分子生物學(xué)知識點修訂稿

分子生物學(xué)知識點內(nèi)部編號：（YUUT-TBBY-MMUT-URRUY-UOOY-DBUYI-0128）一、名詞解釋：基因DNARNA基因表達(dá)基因的激活、轉(zhuǎn)錄、翻譯以及相關(guān)的加工修飾等多個步驟或過程。管家基因：在一個生物個體的幾乎所有組織細(xì)胞中和所有時間段都持續(xù)表達(dá)GAPDH、β基因。啟動子RNADNA操縱子列、操縱序列等。如：乳糖操縱子、色氨酸操縱子等。反式作用因子用而參與調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄的蛋白因子（轉(zhuǎn)錄因子）。順式作用元件DNA列。是轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點，通過與轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合而實現(xiàn)對真核基因轉(zhuǎn)錄的精確調(diào)控。Ct：即循環(huán)閾值（cyclethreshold，Ct），PCR產(chǎn)物的熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。（PCR核酸分子雜交：是指核酸分子在變性后再復(fù)性的過程中，來源不同但互不配對的核酸單鏈（DNADNA，DNARNA，RNARNA）相互結(jié)合形成雜合雙技術(shù)則稱為分子雜交技術(shù)。印跡或轉(zhuǎn)印：至尼龍膜等支持載體上的一種方法，該技術(shù)類似于用吸墨紙吸收紙張上的墨跡。酸片段。DNADNADNADNADNAcDNA克?。菏莵碜酝皇甲娴南嗤北净蚩截惖募?。DNADNADNA基因工程（GeneticEngineering）：又稱基因操作（genemanipulation）、DNA（DNArecombination），方式，按照預(yù)先設(shè)計的藍(lán)圖，將一種或多種生物體（供體）的基因育載體在體外DNA（受體）內(nèi)，以改變生物原有的遺傳特性并表達(dá)出新的性狀。獲得新品種，生產(chǎn)新產(chǎn)品，或是研究基因的結(jié)構(gòu)和功能。因此，供體、受體和載體稱為基因工程的三大要素，其中相對DNA（MolecularCloning）或基因的無性繁殖。DNA生長因子：（growthfactor）內(nèi)部，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與增殖的多肽類物質(zhì)?；蚪M：泛指一個生命體、病毒或細(xì)胞器的全部遺傳物質(zhì)。胞或組織在翻譯水平的蛋白質(zhì)表達(dá)譜。1986199030斷和治療提供重要依據(jù)。及其表達(dá)水平是否正常，從而對人體狀態(tài)和疾病做出診斷的方法。揮作用而達(dá)到治療疾病目的的方法均稱為基因治療。DNA故稱這類基因為“自殺基因”。RNA命階段、某一生理或病理狀態(tài)下，生命體的細(xì)胞或組織所表達(dá)的基因種類及水平。癌基因：（oncogene）表達(dá)異常，可以引起細(xì)胞癌變。病毒癌基因：存在于腫瘤細(xì)胞中，能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。抑癌基因化，和抑制細(xì)胞遷移，因此起負(fù)調(diào)控作用，抑癌基因的突變是隱性的（遷移，因此起負(fù)調(diào)控作用，抑癌基因的突變是隱性的。）DNA二、問答題轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)節(jié)——操縱子調(diào)控模式構(gòu)基因、啟動序列、操縱序列等。如：乳糖操縱子、色氨酸操縱子等。IOPZ、Y、AIRNA（CAP）Z、YA關(guān)的酶，即：β-半乳糖苷酶，透酶和乙酰轉(zhuǎn)移酶。這三個酶的基因作為一個整體由同一個調(diào)控區(qū)調(diào)節(jié)，以實現(xiàn)基因的協(xié)調(diào)表達(dá)。其調(diào)節(jié)機制主要有正性和負(fù)性兩種模式。RNA啟動序列上解離下來，從而啟動結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄，此時操縱子處于誘導(dǎo)狀態(tài)。②CAPcAMPCAPCAPcAMPCAP在有乳糖且無葡萄糖時，阻遏蛋白的抑制作用不解除，CAP時結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄水平最高。生長因子的作用機制同的響應(yīng)，生長因子是作用機制分為三種情況：①生長因子與具有酪氨酸蛋白激酶（TPK）活性的跨膜受體結(jié)合，TPK酸化相應(yīng)蛋白質(zhì)，產(chǎn)生生理效應(yīng)。因轉(zhuǎn)錄，達(dá)到調(diào)節(jié)生長與分化的作用。細(xì)胞生長。與胞內(nèi)受體與膜受體結(jié)與胞內(nèi)受體生長因子作用機制示意圖R產(chǎn)生第二信生長因子-受體復(fù)基本原理：生長因子-受體復(fù)磷酸化相應(yīng)蛋 活化蛋白激類似于DNA的天然復(fù)制過程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR基本反應(yīng)步驟構(gòu)活胞核相關(guān)①變性（denature）：DNA95℃DNAPCRDNA②退火（annealing）（復(fù)性）：DNATm（55℃左右），DNA③延伸（extension）：DNATaqDNADNA2~4302~3DNA定量PCRPCRPCRPCRPCRCt）與擴增的起始模板量進行準(zhǔn)確的絕對和（或）相對定量。循環(huán)閾值（cyclethreshold，Ct）PCR光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。熒光閾值（threshold）PCR15光本底信號（baseline），3~1510強度。SangerSanger法也稱雙脫氧鏈末端終止法，是目前應(yīng)用最為廣泛的方法。DNAddNTPDNADNAddNTPDNAddNTP3'-位碳原子上缺少羥基而不能與下一位核苷酸的5'-3',5'DNAddNTPSouthernNorthern相同點：基本流程相似不同點：

Southern印跡（雜交）

Northern印跡（雜交）用途 主要用于檢測基因DNA事先進行限制性內(nèi)切酶需要處理進行堿變性 需要基因工程中如何選擇載體？

主要用于檢測RNA變性瓊脂糖凝膠電泳基因工程選擇載體的標(biāo)準(zhǔn)如下：①能自主復(fù)制②具有兩個以上的遺傳標(biāo)記物，便于重組體的篩選和鑒定③有克隆位點（DNA），DNA重組DNADNADNADNAcDNAPCR擇和構(gòu)建。根據(jù)實驗?zāi)康暮筒僮骰虻男再|(zhì)選擇合適的載體和改建方法。③外源DNADNADNADNADNA目前基因治療采用的方法分為哪幾種？基因治療的方法分為以下：①基因矯正，將致病基因的異常堿基進行糾正，而正常部分予以保留的基因治療方法；②基因置換，用正常的基因通過體內(nèi)基因同源DNA治療方法；③基因增補，將目的基因?qū)氩∽兓蚱渌?xì)胞，不去除異?；?，通過目的基因的非定點整合，使其表達(dá)產(chǎn)物補償缺陷基因的功能或使原有的功能得以加強的基因治療方法；④基因失活，將特定的序列導(dǎo)入細(xì)胞后，在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平阻斷某些基因的異常表達(dá)的治療方法；⑤自殺基因的應(yīng)用，用某些病毒或細(xì)菌的基因所表達(dá)的酶能將對人體無毒或低毒的藥物前體在人體細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞因”?；蛑委煹幕具^程？內(nèi)，將治療基因修飾的細(xì)胞以不同的方式回輸體內(nèi)以發(fā)揮治療作用。人類基因組計劃的基本任務(wù)及意義HCGHCG基本任務(wù)可用四張圖譜來概括，即遺傳圖、物理圖、轉(zhuǎn)錄圖（基因圖）、序列圖。①遺傳圖：又稱連鎖圖，是具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記作為“位標(biāo)”，遺傳學(xué)距離為“圖距”的基因組圖。需要應(yīng)用多態(tài)性標(biāo)志——RFLP、VNTR、SNPDNADNA（Mbkb）作為圖距的基因組圖。③5cDNA序列圖”。④序列圖：也就是人類基因組核苷酸序列圖，是分子水平上最高層素周期表”，可見其重要性。因醫(yī)學(xué)的新時代；③推動模式生物基因組的研究；④促進學(xué)科交叉與重組。什么是基因組學(xué)包括哪些內(nèi)容13.1986因組計劃”的實施推動其發(fā)展的一門學(xué)科?；蚪M學(xué)的內(nèi)容亞領(lǐng)域 內(nèi)容結(jié)構(gòu)基因組學(xué) 整個基因組的遺傳制圖、物理制圖及DNA