高中生物第3章基因工程第2節(jié)基因工程的基本操作程序課件選擇性必修3

第3章基因工程第2節(jié)基因工程的基本操作程序課標(biāo)要求核心素養(yǎng)1．掌握目的基因的篩選與獲取方法。(科學(xué)思維、生命觀念)2．學(xué)會(huì)基因表達(dá)載體構(gòu)建的方法和要求。(科學(xué)探究)3．理解目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的具體過(guò)程。(科學(xué)探究)4．掌握目的基因檢測(cè)與鑒定的方法。(科學(xué)探究、社會(huì)責(zé)任)5．掌握DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定的方法。(科學(xué)探究)1．概述基因工程的基本操作程序。2．說(shuō)明利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的基本過(guò)程。3．理解基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)和各部分的作用及基因表達(dá)載體的構(gòu)建。4．舉例說(shuō)明獲取目的基因的途徑，目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法、檢測(cè)與鑒定目的基因的方法。知識(shí)導(dǎo)圖學(xué)霸記憶?素養(yǎng)積累訓(xùn)練鞏固?課堂達(dá)標(biāo)新知預(yù)習(xí)?雙基夯實(shí)課內(nèi)探究?名師點(diǎn)睛指點(diǎn)迷津?撥云見(jiàn)日新知預(yù)習(xí)?雙基夯實(shí)一、目的基因的篩選與獲取1．目的基因(1)概念：用于改變______________或獲得______________等的基因。(2)實(shí)例：培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉用到的目的基因是________________。受體細(xì)胞性狀

預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物

Bt抗蟲(chóng)蛋白基因

2．篩選合適的目的基因(1)較為有效的方法：從相關(guān)的__________和__________的基因中進(jìn)行篩選。(2)實(shí)例：在培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉之前，科學(xué)家不僅掌握了Bt基因的__________，也對(duì)Bt基因的表達(dá)產(chǎn)物____________有了較為深入的了解。(3)認(rèn)識(shí)基因結(jié)構(gòu)和功能的技術(shù)方法：_________技術(shù)、__________數(shù)據(jù)庫(kù)、__________工具。已知結(jié)構(gòu)

功能清晰

序列信息

Bt抗蟲(chóng)蛋白

DNA測(cè)序

遺傳序列

序列比對(duì)

3．利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因(1)PCR的含義：PCR是________________的縮寫(xiě)，它是一項(xiàng)根據(jù)_______________的原理，在體外提供_____________的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)______________________進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)。(2)條件：DNA模板、分別與兩條模板鏈結(jié)合的2種______、四種____________、___________________。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

DNA半保留復(fù)制

參與DNA復(fù)制

目的基因的核苷酸序列

引物

脫氧核苷酸

耐高溫的DNA聚合酶

(3)過(guò)程：①變性：溫度上升到90℃以上，目的基因DNA____________________。②復(fù)性：溫度下降到50℃左右時(shí)，__________通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。③延伸：溫度上升到72℃左右時(shí)，溶液中________________在耐高溫的___________的作用下加到引物的______端合成子鏈。④重復(fù)循環(huán)多次。(4)結(jié)果：每次循環(huán)后目的基因的量增加一倍，即成______形式擴(kuò)增(約為2n)。受熱變性后解為單鏈

兩種引物

四種脫氧核苷酸

DNA聚合酶

3′

指數(shù)

二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建1．構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的(1)使目的基因在受體細(xì)胞中__________，并且可以______給下一代。(2)使目的基因能夠______和發(fā)揮作用。穩(wěn)定存在

遺傳

表達(dá)

2．基因表達(dá)載體的組成[填圖]3．基因表達(dá)載體的構(gòu)建首先用一定的________切割載體，使它出現(xiàn)一個(gè)切口，然后用______限制酶或________________的限制酶切割目的基因的DNA片段，再利用___________將目的基因片段拼接到載體的切口處。限制酶

同種

能產(chǎn)生相同末端

DNA連接酶

三、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1．轉(zhuǎn)化：目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)__________和______的過(guò)程。2．目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法(1)目的基因?qū)胫参锛?xì)胞①花粉管通道法Ⅰ.用微量注射器將含目的基因的DNA溶液直接注入______中。Ⅱ.在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，將DNA溶液滴加在花柱切面上，使目的基因借____________進(jìn)入______。維持穩(wěn)定

表達(dá)

子房

花粉管通道

胚囊

②農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法Ⅰ.農(nóng)桿菌的特點(diǎn)：農(nóng)桿菌自然條件下侵染________植物和______植物；農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的________能夠整合到所侵染細(xì)胞的___________上。Ⅱ.轉(zhuǎn)化方法：將目的基因插入農(nóng)桿菌________________中，讓農(nóng)桿菌侵染植物細(xì)胞。雙子葉

裸子

T－DNA

染色體DNA

Ti質(zhì)粒的T－DNA

(2)目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞①常用方法：__________法。②常用受體細(xì)胞：________。(3)目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞①方法：用________處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后將重組表達(dá)載體導(dǎo)入其中。②常用受體細(xì)胞：原核細(xì)胞(使用最廣泛的是大腸桿菌)。顯微注射

受精卵

Ca2＋

四、目的基因的檢測(cè)與鑒定1．分子水平檢測(cè)(1)通過(guò)_____等技術(shù)檢測(cè)受體細(xì)胞染色體DNA上是否插入了目的基因或檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA。(2)從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)用相應(yīng)的抗體進(jìn)行____________雜交，檢測(cè)目的基因是否翻譯成了蛋白質(zhì)。2．個(gè)體水平鑒定包括抗蟲(chóng)、抗病的接種實(shí)驗(yàn)，以確定是否有抗性及抗性程度?；蚬こ坍a(chǎn)品需要與天然產(chǎn)品活性進(jìn)行比較等。PCR

抗原—抗體

1．從已知結(jié)構(gòu)和功能清晰的基因中篩選目的基因是獲取目的基因的一種有效方法。

(

)2．Taq酶是用PCR儀對(duì)DNA分子擴(kuò)增過(guò)程中常用的一種耐高溫的DNA連接酶。

(

)3．基因表達(dá)載體中啟動(dòng)子是DNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。

(

)4．將重組表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用顯微注射法。

(

)活學(xué)巧練√

×

×

√

5．轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉植株抗蟲(chóng)效果的鑒定必須通過(guò)分子檢測(cè)才能達(dá)到目的。

(

)6．可通過(guò)PCR等技術(shù)檢測(cè)棉花的染色體上是否插入了Bt基因。

(

)×

√

思考：1．PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，復(fù)性溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。復(fù)性溫度過(guò)高會(huì)破壞引物與模板的堿基配對(duì)，復(fù)性溫度過(guò)低又會(huì)造成引物不能與DNA模板鏈的特定部位結(jié)合。復(fù)性溫度的設(shè)定與引物長(zhǎng)度、堿基組成有關(guān)，假設(shè)引物的長(zhǎng)度相同，在GC含量高時(shí)，對(duì)復(fù)性溫度的設(shè)定有什么要求？說(shuō)明理由。提示：在引物的GC含量高時(shí)，設(shè)定的復(fù)性溫度要高一些。因?yàn)镈NA分子中G—C之間有三個(gè)氫鍵，A—T之間有兩個(gè)氫鍵。2．在利用PCR獲取和擴(kuò)增目的基因時(shí)，從第幾輪循環(huán)才會(huì)產(chǎn)生完整的目的基因？提示：第3輪3．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)腚p子葉植物和裸子植物的一種方法，原因是雙子葉植物和裸子植物能夠產(chǎn)生一種吸引農(nóng)桿菌的化學(xué)物質(zhì)，而單子葉植物不能產(chǎn)生這種物質(zhì)，能不能利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)雴巫尤~植物？說(shuō)明原因。提示：能，可從雙子葉植物中提取該化合物，再用該化合物處理單子葉植物細(xì)胞，然后就可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)雴巫尤~植物細(xì)胞。4．將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的受體細(xì)胞除了受精卵外，還可以選擇什么細(xì)胞？提示：還可以將目的基因?qū)肱咛ジ杉?xì)胞，因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞也能發(fā)育成動(dòng)物體。學(xué)霸記憶?素養(yǎng)積累1．基因工程的基本操作程序有：(1)目的基因的篩選與獲?。?2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定。2．PCR反應(yīng)液中需要提供DNA模板、分別與兩條模板鏈結(jié)合的2種引物、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶。3．PCR反應(yīng)中每次循環(huán)一般可分為變性、復(fù)性、延伸三步。4．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，基因表達(dá)載體是載體的一種，除了目的基因外，它還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等。5．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和花粉管通道法。6．將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射技術(shù)，導(dǎo)入微生物細(xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法(Ca2＋處理法)。7．分子水平的檢測(cè)：檢測(cè)目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA中；檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；檢測(cè)目的基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)。8．目的基因的檢測(cè)與鑒定也可以在個(gè)體生物學(xué)水平進(jìn)行鑒定。課內(nèi)探究?名師點(diǎn)睛知識(shí)點(diǎn)1．目的基因用于改變受體細(xì)胞性狀或獲得預(yù)期表達(dá)產(chǎn)物等的基因，主要是指編碼蛋白質(zhì)的基因。2．獲取方法(1)從基因文庫(kù)中獲取。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增。(3)通過(guò)化學(xué)方法人工合成。目的基因的獲取3．PCR反應(yīng)(1)條件①模板：DNA母鏈(目的基因所在的DNA片段)。②酶：耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)。③兩種引物：分別與兩條模板鏈相結(jié)合。④原料：四種脫氧核苷酸。(2)過(guò)程過(guò)程說(shuō)明圖解變性溫度上升到90℃左右，雙鏈DNA解聚為單鏈復(fù)性溫度下降到50℃左右，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合過(guò)程說(shuō)明圖解延伸溫度上升到72℃左右，溶液中的4種脫氧核苷酸在耐高溫的DNA聚合酶的作用下從引物起始合成互補(bǔ)鏈，可使新鏈由5′端向3′端延伸(3)結(jié)果上述三步反應(yīng)完成后，一個(gè)DNA分子就變成了兩個(gè)DNA分子，隨著重復(fù)次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過(guò)程都是在PCR擴(kuò)增儀中完成的。知識(shí)貼士關(guān)于引物①概念：引物是一小段能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對(duì)的短單鏈核酸。用于PCR的引物長(zhǎng)度一般為20～30個(gè)核苷酸。②作用：使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開(kāi)始連接脫氧核苷酸，見(jiàn)下圖：

PCR是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)，模擬了體內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程。下圖為PCR技術(shù)原理示意圖，對(duì)于圖中物質(zhì)和過(guò)程的說(shuō)明，錯(cuò)誤的是

(

)A．物質(zhì)a：游離的脫氧核苷酸B．過(guò)程①：氫鍵斷裂C．過(guò)程②：邊解旋邊復(fù)制D．過(guò)程③：遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則典例1典例剖析C

解析：PCR模擬了體內(nèi)的DNA復(fù)制，所以a是DNA復(fù)制的原料——脫氧核苷酸，A項(xiàng)正確；在94℃高溫條件下，DNA分子雙螺旋解開(kāi)，形成單鏈，此時(shí)氫鍵斷裂，B項(xiàng)正確；體外模擬DNA的復(fù)制依據(jù)了DNA的熱變性原理，該過(guò)程DNA分子不是邊解旋邊復(fù)制，C項(xiàng)錯(cuò)誤；DNA復(fù)制需要遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，D項(xiàng)正確。1．PCR一般要經(jīng)過(guò)三十次循環(huán)，從第二輪循環(huán)開(kāi)始，上一次循環(huán)的產(chǎn)物也作為模板參與反應(yīng)，由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時(shí)將

(

)A．仍與引物Ⅰ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸B．與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸C．同時(shí)與引物Ⅰ和引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行子鏈的延伸D．無(wú)須與引物結(jié)合，在酶的作用下從頭合成子鏈變式訓(xùn)練B

解析：當(dāng)由引物Ⅰ延伸而成的DNA單鏈作模板時(shí)，此單鏈引物固定端為5′端，與它互補(bǔ)的子鏈從另一端開(kāi)始合成，即與引物Ⅱ結(jié)合進(jìn)行DNA子鏈的延伸。知識(shí)點(diǎn)1．目的(1)使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代。(2)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2．地位：基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建3．基因表達(dá)載體的組成4．過(guò)程知識(shí)貼士啟動(dòng)子≠起始密碼子，終止子≠終止密碼子(1)啟動(dòng)子位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，與終止子一樣都位于DNA片段上，分別控制轉(zhuǎn)錄過(guò)程的啟動(dòng)和終止。(2)起始密碼子和終止密碼子位于mRNA上，分別控制翻譯過(guò)程的啟動(dòng)和終止。

下圖為基因表達(dá)載體的模式圖，下列有關(guān)基因工程中載體的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是 (

)A．基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建B．基因表達(dá)載體的構(gòu)建并不一定相同C．圖中啟動(dòng)子位于目的基因的首端，是核糖體識(shí)別和結(jié)合的部位D．抗生素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因，用于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因典例2典例剖析C

解析：由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物、微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，因此基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有所差別，不可能是千篇一律的；啟動(dòng)子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于目的基因的上游，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。2．(不定項(xiàng))如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，生產(chǎn)可食用疫苗的部分過(guò)程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切核酸酶。下列說(shuō)法正確的是 (

)變式訓(xùn)練A．卡那霉素抗性基因的存在有利于將含有抗原基因的細(xì)胞篩選出來(lái)B．基因表達(dá)載體構(gòu)建時(shí)需要用到限制酶SmaⅠC．切割目的基因需要PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶D．除圖示組成外，基因表達(dá)載體中還應(yīng)該含有啟動(dòng)子和終止子等結(jié)構(gòu)ACD

解析：卡那霉素抗性基因是標(biāo)記基因，便于鑒定和篩選含有目的基因的細(xì)胞，A正確；構(gòu)建過(guò)程中需要將目的基因完整切割下來(lái)，需要在目的基因的兩側(cè)有酶切位點(diǎn)，而不能選擇酶切位點(diǎn)在目的基因內(nèi)部的限制酶，SmaⅠ的識(shí)別序列位于目的基因上，因此要用到限制酶PstⅠ、EcoRⅡ，B錯(cuò)誤、C正確；基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因等，D正確。知識(shí)點(diǎn)1．導(dǎo)入的方法目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞受體細(xì)胞類(lèi)型方法說(shuō)明特點(diǎn)植物細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA上→轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→插入植物細(xì)胞中的染色體DNA上→目的基因表達(dá)經(jīng)濟(jì)、有效，適合于雙子葉植物和裸子植物花粉管通道法在植物受粉后，花粉形成的花粉管還未愈合前，剪去柱頭→滴加DNA(含目的基因)，使目的基因借助花粉管通道進(jìn)入受體細(xì)胞→目的基因表達(dá)簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)受體細(xì)胞類(lèi)型方法說(shuō)明特點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞顯微注射法目的基因片段受精卵的核內(nèi)→將受精卵移植到雌性動(dòng)物的輸卵管或子宮內(nèi)→使受精卵發(fā)育成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的最有效的方法微生物細(xì)胞Ca2＋處理法(感受態(tài)細(xì)胞法)Ca2＋處理微生物細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→將基因表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合在緩沖液中→在一定溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過(guò)程簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、有效2．目的基因在受體細(xì)胞中的位置不同會(huì)引起遺傳上的差別(1)圖中a細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)，細(xì)胞質(zhì)是不均分的，子細(xì)胞不一定含有目的基因。(2)圖中b在進(jìn)行細(xì)胞減數(shù)分裂時(shí)，細(xì)胞核中的DNA經(jīng)復(fù)制后平均分配到兩個(gè)子細(xì)胞中，保證了親子代遺傳性狀的穩(wěn)定性，細(xì)胞中目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。知識(shí)貼士在將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞之前，都必須進(jìn)行基因表達(dá)載體的構(gòu)建，也就是說(shuō)導(dǎo)入受體細(xì)胞的必須是重組DNA分子，而不是直接導(dǎo)入目的基因。

下列有關(guān)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的敘述，正確的是

(

)A．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法B．原核生物有繁殖快、遺傳物質(zhì)少等特點(diǎn)，可用于生產(chǎn)各種有生物活性的蛋白質(zhì)C．基因槍法是將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞中最為有效的方法D．可將含有目的基因的植物病毒作為載體導(dǎo)入Ca2＋處理后的大腸桿菌細(xì)胞典例3典例剖析A

解析：原核生物的細(xì)胞中沒(méi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，不能對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工，故生產(chǎn)的蛋白質(zhì)可能沒(méi)有生物活性；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最常用的方法是顯微注射技術(shù)；植物病毒只侵染植物細(xì)胞。3．下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。以下相關(guān)敘述，正確的是

(

)A．⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異B．③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上C．④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀D．②的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA聚合酶參與變式訓(xùn)練A

解析：⑤為轉(zhuǎn)基因植物，只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就說(shuō)明轉(zhuǎn)入的目的基因成功表達(dá)了，基因工程的原理是基因重組，屬于可遺傳變異，A項(xiàng)正確；③侵染植物細(xì)胞后，重組Ti質(zhì)粒上的T－DNA整合到棉花細(xì)胞的染色體上，B項(xiàng)錯(cuò)誤；受體細(xì)胞的染色體上可能含抗蟲(chóng)基因，但不代表該基因就一定成功表達(dá)，因此不能確定⑤是否表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀，C項(xiàng)錯(cuò)誤；基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連接酶參與，D項(xiàng)錯(cuò)誤。知識(shí)點(diǎn)1．目的基因的檢測(cè)與鑒定目的基因的檢測(cè)與鑒定2．不同分子檢測(cè)原理的異同(1)檢測(cè)目的基因是否插入受體DNA中、目的基因是否轉(zhuǎn)錄時(shí)，用的探針都是放射性同位素等標(biāo)記的含有目的基因的DNA片段。檢測(cè)原理都是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，只是被檢測(cè)的物質(zhì)不同，一個(gè)是轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA，一個(gè)是轉(zhuǎn)基因生物細(xì)胞內(nèi)的mRNA。(2)進(jìn)行翻譯水平的檢測(cè)，通常以目的基因表達(dá)產(chǎn)物(蛋白質(zhì))作抗原，制備相應(yīng)抗體，檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的蛋白質(zhì)，利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理。(3)不論是復(fù)制水平、轉(zhuǎn)錄水平還是翻譯水平的檢測(cè)，都是在體外進(jìn)行的。知識(shí)貼士基因工程操作過(guò)程中堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象基因工程操作過(guò)程中只有第三步“將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞”沒(méi)有堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象；第一步篩選與獲取目的基因，用人工合成、PCR獲取或基因文庫(kù)獲取，三種常用方法都涉及堿基互補(bǔ)配對(duì)；第二步基因表達(dá)載體的構(gòu)建中DNA連接酶連接目的基因與質(zhì)粒載體，第四步利用分子雜交的方法檢測(cè)(DNA、mRNA)，也都存在堿基互補(bǔ)配對(duì)現(xiàn)象。

目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過(guò)鑒定與檢測(cè)才能知道。下列屬于目的基因檢測(cè)和鑒定的是

(

)①檢測(cè)受體細(xì)胞中是否有目的基因②檢測(cè)受體細(xì)胞中是否有致病基因③檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA

④檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)A．①②③

B．②③④C．①③④ D．①②④典例4C

典例剖析解析：對(duì)轉(zhuǎn)基因中目的基因的分子水平的檢測(cè)包括三個(gè)方面：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了相應(yīng)的mRNA，方法也是使用基因探針與之雜交；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成了相應(yīng)的蛋白質(zhì)，常用的方法是抗原—抗體雜交。4．綠葉海天牛(簡(jiǎn)稱甲)吸食濱海無(wú)隔藻(簡(jiǎn)稱乙)后，身體就逐漸變綠，這些“奪來(lái)”的葉綠體能夠在甲體內(nèi)長(zhǎng)期穩(wěn)定存在，有科學(xué)家推測(cè)其原因是在甲的染色體DNA上可能存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因。為證實(shí)上述推測(cè)，以這種變綠的甲為材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法和結(jié)果最能支持上述推測(cè)的是 (

)變式訓(xùn)練A．提取甲的全部DNA，通過(guò)PCR技術(shù)能克隆出乙的編碼葉綠體蛋白的核基因B．通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNAC．給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性D．用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶答案：D

解析：通過(guò)PCR技術(shù)從甲體內(nèi)的DNA中克隆出屬于乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，這只能說(shuō)明甲體內(nèi)含有乙的編碼葉綠體蛋白的核基因，但不能說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，A項(xiàng)錯(cuò)誤；通過(guò)核酸分子雜交技術(shù)，在甲體內(nèi)檢測(cè)到乙的編碼葉綠體蛋白的核基因轉(zhuǎn)錄出的RNA，這只能說(shuō)明甲體內(nèi)含有乙的編碼葉綠體蛋白的核基因且發(fā)生了轉(zhuǎn)錄，但不能說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，B項(xiàng)錯(cuò)誤；給甲提供14CO2，一段時(shí)間后檢測(cè)到其體內(nèi)的部分有機(jī)物出現(xiàn)放射性，這只能說(shuō)明甲進(jìn)行了光合作用，其中含有葉綠體，但不能說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，C項(xiàng)錯(cuò)誤；用乙編碼葉綠體蛋白的核基因做探針與甲的染色體DNA雜交，結(jié)果顯示出雜交帶，這說(shuō)明甲的染色體DNA上存在乙編碼葉綠體部分蛋白的核基因，D項(xiàng)正確。知識(shí)點(diǎn)1．原理(1)PCR利用DNA的熱變性原理，通過(guò)調(diào)整溫度來(lái)控制DNA雙鏈的解聚與結(jié)合。PCR儀實(shí)質(zhì)上就是一臺(tái)能夠自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。(2)DNA分子具有可解離的基團(tuán)，在一定的pH下，這些基團(tuán)帶上正電荷和負(fù)電荷。在電場(chǎng)的作用下，這些帶電分子向著與它所帶電荷相反的電極移動(dòng)。PCR的產(chǎn)物一般通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。凝膠中的DNA分子通過(guò)染色，可以在波長(zhǎng)為300nm的紫外燈下被檢測(cè)出來(lái)。DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定2．材料與用具(1)PCR儀一臺(tái)能夠自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器。(2)微量離心管進(jìn)行PCR反應(yīng)的場(chǎng)所，一種薄壁塑料管，總?cè)莘e為0.2mL或0.5mL。(3)微量移液器、一次性吸液槍頭用于定量轉(zhuǎn)移PCR反應(yīng)體系的配方中的液體，其上的一次性吸液槍頭用一次更換一次。(4)電泳裝置(包括電泳儀、電泳槽)用于鑒定PCR的產(chǎn)物。(5)材料試劑4種脫氧核苷酸的等量混合液、2種引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA、擴(kuò)增緩沖液、無(wú)菌水、電泳緩沖液、凝膠載樣緩沖液、瓊脂糖和核酸染料等。3．方法步驟(1)PCR擴(kuò)增①準(zhǔn)備：按照PCR反應(yīng)體系的配方或PCR試劑盒的說(shuō)明書(shū)，將所需的試劑擺放在實(shí)驗(yàn)桌上。②移液：用微量移液器按照PCR反應(yīng)體系的配方往微量離心管里面加入各種試劑。③混合：蓋嚴(yán)微量離心管的蓋子，用手指輕輕彈擊管壁。注意：離心管的蓋子一定蓋嚴(yán)，防止實(shí)驗(yàn)中脫落或液體外溢。手指輕輕彈擊微量離心管的管壁，目的是使反應(yīng)液混合均勻。④離心a．過(guò)程：將微量離心管放入離心機(jī)里，離心約10s。b．目的：使掛在管壁上的液體全部甩下。⑤反應(yīng)循環(huán)程序變性復(fù)性延伸預(yù)變性94℃，5min——30次94℃，30s55℃，30s72℃，1min最后1次94℃，1min55℃，30s72℃，1min注意：預(yù)變性的目的是增加大分子模板DNA徹底變性的概率。(2)鑒定PCR產(chǎn)物——瓊脂糖凝膠電泳法①配制瓊脂糖溶液：用電泳緩沖液配制質(zhì)量體積比為0.8%～1.2%的瓊脂糖溶液。在沸水浴或微波爐內(nèi)加熱至瓊脂糖熔化。稍冷卻后，加入適量的核酸染料混勻。②制備瓊脂糖凝膠：將溫?zé)岬沫傊侨芤貉杆俚谷肽＞撸⒉迦脒m合大小的梳子，以形成加樣孔。待凝膠溶液完全凝固，小心拔出梳子，取出凝膠放入電泳槽內(nèi)。見(jiàn)下圖：③將電泳緩沖液加入電泳槽中，電泳緩沖液沒(méi)過(guò)凝膠1mm為宜。④加樣：將擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物與凝膠載樣緩沖液(內(nèi)含指示劑)混合，再用微量移液器將混合液緩慢注入凝膠的加樣孔內(nèi)。留一個(gè)加樣孔加入指示分子大小的標(biāo)準(zhǔn)參照物。⑤電泳：接通電源，進(jìn)行電泳，待指示劑前沿遷移接近凝膠邊緣時(shí)，停止電泳。⑥取出凝膠置于紫外燈下觀察和照相。

用PCR方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因植株是否成功導(dǎo)入目的基因時(shí)，得到以下電泳圖譜，其中1號(hào)為DNA標(biāo)準(zhǔn)樣液(Marker)，10號(hào)為蒸餾水。PCR時(shí)加入的模板DNA如下圖所示。據(jù)此作出的分析，不合理的是 (

)A．PCR產(chǎn)物的分子大小為250～500bpB．3號(hào)樣品為不含目的基因的載體DNAC．9號(hào)樣品對(duì)應(yīng)植株不是所需的轉(zhuǎn)基因植株D．10號(hào)的電泳結(jié)果能確定反應(yīng)體系等對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有干擾典例5B

典例剖析解析：PCR過(guò)程中，可以通過(guò)設(shè)計(jì)特定的引物來(lái)擴(kuò)增特定的DNA片段。4～9號(hào)是轉(zhuǎn)基因植株，理論上應(yīng)包含目的基因，結(jié)合2號(hào)野生型和10號(hào)蒸餾水組的結(jié)果，推測(cè)包含目的基因的片段大小應(yīng)為250～500bp，A項(xiàng)正確。3號(hào)PCR結(jié)果包含250～500bp片段，應(yīng)包含目的基因，B項(xiàng)錯(cuò)誤。9號(hào)PCR結(jié)果不包含250～500bp片段，所以不是所需轉(zhuǎn)基因植株，C項(xiàng)正確。10號(hào)放入蒸餾水，可排除反應(yīng)體系等對(duì)結(jié)果的干擾，D項(xiàng)正確。5．對(duì)禽流感的確診，先用PCR技術(shù)將標(biāo)本基因大量擴(kuò)增，然后利用基因探針，測(cè)知待測(cè)標(biāo)本與探針核酸的堿基異同。下圖P表示禽流感病毒探針基因在凝膠的電泳標(biāo)記位置，甲、乙、丙、丁是四份送檢樣品在測(cè)定后的電泳標(biāo)記位置，哪份標(biāo)本最有可能被確診為禽流感？

(

)A．甲

B．乙C．丙

D．丁變式訓(xùn)練C

解析：據(jù)圖分析，圖中P表示禽流感病毒探針基因在凝膠的電泳標(biāo)記位置，甲、乙、丙、丁是四份送檢樣品在測(cè)定后的電泳標(biāo)記位置，其中丙的電泳位置與P最接近，因此最有可能被確診為禽流感。指點(diǎn)迷津?撥云見(jiàn)日一、PCR技術(shù)1．通過(guò)PCR技術(shù)獲得目的基因的過(guò)程1．一般情況下，DNA模板鏈較長(zhǎng)，需要PCR擴(kuò)增的基因只是DNA模板鏈的一段。2．第一輪循環(huán)，兩引物與模板鏈互補(bǔ)，DNA分子模板鏈最長(zhǎng)，新合成的DNA單鏈(含有引物的鏈)較短。3．第二輪循環(huán)，以含有引物的母鏈為模板合成的DNA分子，會(huì)出現(xiàn)含有兩個(gè)引物的DNA，其中新合成的單鏈b會(huì)比母鏈a更短，其實(shí)b就是我們所需擴(kuò)增的目的基因的長(zhǎng)度，只是b為單鏈。4．第三輪循環(huán)，以b為模板合成的DNA片段就是目的基因片段的長(zhǎng)度。5．結(jié)果分析(1)兩條單鏈等長(zhǎng)DNA(目的基因)從第三輪循環(huán)開(kāi)始出現(xiàn)(甲、乙)。隨循環(huán)次數(shù)的增加，目的基因含量會(huì)不斷增加。(2)通過(guò)以上分析我們可知，PCR反應(yīng)的產(chǎn)物不都是所需的目的基因片段，除目的基因外，還會(huì)存在四種類(lèi)型的DNA分子(這四種類(lèi)型同第二輪循環(huán)產(chǎn)生的4個(gè)DNA分子)。(3)DNA聚合酶只能特異性地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列，等長(zhǎng)DNA(目的基因)從第三輪循環(huán)開(kāi)始出現(xiàn)，隨著循環(huán)次數(shù)的增多，呈指數(shù)擴(kuò)增。

請(qǐng)回答以下基因工程方面的有關(guān)問(wèn)題：(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類(lèi)似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。典例6典例剖析①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物A的DNA片段所占的比例為_(kāi)___________。②在第____輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的DNA片段。15/16

三

(2)設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)的關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請(qǐng)分別說(shuō)明理由。①第1組：__________________________________________；②第2組：________________________________________________。引物Ⅰ和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

引物Ⅰ′自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效

(3)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因?yàn)開(kāi)___________________________________________________________________。DNA聚合酶只能將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上

解析：(1)①由圖可知，以原來(lái)的每條母鏈為模板合成的兩個(gè)新DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子鏈為模板合成新DNA分子時(shí)，兩種引物都含有，故第四輪循環(huán)共產(chǎn)生16個(gè)DNA分子，其中含有引物A的分子是15個(gè)，占15/16。②第一、二循環(huán)合成的子鏈長(zhǎng)度均不同，根據(jù)半保留復(fù)制特點(diǎn)，前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的4個(gè)DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng)，第三輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核苷酸鏈。(2)引物是單鏈DNA時(shí)才能與DNA結(jié)合，而單鏈DNA的堿基互補(bǔ)配對(duì)部分容易形成雙鏈結(jié)構(gòu)而失去其功能。從圖示可以看出，第1組引物Ⅰ和引物Ⅱ局部堿基互補(bǔ)配對(duì)，易形成雙鏈結(jié)構(gòu)而失效。第2組引物相互間不能發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)，但引物Ⅱ′自身折疊后會(huì)出現(xiàn)局部堿基互補(bǔ)配對(duì)而失效。(3)DNA聚合酶的作用是將單個(gè)脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上，而不能直接將兩個(gè)脫氧核苷酸連在一起。二、啟動(dòng)子和起始密碼子、終止子和終止密碼子的區(qū)別項(xiàng)目啟動(dòng)子終止子起始密碼子終止密碼子化學(xué)成分DNA片段DNA片段mRNA上三個(gè)相鄰堿基mRNA上三個(gè)相鄰堿基位置目的基因首端目的基因尾端mRNA首端mRNA尾端作用RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA決定轉(zhuǎn)錄的結(jié)束翻譯的起始信號(hào)決定翻譯過(guò)程的結(jié)束

下列有關(guān)人胰島素基因表達(dá)載體的敘述，正確的是(

)A．表達(dá)載體中的胰島素基因可通過(guò)人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得B．表達(dá)載體的復(fù)制和胰島素基因的表達(dá)均啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)C．借助抗生素抗性基因可將含胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)D．啟動(dòng)子和終止密碼子均在胰島素基因的轉(zhuǎn)錄中起作用典例6典例剖析C

解析：由于人肝細(xì)胞中胰島素基因不能表達(dá)，所以無(wú)法利用人肝細(xì)胞mRNA反轉(zhuǎn)錄獲得胰島素基因，A項(xiàng)錯(cuò)誤；表達(dá)載體的復(fù)制啟動(dòng)于復(fù)制原點(diǎn)，但胰島素基因的表達(dá)則開(kāi)始于啟動(dòng)子，B項(xiàng)錯(cuò)誤；抗生素抗性基因是標(biāo)記基因，作用是檢測(cè)受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有胰島素基因的受體細(xì)胞篩選出來(lái)，C項(xiàng)正確；啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)，而終止密碼子位于mRNA上，在翻譯中起作用，D項(xiàng)錯(cuò)誤。解疑答惑從社會(huì)中來(lái)?P76提示：轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉抗蟲(chóng)的機(jī)制是抗蟲(chóng)基因(Bt基因)來(lái)源于蘇云金桿菌，Bt基因表達(dá)的蛋白質(zhì)具有殺蟲(chóng)活性。當(dāng)害蟲(chóng)食用轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉花的時(shí)候，同時(shí)攝入Bt基因產(chǎn)生的抗蟲(chóng)蛋白，當(dāng)Bt抗蟲(chóng)蛋白被分解為多肽后，多肽與害蟲(chóng)腸上皮細(xì)胞的特異性受體結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞膜穿孔，最后造成害蟲(chóng)死亡。培育轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的步驟有目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。旁欄思考1?P79提示：用PCR不能直接擴(kuò)增mRNA，DNA聚合酶識(shí)別的是雙鏈DNA，mRNA為單鏈結(jié)構(gòu)。應(yīng)首先逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA才能進(jìn)行PCR。旁欄思考2?P80提示：有人采用總DNA注射法進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化，即將一個(gè)生物中的總DNA提取出來(lái)，通過(guò)注射或花粉管通道法導(dǎo)入受體植物，沒(méi)有進(jìn)行表達(dá)載體的構(gòu)建，這種方法針對(duì)性差，完全靠運(yùn)氣，也無(wú)法確定什么基因?qū)肓耸荏w植物。到社會(huì)中去?P831．提示：這是一個(gè)開(kāi)放性的問(wèn)題，需要查找資料來(lái)回答。隨著田間監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的更新及新的科研論文發(fā)表，每年獲得的證據(jù)是不一樣的。要注意搜集科學(xué)、可靠的證據(jù)，如科研論文、權(quán)威的官方報(bào)道等。2．提示：科研人員想出的延緩棉鈴蟲(chóng)對(duì)Bt抗蟲(chóng)蛋白產(chǎn)生抗性的措施有很多，主要可以分為以下幾個(gè)方面。(1)基因策略。該策略是在分子水平上提高轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉的抗蟲(chóng)性和抗蟲(chóng)持久性，包括在棉花中轉(zhuǎn)入多個(gè)殺蟲(chóng)基因、構(gòu)建組織特異性表達(dá)的啟動(dòng)子、提高殺蟲(chóng)基因的表達(dá)量等。例如，最早種植的抗蟲(chóng)棉中只轉(zhuǎn)入了一種Bt基因，抗性比較單一；現(xiàn)在經(jīng)常將兩種或兩種以上的Bt基因(如CrylAa和CrylAc基因)同時(shí)轉(zhuǎn)入棉花細(xì)胞，這樣既可以提高殺蟲(chóng)活性，又可以延緩害蟲(chóng)抗性的產(chǎn)生和發(fā)展，還可以通過(guò)不同基因間的互補(bǔ)作用擴(kuò)大抗蟲(chóng)范圍。(2)田間策略。這是在種植時(shí)采取的措施，如提供庇護(hù)所、與其他作物輪作或套種等。(3)國(guó)家宏觀調(diào)控策略。該策略包括實(shí)施分區(qū)種植管理、加強(qiáng)抗性監(jiān)測(cè)、進(jìn)行嚴(yán)格的安全性評(píng)價(jià)等。練習(xí)與應(yīng)用?P83一、概念檢測(cè)1．(1)√(2)×

提示：構(gòu)建質(zhì)粒要用到限制酶(用來(lái)在特定位點(diǎn)進(jìn)行切割)和DNA連接酶(用來(lái)連接目的基因和載體)，不需要核酸酶。(3)×

提示：目的基因成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后不一定會(huì)表達(dá)，還需要進(jìn)行檢測(cè)和鑒定。2．D

提示：延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP和4種脫氧核苷酸。二、拓展應(yīng)用1．提示：可能在自交繁殖過(guò)程中存在轉(zhuǎn)基因的沉默或丟失現(xiàn)象。2．提示：(1)psy和crlⅠ基因、pmi基因?qū)⒛康幕蛩腿胧荏w細(xì)胞。(2)不能，限制酶會(huì)將目的基因切斷，破壞目的基因。(3)維生素A在人體內(nèi)具有非常重要的生理功能，對(duì)視力、骨骼生長(zhǎng)、免疫功能等都有調(diào)節(jié)作用。但是，人體不能合成維生素A，需要從食物中攝取。維生素A缺乏癥是南亞地區(qū)常見(jiàn)的由營(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致的疾病，該地區(qū)的居民一般以秈稻作為主食。β－胡蘿卜素是維生素A的前體，在人體內(nèi)它可以轉(zhuǎn)化為維生素A。因此，科學(xué)家將兩個(gè)參與β－胡蘿卜素合成的酶的基因轉(zhuǎn)入了秈稻中，使其胚乳中富含β－胡蘿卜素，期望讓人們通過(guò)日常食用主食就能補(bǔ)充足夠量的維生素A，從而降低維生素A缺乏癥的患病率。關(guān)于“是否要推廣‘黃金大米’”的爭(zhēng)論主要圍繞其安全性、有效性等方面展開(kāi)。探究·實(shí)踐?P84結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1．提示：觀察DNA帶的分布及粗細(xì)程度來(lái)評(píng)價(jià)擴(kuò)增的效果。2．提示：如果擴(kuò)增不成功，可能的原因有：漏加了PCR的反應(yīng)成分，各反應(yīng)成分的用量不當(dāng)，PCR程序設(shè)置不當(dāng)?shù)?。如果擴(kuò)增結(jié)果不止一條條帶，可能的原因有：引物設(shè)計(jì)不合理，它們與非目的序列有同源性或容易聚合形成二聚體；退火溫度過(guò)低；DNA聚合酶的質(zhì)量不好等。訓(xùn)練鞏固?課堂達(dá)標(biāo)1．利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá)，可生產(chǎn)人類(lèi)所需的產(chǎn)品。下列選項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因在導(dǎo)入受體細(xì)胞后完成表達(dá)的是 (

)A．棉花細(xì)胞中檢測(cè)到載體上的標(biāo)記基因B．山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素基因C．大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因的mRNAD．酵母菌細(xì)胞中提取到人的干擾素解析：A、B兩項(xiàng)只說(shuō)明目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞中，C項(xiàng)說(shuō)明目的基因在受體細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA。D項(xiàng)含有人的干擾素基因的酵母菌合成了人的干擾素，說(shuō)明目的基因