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菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng)植物的組織培養(yǎng)又叫離體培養(yǎng),指植物的組織、器官或細胞等(外植體課本34頁旁欄)在離體條件下,通過無菌操作,在人工控制條件下(一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件)進行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。
一、植物組織培養(yǎng)的概念一、植物組織培養(yǎng)的概念概念:原因:(回想)植物組織培養(yǎng)原理:植物細胞的全能性細胞的全能性是指已分化的細胞具有發(fā)育成完整個體的潛能。生物體的每一個細胞都是由同一個受精卵有絲分裂而來,都含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)概念:(回想)植物組織培養(yǎng)原理:植物細胞的全能性細胞的全能性什么叫分化?(其實質(zhì)是什么來著?)什么叫脫(去)分化、再分化?愈傷組織的細胞有什么特點?如何控制細胞的脫分化與去分化?
(閱讀32-33頁第一段解決下列問題)二、植物組織培養(yǎng)的基本過程基因的選擇性表達
什么叫分化?(其實質(zhì)是什么來著?)(閱讀32-33頁第一段解二、植物組織培養(yǎng)的基本過程二、植物組織培養(yǎng)的基本過程三、影響植物組織培養(yǎng)的因素:1、材料(外植體)的選?。?)不同植物的組織培養(yǎng)難度不同什么樣的植物容易進行組織培養(yǎng)?
(2)同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同什么樣的組織容易進行組織培養(yǎng)?容易進行無性生殖的植物,如煙草、胡蘿卜幼齡、保存時間短的組織菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料?未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝三、影響植物組織培養(yǎng)的因素:1、材料(外植體)的選取容易進行2、營養(yǎng)成分(培養(yǎng)基)(1)植物組織培養(yǎng)常用的培養(yǎng)基?
MS培養(yǎng)基大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等
(2)MS培養(yǎng)基的主要成分?培養(yǎng)基中的各種成分的作用是什么?大量元素和微量元素提供植物細胞需要的各種無機鹽;蔗糖提供碳源的同時維持細胞滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細胞的特殊營養(yǎng)物質(zhì)需求課本33頁旁欄思考:微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)2、營養(yǎng)成分(培養(yǎng)基)MS培養(yǎng)基大量元素:C、H、O、N、P3、植物激素(1)關(guān)鍵激素是什么?(2)兩種激素的不同使用順序出現(xiàn)不同結(jié)果(3)兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果4、pH、溫度、光照等
菊花組織培養(yǎng)的PH?溫度?光照?3、植物激素(1)關(guān)鍵激素是什么?(2)兩種激素的不同使用順菊花的組織培養(yǎng)再分化材料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)節(jié)物質(zhì)、環(huán)境條件基本原理:細胞的全能性基本過程:脫分化愈傷組織影響因素:OK了,整理并記憶菊花的組織培養(yǎng)再分化材料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、基本原理:細胞的全能制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽培四、實驗操作移栽流水沖洗—無菌紙吸干—70%酒精—無菌水沖洗—無菌紙吸干—0.1%氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上(流水是為消毒嗎?能消毒的是什么?無菌水沖洗是為了干啥?)(哪6步?)1、配制各種母液(大量元素、微量元素各濃縮多少倍?用量較小的有機物呢?)2、配制培養(yǎng)基(菊花組培是否添加植物激素?)3、滅菌(哪種滅菌方法?)注意接種時的各種無菌操作。將菊花莖段插入培養(yǎng)基時特別應(yīng)注意什么?最好在哪兒培養(yǎng)?溫度?光照?定期消毒?直接移栽到土壤中嗎?制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)栽1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)2、外植體的消毒(酒精、氯化汞)3、接種的無菌操作(酒精、酒精燈——灼燒)4、無菌箱中的培養(yǎng);5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的?35頁旁欄思考:至少做一組以上的重復(fù)。對照實驗用一個不接種的空白培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基一同培養(yǎng),用以說明培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。1、培養(yǎng)基的滅菌(高壓蒸汽滅菌)在整個操作過程中,是如何來實結(jié)果分析與評價(一)對接種操作中污染情況的分析(二)是否完成了對植物組織的脫分化和再分化(三)是否進行了統(tǒng)計、對照與記錄(四)生根苗的移栽是否合格結(jié)果分析與評價(一)對接種操作中污染情況的分析課題延伸(略)練習(xí)1.答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長,如一些細菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染,就會導(dǎo)致實驗前功盡棄,因此要進行嚴(yán)格的無菌操作。2.答:外植體的生理狀態(tài)是成功進行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。課題延伸(略)練習(xí)菊花的組織培養(yǎng)再分化材料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、
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