放線菌的觀察

微生物學實驗報告題目：放線菌的形態(tài)觀察姓名：學號： 年級班級： 組別：同組者： 時間：【實驗器材】1..菌種:青色鏈霉菌(S.glaucus)，弗氏鏈霉菌(S.fiadiae)。培養(yǎng)基：高氏I號培養(yǎng)基。儀器或其他用具：培養(yǎng)皿，蓋玻片，載玻片，蓋玻片，接種環(huán)，銀子，顯微鏡等。【目的要求】掌握配制合成培養(yǎng)基的一般方法。學習并掌握觀察放線菌形態(tài)的基本方法。初步了解放線菌的形態(tài)特征?！净驹怼扛呤螴號培養(yǎng)基高氏I號培養(yǎng)基是用來培養(yǎng)和觀察放線菌形態(tài)特征的合成培養(yǎng)基。此合成培養(yǎng)基的主要特點是含有多種化學成分己知的無機鹽，這些無機鹽可能相互作用而產(chǎn)生沉淀。因此，在混合培養(yǎng)基成分時，一般是按配方的順序依次溶解各成分，甚至有時還需要將二種或多種成分分別滅菌，使用時再按比例混合。此外，合成培養(yǎng)基有的還要補加微量元素。放線菌放線菌是指能形成分枝絲.狀體或菌絲?體的一類革蘭氏陽性細菌。常見放線菌大多能形成菌絲.體，緊貼培養(yǎng)基表面或深入培養(yǎng)基內(nèi)生長的叫基內(nèi)菌統(tǒng)，基內(nèi)菌幺幺.生長到一定階段還能向空氣中生長出氣生菌統(tǒng)，并進一步分化產(chǎn)生抱子統(tǒng)及抱子。有的放線菌只產(chǎn)生基內(nèi)菌絲而無氣生菌絲。在顯微鏡下直接觀察時，氣生菌統(tǒng)色暗，基內(nèi)菌絲?較透明。抱子幺幺.依種類的不同，有直、波曲、各種螺旋形或輪生。在油鏡下觀察，放線菌的抱子有球形、橢圓、桿狀或柱狀。能否產(chǎn)生菌幺幺?體及由菌絲?體分化產(chǎn)生的各種形態(tài)特征是放線菌分類鑒定的重要依據(jù)。為了觀察放線菌的形態(tài)特征，人們設計了各種培養(yǎng)和觀察方法，這些方法的主要目的是為了盡可能保持放線菌自然生長狀態(tài)下的形態(tài)特征。本實驗應用插片法。插片法將放線菌接種在平板上，插上滅菌蓋玻片后培養(yǎng)，使放線菌菌絲.沿著培養(yǎng)基表面與蓋玻片的交接處生長而附著在蓋玻上。觀察時，輕輕取出蓋玻片，置于載玻片上直接鏡檢。這種方法可觀察到放線菌自然生長狀態(tài)下的特征，而且便于觀察不同生長期的形態(tài)?！静僮鞑襟E】配制高氏I號培養(yǎng)基(200mL)o按配方稱取高氏培養(yǎng)基各組分，先用少量冷水，將淀粉調(diào)成糊狀，倒入煮沸的水中，在火上加熱，邊攪拌邊加入其他成分，溶化后，補足水分至200mL,調(diào)節(jié)pH,121°C滅菌2Omnio倒平板。取融化并冷至大約50°C的高氏I號培養(yǎng)基倒平板,倒平板時盡量使培養(yǎng)基厚一些，凝固待用。接種。無菌操作，用接種環(huán)挑取菌種斜面培養(yǎng)物在平板上劃線接種，劃線要密。插片。以無菌操作用鑲子將滅菌的蓋玻片以大約與培養(yǎng)基成45°角插入平板內(nèi)，并與劃線垂直，每個平板插入3個蓋玻片。培養(yǎng)。將平板倒置，28°C培養(yǎng)3~5d。鏡檢。用鑲子小心拔出蓋玻片，擦去背面培養(yǎng)物，然后將無菌的一面朝上放在載玻片上，直接鏡檢。觀察時，宜用略暗光線；先用低倍鏡找到適當視野，再換高倍鏡觀察，必要時可用油鏡觀察?！緦嶒灲Y(jié)果】圖片：青色鏈霉菌及弗氏鏈霉菌菌絲.青色鏈霉菌（示菌絲.）（10X100,油鏡）弗氏鏈霉菌（示菌絲.）（10X100,油鏡）表格：各種菌絲.形態(tài)特征項目基內(nèi)菌統(tǒng)形態(tài)項目基內(nèi)菌統(tǒng)形態(tài)青色鏈霉菌較長，疏松，多分枝弗氏鏈霉菌略短，較密，多分枝氣生菌絲?形態(tài)抱子統(tǒng)形態(tài)毛狀緊密螺旋形厚絮狀直條狀【思考題】1.鏡檢時如何區(qū)分放線菌基內(nèi)菌統(tǒng)、氣生菌統(tǒng)及抱子統(tǒng)？答：基內(nèi)菌幺幺比較亮比較粗、較透明；氣生菌幺幺比較黑比較細、色暗；抱子絲?依種類的不同，有直、波曲、各種螺旋形或輪生，末端有時有抱子脫落。【附】高氏I號培養(yǎng)基配方:TOC\o"1-5"\h\z可溶性淀粉 20gKNO3 lgNaCl 0.5gK2HPO4 0.5gMgSO4 0.5gFeSO4 0.01g瓊脂 20g水 lOOOmLpH 7.2