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北師大版選修1生物技術(shù)實(shí)踐《乳酸脫氨酶同工酶的提取和分離》教案及教學(xué)反思背景介紹生物技術(shù)是當(dāng)今世界日益發(fā)展的新興學(xué)科,不僅在醫(yī)學(xué)、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,同時(shí)也成為高中生物教育中必不可少的一部分。在北師大版選修1生物技術(shù)實(shí)踐教材中,乳酸脫氨酶同工酶提取和分離是一個(gè)非常實(shí)用的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,通過該實(shí)驗(yàn),學(xué)生可以了解酶的提取和分離方法,同時(shí)加深對生物技術(shù)理論的理解。實(shí)驗(yàn)?zāi)康耐ㄟ^乳酸脫氨酶同工酶的提取和分離實(shí)驗(yàn),達(dá)到以下目的:了解酶的特性和產(chǎn)生方式;熟悉酶的提取和分離方法;加深對生物技術(shù)理論的理解。實(shí)驗(yàn)原理乳酸脫氨酶是一種重要的酶,具有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。在此實(shí)驗(yàn)中,我們通過離心等方法從菌群中分離蛋白質(zhì),再通過分離純化技術(shù)提取出乳酸脫氨酶同工酶。實(shí)驗(yàn)步驟:大腸桿菌的預(yù)處理:取1mL的大腸桿菌進(jìn)行離心和去膜作用;蛋白質(zhì)的提取:將離心后的菌體加入10mL的0.1mol/LTris-HCl緩沖液中,微量振蕩;聲波破碎:將加入緩沖液中的蛋白質(zhì)經(jīng)過聲波破碎并在0.5%十二烷基硫酸鈉中混合;離心分離:用離心分離大于15,000r/min;反復(fù)凝聚:用PH中性緩沖液反復(fù)凝聚,取上清液即為提取物;氨基酸分析:提取物對半胱氨酸反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,通過以上步驟可以成功地提取分離出乳酸脫氨酶同工酶。同時(shí),通過氨基酸分析也證明該酶的純度較高。實(shí)驗(yàn)教案實(shí)驗(yàn)材料大腸桿菌0.1mol/LTris-HCl緩沖液(PH7.0)0.5%十二烷基硫酸鈉半胱氨酸等氨基酸反應(yīng)試劑實(shí)驗(yàn)步驟大腸桿菌的預(yù)處理:取1mL的大腸桿菌進(jìn)行離心和去膜作用;蛋白質(zhì)的提?。簩㈦x心后的菌體加入10mL的0.1mol/LTris-HCl緩沖液中,微量振蕩;聲波破碎:將加入緩沖液中的蛋白質(zhì)經(jīng)過聲波破碎并在0.5%十二烷基硫酸鈉中混合;離心分離:用離心分離大于15,000r/min;反復(fù)凝聚:用PH中性緩沖液反復(fù)凝聚,取上清液即為提取物;氨基酸分析:提取物對半胱氨酸反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)操作時(shí)需戴手套,避免損傷皮膚;注意配置好實(shí)驗(yàn)各種試劑的濃度;注意離心時(shí)轉(zhuǎn)速精確控制。教學(xué)反思該實(shí)驗(yàn)在教學(xué)過程中,學(xué)生積極主動(dòng)、嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真地完成了實(shí)驗(yàn)操作,較好地實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。但是在操作過程中,部分同學(xué)的操作不夠細(xì)心,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想。教學(xué)反思中,我們需要更加重視學(xué)生的實(shí)驗(yàn)操作技巧和實(shí)驗(yàn)方法的理解,通過多種方式提高學(xué)生對實(shí)驗(yàn)的認(rèn)識和學(xué)習(xí)興趣,從而更好地達(dá)到教學(xué)目的。同時(shí),在實(shí)驗(yàn)操作中,我們也需要更加注重對學(xué)生的安全保障??偟膩碚f,該實(shí)驗(yàn)在教學(xué)實(shí)踐中達(dá)到了較高的效果,同時(shí)也啟示
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