體檢培訓(xùn)血紅蛋白

一、項(xiàng)目簡介（一）血紅蛋白評價(jià)貧血的標(biāo)準(zhǔn)（二）血紅蛋白的檢測原理本文檔共67頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分年齡（歲）血紅蛋白單位：（g/L）6～59月齡<1105～11歲<11512～14歲<12015歲以上女生<12015歲以上男生<130（一）血紅蛋白評價(jià)貧血的標(biāo)準(zhǔn)表1WHO2001年診斷貧血的血紅蛋白水平本文檔共67頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（二）血紅蛋白的檢測原理

方法：氰化高鐵血紅蛋白法

原理：

血紅蛋白鐵氰化鉀高鐵血紅蛋白

氰化鉀

氰化高鐵血紅蛋白氰化高鐵血紅蛋白：顯紅色，極為穩(wěn)定。本文檔共67頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分二、檢測流程（一）試劑（二）采血（三）檢測本文檔共67頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（一）試劑

采用文齊氏液。

文齊氏液(Hb試劑)為濃縮50倍的貯備液，用時(shí)加蒸餾水稀釋50倍。如：配制1000ml工作液時(shí)，取文齊氏濃縮液20ml。本文檔共67頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分文齊氏液本文檔共67頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（1）配制方法：

取棕色容量瓶，先加蒸餾水800ml，后用吸量管吸取文齊氏液20ml，最后加蒸餾水直至1000ml刻度線，混勻即可。配置好的文齊氏液,應(yīng)為清晰透明的淡黃色溶液。本文檔共67頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分棕色容量瓶（1000ml）本文檔共67頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（2）注意事項(xiàng)：為保證配制試劑濃度準(zhǔn)確，必須采用標(biāo)準(zhǔn)量器操作。取文齊氏液應(yīng)用吸量管（5ml或10ml）；加蒸餾水稀釋應(yīng)用容量瓶（1000ml棕色）。

容量瓶、吸量管須每3年計(jì)量一次；有計(jì)量所出具的計(jì)量報(bào)告。本文檔共67頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分配液量器本文檔共67頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（3）試劑保存文齊氏濃縮液應(yīng)儲(chǔ)存于4℃冰箱，有效期2年。稀釋后的試劑應(yīng)儲(chǔ)存于棕色玻璃瓶中，一般室溫可存放一個(gè)月。若暴露于光線，則試劑不穩(wěn)定；受冰凍可破壞分解。如試劑出現(xiàn)渾濁則不能用。本文檔共67頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分棕色磨口瓶(2000ml)本文檔共67頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（二）采血1.加樣：用瓶式分液器加樣，每批加樣前，使用5ml容量瓶校正。本文檔共67頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分瓶式分液器的校正方法：（1）分液器刻度調(diào)整到2.5ml；連續(xù)按動(dòng)分液器以排出管路中的空氣。（2）按動(dòng)分液器二次（即為5ml），將液體加入5ml容量瓶中，觀察凹液面與容量瓶刻度是否水平。（3）呈水平則分液器準(zhǔn)確可用；反之須調(diào)整分液器，再次校正，直至凹液面與刻度線呈水平。本文檔共67頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分2.器具：（1）消毒棉簽；（2）75％酒精；（3）一次性采血針；（4）微量血紅蛋白吸管（10μl或20μl）；（5）一次性塑料試管（5ml）；（6）試管塞；（7）利器盒本文檔共67頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分17本文檔共67頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分18本文檔共67頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分3.

步驟（1）用瓶式分液器將2.5ml文齊氏液加入試管內(nèi)；（2）用酒精棉簽消毒左手無名指；（3）待酒精揮發(fā)后，用采血針向左手無名指指尖迅速垂直刺入，深約2～3mm，讓血液自然流出；（4）去掉第一滴血；（5）用血紅蛋白吸管吸血至10μl刻度，擦凈管壁外余血；（6）置于盛有2.5ml文齊氏液的試管中，沖洗干凈并混勻。（7）用無菌棉簽按壓止血。（8）血樣避免太陽光直射，放置至少15分鐘后比色。本文檔共67頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分22本文檔共67頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分23本文檔共67頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分24本文檔共67頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分26本文檔共67頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分×本文檔共67頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分√本文檔共67頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分√×本文檔共67頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分補(bǔ)充混勻照片本文檔共67頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分4.質(zhì)量控制要點(diǎn)：（1）體檢前：

使用定值溶血液（盲樣），對采血人員進(jìn)行崗前培訓(xùn)與技術(shù)考核。

此考核亦為中心實(shí)驗(yàn)室對各點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室檢測能力的技術(shù)考核。本文檔共67頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分本文檔共67頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分表2血紅蛋白檢測質(zhì)控考核記錄表編號Hb值（g/L）12345678910平均值區(qū)縣：___________

單位：____________

檢測日期：______________

質(zhì)控品編號：___________________

質(zhì)控品真值：___________________

采血者：________

檢測儀器：________________

檢測者：___________

是否經(jīng)過計(jì)量部門檢定：（是否）

檢測儀器最近檢定日期：________

本文檔共67頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分

表3

采血人員考核記錄表定值血Hb值

100

采血人趙敏敏考核人孫穎編號Hb值（X）11032103310441045108610171048104911210108本文檔共67頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分對考核結(jié)果是否合格的判定（1）X的均數(shù)

X＝103+103+104+104+108+101+104+104+112+10810

＝105.1（2）

DI＝1.02

（3）判斷標(biāo)準(zhǔn)：

DI≤0.5優(yōu)秀0.5<DI≤1.0良好

1.0<DI≤2.0及格2.0<DI≤3.0不及格，應(yīng)注意判斷：采血人員趙敏敏及格本文檔共67頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分4.質(zhì)量控制要點(diǎn)：（2）體檢過程中：

①采血員操作步驟質(zhì)控：a.左手無名指

b.酒精完全揮發(fā)

c.擦去第一滴血

d.局部勿用力擠壓

e.采血準(zhǔn)確到刻度

f.采血管內(nèi)無氣泡

g.擦凈管壁外余血

h.管內(nèi)血液無殘留

i.試管編號與被采血者編號統(tǒng)一j.分液器用5ml容量瓶校準(zhǔn)

k.樣品避光保存本文檔共67頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分

表4

質(zhì)量控制人員應(yīng)對采血員的現(xiàn)場采血過程進(jìn)行監(jiān)督日期

2005.3.22

學(xué)校大興榆垡中學(xué)質(zhì)控員符筠

項(xiàng)目采血人崔丹趙敏敏邢慧琴左手無名指√√√酒精完全揮發(fā)√╳√擦去第一滴血√√√局部勿用力擠壓√√√采血準(zhǔn)確到刻度√√╳采血管內(nèi)無氣泡√√√擦凈管壁外余血√√√管內(nèi)血液無殘留√√√試管編號與被采血者編號統(tǒng)一√√╳加樣器用5ml容量瓶校準(zhǔn)√√√樣品避光保存√√√本文檔共67頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分②平行樣質(zhì)控法：

平行樣數(shù)占總樣本數(shù)的5％。

具體方法：同一采血員對同一對象采2個(gè)血樣，由實(shí)驗(yàn)室檢測后，如兩個(gè)血紅蛋白值在T±0.05T范圍內(nèi)，則采血員合格；反之，則為不合格。若不合格，要求質(zhì)量控制人員對采血員的采血過程進(jìn)行檢查，找出發(fā)生錯(cuò)誤的原因并立即糾正。本文檔共67頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分表5血紅蛋白平行樣測定質(zhì)量控制表日期

2005.3.22

學(xué)校大興榆垡中學(xué)采血人崔丹

編號血紅蛋白值復(fù)測值范圍是否合格20149145141.6<149<156.5合格40140146133<140<147合格60143132135.9<143<150.2不合格80130117123.5<130<136.5不合格100123120116.9<123<129.2合格本文檔共67頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分5.注意事項(xiàng)（1）環(huán)境：選用明亮、通風(fēng)的室內(nèi)場地，面積適宜，保證學(xué)生進(jìn)出安全；最好有上下水，方便工作人員隨時(shí)清洗雙手；桌上鋪治療巾或醫(yī)用中單，防止交叉感染。（2）保護(hù)學(xué)生：最好配置椅子，學(xué)生采血后稍作休息，防止暈針；請校醫(yī)提前提醒學(xué)生洗手，更有效的保證酒精消毒的效果；囑咐學(xué)生針刺2小時(shí)內(nèi)，保持手指清潔，不接觸水。提前為學(xué)生預(yù)備好糖水，以備學(xué)生突發(fā)暈針。本文檔共67頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分5.注意事項(xiàng)（3）采血過程：若血液不易流出，可由掌端向指端輕輕按摩，切勿局部用力擠壓。核對好姓名、編號等信息。如有不愿采血的學(xué)生，不要過分勉強(qiáng)。（4）血樣儲(chǔ)存：氰化高鐵血紅蛋白雖性質(zhì)穩(wěn)定，但為避免水分蒸發(fā)，最好在當(dāng)天完成檢測。如不能當(dāng)天檢測，應(yīng)使用試管塞塞緊，置暗處可存儲(chǔ)12小時(shí)。如超過12小時(shí)，應(yīng)放在4℃冰箱中，檢測前須平衡至室溫并搖勻。

本文檔共67頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分5.注意事項(xiàng)（5）醫(yī)療用品：棉簽、一次性采血針、微量血紅蛋白吸管要保證在消毒保質(zhì)期內(nèi)，不可隨便打開或長久暴露。配制好的試劑避光保存。（6）醫(yī)療垃圾處理：按照衛(wèi)生部頒布的《醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)醫(yī)療廢物管理辦法》進(jìn)行處理。利器盒盛裝不得超過容量的3/4，密封后與其他醫(yī)療垃圾一并委托專業(yè)機(jī)構(gòu)集中處理。本文檔共67頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（二）檢測1.儀器可見光分光光度計(jì)光徑1cm比色杯

本文檔共67頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分48本文檔共67頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分分光光度計(jì)每年計(jì)量檢定一次，有計(jì)量報(bào)告書。本文檔共67頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分

比色杯檢測：

在可見光分光光度計(jì)750nm處比色（蒸餾水作空白管），吸光度小于0.003時(shí)可以使用。本文檔共67頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（二）檢測2.儀器使用注意事項(xiàng)：（1）放置儀器應(yīng)遠(yuǎn)離電磁干擾；避免陽光直射。（2）開機(jī)前先確認(rèn)儀器樣品室內(nèi)沒有物品遮擋光路。（3）備有穩(wěn)壓器以保證電壓的穩(wěn)定。（4）開機(jī)預(yù)熱至少20分鐘。（5）自檢過程中不可開蓋，直到屏幕顯示“100.0”和“546”。（6）所用比色杯應(yīng)檢查其均一性，去除不符合要求的比色杯。（7）比色杯透光部分不能有指印、溶液痕跡，被測溶液中不能有氣泡、懸浮物。（8）儀器開機(jī)后使用血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液檢測，久放或搬動(dòng)后須四個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)液校正。本文檔共67頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分3.儀器的質(zhì)控（1）分光光度計(jì)的校正

氰化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液：

含50、100、150、200g/L四種濃度，每支標(biāo)準(zhǔn)約10ml。

本文檔共67頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分53本文檔共67頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分OD真相相應(yīng)Hb真相誤差允許范圍ODHb0.136500.133~0.13949~510.2721000.267~0.27798~1020.4081500.400~0.416147~1530.5442000.533~0.554196~204

表6可見光分光光度計(jì)波長540nm，光徑1.0cm標(biāo)準(zhǔn)液允許誤差本文檔共67頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（2）校正：血紅蛋白含量與光密度符合下述公式：Hb(g/L)=OD×367.7若光密度值超出誤差允許范圍，則公式中的常數(shù)（367.7）需要校正。校正公式為：

常數(shù)k=（∑光密度真值/∑光密度度數(shù)）×367.7本文檔共67頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分表7舉例：某臺分光光度計(jì)OD真相Hb真相ODHb誤差允許范圍ODHb0.136500.13047.80.133~0.13949~510.2721000.25593.760.267~0.27798~1020.4081500.380139.730.400~0.416147~1530.5442000.515189.370.533~0.544196~204本文檔共67頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分

OD真相值和

0.136+0.272+0.408+0.544＝1.360此分光光度計(jì)OD值之和

0.130+0.255+0.380+0.515＝1.280常數(shù)＝（1.360/1.280）×367.7＝391.1則此臺分光光度計(jì)測樣品時(shí)，其光密度讀數(shù)乘391.1為血紅蛋白值。（2）校正：本文檔共67頁；當(dāng)前第57頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分表8

校正后結(jié)果ODHb真相校正前Hb（K值＝367.7）校正后Hb（k值＝391.1）誤差允許范圍ODHb0.1305047.850.840.133~0.13949~510.25510093.7699.730.267~0.27798~1020.380150139.73148.620.400~0.416147~1530.515200189.37201.420.533~0.544196~204本文檔共67頁；當(dāng)前第58頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分（2）氰化高鐵血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液質(zhì)控法：采用單一濃度血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液（中間值）；

儀器每測20個(gè)樣品做一次質(zhì)控；每次質(zhì)控，連續(xù)測2次血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)液；記錄標(biāo)準(zhǔn)液測定值，畫出曲線。本文檔共67頁；當(dāng)前第59頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分曲線的繪制：

以測定結(jié)果為縱坐標(biāo),測定次數(shù)為橫坐標(biāo)。確定靶值線；警告線；最大容許線。四個(gè)界限點(diǎn)的確定方法：

T±0.05T為上下警告界限，T±0.08T為最大界限。本文檔共67頁；當(dāng)前第60頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分124.2120.8115.0（T）109.2105.8本文檔共67頁；當(dāng)前第61頁；編輯于星期一\23點(diǎn)45分表9

定值溶血液質(zhì)控法記錄表時(shí)間

標(biāo)準(zhǔn)液濃度

100g/L操作者孫穎

編號第一次第二次ODHbODHb10.263990.2639920.263990.2639930.263990.2639940.263990.263995