上海市臨檢中心 PCR培訓班 PCR實驗室存在問題及解決措施

PCR實驗室存在問題及解決措施上海市臨床檢驗中心肖艷群1回顧

1990年：PCR技術(shù)在國內(nèi)開始用于臨床檢測

90年代中期：假陽性？（假陰性？）

《關(guān)于暫停臨床基因擴增檢驗的通知》（衛(wèi)醫(yī)政發(fā)[1998]第9號）

《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號）

《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》的通知（衛(wèi)醫(yī)政〔2009〕18號）

《臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》（衛(wèi)辦醫(yī)政發(fā)[2010]194號）2醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法（分類分級管理、審核）

第一類：安全性、有效性確切，醫(yī)療機構(gòu)通過常規(guī)管理在臨床應(yīng)用中能確保其安全性、有效性的技術(shù)—醫(yī)療機構(gòu)自行組織實施

第二類：安全性、有效性確切，涉及一定倫理問題或者風險較高，衛(wèi)生行政部門應(yīng)當加以控制管理的醫(yī)療技術(shù)—省級衛(wèi)生行政部門指定或者組建的技術(shù)機構(gòu)負責技術(shù)審核

第三類：具有下列情形之一，需要衛(wèi)生行政部門加以嚴格控制管理的醫(yī)療技術(shù)—衛(wèi)生部或衛(wèi)生部委托省級衛(wèi)生行政組織負責對指定的第三類醫(yī)療技術(shù)進行審核（一）涉及重大倫理問題（二）高風險（三）安全性、有效性尚需經(jīng)規(guī)范的臨床試驗研究進一步驗證（四）需要使用稀缺資源（五）衛(wèi)生部規(guī)定的其他需要特殊管理的醫(yī)療技術(shù)3上海市第二類醫(yī)療技術(shù)目錄首批（18項）（

2009.8.24

）第二批（6項）（2012.1.4）冠心病介入診療技術(shù)體外沖擊波碎石/經(jīng)輸尿管鏡碎石取石術(shù)人工椎間盤置換術(shù)先天性心臟病介入診療技術(shù)心臟導管消融技術(shù)經(jīng)尿道前列腺汽化消融術(shù)內(nèi)科胸腔鏡診療技術(shù)起搏器介入診療技術(shù)心室輔助裝置植入技術(shù)擴大全胰腺切除術(shù)急性腦梗死溶栓術(shù)直腸癌根治術(shù)內(nèi)鏡逆行胰膽管造影診療技術(shù)髖、膝關(guān)節(jié)置換技術(shù)角膜移植技術(shù)白內(nèi)障超聲乳化技術(shù)準分子激光角膜屈光手術(shù)口腔種植診療技術(shù)輸尿管鏡技術(shù)面部輪廓整形技術(shù)血液透析技術(shù)臨床基因擴增檢驗技術(shù)醫(yī)用高壓氧治療技術(shù)本市首次開展（未納入衛(wèi)生部規(guī)定的第三類醫(yī)療技術(shù)目錄）的醫(yī)療技術(shù)4衛(wèi)生部公布第三類醫(yī)療技術(shù)目錄同種器官移植、變性手術(shù)、心室輔助裝置應(yīng)用技術(shù)、基因芯片診斷技術(shù)（2011年5.3日由三類調(diào)整為二類）等共19項5滬臨檢辦〔2011〕29號關(guān)于印發(fā)《上海市醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗技術(shù)審核辦法》和《上海市醫(yī)療機構(gòu)基因芯片診斷技術(shù)審核辦法》的通知附件1：《臨床基因擴增檢驗及分子診斷相關(guān)技術(shù)審核專家?guī)烀麊巍犯郊?：《上海市醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗技術(shù)審核辦法》附件3：《上海市醫(yī)療機構(gòu)基因芯片技術(shù)診斷審核辦法》附件4:

《上海市醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用能力技術(shù)審核申請書》附件5：《上海市臨床基因擴增檢驗及分子診斷相關(guān)技術(shù)審核流程》（首頁醫(yī)療技術(shù)準入專欄中下載

）6基本要求上

海

市

醫(yī)

療

機

構(gòu)

臨

床

基

因

擴

增

檢

驗

技

術(shù)

審

核

辦

法（1）醫(yī)療機構(gòu)基本要求（2）人員基本要求（3）臨床應(yīng)用基本規(guī)范和管理要求（4）實驗室設(shè)置基本要求

（5）人員管理（7）標本管理

（8）質(zhì)量管理（6）設(shè)備管理（9）檢測要求等上

海

市

醫(yī)

療

機

構(gòu)

基

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技

術(shù)

審

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法醫(yī)療機構(gòu)要求

二級及以上醫(yī)院

獨立實驗室

（公司）

實驗室應(yīng)集中設(shè)置、統(tǒng)一管理

實驗室必須通過上海市臨床檢驗中心技術(shù)審核合格并報上海市衛(wèi)生監(jiān)督所備案后方可開展檢測項目，以后每3年必須進行復審

實驗室通過審核后應(yīng)根據(jù)其核定的技術(shù)審核項目開展檢測工作。如需要增加檢測項目，應(yīng)向上海市臨床檢驗中心提出擴項申請，并報上海市衛(wèi)生監(jiān)督所準入后方可開展檢測項目

實驗室開展分子診斷新技術(shù)，應(yīng)向上海市臨床檢驗中心提出新技術(shù)申請，并報上海市衛(wèi)生監(jiān)督所準入后方可開展新技術(shù)的檢測項目8臨床應(yīng)用基本規(guī)范和管理要求

以科研為目的的臨床基因擴增檢驗項目，不得向臨床出具檢驗報告，不得向病人收取任何費用9檢測要求

項目：新開展檢測項目應(yīng)有相應(yīng)臨床科室出具的評估報告

儀器：必須三證齊全

試劑：必須SFDA批準

新開展項目在技術(shù)審核前應(yīng)進行方法學驗證

儀器、試劑、方法更新時應(yīng)進行方法學驗證10分包

有外送檢驗項目的實驗室應(yīng)與委托實驗室簽訂相關(guān)協(xié)議，有委托實驗室資質(zhì)和質(zhì)量保證的證明文件

實驗室有外送檢驗項目的要求和規(guī)定，并做好外送樣品的登記和記錄，有委托實驗室標本運送和交接過程的監(jiān)控和記錄

定期評審委托實驗室檢測質(zhì)量，并有相關(guān)記錄

分包后自行開展，需確認具備開展相關(guān)檢測的能力11審核前準備工作

實驗室按要求設(shè)置、裝修

儀器、人員到位

完成質(zhì)量手冊、程序文件、操作規(guī)程編寫

完成方法學驗證

參加至少一次室間質(zhì)評，成績合格

檢驗前、中、后流程暢通12申請技術(shù)審核需遞交的材料

《上海市臨床技術(shù)臨床應(yīng)用能力技術(shù)審核申請書》醫(yī)療機構(gòu)基本情況申請單位相關(guān)學科基本情況....項目負責人基本情況學科人員基本情況項目所在地實驗室的專用設(shè)備、設(shè)施及工作基礎(chǔ)擬開展檢驗項目開展該技術(shù)的目的、意義和實施方案該項醫(yī)療技術(shù)的基本概況...技術(shù)路線國內(nèi)外應(yīng)用情況與同種疾病的其他檢測技術(shù)的特點及費用比較13技術(shù)審核需遞交的材料

醫(yī)療機構(gòu)執(zhí)業(yè)許可證副本復印件

技術(shù)人員相關(guān)資格證書復印件

與該技術(shù)有關(guān)的實驗室平面圖

醫(yī)療機構(gòu)醫(yī)學倫理審查報告

儀器、試劑三證復印件

方法學性能驗證報告

室間質(zhì)評成績

質(zhì)量手冊、程序文件、操作規(guī)程

申請在本市首次開展的醫(yī)療技術(shù)還需遞交：國內(nèi)外有關(guān)該技術(shù)研究和使用情況的檢索報告及技術(shù)資料14醫(yī)療機構(gòu)提出技術(shù)審核申請申請資料審查補充資料不予受理受理、登記、編號發(fā)出《技術(shù)審核受理通知書》文件內(nèi)容審查PCR審核退回修改流程（初審、復審、擴項、新技術(shù)）確定審核專家組成員啟動回避程序書面通知專家、醫(yī)療機構(gòu)組織專家現(xiàn)場審核匯總專家組審核意見1個月內(nèi)提交整改報告醫(yī)療機構(gòu)就專家意見整改現(xiàn)場確認整改效果報衛(wèi)生行政部門完成技術(shù)審核結(jié)論報告送達醫(yī)療機構(gòu)15審核結(jié)果

合格

基本合格

不合格，12個月后重新申請16不合格重新申請時間依據(jù)

《醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法》（衛(wèi)醫(yī)政發(fā)[2009]18號）.第二十三條：有下列情形之一的，醫(yī)療機構(gòu)不得向技術(shù)審核機構(gòu)提出醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用能力技術(shù)審核申請（三）申請的醫(yī)療技術(shù)距上次同一醫(yī)療技術(shù)未通過臨床應(yīng)用能力技術(shù)審核時間未滿12個月的.第二十四條：未通過審核的醫(yī)療技術(shù)，醫(yī)療機構(gòu)技術(shù)不得在12個月內(nèi)向其他技術(shù)審核機構(gòu)申請同一醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用能力再審核17一票否決項《醫(yī)療機構(gòu)臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》第四章

第二十條

開展的臨床基因擴增檢驗項目超出市衛(wèi)生行政部門核定范圍的

使用未經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理局批準的臨床試劑開展臨床擴增檢驗的

在臨床基因擴增檢驗中未開展室內(nèi)質(zhì)控的

在臨床基因擴增檢驗中未參加室間質(zhì)評的

在臨床基因擴增檢驗中弄虛作假的

以科研為目的的基因擴增檢驗項目向患者收取費用的

使用未經(jīng)培訓合格的專業(yè)技術(shù)人員從事臨床基因擴增檢驗工作的

使用非本院技術(shù)人員從事臨床基因擴增檢驗工作的

嚴重違反國家實驗室生物安全有關(guān)規(guī)定或不具備實驗室生物安全保障條件的

現(xiàn)場標本考核成績（該項目的可接受結(jié)果數(shù)/該項目的總的測定結(jié)果數(shù)×100）<80%的18實驗室設(shè)置與設(shè)備存在問題整改措施各緩沖間相通未安裝沖眼器移動紫外車缺或已壞未及時更換19設(shè)施與環(huán)境存在問題整改措施溫、濕度超出實驗規(guī)定范圍，未見糾正

安裝獨立空調(diào)措施檢測前、后標本放置同一冰箱，未見標

標本分區(qū)放置，并用標識加以區(qū)分識加以區(qū)分1、進入和使用實驗室各區(qū)域未見相應(yīng)措

1、安裝門禁或貼標識加以限制和控制施加以限制和控制2、非檢測人員進出登記2、科研人員進出管理混亂不同工作區(qū)域內(nèi)物品混用（手套、記錄

各區(qū)物品貼區(qū)域標識加以區(qū)分未按要求分區(qū)放置）1、清潔用具混用或共用2、未對相關(guān)人員培訓1、各區(qū)專用清潔用具；2、指定人員；3、培訓；4、記錄雜交在擴增區(qū)、雜交膜存放在擴增區(qū)；

雜交在產(chǎn)物分析區(qū)，雜交膜存放在產(chǎn)物分析20操作規(guī)程存在問題整改措施1、編寫不規(guī)范，不適合實驗室實際情況2、操作規(guī)程不是現(xiàn)行有效1、檢驗項目操作規(guī)程應(yīng)參照《臨床檢驗操作規(guī)程編寫要求》3、實驗室各區(qū)未放置相關(guān)SOP（WS/T227-2002和說明書編寫4、試劑重要參數(shù)修改后SOP未及時更新5、缺需校準的參數(shù)及需達到的要求2、更換試劑批號時仔6、操作性差：儀器設(shè)備的操作規(guī)內(nèi)容簡單；標本接收、拒收不分標本類別；方法學驗證、試劑質(zhì)檢、IQC未分項目類別細閱讀試劑說明書3、SOP為操作指導性文件，應(yīng)具可操作性7、內(nèi)部校準、無EQA的室間比對缺SOP8、標本運送、保存、處理與SOP規(guī)定不一致4、寫、做、記一致21人員存在問題整改措施1、缺培訓計劃、或計劃缺乏針

1、計劃制定應(yīng)有針對性，每年有重點對性；2、培訓形式可以多樣：外出培訓、科、組內(nèi)2、未見培訓記錄部培訓、自學、交流等3、有培訓記錄未見效果評估記

3、效果評估形式：培訓證書、培訓小結(jié)、考錄試、操作、通過培訓解決什么問題、通過培訓提出什么好的建議等初審實驗室大多數(shù)缺員工是否

1、實驗室應(yīng)制定員工能力評審的內(nèi)容和方法能勝任其崗位的記錄（新進、轉(zhuǎn)崗）2、定期評審員工的工作能力，并保存勝任的證據(jù)（室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評、投訴處理）1、實驗室技術(shù)人員檔案內(nèi)容過

實驗室應(yīng)分冊建立技術(shù)人員技術(shù)檔案，檔案于簡單：只有學歷、職稱、PCR

至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：

學歷、職稱、臨床上崗證書復印件，其余缺基因擴增檢驗技術(shù)上崗證書復印件；培訓、能力評審等資料，并定期更新2、未及時更新22儀器、試劑和方法存在問題整改措施1、冰箱溫度缺允許范圍1、根據(jù)試劑說明書要求規(guī)定試劑儲存要求，2、冰箱溫度非檢測日不記錄2、每日實施監(jiān)控并有記錄3、冰箱溫度計缺或壞，仍在記錄檢測、科研儀器無標識加以區(qū)分

每件設(shè)備均應(yīng)有唯一性標簽、標記或其他識別方式，有明顯的標識表明儀器的狀態(tài)儀器設(shè)備檔案內(nèi)容不全應(yīng)保存主要設(shè)備的檔案，檔案內(nèi)容應(yīng)包括：設(shè)備標識、型號、序號或其它唯一性識別、到貨日期和投入運行日期、目前放置地點、接收時的狀態(tài)、儀器使用說明書或其存放處、證實設(shè)備可以使用的設(shè)備驗證報告、校準和/或檢定報告、維護、損壞、故障或維修的記錄23存在問題整改措施1、部分儀器到期未校準1、實驗室檢測人員提出要求2、校準未覆蓋檢測常用量程（移液器、恒溫金2、審核校準報告屬浴）3、校準報告不規(guī)范，缺原始記錄4、校準不符合要求的設(shè)備仍在使用（移液器、高速冷凍離心機）5、內(nèi)部校準存在問題：用于校準恒溫金屬浴的溫度計未校準；且最小刻度為1℃，不適用于金屬浴校準；內(nèi)部校準（溫度計）無記錄6、未引用校準出現(xiàn)的校準因子（恒溫金屬?。?4存在問題整改措施1、未對試劑進行質(zhì)檢2、未對耗材進行質(zhì)檢試劑質(zhì)檢：定性：陰性標本、弱陽性標本定量：陰性、高、低三個臨床樣本，檢測結(jié)果在±0.5log10范圍內(nèi)，可接受；對離心管等耗材應(yīng)進行暴管和抑制物質(zhì)檢（除非標明不含抑制物）使用上一次的擴增曲線判

每次擴增應(yīng)都做標準曲線斷結(jié)果方法學驗證有缺陷定量：精密度、準確度、檢測下限、線性范圍定性：精密度、符合率更改標本類型未做評估25CLSI:相關(guān)文件項目名稱內(nèi)容123456789CLSI

C24-A2CLSI

C28-A2CLSI

EP5-ACLSI

EP6-ACLSI

EP7-ACLSI

EP9-A2CLSI

EP10-A2CLSI

EP13RCLSI

GP10-A定量測定統(tǒng)計質(zhì)量控制：原理和定義如何確定臨床檢驗的參考區(qū)間臨床化學設(shè)備精密性能的評價定量分析方法現(xiàn)行的評價臨床化學中的干擾物檢測方法用患者標本進行方法比對及偏倚估計定量臨床檢驗方法的初步評價實驗室統(tǒng)計量-標準差使用ROC曲線評價臨床試驗的準確度：批準指南性能驗證前的準備

應(yīng)熟悉待驗證的檢測系統(tǒng)

應(yīng)熟悉驗證方案的步驟(PCR檢測項目成本高、陽性標本來源困難,精密度和正確度驗證建議采用EP15-A2文件)

制定質(zhì)量保證措施

確保足夠的樣本數(shù)量和覆蓋較寬檢測范圍

確定比較方法27精密度驗證（EP5-A2）

重復性:指在相同條件

(時間、校準、操作者、儀器)下獲得的精密度,也稱批內(nèi)精密度

實驗室內(nèi)精密度:同一實驗室內(nèi)，使用相同的設(shè)備,由不同的操作者在不同時間內(nèi)獲得的精密度,也稱總精密度.(不包括大的設(shè)備維護、儀器校準和更換試劑批號等)28實驗要求

試劑:同一批號

實驗樣本:以前分析過的病人樣本其他已知值的物質(zhì)

濃度要求:醫(yī)學決定水平廠家說明書精密度指標所用濃度

內(nèi)容:

重復性實驗室內(nèi)精密度29實驗步驟

5天,每日一分析批,每日2個濃度水平,每一水平上同一樣本4次重復測定.

每天做室內(nèi)質(zhì)控,如果失控,剔除數(shù)據(jù),重新進行測定

按照廠家說明書規(guī)定進行校準

計算

結(jié)果判斷：與廠家申明比較30正確度驗證（EP9-A2）

比對方法:利用臨床病人樣本,比較兩個測量程序間的結(jié)果

參考物質(zhì)31比對方法

檢測20份患者樣本,其濃度水平覆蓋方法的可報告范圍

在實驗室以常規(guī)操作方式檢測新鮮患者標本

在3-4天時間內(nèi),每天由實驗和可比較方法測定5-7份樣本

每天做室內(nèi)質(zhì)控,如果失控,剔除,重新測定

檢查比較數(shù)據(jù)識別任何差異的結(jié)果出現(xiàn)單個樣本異常(兩個測量方法之間結(jié)果偏差很大)時:用兩個測量方法對樣本進行重復測定,以區(qū)分:特異性導致的誤差其他偶然或儀器的系統(tǒng)誤差32棄去偏差異常大樣本,重新測定另一樣本

計算：偏移、相關(guān)系數(shù)

結(jié)果判斷：與廠家（實驗室）申明比較33使用參考物質(zhì)的正確度方案

參考物質(zhì)有證參考物質(zhì)能力驗證計劃中具有指定值的參考物質(zhì)廠家具有指定值的物質(zhì)EQA計劃中的物質(zhì)由幾家實驗室分析具有指定值來自第三方的物質(zhì)制備的已知濃度的標準物質(zhì)34實驗步驟

至少2個物質(zhì),濃度為可報告范圍中高和低的決定性濃度

在3-5天內(nèi)每天測定一次,每次重復2次

計算每個濃度測定結(jié)果的均值和標準差,以及置信區(qū)間幫助指定值的驗證35結(jié)果判斷

如果驗證區(qū)間包括定值數(shù)字,驗證通過驗證區(qū)間包括定值,但偏倚較大,可增加2-5個樣本進行檢測,用所有數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計以增加統(tǒng)計效能

如果驗證區(qū)間未能包括定值數(shù)字,驗證不通過計算偏倚和允許總誤差是否符合臨床需要或者實驗室要求聯(lián)系廠家協(xié)助36定量檢出限的驗證(EP-17A)

概念

能可靠檢出分析物的最低實際濃度,并在該濃度下的總誤差符合準確度要求

總誤差目標來源:實驗室的需求、室間質(zhì)評結(jié)果、廠家的申明37實驗樣本

低濃度參考物質(zhì)

已知濃度的樣品適當稀釋成3-5個低濃度實驗樣品38實驗步驟

至少25個重復測量

每個樣品重復測量的結(jié)果與該樣品的參考值比較,以確定是否超出目標誤差,超過誤差目標的結(jié)果數(shù)量可用于評價此方法在該濃度是否合適3920-1000個檢測值符合超出LoB預(yù)期95%比例的下限檢測數(shù)

觀察比例的下限(%)檢測數(shù)

觀察比例的下限(%）203040506070809085878888888989901001502002503004005001000909192929293939440分析測量范圍（EP6-A）

分析測量范圍(線性范圍):指患者樣本未經(jīng)任何處理(稀釋、濃縮或其他預(yù)處理),由檢測系統(tǒng)直接測量得到的可靠結(jié)果范圍,在此范圍內(nèi)一系列不同樣本分析物的測量值與其實際濃度(真值)呈線性比例關(guān)系.

臨床可報告范圍:指定量檢測項目向臨床能報告的檢測范圍,患者樣本可經(jīng)稀釋、濃縮或其他預(yù)處理.

線性:檢測樣本時,在一定范圍內(nèi)可以直接按比例關(guān)系得出分析物含量的能力.41實驗樣品準備

選擇與臨床樣本同樣的基質(zhì),不含干擾物質(zhì);

或廠家推薦的產(chǎn)品

數(shù)量驗證實驗:5-7個不同濃度的樣本,高值樣本應(yīng)高于線性上限30%,低值樣本低于線性下限42實驗方法

實驗方法：上限的高值樣本按一定比例稀釋為至少5種濃度,按試劑說明書操作,將每一濃度樣本重復檢測2次,計算線性相關(guān)系數(shù)

結(jié)果判斷：線性范圍應(yīng)符合制造商規(guī)定的要求,且線性相關(guān)系數(shù)|r|≥0.9743定性檢測項目的性能驗證

診斷明確的定性檢測性能評估:靈敏度、特異性

診斷不明確的定性檢測性能評估:結(jié)果的一致性,Kappa值表示44診斷明確的定性檢測

比較方法:目前正在使用的、”金標準”方法、某種定量方法或臨床診斷

樣本要求:量足夠大,穩(wěn)定

樣本數(shù)量:取決于評價者的目的

結(jié)果不一樣標本的處理:用金標準或參考方法明確結(jié)果45檢測方法與明確診斷比較2*2列聯(lián)表檢測方法明確診斷陽性A陰性B總數(shù)A+Ｂ陽性陰性總數(shù)ＣＤＣ＋ＤＡ＋ＣＢ＋ＤＡ＋Ｂ＋Ｃ＋Ｄ靈敏度=100%[A/(A+C)]陽性預(yù)測值=100%[A/(A+B)]特異性=100%[B/(B+D)]陰性預(yù)測值=100%[A/(A+C)]檢驗效能=100%[(A+D)/N]46診斷不明確的定性檢測項目性能評估檢測方法、可比較方法一致程度比較檢測方法可比較方法陽性陰性總計陽性陰性總計ＡＣＢＤＡ＋ＢＣ＋ＤnＡ＋ＣＢ＋Ｄ一致程度百分比=100%(A+D)/nKappa值>0.75，一致性優(yōu)秀Kappa值：0.4-0.75，一致性較好Kappa值<0.4，一致性差47個體化檢測系統(tǒng)性能驗證的特殊性

驗證性能參數(shù)：精密度/重復性、正確度（突變型的檢測能力）、分析特異性（如正常野生型基因組與突變型之間的區(qū)分能力）、檢出限（每個反應(yīng)能檢出的最小突變拷貝數(shù)）、選擇性（突變型與野生型不同比例設(shè)定）

覆蓋標本的范圍（如不同的基因型）

標本的類型（血液、尿液、新鮮/冷凍組織、石蠟包埋組織）

性能驗證存在難點：患病率低或罕見病其陽性標本少缺乏金標準48標本管理存在問題整改措施HCVRNA檢測項目未按操作規(guī)程要求

實驗室應(yīng)監(jiān)控標本運送到實驗室的過及時送達程，標本運送應(yīng)符合時間、溫度、生物安全的要求接收標本時標本狀態(tài)信息記錄不完

應(yīng)記錄收到標本的日期和時間，同時善

應(yīng)記錄標本接收時的詳細狀態(tài)分泌物標本、分子病理標本是否符

實驗室應(yīng)確定標本是否符合檢測要求,合要求，缺支持性文件記錄

拒收標本原因要明確實驗室對標本拒收原因缺定期分析

定期制定切實可行的整改措施，提高及整改措施

工作效率1、標本保存時間短于規(guī)定時間；

標本應(yīng)按相關(guān)規(guī)定保存（應(yīng)結(jié)合檢測報告復核的提示時間2、標本保存時間與溫度無法確保其性狀穩(wěn)定49質(zhì)量控制存在問題整改措施對暫無室間質(zhì)評的項目缺驗證其結(jié)

實驗室應(yīng)制定質(zhì)量控制文件，編寫果可靠性的措施或規(guī)定對暫無室間質(zhì)評的項目驗證其結(jié)果可靠性的措施或規(guī)定的SOP初審實驗室方法學驗證時有時不做

理解室內(nèi)質(zhì)控的作用室內(nèi)質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控未監(jiān)控核酸提取、擴增整

應(yīng)監(jiān)控核酸提取、擴增、產(chǎn)物分析個過程等標本檢測全過程擴增條件相同的不同檢測項目只做

應(yīng)分別做室內(nèi)質(zhì)控其中一個項目室內(nèi)質(zhì)控內(nèi)標未出現(xiàn)，陰性結(jié)果仍發(fā)出內(nèi)標應(yīng)符合要求50存在問題整改措施擴增漏做室內(nèi)質(zhì)控每次擴增都應(yīng)做室內(nèi)質(zhì)控實驗室未根據(jù)統(tǒng)計學質(zhì)控方法建立

定量項目：實驗室應(yīng)根據(jù)統(tǒng)計學質(zhì)控實驗室自身檢測項目的控制限方法建立檢測項目的控制限定性項目：根據(jù)試劑說明書要求判斷失控未見原因分析，或分析滯后，

失控及時查找原因，采取糾正措施，或原因分析缺乏針對性

填寫失控分析報告室間質(zhì)評樣品特殊對待，無法反應(yīng)

應(yīng)與臨床標本同等對待實際情況室間質(zhì)評結(jié)果原因分析流于形式，

分析室間質(zhì)評反饋結(jié)果，對不合格項缺乏針對性目，應(yīng)及時查找原因，采取糾正措施51室間比對標本濃度選擇單一無EQA項目應(yīng)定期（每年至少2次）進行實驗HPV方法多種，但比對方式有欠

室間比對：比對樣品數(shù)量至少5份，濃度包缺括正常和異常水平，判定標準應(yīng)有≥80%的結(jié)果滿足要求無EQA項目使用標本為非原始標

應(yīng)使用臨床標本監(jiān)測檢測全過程本，而是提取產(chǎn)物當實驗室間比對不可行或不適用

實驗室應(yīng)制定評價方法，確保檢測結(jié)果的可時，缺其它方法及判斷檢測結(jié)果

接受性（留樣檢測、人員比對、方法比對、的可接受性對室間比對不一致的標本，未見

應(yīng)有措施進行結(jié)果確認（其他試劑、其它方原因分析及糾正措施

法、第三家實驗室等）與臨床診斷的符合性等）缺實驗室負責人監(jiān)控室間比對或

實驗室負責人應(yīng)監(jiān)控室間比對或其它活動的其它活動的結(jié)果

結(jié)果定量檢測項目結(jié)果有效性判斷未

結(jié)果有效性判斷除室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控外，還關(guān)注標準曲線的相關(guān)系數(shù)是否滿

應(yīng)判斷標準曲線的相關(guān)系數(shù)