植物細胞懸浮培養(yǎng)技術

植物細胞懸浮培養(yǎng)技術第一頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六切取形成層無菌接種誘導愈傷組織的形成試管苗的形成培養(yǎng)室移栽脫分化再分化第二頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六12345再分化(愈傷組織)植物組織培養(yǎng)6脫分化第三頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六脫分化就是讓已經(jīng)分化的細胞，經(jīng)過誘導后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞的過程。脫分化的實質(zhì)和結(jié)果分別是什么？實質(zhì)是恢復細胞的全能性過程。結(jié)果是形成愈傷組織。第四頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六愈傷組織原指植物體受傷時產(chǎn)生于傷口周圍的組織?，F(xiàn)多指切取植物體的一部分，置于含有生長素和細胞分裂素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，誘導產(chǎn)生的無定形的組織團塊。

愈傷組織的特點排列疏松、高度液泡化的無定形狀態(tài)薄壁細胞團菠蘿的愈傷組織脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化成根或芽等器官的過程。再分化：第五頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六

當細胞分裂素和生長素共同使用時，能刺激愈傷組織的形成，而通過調(diào)節(jié)二者的濃度比，就可以調(diào)控植物細胞培養(yǎng)過程中芽和根的形成，稱為“激素杠桿”。

生長素細胞分裂素根愈傷組織芽第六頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？

植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長，所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌不但會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)，而且這些雜菌生長的過程中會生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導致培養(yǎng)物迅速死亡。

第七頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六

植物細胞培養(yǎng)技術第八頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六植物細胞培養(yǎng)的過程：愈傷組織懸浮培養(yǎng)或其它分散細胞懸浮細胞繼代培養(yǎng)篩選

優(yōu)良的細胞群體無性繁殖系擴大培養(yǎng)

細胞代謝產(chǎn)物

發(fā)酵技術

分離提純單個細胞第九頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六1、單細胞的分離由完整的植物器官分離單細胞由培養(yǎng)組織（如愈傷組織）中分離單細胞機械法(研或刮）酶解法葉片是分離單細胞的最好材料第十頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六機械法和酶解法比較機械法酶解法細胞不受到酶的傷害；不用質(zhì)壁分離；細胞產(chǎn)量低；細胞易破。細胞受到酶的傷害；要質(zhì)壁分離；細胞產(chǎn)量高；細胞不易破。第十一頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六2由培養(yǎng)組織（愈傷組織）分離單細胞材料：胡蘿卜肉質(zhì)根步驟：1誘導產(chǎn)生愈傷組織2愈傷組織反復繼代，使組織不斷增殖，提高愈傷組織的松散性；第十二頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六搖床用于振蕩繼代懸浮3懸浮培養(yǎng)：將愈傷組織在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，建立懸浮培養(yǎng)物優(yōu)點：細胞團成小細胞團或單細胞；在培養(yǎng)基中均勻分布；有空氣交流。第十三頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六懸浮培養(yǎng)愈傷組織第十四頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六4、懸浮繼代培養(yǎng)分批培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)第十五頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六繼代分批培養(yǎng)第十六頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六連續(xù)培養(yǎng)加入培養(yǎng)基排出培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物二者體積相等分：開放式連續(xù)培養(yǎng)封閉式連續(xù)培養(yǎng)第十七頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六5、繼代培養(yǎng)最佳繼代時期：

選擇指數(shù)生長期和直線生長期。第十八頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六滯后期（微生物又叫適應期）

指數(shù)生長期（微生物又叫對數(shù)期）直線生長期減慢期靜止期（微生物又叫穩(wěn)定期）培養(yǎng)時間培養(yǎng)細胞數(shù)目1234512345細胞生長曲線：呈S形曲線第十九頁，共二十一頁，編輯于2023年，星期六6、植物細胞培養(yǎng)的意義：1）不受地理、季節(jié)和氣候條件的限制；2）節(jié)省土地，降低成本，生產(chǎn)周期短，可大大提高經(jīng)濟效益；不污染環(huán)境3）可代替整體植株在工廠內(nèi)連續(xù)生產(chǎn)所需產(chǎn)物；4）可通過添加抑制劑等使生物合成按照人的意志進行；5）可通過誘變篩選，獲得高產(chǎn)細胞株，并且可以進行特定的生物轉(zhuǎn)化獲得新的有用物質(zhì)。第二十