淋巴細(xì)胞及其亞群檢測的臨床意義新版課件

淋巴細(xì)胞及其亞群檢測的臨床意義一、概念來源于骨髓的淋巴樣干細(xì)胞，在胸腺中成熟的淋巴細(xì)胞，故稱胸腺依賴性淋巴細(xì)胞（thymus-dependentlymphocyte），簡稱T細(xì)胞。負(fù)責(zé)細(xì)胞免疫功能，參與抗腫瘤、抗細(xì)胞內(nèi)感染微生物、移植排斥、遲發(fā)型超敏反應(yīng)；對(duì)部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。外周血：約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%～80%；Lymphocytes外周血中占總淋巴細(xì)胞的60-80%二、T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育ThedevelopmentofTCRPositiveselectionNegativeselectionExtrathymicT-celldevelopment1、T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育三個(gè)重要事件三個(gè)重要結(jié)果三個(gè)階段雙陰性階段

(DN)

雙陽性階段

(DP)單陽性階段

(SP)TCR基因重排陽性選擇陰性選擇獲得功能性TCR獲得MHC限制性獲得自身耐受T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞ThedevelopmentofTCR功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用。（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）CD8+T細(xì)胞IL-2、IFN-γ、TNF主要表面標(biāo)記：CD8+CD28+二、T淋巴細(xì)胞的分化發(fā)育釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細(xì)胞按T細(xì)胞的CD4和CD8分子表型主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-初始T細(xì)胞（naiveTcell）對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能部位：胸腺皮髓質(zhì)交界處及髓質(zhì)區(qū)。初始T細(xì)胞（naiveTcell）T細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用。T細(xì)胞表面CD分子表達(dá)不同表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）、、、四種肽鏈基因的重排與表達(dá)，形成TCR和TCR，將T細(xì)胞分為TCR和TCR兩種類型。CD3分子的低度表達(dá)結(jié)果：獲得功能性TCRCD3+CD4+CD8-SP

SP細(xì)胞

部位：胸腺皮質(zhì)。過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞

(TCR、CD4+CD8+)

(抗原肽-自身MHC分子復(fù)合物)適當(dāng)親和力發(fā)生結(jié)合不能發(fā)生有效結(jié)合或結(jié)合親和力過高結(jié)合MHC-Ⅰ類分子CD3+CD4-CD8+SP

凋亡結(jié)合MHC-Ⅱ類分子結(jié)果：單陽性細(xì)胞（SP）、獲得自身MHC限制性。T細(xì)胞發(fā)育過程中的陽性選擇(positiveselection)部位：胸腺皮髓質(zhì)交界處及髓質(zhì)區(qū)。過程：SP細(xì)胞胸腺樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞

（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）高親和力結(jié)合不結(jié)合或低親和力結(jié)合凋亡刪除存活結(jié)果：成熟的SP、獲得自身（中樞）免疫耐受。T細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)CD4+/CD8+的比值過程：SP細(xì)胞胸腺樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞數(shù)量多，CD4+或CD8+（SP細(xì)胞）過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞初始T細(xì)胞（naiveTcell）4）CD4+/CD8+的比值TCR+T細(xì)胞2、TCRαβT細(xì)胞和TCRγδT細(xì)胞TCR+T細(xì)胞過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞評(píng)價(jià)那些自身免疫失調(diào)或被懷疑是免疫失調(diào)或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊1）T淋巴細(xì)胞（CD3+）Lymphocytes腫瘤終未期患者CD4/CD8比值異常，可預(yù)測患者存活期。外周血中占總淋巴細(xì)胞的60-80%Negativeselection3、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞惡性腫瘤患者術(shù)前CD4/CD8比值低與術(shù)后比值恢復(fù)正常。主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-IL-2、IFN-γ、TNF主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-Th（helpTcell）2、T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育初始T細(xì)胞主要定居于外周淋巴器官的胸腺依賴區(qū)T細(xì)胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應(yīng)功能的T細(xì)胞亞群，效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞。三、T淋巴細(xì)胞亞群按T細(xì)胞所處的活化階段初始T細(xì)胞（naiveTcell）效應(yīng)T細(xì)胞（effectorTcell）記憶性T細(xì)胞（memoryTcell）按TCR的表型分類TCR+

T細(xì)胞TCR+

T細(xì)胞按T細(xì)胞的CD4和CD8分子表型CD4+T細(xì)胞CD8+T細(xì)胞按T細(xì)胞的功能分類Th（helpTcell）Tc/CTL（cytotoxicTcell）Tr（regulatoryTcell）1、初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞初始T細(xì)胞表型：CD45RA+、CD62L+、CD25-（IL-2R）特點(diǎn)：未接觸抗原的成熟T細(xì)胞，有分化潛能效應(yīng)T細(xì)胞遷往炎癥部位，執(zhí)行細(xì)胞免疫效應(yīng)記憶性T細(xì)胞表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化1、根據(jù)CD4和CD8分子表達(dá)，可將成熟T細(xì)胞分為CD4+CD8-或CD4-CD8+細(xì)胞；2、根據(jù)CD4+細(xì)胞所表達(dá)CD45分子異構(gòu)體，可分為CD45RA+和CD45RO+T細(xì)胞，兩者分別是初始T細(xì)胞(naiveTcell,Tn)和記憶性T細(xì)胞(memoryTcell,Tm)的重要表型。T細(xì)胞表面CD分子表達(dá)不同2、TCRαβT細(xì)胞和TCRγδT細(xì)胞TCRγδT細(xì)胞數(shù)量少，占5％多為CD4―CD8―（DN細(xì)胞）；少數(shù)為CD8+分布于皮膚、粘膜參與固有免疫，是抗感染的第一線細(xì)胞TCRαβT細(xì)胞數(shù)量多，CD4+或CD8+（SP細(xì)胞）TCR識(shí)別譜廣，是參與免疫應(yīng)答的主要細(xì)胞群3、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞兩者通常是針對(duì)TCRαβT細(xì)胞而言CD4+T細(xì)胞約占60～65％受MHCⅡ類分子限制主要分化為ThCD8+T細(xì)胞約占30～35％受MHCⅠ類分子限制主要分化為CTL4、Th、CTL、Ts和Treg細(xì)胞輔助性T細(xì)胞（Th）主要表面標(biāo)記：CD4＋CD8-主要種類：TH1，TH2功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用。細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）主要表面標(biāo)記：CD8+CD28+功能：特異性直接殺傷靶細(xì)胞殺傷機(jī)制：釋放穿孔素，顆粒酶殺傷靶細(xì)胞通過Fasl介導(dǎo)靶細(xì)胞的凋亡TH1TH2分泌CKsIL-2、IFN-γ、TNFIL-4、5、6、10CKs作用介導(dǎo)細(xì)胞毒和局部炎癥有關(guān)的免疫應(yīng)答,輔助抗體生成,參與細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生促進(jìn)B細(xì)胞增殖、成熟和促進(jìn)抗體生成，與體液免疫有關(guān)生物學(xué)功能介導(dǎo)細(xì)胞免疫引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)(TDTH)輔助體液免疫抗寄生蟲感染抑制性T細(xì)胞（Ts）主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）主要表面標(biāo)記：CD4+CD25+功能：抑制免疫應(yīng)答可能的機(jī)制有：直接接觸；分泌抑制性CKs；此外，抑制CKs分泌，抑制APC等。效應(yīng)T細(xì)胞（effectorTcell）CD4+/CD8+的比值對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能外周血中占總淋巴細(xì)胞的60-80%過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞1、T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育CD4+/CD8+的比值1、初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）部位：胸腺皮髓質(zhì)交界處及髓質(zhì)區(qū)。CD8+T細(xì)胞初始T細(xì)胞（naiveTcell）CD4+和CD8+T細(xì)胞有助于監(jiān)測患有免疫缺陷疾?。ㄈ鏢CID、AIDS的病人體內(nèi)CD4+細(xì)胞亞群的百分率相對(duì)降低，而CD8+群體的百分率相對(duì)升高），自身免疫性疾?。ㄈ缭赟LE病人中，CD8+淋巴細(xì)胞的相對(duì)百分比往往會(huì)降低，但當(dāng)使用類固醇藥物治療時(shí)，也可能上升。Tr（regulatoryTcell）主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-結(jié)果：成熟的SP、獲得自身（中樞）免疫耐受。T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育特點(diǎn)：未接觸抗原的成熟T細(xì)胞，有分化潛能評(píng)價(jià)那些自身免疫失調(diào)或被懷疑是免疫失調(diào)或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。初始T細(xì)胞（naiveTcell）小結(jié)ThCTLTsTreg表面標(biāo)記CD3+CD4＋CD8+CD28+CD8+CD28-CD4+CD25+主要功能介導(dǎo)細(xì)胞免疫引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)、輔助體液免疫抗寄生蟲感染特異性直接殺傷靶細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能抑制免疫應(yīng)答四、T淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義通過T淋巴細(xì)胞亞群的檢測可了解在不同情況下體內(nèi)免疫功能狀態(tài)，輔助臨床疾病的診斷，探索疾病的發(fā)病機(jī)理、病程、預(yù)后，監(jiān)測、指導(dǎo)臨床治療方案。目前主要可以做以下項(xiàng)目的檢測

1）T淋巴細(xì)胞（CD3+）2）CD4+細(xì)胞3）CD8+細(xì)胞4）CD4+/CD8+的比值

總T淋巴細(xì)胞可以結(jié)合總B淋巴細(xì)胞來判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+和CD8+T細(xì)胞有助于監(jiān)測患有免疫缺陷疾?。ㄈ鏢CID、AIDS的病人體內(nèi)CD4+細(xì)胞亞群的百分率相對(duì)降低，而CD8+群體的百分率相對(duì)升高），自身免疫性疾病（如在SLE病人中，CD8+淋巴細(xì)胞的相對(duì)百分比往往會(huì)降低，但當(dāng)使用類固醇藥物治療時(shí)，也可能上升。在急性GVHD和移植排斥中，CD8+淋巴細(xì)胞所占的比例有可能在正常人的范圍之外）CD4+/CD8+的比值評(píng)價(jià)那些自身免疫失調(diào)或被懷疑是免疫失調(diào)或已知患有免疫缺陷的病人的免疫狀態(tài)，此外，這一比值還可用來監(jiān)測骨髓移植病人以免受到急性GVHD的攻擊CD4/CD8升高：自身免疫性疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、SLE。CD4/CD8降低：病毒感染、惡性腫瘤、再生障礙性貧血等。CD4/CD8比值與腫瘤惡性腫瘤患者術(shù)前CD4/CD8比值低與術(shù)后比值恢復(fù)正常。當(dāng)發(fā)生癌轉(zhuǎn)移時(shí),CD3、CD4細(xì)胞數(shù)明顯減少的同時(shí)CD8細(xì)胞數(shù)明顯增多,CD4/CD8比值明顯降低,提示惡性腫瘤患者晚期細(xì)胞免疫功能更低,預(yù)后更差。腫瘤終未期患者CD4/CD8比值異常，可預(yù)測患者存活期。常見疾病與T細(xì)胞免疫檢測關(guān)系疾病CD3+CD4+CD8+CD4/CD8腫瘤↓↓↓↓↑↑↓↓再生障礙性貧血↑粒細(xì)胞減少癥↓↑↓過敏性皮炎↓↓↓類風(fēng)濕↑（活動(dòng)期）↓↑紅斑狼瘡↓（活動(dòng)期）↑↓↑膜性腎小球腎炎↓↑胰島素依賴性糖尿病↑↓乙型肝炎急性/慢性↑↓疾病 CD3+ CD4+ CD8+CD4/CD8自身溶血性貧血↑上呼吸道感染↓↑↑傳染性單核細(xì)胞增多癥↑（急性期）↓巨細(xì)胞病毒感染↓↑↓乙肝↑結(jié)核病↑瘧疾↓血吸蟲病↓獲得性免疫缺陷綜合癥↓↓初始T細(xì)胞（naiveTcell）TCR+T細(xì)胞3、CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞初始T細(xì)胞（naiveTcell）對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能過程：SP細(xì)胞胸腺樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞初始T細(xì)胞（naiveTcell）外周血：約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%～80%；過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞四、T淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義對(duì)部分體液免疫發(fā)揮輔助功能。四、T淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義CD4/CD8降低：病毒感染、惡性腫瘤、再生障礙性貧血等。T細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)多為CD4―CD8―（DN細(xì)胞）；、、、四種肽鏈基因的重排與表達(dá)，形成TCR和TCR，將T細(xì)胞分為TCR和TCR兩種類型。特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化結(jié)果：單陽性細(xì)胞（SP）、獲得自身MHC限制性。對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能Tr（regulatoryTcell）功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞結(jié)果：單陽性細(xì)胞（SP）、獲得自身MHC限制性。淋巴細(xì)胞及其亞群檢測的臨床意義1、T細(xì)胞在胸腺中的發(fā)育TCR+T細(xì)胞TCR+T細(xì)胞T細(xì)胞發(fā)育過程中的陰性選擇(negativeselection)初始T細(xì)胞（naiveTcell）功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用。外周血中占總淋巴細(xì)胞的60-80%引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)(TDTH)功能：特異性直接殺傷靶細(xì)胞過程：SP細(xì)胞胸腺樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞2、T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育四、T淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義外周血中占總淋巴細(xì)胞的60-80%主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-CD4/CD8比值與腫瘤T細(xì)胞在外周淋巴器官與抗原接觸后，最終分化為具有不同效應(yīng)功能的T細(xì)胞亞群，效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞。四、T淋巴細(xì)胞亞群檢測的臨床意義總T淋巴細(xì)胞可以結(jié)合總B淋巴細(xì)胞來判斷某些免疫缺陷和自身免疫性疾病。CD4+T細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育CD4+/CD8+的比值初始T細(xì)胞（naiveTcell）（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）2、根據(jù)CD4+細(xì)胞所表達(dá)CD45分子異構(gòu)體，可分為CD45RA+和CD45RO+T細(xì)胞，兩者分別是初始T細(xì)胞(naiveTcell,Tn)和記憶性T細(xì)胞(memoryTcell,Tm)的重要表型。T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育淋巴細(xì)胞及其亞群檢測的臨床意義T淋巴細(xì)胞亞群的正常參考值4）CD4+/CD8+的比值特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化（TCR、CD4+/CD8+）（自身抗原肽-MHC分子）過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞外周血：約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%～80%；過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。功能：具有輔助其他免疫細(xì)胞分化和調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答（促進(jìn)和抑制）的作用。CD4+/CD8+的比值2、T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化主要表面標(biāo)記：CD8+CD28+外周血：約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的60%～80%；主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-4、Th、CTL、Ts和Treg細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）T細(xì)胞發(fā)育過程中的陽性選擇(positiveselection)1、初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞功能：對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能，抑制性T細(xì)胞功能的異常，常與T自身免疫性疾病、第I型超敏反應(yīng)等疾病發(fā)生有關(guān)。2、T細(xì)胞在外周淋巴器官中的分化發(fā)育CD3+CD4+CD8-SP4）CD4+/CD8+的比值按T細(xì)胞所處的活化階段結(jié)果：獲得功能性TCR過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞IL-2、IFN-γ、TNFT淋巴細(xì)胞亞群的正常參考值TCR+T細(xì)胞T細(xì)胞表面CD分子表達(dá)不同過程：DP細(xì)胞胸腺上皮細(xì)胞CD3+CD4-CD8+SP結(jié)果：單陽性細(xì)胞（SP）、獲得自身MHC限制性。主要表面標(biāo)記：CD8+CD28+功能：特異性直接殺傷靶細(xì)胞對(duì)免疫應(yīng)答有重要的負(fù)調(diào)節(jié)功能介導(dǎo)細(xì)胞毒和局部炎癥有關(guān)的免疫應(yīng)答,輔助抗體生成,參與細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏性炎癥的發(fā)生初始T細(xì)胞（naiveTcell）1、初始T細(xì)胞、效應(yīng)T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞IL-4、5、6、10不能發(fā)生有效結(jié)合或結(jié)合親和力過高CD3+CD4+CD8-SP主要表面標(biāo)志：CD8+CD28-T細(xì)胞受體（TCR）的發(fā)育常見疾病與T細(xì)胞免疫檢測關(guān)系1）T淋巴細(xì)胞（CD3+）初始T細(xì)胞（naiveTcell）惡性腫瘤患者術(shù)前CD4/CD8比值低與術(shù)后比值恢復(fù)正常。特點(diǎn)：存活期長，再次接受抗原刺激后可迅速活化兩者通常是針對(duì)TCRαβT細(xì)胞而言CD4/CD8升高：自身免