林羅氏平衡液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的研究

林羅氏平衡液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的研究【摘要】目的建立林羅氏平衡液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法。方法按《中國藥典》2005版附錄細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法及中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果林羅氏平衡液原液，用靈敏度為/ml的TAL檢測，對鱟試劑的凝集反應(yīng)無干擾作用，檢查其細(xì)菌內(nèi)毒素的方法可行、有效。結(jié)論可用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法代替熱原檢查法檢測林羅氏平衡液。

【關(guān)鍵詞】林羅氏平衡液；熱原；細(xì)菌；內(nèi)毒素類；實(shí)驗(yàn)室技術(shù)和方法

林羅氏平衡液(Ringer-lockeBalancedSaltSolution)是我院臨床常用藥物［批準(zhǔn)文號：桂衛(wèi)藥制字(1998)178009號］。具有補(bǔ)充體液、糾正和維持人體酸堿平衡的作用。臨床上常用于治療酸中毒、外傷或出血性休克［1］。該品種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定進(jìn)行熱原檢查。本文按《中國藥典》2005年版［2］及中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范［3］規(guī)定的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，對以細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法取代熱原檢查法的可行性進(jìn)行研究。

1實(shí)驗(yàn)材料

鱟試劑(TAL)：規(guī)格/支，靈敏度(λ)EU/ml，批號0210152、0209243，湛江安度斯生物有限公司；批號020705，北海市興龍生物制品有限公司。細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品：規(guī)格70EU/支，批號2001-3，中國藥品生物制品檢定所。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水(BET水)：規(guī)格2ml/支，批號030105，北海市興龍生物制品有限公司。林羅氏平衡液：規(guī)格500ml/瓶，批號：021031、021203、021216、030107、030208、030228、030326、030416，本院制劑室配制。旋渦混合器，電熱恒溫水浴箱，101A－1B電熱鼓風(fēng)干燥箱。所有試驗(yàn)用器皿經(jīng)250℃干烤2h處理。

2實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果

細(xì)菌內(nèi)毒素限值的計(jì)算“欽HQ-87-20標(biāo)準(zhǔn)”規(guī)定本品熱原檢查劑量為M=10ml/kg·h-1。本品為靜脈用藥，內(nèi)毒素域值為K=5EU/kg·h-1。本品內(nèi)毒素理論限值L=K/M=/ml。

最大有效稀釋倍數(shù)的計(jì)算MVD=C·L/λ=(×)/=1。

鱟試劑靈敏度的復(fù)核按《中國藥典》2005年版二部內(nèi)毒素檢查法操作［2］，用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水將內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品制成、、、λ等系列濃度，對所用兩個廠家的三批鱟試劑靈敏度進(jìn)行復(fù)核，結(jié)果所用三個批號鱟試劑靈敏度值均在～2λ之間，λc=λb，符合規(guī)定。

表1鱟試劑靈敏度復(fù)核結(jié)果

供試品的干擾試驗(yàn)按《中國藥典》2005年版［1］及中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范［2］的細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法，采用兩個廠家共3個批號λ/ml的鱟試劑，分別用林羅氏平衡液原液和BET水將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品稀釋成、、、λ4個系列濃度，考察本品對細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法的干擾情況，見表2。

表2供試品干擾試驗(yàn)結(jié)果

結(jié)果表明，用BET水稀釋的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值(Es)在～2λ之間，并用供試品原液稀釋的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液的反應(yīng)終點(diǎn)的幾何平均值在～2Es之間，故認(rèn)為供試品原液對細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾作用。

樣品細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法與熱原檢查法的比較試驗(yàn)取林羅氏平衡液原液5批，按細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法操作［2，3］，與熱原檢查法［2］進(jìn)行對照，見表3。

表3林羅氏-平衡液細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法與熱原檢查法結(jié)果

兩種方法檢查結(jié)果一致，用于臨床無一例出現(xiàn)輸液反應(yīng)。

3討論

實(shí)驗(yàn)表明，林羅氏平衡液原液對細(xì)菌內(nèi)毒素檢查無干擾，用靈敏度為/ml的鱟試劑檢測內(nèi)毒素是有效的，并與家兔法的結(jié)果一致。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查方法簡單，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，完全可代替細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法替代熱原檢查法作為醫(yī)院日常檢測林羅氏平衡液。

【參考文獻(xiàn)】

［1］龐邦斌.平衡液質(zhì)量控制及處方改進(jìn)［J］.中國藥房，2004，15(6):345.