豬瘟專用血清質(zhì)量標準

豬瘟疫苗專用血清質(zhì)量標準編號：STP-ZL008-00頁碼：1\3版本號：01修訂號：01機密等級：秘密起草人起草日期頒發(fā)部門質(zhì)量管理部審核人審核日期批準人批準日期生效日期分發(fā)清單研發(fā)部[]質(zhì)量管理部[]綜合管理部[]生產(chǎn)管理部[]市場銷售部[]財務(wù)部[]目的建立豬瘟疫苗專用血清質(zhì)量標準，保證成品血清質(zhì)量。適用范圍適用于豬瘟疫苗生產(chǎn)專用的初制血清及成品的質(zhì)量標準。職責3.1.質(zhì)量管理部：負責本規(guī)程的起草、修訂、審核、培訓(xùn)、實施和監(jiān)督。3.2.質(zhì)量管理部QC人員：負責本規(guī)程的實施。3.3.總經(jīng)理：負責本規(guī)程的批準。定義精制血清：初制血清按類型混合后經(jīng)過濾除菌、分裝等程序成為成品血清。引用標準《中華人民共和國藥典》2015版第四部；《中國獸藥典》2010版材料及設(shè)備6.1無流程圖無內(nèi)容8.1.物理性狀：橙黃色清亮透明稍粘稠液體。8.2．pH值：依通則0631，7.0～8.58.3．蛋白質(zhì)含量：依通則0731（雙縮脲法）檢查，應(yīng)為35～50g/L。8.4．血紅蛋白：分光光度計法，不高于200mg/L。8.5．大腸桿菌噬菌體：采用噬斑法和增殖法檢測，不得有噬菌體的污染8.6．滲透壓摩爾濃度：依通則0632，應(yīng)為250～330mOsmol/kg。8.7．無菌檢驗：依通則1101檢查，符合規(guī)定。8.9．支原體：依通則3301檢查，不得有支原體污染。8.9．細菌內(nèi)毒素：依通則1143凝膠法，每ml不高于10EU。8.10．病毒檢查：8.11．依通則3604病毒檢查，應(yīng)符合規(guī)定。8.12．支持細胞增殖檢查：用Sp2/0-Ag14或適宜的非貼壁傳代細胞進行。8.12.1．細胞生長曲線的測定取供試品按10%的濃度配置細胞培養(yǎng)液，按每ml含量104的細胞濃度接種細胞，每天計數(shù)活細胞，連續(xù)觀察一周，并繪制生長曲線，細胞的最大增殖濃度應(yīng)不低于106/ml。8.12.2．細胞倍增時間的測定按Sp2/0-Ag14細胞生長曲線計算細胞的倍增時間。取細胞峰值前一天的細胞計數(shù)（Y）、接種細胞數(shù)（X）及生長時間（T）計算。倍增時間=T/AA=log2Y/XSp2/0-Ag14細胞的倍增時間不超過20小時。8.12.3．克隆率的測定按有限稀釋法將細胞稀釋，并按每孔1個細胞的濃度接種于96孔細胞培養(yǎng)板，每板至少接種60孔。于37℃、5％二氧化碳條件下培養(yǎng)一周后計算克隆率，應(yīng)不低于70％?？寺÷?A/B×100％式中A為細胞克隆孔數(shù)。B為接種細胞的總孔數(shù)。8.13．牛病毒性腹瀉病毒抗原及抗體檢測8.13.1用牛腎細胞（MDBK）等適宜細胞逐頭篩選的新生牛血清牛病毒性腹瀉病病毒中和抗體小于1：2。酶聯(lián)免疫吸附法檢測BVDV抗體全部陰性。8.13.2酶聯(lián)免疫吸附試驗逐頭篩選牛病毒性腹瀉病毒抗原陰性，PCR法檢測陰性。8.14．不得添加抗生素和胰島素等任何化學(xué)物質(zhì)8.15．貯藏溫度：-15℃及以下8.16．效期：生產(chǎn)之日起5年規(guī)格：100ml/瓶、500ml/瓶、1000ml/瓶注意事項無附錄及派生記錄無相關(guān)文件11.1《無菌檢驗操作SOP》SOP-ZL001-0111.2《細菌內(nèi)毒素檢測（凝膠法）SOP》SOP-ZL002-0111.3《蛋白檢驗操作SOP》SOP-ZL003-0111.4《血紅蛋白檢驗操作SOP》SOP-ZL004-0111.5《支原體檢查（培養(yǎng)法）SOP》SOP-ZL005-0111.6《支原體檢查（DNA法）SOP》SOP-ZL006-0111.7《大腸桿菌噬菌檢驗操作SOP》SOP-ZL007-0111.8《病毒檢驗操作SOP》SOP-ZL008-0111.9《促細胞增殖檢查SOP》SOP-ZL009-0111.10《摩爾滲透壓測定SOP》SOP-ZL010-0111.11《pH檢驗操作SOP》SOP-ZL011-0111.12《BVDV中和抗體檢測SOP》SOP-ZL013-0011.13《牛病毒性腹瀉PCR檢測SOP》SOP-ZL038-0011.14《酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測BVDV抗原》SOP-ZL0