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實(shí)驗(yàn)三酶的基本性質(zhì)第1頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月酶的定義:是生物細(xì)胞產(chǎn)生的、以蛋白質(zhì)為主要成分的生物催化劑。生物體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)基本上都是在酶催化下進(jìn)行的。酶的特點(diǎn):酶具有高效性、專一性、活性可調(diào)節(jié)控制等特性。溫度、pH值、激活劑、抑制劑可影響酶的活性。第2頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月一、目的通過檢驗(yàn)不同溫度下唾液淀粉酶的活性,了解溫度對酶活性的影響,明確最適溫度的概念;了解pH值對酶活力的影響,學(xué)習(xí)測定最適pH值的方法;了解激活劑、抑制劑對酶活性的影響,學(xué)習(xí)檢定激活劑和抑制劑影響酶反應(yīng)的方法和原理。第3頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月二、原理酶的催化作用受溫度的影響很大提高溫度可以增加酶促反應(yīng)的速度。通常溫度每升高10攝氏度,反應(yīng)速度加快一倍左右,最后反應(yīng)速度達(dá)到最大值。酶是一種蛋白質(zhì),溫度過高可引起蛋白質(zhì)變性,導(dǎo)致酶的失活。因此,反應(yīng)速度達(dá)到最大值以后,隨著溫度升高,反應(yīng)速度反而逐漸下降,以至完全停止反應(yīng)。反應(yīng)速度達(dá)到最大值時的溫度稱為某種酶作用的最適溫度。高于或低于最適溫度時,反應(yīng)速度逐漸降低。最適溫度(一)溫度對酶活性的影響第4頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月二、原理酶的活性受環(huán)境pH的影響極為顯著。通常各種酶只有在一定的pH范圍內(nèi)才表現(xiàn)它的活性。一種酶表現(xiàn)其活性最高時的pH值,稱為該酶的最適pH。低于或高于最適pH時,酶的活性逐漸降低。不同酶的最適pH值不同,例如,胃蛋白酶的最適pH為1.5-2.5,胰蛋白酶的最適pH為8等。
(二)pH對酶活性的影響第5頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月酶的活性常受某些物質(zhì)的影響。有些物質(zhì)能使酶的活性增加,稱為酶的激活劑;有些物質(zhì)能使酶的活性降低,稱為酶的抑制劑。例如,氯化鈉為唾液淀粉酶的激活劑,硫酸銅為其抑制劑。很少量的激活劑或抑制劑就會影響酶的活性,而且常具有特異性。激活劑和抑制劑不是絕對的,有些物質(zhì)在低濃度時為某種酶的激活劑,而在高濃度時則為該酶的抑制劑。例如,氯化鈉達(dá)到1/3飽和度時就可抑制唾液淀粉酶的活性。
二、原理(三)酶的激活和抑制第6頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月二、原理
本實(shí)驗(yàn)分別在不同溫度、不同pH值及不同物質(zhì)作用的條件下使淀粉酶作用于其底物——淀粉,并用碘液檢查酶促淀粉水解程度來說明各條件與酶活力之間的關(guān)系。淀粉糊精麥芽糖淀粉酶淀粉酶大小中碘液碘液碘液碘液碘液藍(lán)色藍(lán)紫色暗褐色紅色碘色第7頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月三、儀器和試劑儀器移液管、吸耳球、試管、試管架、恒溫水浴鍋、膠頭滴管、白瓷反應(yīng)盤試劑1%淀粉溶液(含0.3%NaCl),0.1%淀粉溶液,唾液淀粉酶液,pH7.0、8.0、5.0的磷酸緩沖液(PB),碘液,1%NaCl,1%CuSO4,蒸餾水(dH2O)第8頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月四、實(shí)驗(yàn)方法(一)溫度對酶活性的影響操作項(xiàng)目管號123唾液淀粉酶液(mL)111酶液處理5min0℃37℃100℃pH7.0緩沖液(mL)2221%淀粉液(含0.3%NaCl)(mL)111反應(yīng)10min0℃37℃100℃冷卻3min流動水冷卻碘液(滴)111第9頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月四、實(shí)驗(yàn)方法(二)pH值對酶活性的影響操作項(xiàng)目管號123pH5.0緩沖液(mL)3//pH7.0緩沖液(mL)/3/pH8.0緩沖液(mL)//31%淀粉液(含0.3%NaCl)(mL)111淀粉酶液(mL)111保溫將各管混勻37℃水浴中保溫檢查淀粉水解程度保溫2min后,從2號試管中取出1滴溶液置于白磁盤上,用碘液檢查淀粉的水解程度碘液(滴)111第10頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月四、實(shí)驗(yàn)方法(三)酶的激活和抑制操作項(xiàng)目管號1231%NaCl(mL)1//1%CuSO4(mL)/1/蒸餾水(mL)//1淀粉酶液(mL)1110.1%淀粉液(mL)333保溫將各管混勻37℃水浴中保溫檢查淀粉水解程度保溫1min后,從1號試管中取出1滴溶液置于白磁盤上,用碘液檢查淀粉的水解程度碘液(滴)222第11頁,課件共13頁,創(chuàng)作于2023年2月五、結(jié)果與分析(三)酶的激活和抑制各試管中現(xiàn)象,解釋原因(一)溫度對酶活
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