中CaC%溶液的作用是-

(3)固定化細(xì)胞技術(shù)一般采用包埋法，原因是

【答案】(1).防止血液凝固⑵.紅細(xì)胞的洗滌(3).小分子可以自由進(jìn)出透析袋

(半透膜)，而大分子不能通過(guò)(4).大小，帶電性質(zhì)(5).分子的大小(6).體積

會(huì)增大⑺.使海藻酸鈉聚沉，形成凝膠珠⑻.細(xì)胞個(gè)體大，不易從包埋材料中漏出

【解析】

【分析】

血紅蛋白的提取常常使用凝膠色譜法，步驟可以分為樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定等。

血紅蛋白的處理可以分為紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液和透析。透析

是應(yīng)用透析袋，使得小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)。固定化酶

常常使用化學(xué)結(jié)合法或物理吸附法，固定化細(xì)胞常常使用包埋法。

【詳解】I(1)檸檬酸鈉可以防止血液凝固，作為一種抗凝血?jiǎng)?，方便收集血紅蛋白。

(2)在對(duì)樣品進(jìn)行處理時(shí)，主要包括紅細(xì)胞的洗滌和血紅蛋白的釋放；透析技術(shù)的原理是

小分子可以自由進(jìn)出透析袋(半透膜)，而大分子不能通過(guò)，因此可以用于除去樣品中分子

量較小的雜質(zhì)等。

(3)電泳過(guò)程中，影響蛋白質(zhì)遷移速度的因素包括蛋白質(zhì)分子的大小、帶電性質(zhì)以及分子

的性狀等；SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)一SDS復(fù)合物，SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過(guò)了

蛋白質(zhì)分子原有的電荷量，因而掩蓋了不同種蛋白質(zhì)間的電荷差別，使得蛋白質(zhì)的遷移率只

取決于分子的大小。

n(1)活化酵母菌時(shí)，其細(xì)胞體積會(huì)增大，因此需要選擇足夠大的容器。

(2)CaCb溶液使海藻酸鈉聚沉，形成凝膠珠。

(3)固定細(xì)胞常常使用包埋法，是由于細(xì)胞體積大，難以被吸附或結(jié)合，不容易從包埋材

料中漏出。

【點(diǎn)睛】本題主要考察了血紅蛋白的提取和分離及固定化細(xì)胞技術(shù)，考察較為基礎(chǔ)，識(shí)記這

兩項(xiàng)技術(shù)的基礎(chǔ)知識(shí)是本題的解題關(guān)鍵。

江西省上饒市民?？荚嚶?lián)盟2020-2021學(xué)年高三上學(xué)期11.楊梅是特色水果之一，某工廠對(duì)

其深加工，進(jìn)行了楊梅酒和楊梅醋的研制。請(qǐng)根據(jù)所學(xué)知識(shí)回答：

(1)在制備楊梅酒過(guò)程中，需要控制的發(fā)酵溫度為o發(fā)酵罐頂上彎管中常需要加

水，其主要目的是。發(fā)酵一定時(shí)間后，觀察到,說(shuō)明發(fā)酵基本完畢。

(2)在制備楊梅醋過(guò)程中，發(fā)酵罐內(nèi)需要先填充經(jīng)處理的木材刨花，然后加

入含_____菌的培養(yǎng)液，加木材刨花的目的是;再讓發(fā)酵完畢的楊梅酒流入發(fā)酵

罐進(jìn)行楊梅醋發(fā)醉，楊梅醋的pH可通過(guò)來(lái)調(diào)節(jié)。

(3)若發(fā)酵好的楊梅酒全部制成楊梅醋，則發(fā)酵制醋過(guò)程中CO2的產(chǎn)生量是o

A.釀酒過(guò)程的兩倍B.與釀酒過(guò)程的相等C.釀酒過(guò)程的一半D.幾乎為零

【答案】(1).18?25℃(2).防止空氣進(jìn)入(3).發(fā)酵罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出

(4).滅菌(5).醋酸桿⑹.使該菌附著在刨花上(7).控制楊梅酒的流速(8).

D

【解析】

分析：本題考查了果酒、果醋的制作的相關(guān)知識(shí)。酵母菌在有氧和無(wú)氧的條件下都能生活：

在有氧時(shí)，酵母菌大量繁殖，但是不起到發(fā)酵效果；在無(wú)氧時(shí)，繁殖速度減慢，但是此時(shí)可

以進(jìn)行發(fā)酵。在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其

繁殖，再隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵。20℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵的最佳溫度是

18℃~25℃?醋酸菌是好氧性細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)，在有氧條件下，可將乙醇(酒精)氧化

成醋酸。醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃?35℃。

詳解：(1)溫度是酵母菌生長(zhǎng)與發(fā)育的重要條件，果酒發(fā)酵的適宜溫度是18-25℃。發(fā)酵罐

進(jìn)行的是酒精發(fā)酵，需要在無(wú)氧環(huán)境中進(jìn)行，因此發(fā)酵罐頂上彎管中加水的主要目的是防止

空氣進(jìn)入。酒精發(fā)酵過(guò)程中除了產(chǎn)生酒精，還產(chǎn)生二氧化碳，若發(fā)酵一定時(shí)間后，觀察到甲

罐內(nèi)液面不再有氣泡冒出，則說(shuō)明發(fā)酵基本完畢。

（2）參與果醋發(fā)酵的微生物是醋酸菌，在制備楊梅醋過(guò)程中，發(fā)酵罐內(nèi)先填充經(jīng)滅菌處理

的木材刨花，然后加入含醋酸桿菌的培養(yǎng)液，使該菌附著在刨花上，再讓發(fā)酵完畢的楊梅酒

流入發(fā)酵罐進(jìn)行楊梅醋發(fā)酵，楊梅醋的pH可通過(guò)控制楊梅酒的流速來(lái)調(diào)節(jié)。

（3）若發(fā)酵罐中的楊梅酒全部制成楊梅醋，此過(guò)程中的反應(yīng)式為：

C2H5OH+O2-CH3coOH+H2O,根據(jù)反應(yīng)式可知，發(fā)酵罐中沒有CO?產(chǎn)生。故選：D。

點(diǎn)睛：本題以楊梅酒和楊梅醋的研制為背景，考查學(xué)生從材料中獲取信息的能力和對(duì)知識(shí)的

理解、遷移能力，難度中等。果酒、果醋發(fā)酵過(guò)程中的注意事項(xiàng)：發(fā)酵過(guò)程中，為了防止空

氣中的雜菌進(jìn)入及排除發(fā)酵產(chǎn)生的C02,發(fā)酵罐頂上的排氣口要通過(guò)一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管

與罐身連接，果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一種好氧菌，所以在制作過(guò)程中需通氧氣;

當(dāng)氧氣、糖源充足時(shí)，醋酸菌可將葡萄糖氧化成醋酸；醋酸菌的呼吸作用為嚴(yán)格的有氧呼吸。

上海市長(zhǎng)寧區(qū)2020-2021學(xué)年高三第一學(xué)期期末統(tǒng)測(cè)23.圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力

（將大氣中的N?固定成NH3）,并且能夠分泌植物生長(zhǎng)素，促進(jìn)植株生長(zhǎng)和果實(shí)發(fā)育。某

研究小組從土壤中分離固氮菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后制成菌肥施入土壤中以增加土壤肥力，提高

農(nóng)作物的產(chǎn)量。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是（）

A.圓褐固氮菌固定的氮能直接被植物吸收利用

B.可用酚紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定

C.篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中要加入有機(jī)氮源

D.可通過(guò)平板劃線法對(duì)所培養(yǎng)的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)

【答案】B

【解析】

【分析】

根據(jù)題干信息分析，圓褐固氮菌具有較強(qiáng)的固氮能力，能夠?qū)⒋髿庵械腘2固定成NH3,這

些NH3進(jìn)入土壤后提高了土壤肥力，進(jìn)而提高農(nóng)作物產(chǎn)量；圓褐固氮菌還能夠分泌植物生

長(zhǎng)素，促進(jìn)植株生長(zhǎng)和果實(shí)發(fā)育。

【詳解】A、生物固氮生成的NH3經(jīng)過(guò)土壤中硝化細(xì)菌的作用，最終轉(zhuǎn)化成硝酸鹽，硝酸

鹽可以被植物吸收利用，A錯(cuò)誤；

B、酚紅指示劑在pH升高后將變紅，而圓褐固氮菌固氮產(chǎn)生氨使得pH升高，因此可用酚

紅對(duì)選擇培養(yǎng)的圓褐固氮菌進(jìn)行鑒定，B正確；

C、圓褐固氮菌具有固氮能力，因此篩選圓褐固氮菌的培養(yǎng)基中不要加入有機(jī)氮源，C錯(cuò)誤;

D、平板劃線法只能用于菌種的分離，不能用于菌種的計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。

故選Bo

18.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測(cè)評(píng)”高三上學(xué)期聯(lián)合測(cè)評(píng)生物試題）利用葡萄汁發(fā)

酵生產(chǎn)葡萄酒，當(dāng)酒精含量達(dá)到12%~16%時(shí)，發(fā)酵就停止了。下列有關(guān)解釋錯(cuò)誤的是（）

A.酒精對(duì)酵母菌有抑制作用

B.葡萄汁中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足

C.發(fā)酵液中pH逐漸降低影響酶的活性

D.氧氣過(guò)少導(dǎo)致酵母菌無(wú)法進(jìn)行細(xì)胞呼吸

【答案】D

【解析】

【分析】參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的

原理：在存在氧氣的時(shí)，1分子葡萄糖和6分子氧氣和6分子水分在酶的作用下生成6分子

二氧化碳和12分子水分，并釋放大量的能量；在無(wú)氧條件下，1分子葡萄糖在酶的作用下

分解成2分了酒精和2分子二氧化碳，釋放少量的能量。

【詳解】A、酒精對(duì)酵母菌有毒害作用，A正確；

B、酵母菌無(wú)氧呼吸時(shí)需要消耗葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)減少，很難維持大量酵母菌

的代謝需要，B正確；

C、酒精發(fā)酵過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生酒精和二氧化碳，導(dǎo)致pH值逐漸下降，不適宜酵母菌生存，C

正確；

D、酒精發(fā)酵時(shí)進(jìn)行的是無(wú)氧呼吸，不需要氧氣，D錯(cuò)誤。

故選D。

19.（2021屆湖北省“大課改大數(shù)據(jù)大測(cè)評(píng)”高三上學(xué)期聯(lián)合測(cè)評(píng)生物試題）下列有關(guān)固體

培養(yǎng)基的敘述，不正確的是（）

A.純化微生物和植物組織培養(yǎng)時(shí)常用的是固體培養(yǎng)基

B.在固體培養(yǎng)基中加入水稀釋直至用于擴(kuò)大化培養(yǎng)細(xì)菌

C.利用固體培養(yǎng)基上的菌落特征來(lái)初步判斷和鑒別細(xì)菌的類型

D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)菌落

【答案】B

【解析】

【分析】

1、培養(yǎng)基按物理性質(zhì)分：

名稱特征功能

固體培養(yǎng)基外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于微生物的分離、鑒定

液體培養(yǎng)基呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基主要用于工業(yè)生產(chǎn)

2、營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)

對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素,

培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧

微生物時(shí)則需要提供無(wú)氧的條件。

【詳解】A、純化微生物和植物組織培養(yǎng)時(shí)常用的是固體培養(yǎng)基，A正確；

B、固體培養(yǎng)基去除瓊脂，才能是液體培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基擴(kuò)大化培養(yǎng)細(xì)菌，增加細(xì)菌的數(shù)

量，B錯(cuò)誤；

C、不同的細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落特征不同，因此可根據(jù)菌落特征判斷和鑒別細(xì)菌

的類型，C正確；

D、微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見的單個(gè)菌落，D正確。

故選Bo

2.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）在適宜的溫度等條件下，

某同學(xué)利用下圖裝置、淀粉溶液、酵母菌等進(jìn)行酒精發(fā)酵的研究，其中X溶液用于檢測(cè)相

關(guān)的發(fā)酵產(chǎn)物。下列相關(guān)分析正確的是（）

氣閥

?X溶液

A,淀粉的水解產(chǎn)物在酵母菌的線粒體基質(zhì)中氧化，產(chǎn)生丙酮酸與NADH

B.呼吸作用產(chǎn)生的ATP和C02,使裝置內(nèi)培養(yǎng)液的溫度升高，體積增大

C.在整個(gè)發(fā)酵過(guò)程中，始終關(guān)閉氣閥或頻繁打開氣閥都會(huì)影響酒精的產(chǎn)生速率

D.X溶液是漠麝香草酚藍(lán)水溶液或酸性重倍酸鉀溶液，可用于檢測(cè)C02或酒精產(chǎn)量

【答案】C

【解析】

【分析】

在02充足的條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；在無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵。

【詳解】A、淀粉的水解產(chǎn)物是葡萄糖，葡萄糖在酵母菌的細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)氧化，產(chǎn)生內(nèi)酮酸與

NADH,A錯(cuò)誤；

B、呼吸作用產(chǎn)生的熱能使裝置內(nèi)培養(yǎng)液的溫度升高，呼吸作用產(chǎn)生的C02使裝置內(nèi)培養(yǎng)液

的體積增大，B錯(cuò)誤；

C、發(fā)酵初期，打開氣閥有利于醉母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖；若頻繁打開氣閥會(huì)形成有氧

條件，不利于酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，因而始終關(guān)閉氣閥或頻繁打開氣閥都會(huì)影響酵

母菌的無(wú)氧呼吸，影響酒精的產(chǎn)生速率，C正確；

D、X溶液可以是浪麝香草酚藍(lán)水溶液，用于檢測(cè)C02的產(chǎn)生量；若要檢測(cè)酒精，應(yīng)從裝置

的液體中取樣，D錯(cuò)誤。

故選C,

12.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）山棗果實(shí)營(yíng)養(yǎng)豐富，含有

多種微量元素，是制作山棗酒、山棗醋的重要原料。山棗醋的制作通常包括果酒發(fā)酵、果醋

發(fā)醉、勾兌調(diào)配成商品醋等階段。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.清洗山棗后進(jìn)行蒸煮并搗碎，冷卻后加入果膠前，有利于釋放有機(jī)酸和糖類

B,釀制山棗果酒時(shí)，接種活化的酵母后應(yīng)在30℃的條件下密封發(fā)酵10天左右

C.在山棗酒中按比例接種醋酸菌，放入30°C恒溫振蕩培養(yǎng)箱中發(fā)酵可獲得果醋

D.在山棗醋中添加果汁、蔗糖糖漿等并進(jìn)行調(diào)配后，需進(jìn)行滅菌處理才能得到成品

【答案】B

【解析】

【分析】

1、在利用酵母菌發(fā)酵時(shí)最好是先通入足夠的無(wú)菌空氣在有氧環(huán)境下一段時(shí)間使其繁殖，再

隔絕氧氣進(jìn)行發(fā)酵；酒精發(fā)酵的最佳溫度是在18℃?25℃,pH最好是弱酸性。

2、醋酸菌好氧型細(xì)菌，當(dāng)缺少糖源時(shí)和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氣化成醋酸；當(dāng)氧

氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長(zhǎng)的最佳溫度是在30℃?

35℃?

【詳解】A、清洗山棗后進(jìn)行蒸煮并搗碎，冷卻后加入果膠酶，有利于分解細(xì)胞壁，釋放有

機(jī)酸和糖類，A正確；

B、釀制山棗果酒階段，接種活化的酵母后應(yīng)在20℃左右的條件下密封發(fā)酵，B錯(cuò)誤；

C、在山棗酒中按比例接種醋酸菌，放入30°（:恒溫振蕩培養(yǎng)箱中發(fā)酵可制得果醋，C正確；

D、在山棗醋添加果汁、蔗糖糖漿等調(diào)配后，還需要進(jìn)行殺菌處理后得到產(chǎn)品，D正確。

故選B。

16.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）某同學(xué)從植物中提取了W

物質(zhì)，并研究其抑菌效果。在平板中央處打孔后加入提取物W,測(cè)量抑菌圈的大小和計(jì)算

抑菌圈平均增幅速率，實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖分析下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.將一定量菌液與剛滅菌的培養(yǎng)基混勻后，冷卻并傾倒平板可得到試驗(yàn)菌平板

B.在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板

C.抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間密切相關(guān)

D.提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W后的2小時(shí)可獲得最佳抑菌效果

【答案】AD

【解析】

【分析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等，牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基屬于細(xì)菌培養(yǎng)基，麥芽汁

瓊脂培養(yǎng)基適合培養(yǎng)真菌。常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。常用的滅菌方

法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法。

【詳解】A、菌液不能與剛滅菌的培養(yǎng)基混勻，否則會(huì)由于高溫殺死菌種，A錯(cuò)誤；

B、在試驗(yàn)平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，灼燒時(shí)鋼管上的微生物死亡，進(jìn)行打孔操作時(shí)

可防止微生物對(duì)平板造成污染，B正確；

C、抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間有很大關(guān)系，C正確；

D、提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加人提取物W后的2小時(shí)獲得抑菌圈最大平均增幅速率,

說(shuō)明提取物在2小時(shí)內(nèi)擴(kuò)散得較快，但不能確定為最佳抑菌效果，上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，24

小時(shí)抑菌圈的宜徑最大，抑菌效果更佳，D錯(cuò)誤。

故選AD。

【點(diǎn)睛】

16.（2021屆湖北省九師聯(lián)盟高三12月聯(lián)考（新高考）生物試題）某同學(xué)從植物中提取了W

物質(zhì)，并研究其抑菌效果。在平板中央處打孔后加入提取物W,測(cè)量抑菌圈的大小和計(jì)算

抑菌圈平均增幅速率，實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果如下圖所示。據(jù)圖分析下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

5.00

4.50

4.00

3.50

3.00

2.50

2.00

1.50

1.00

0.50

0

提取物,預(yù)擴(kuò)散時(shí)間/h

A.將一定量菌液與剛滅菌的培養(yǎng)基混勻后，冷卻并傾倒平板可得到試驗(yàn)菌平板

B.在平板上打孔的鋼管需要灼燒滅菌，目的是防止微生物污染平板

C.抑菌圈直徑的大小與菌體濃度、提取物W的濃度和預(yù)擴(kuò)散時(shí)間密切相關(guān)

D.提取物W在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，加入提取物W后的2小時(shí)可獲得最佳