腫瘤繼承性免疫治療詳解演示文稿

腫瘤繼承性免疫治療詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)優(yōu)選腫瘤繼承性免疫治療目前二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)中國癌癥趨勢(shì)

2000年發(fā)病約180-200萬死亡140-150萬0～64歲人口中，1/4死于癌癥

中國癌癥預(yù)防與控制規(guī)劃綱要（2004-2010）

目前三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥的三大常規(guī)治療１．手術(shù)---破冰船歷史悠久手術(shù)本身的兩面性：消除（降低）腫瘤負(fù)荷促進(jìn)轉(zhuǎn)移的傾向難以清除腫瘤微小轉(zhuǎn)移灶很多患者就診時(shí)已失去手術(shù)最佳時(shí)機(jī)目前四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥的三大常規(guī)治療２．化療---轟炸機(jī)腫瘤內(nèi)科治療的基石對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷缺乏選擇性損傷正常組織Goldie-Coldman假說及“一級(jí)動(dòng)力學(xué)”理論：化療對(duì)數(shù)殺滅細(xì)胞，不可能徹底清除腫瘤細(xì)胞目前五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥的三大常規(guī)治療1898年發(fā)現(xiàn)鐳鐳用于治療腫瘤放療有效破壞或消滅癌細(xì)胞，甚至可以治愈部分腫瘤放療損傷機(jī)體正常細(xì)胞，降低機(jī)體免疫力

3．放療---太陽能目前六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤治療的現(xiàn)狀靶向藥物靶向藥物腫瘤生物治療是進(jìn)一步提高療效的很有前景的方法目前七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)目前癌癥療效的總體評(píng)估“近20年來，我國癌癥死亡率上升了29%，……癌癥治愈率(5年生存率)仍徘徊在20%-30%左右。其中肺癌僅10%，肝癌3%左右”。

--衛(wèi)生部2006年《中國慢性病報(bào)告》“近30年來，晚期轉(zhuǎn)移腫瘤5年生存率基本上沒有改變。這主要是由我們目前腫瘤治療不當(dāng)和過度治療造成的。”

--程書鈞院士目前八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥治療的誤區(qū)

注重腫瘤本身，想盡辦法殺死腫瘤細(xì)胞體內(nèi)正常細(xì)胞被錯(cuò)殺為什么要長腫瘤？

目前九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥認(rèn)識(shí)的誤區(qū)只有確切了解癌癥，才可能找到治愈的方法

重大突破通常來源于認(rèn)識(shí)上的巨大轉(zhuǎn)變細(xì)菌與感染的聯(lián)系得到證實(shí)后，才意識(shí)到要治愈此類疾病便必須除去細(xì)菌。結(jié)果是促使抗生素的誕生，從而控制一系列的傳染病目前十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥治療的困境與未來術(shù)后1年復(fù)發(fā)率達(dá)60%死于腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的人超過80%徹底消滅癌細(xì)胞及體內(nèi)不再產(chǎn)生癌細(xì)胞的“根治”任務(wù)很可能落在生物治療身上目前十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥治療的生物療法腫瘤生物免疫療法成為最令人矚目、最鼓舞人心的焦點(diǎn)，將成為21世紀(jì)人類攻克癌癥具有戰(zhàn)略意義的一個(gè)重要方面.

37-39屆美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)（ASCO）

第7屆中國抗癌協(xié)會(huì)臨床腫瘤學(xué)協(xié)作專業(yè)委員會(huì)（CSCO）

目前十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Strength(優(yōu)勢(shì))細(xì)胞免疫技術(shù)發(fā)展給成功的臨床治療帶來可能性?？茖W(xué)家和臨床專家全力發(fā)展此技術(shù)衛(wèi)生部醫(yī)政處也大力支持。己批準(zhǔn)此臨床技術(shù),并核準(zhǔn)收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)Opportunity(機(jī)會(huì))目前各研究所及醫(yī)科大學(xué)各自為政地，并且各機(jī)構(gòu)只有少量臨床病例報(bào)道，因此給產(chǎn)業(yè)化，系統(tǒng)化發(fā)展帶來可能。腫瘤生物治療現(xiàn)狀

Weakness(劣勢(shì))部分各科臨床醫(yī)師對(duì)此技術(shù)認(rèn)知程度偏低廣大病人對(duì)此知識(shí)一無所知Threat(威脅)各單位技術(shù)力量大小不一，并參差不齊，易造成混亂，阻滯此技術(shù)的臨床健康發(fā)展。

目前十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)政府全力支持

----衛(wèi)生部文件國家發(fā)展改革委、衛(wèi)生部、國家中醫(yī)藥管理局關(guān)于印發(fā)《全國醫(yī)療服務(wù)價(jià)格項(xiàng)目規(guī)范》新增和修訂項(xiàng)目（2007年）的通知發(fā)改價(jià)格[2007]2193號(hào)新增項(xiàng)目

修訂項(xiàng)目

第56條310800024細(xì)胞因子活化殺傷（CIK）細(xì)胞輸注治療含藥物加無血清培養(yǎng)基、體外細(xì)胞培養(yǎng)；

包括樹突狀細(xì)胞治療(DC)次LAK細(xì)胞治療酌情加收

目前十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)政府全力支持

----衛(wèi)生部文件

醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用管理辦法

衛(wèi)生部明確國家建立醫(yī)療技術(shù)臨床應(yīng)用準(zhǔn)入和管理制度，對(duì)醫(yī)療技術(shù)實(shí)行分類、分級(jí)管理。

醫(yī)療技術(shù)分三類管理衛(wèi)醫(yī)政發(fā)(2009)18號(hào)目前十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥治療的生物療法腫瘤免疫的概念起源于本世紀(jì)初1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負(fù)責(zé)防御微生物侵犯，而且清除機(jī)體內(nèi)改變了的宿主成分腫瘤生物免疫療法已成為腫瘤治療基礎(chǔ)和臨床研究的重要領(lǐng)域目前十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥生物治療的分類---操作模式非細(xì)胞治療抗體、多肽/蛋白質(zhì)疫苗、基因疫苗、體內(nèi)基因治療等可以規(guī)?；a(chǎn)有嚴(yán)格、均一的產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)主要由制藥公司開發(fā)細(xì)胞治療采集患者自體細(xì)胞進(jìn)行制備，再回輸給患者無法規(guī)?；a(chǎn)更適于在醫(yī)療機(jī)構(gòu)開展，完成從采集、制備到回輸?shù)娜^程目前十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)正常機(jī)體免疫系統(tǒng)識(shí)別和清除突變細(xì)胞：免疫監(jiān)視免疫逃逸的機(jī)理還不很清楚，但主要的機(jī)制與CD8+T細(xì)胞不能有效地清除腫瘤細(xì)胞有關(guān)目前十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤免疫治療的三種新途徑----針對(duì)腫瘤免疫逃逸增強(qiáng)免疫應(yīng)答間接作用如抑制血管生成直接抑制腫瘤生長毒素放射性核素藥物細(xì)胞介導(dǎo)免疫治療過繼性免疫細(xì)胞治療供體淋巴細(xì)胞輸注腫瘤疫苗目前十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)限制腫瘤免疫應(yīng)答的因素目前二十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)免疫均衡與免疫逃逸淋巴細(xì)胞因素腫瘤細(xì)胞因素目前二十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤過繼性免疫治療體外分離細(xì)胞APC（巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）T淋巴細(xì)胞自然殺傷（NK）細(xì)胞離體培養(yǎng)、擴(kuò)增、活化細(xì)胞因子刺激抗原沖擊基因修飾自體或(同種異體)回輸誘發(fā)機(jī)體特異性抗腫瘤免疫目前二十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹突狀細(xì)胞（DC）共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)自然殺傷細(xì)胞型的淋巴細(xì)胞(NKT)腫瘤過繼性免疫治療目前二十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤過繼性免疫治療目前二十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞

lymphokine-activatedkillercells,LAK1980年，Rosenberg實(shí)驗(yàn)室首報(bào)荷瘤小鼠的脾臟淋巴細(xì)胞和腫瘤患者外周血淋巴細(xì)胞在含有IL-2的條件下，短期培養(yǎng)后可誘導(dǎo)出一種非特異性的殺傷細(xì)胞，能殺傷新鮮分離的實(shí)體瘤細(xì)胞和體外培養(yǎng)的多種腫瘤細(xì)胞目前尚未發(fā)現(xiàn)LAK細(xì)胞特有的表面標(biāo)志LAK細(xì)胞的前體細(xì)胞是NK細(xì)胞和T細(xì)胞。目前二十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)LAK的臨床應(yīng)用1984年Rosenberg研究組首次應(yīng)用IL-2與LAK協(xié)同治療25例腎細(xì)胞癌、黑素瘤、肺癌、肝癌/結(jié)腸癌等患者LAK細(xì)胞0.6～18.4×1010IL-22.8×105～3.3×106U/kg11例腫瘤縮小超過50％，1例黑色素瘤完全消退目前二十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)LAK的臨床應(yīng)用1988年用IL-2與LAK細(xì)胞協(xié)同治療222例16例轉(zhuǎn)移灶完全消退26例腫瘤消退50％以上對(duì)轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌、黑色素瘤、肝癌、結(jié)腸癌和非霍奇金淋巴瘤療效較顯著目前二十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)LAK的臨床應(yīng)用乳腺癌、膀胱癌局部聯(lián)用IL-2也獲得明顯療效由于IL-2用量大，一些病例出現(xiàn)較大毒副反應(yīng)目前二十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)異體LAK：采用抗原性較弱的5個(gè)月以內(nèi)胎兒的脾細(xì)胞、肝細(xì)胞和胸腺細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后具有很強(qiáng)的LAK細(xì)胞活性出現(xiàn)早而持久，不易引起移植排斥反應(yīng)骨髓細(xì)胞用rhIL-2培養(yǎng)后有很強(qiáng)的LAK活性，比外周血來源者強(qiáng)而持久；胎兒臍血細(xì)胞經(jīng)IL-2誘導(dǎo)后，LAK活性也明顯強(qiáng)于成人。目前二十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療目前三十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞

tumorinfiltratinglymphocyte,TIL

1986年Rosenberg研究組首先報(bào)道從腫瘤局部分離出TIL，加入高劑量IL-2體外培養(yǎng)，殘存的腫瘤細(xì)胞7～13天全部死亡。從手術(shù)切下的腫瘤組織、腫瘤引流淋巴結(jié)、癌性胸腹水中獲得淋巴細(xì)胞，加IL-2培養(yǎng)后，其生長、擴(kuò)增能力強(qiáng)于LAK細(xì)胞14例轉(zhuǎn)移性肺癌等晚期腫瘤患者,其中4例腫瘤縮小50％以上，副作用明顯低于IL-2/LAK療法。目前三十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）治療轉(zhuǎn)移性黑色素瘤2002.Science目前三十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)2007年，法國熱那亞大學(xué)細(xì)胞與基因治療中心對(duì)用TIL+IL-2治療過的Ⅲ期黑色素瘤進(jìn)行了長期隨訪，發(fā)現(xiàn)經(jīng)治療過的只有一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者其復(fù)發(fā)率明顯低于對(duì)照組，總生存期也明顯長于只用IL-2治療的患者。腫瘤侵潤性淋巴細(xì)胞目前三十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)

2007年南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬南京市鼓樓醫(yī)院腫瘤中心劉寶瑞等用快速制備自體腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞方法聯(lián)合白細(xì)胞介素2胸腔輸注治療癌性胸腔積液、2001年江西省萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院腫瘤科用TIL/LAK治療惡性漿膜腔積液38例等報(bào)道，他們發(fā)現(xiàn)經(jīng)過TIL治療后，患者生活質(zhì)量明顯提高,體力狀況得到恢復(fù)，有效患者隨訪中治療側(cè)胸腔未再出現(xiàn)胸腔積液或胸腔積液量增加,治療后除少數(shù)病例短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)可耐受的低熱及胸痛外,無一例出現(xiàn)其他不良反應(yīng)。腫瘤侵潤性淋巴細(xì)胞目前三十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹狀突細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療目前三十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞Cytokine-inducedkillercell,CIK由-IFN、TNFa、CD3單抗、IL-1、IL-2等在體外誘導(dǎo)并大量擴(kuò)增的具有殺傷腫瘤活性的細(xì)胞1991年斯坦福骨髓移植中心首先報(bào)道1994年Schmidt-wolf報(bào)道了體外大量增殖CIK細(xì)胞的方法。是目前國際上廣泛應(yīng)用的腫瘤免疫治療手段目前三十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)目前三十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)分2-3次靜脈回輸體內(nèi)采集病人外周血單個(gè)核細(xì)胞加入多種細(xì)胞因子培養(yǎng)擴(kuò)增、活化、誘導(dǎo)成為CIK細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤作用到達(dá)病變部位直接清除殘存腫瘤細(xì)胞調(diào)節(jié)和增強(qiáng)全身免疫機(jī)能防止腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移目前三十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)CIK細(xì)胞的特點(diǎn)1）高增殖活性：培養(yǎng)第18-22天達(dá)頂峰；CD3+CD56+細(xì)胞增加1000-6000倍；28-30天達(dá)平臺(tái)期，細(xì)胞毒活性亦達(dá)峰值2）高細(xì)胞毒力CIK細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞抑制指數(shù)為1.5-3.5，LAK細(xì)胞為0.5-1.5；3）殺瘤譜廣泛：非MHC限制性目前三十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)4）細(xì)胞來源豐富正?；蚧颊叩墓撬鑶蝹€(gè)核細(xì)胞或外周血單個(gè)核細(xì)胞、干細(xì)胞均可誘導(dǎo)獲得CIK細(xì)胞；5）對(duì)多耐藥性腫瘤細(xì)胞同樣敏感6）不受免疫抑制劑CSA、FK506影響7）抵抗腫瘤細(xì)胞誘發(fā)的效應(yīng)細(xì)胞Fas-FasL凋亡，細(xì)胞內(nèi)表達(dá)抗凋亡基因和保護(hù)基因8）對(duì)正常骨髓前體細(xì)胞毒性很小目前四十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)256例各種中晚期腫瘤患者（乳腺癌、肺癌、腸癌、肝癌、胃癌、淋巴瘤等）1-4療程CIK治療部分緩解和輕度緩解為207例（80.86%）1年生存期為96.06%2年生存期為92.96%3年生存期為88.38%生存質(zhì)量卡氏評(píng)分提高率為88.28%無心、肝、腎不良反應(yīng)，僅數(shù)例有一過性發(fā)熱，24小時(shí)即正常國內(nèi)2003年報(bào)道目前四十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)CIK細(xì)胞治療癌性胸、腹水136例癌性胸水61例完全消失57例顯著減少有效率86.8%83例癌性腹水26例完全消失44例顯著減少有效率84.3%目前四十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)1999年，德國柏林Freie大學(xué)Schmidtwolf等人報(bào)告用自身CIK細(xì)胞治療10例腫瘤腫瘤患者，結(jié)果1例完全緩解，3例穩(wěn)定。2005年，美國斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)中心LeembuisT等人用自身CIK（1×109-1010）治療9例霍奇金氏淋巴瘤和非霍奇金氏淋巴瘤，結(jié)果2例部分緩解，2例穩(wěn)定，5例無反應(yīng)，無嚴(yán)重毒副作用。2007年，意大利卡利亞里骨髓移植中心用供者CIK細(xì)胞治療11例惡性血液疾病，結(jié)果病人能夠耐受治療，有助于控制疾病復(fù)發(fā)。CIK細(xì)胞治療目前四十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹突狀細(xì)胞（DC）雙克隆免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤過繼性免疫治療目前四十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)樹突狀細(xì)胞（dendriticcell,DC）應(yīng)用負(fù)載腫瘤抗原的樹突狀細(xì)胞激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生腫瘤特異性CTL有效地殺傷腫瘤細(xì)胞建立持久的抗腫瘤的特異性免疫應(yīng)答目前四十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)

DC研究歷史美國學(xué)者Steinman及Cohn于1973年發(fā)現(xiàn)1992年Steinman建立了應(yīng)用GM-CSF從小鼠骨髓中大規(guī)模培養(yǎng)制備DC的方法此后建立并完善了多種培養(yǎng)擴(kuò)增DC的方法DC的研究得以深入目前四十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)2009年，英國伯明翰英國癌癥研究臨床試驗(yàn)組的Palmer等人用肝癌細(xì)胞株溶胞產(chǎn)物致敏DC治療35例晚期肝癌病人部分緩解和病情穩(wěn)定者10例4例AFP明顯下降7例T細(xì)胞對(duì)AFP有免疫反應(yīng)DC細(xì)胞--近期研究目前四十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)DC細(xì)胞的基本特征體內(nèi)功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞顯著刺激初始型T細(xì)胞增殖機(jī)體免疫反應(yīng)的始動(dòng)者在免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)中具有獨(dú)特的地位目前四十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)DC對(duì)抗原的加工處理與提呈DC與T細(xì)胞接觸表面的MHC-肽復(fù)合物被T細(xì)胞識(shí)別將抗原信息傳遞給T細(xì)胞——抗原提呈目前四十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞的作用目前五十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腦以外的全身各臟器皮膚、肝、脾、骨髓、淋巴器官和外周血中僅占人外周血單個(gè)核細(xì)胞的1％左右外周血中有很多DC前體細(xì)胞，在體外誘導(dǎo)成DCDC的組織分布目前五十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)目前五十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)目前五十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)腫瘤抗原致敏患者自身的樹突狀細(xì)胞制備成瘤苗(或細(xì)胞懸浮液)回輸患者DC細(xì)胞治療腫瘤的方案和途徑目前五十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)樹突狀細(xì)胞（DC）治療流程圖

收集患者外周血單個(gè)模細(xì)胞PBMC抗原致敏的DC體外細(xì)胞因子刺激回輸給同一患者相關(guān)多肽致敏目前五十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)樹突狀細(xì)胞（殺傷性T細(xì)胞）殺傷性T細(xì)胞機(jī)理目前五十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞(LAK)腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞(TIL)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)樹狀突細(xì)胞（DC）共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)腫瘤繼承性免疫治療目前五十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

樹突狀細(xì)胞(DC)+細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(CIK)

DC和CIK是腫瘤免疫治療的兩部分DC識(shí)別病原,激活獲得性免疫系統(tǒng)CIK通過發(fā)揮自身細(xì)胞毒性與分泌細(xì)胞因子殺傷腫瘤細(xì)胞二者聯(lián)合確保有效和諧的免疫反應(yīng)之完成目前五十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)大容量體外CIK細(xì)胞擴(kuò)增技術(shù)誘導(dǎo)CIK細(xì)胞按一定比例與DC細(xì)胞混合培養(yǎng)得到一種新的抗腫瘤免疫活性細(xì)胞群DC-CIK療法擁有更強(qiáng)的增殖能力及特異性識(shí)別﹑殺傷腫瘤細(xì)胞之特性共培養(yǎng)免疫細(xì)胞(DC-CIK)

目前五十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)2008年中國科學(xué)院生物物理研究所鄧笑偉等用不同來源的CIK和DC聯(lián)合治療21例中晚期肺癌，結(jié)果CR2例,PR7例,SD5例,PD7例,有效率為42.9%,臨床獲益率(CR+PR+SD)為66.7%，細(xì)胞回輸后主要不良反應(yīng)為一過性發(fā)熱。CIK-DC共培養(yǎng)細(xì)胞治療目前六十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Barry等（匹茲堡大學(xué)腫瘤研究所2003年）15例轉(zhuǎn)移性乳腺癌回輸NK細(xì)胞4例完全緩解，耐受性良好，無毒副作用NK細(xì)胞目前六十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Koehl等（德國法蘭克福大學(xué)醫(yī)院2004年）3例ALL干細(xì)胞移植病人NK細(xì)胞+IL-2治療患兒能充分耐受NK細(xì)胞目前六十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Miller等（明尼阿波利大學(xué)腫瘤中心2005年）NK細(xì)胞聯(lián)合CTX+Fludarabine治療19例AML5例血液學(xué)完全緩解NK細(xì)胞目前六十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Arai等（芝加哥Risb大學(xué)醫(yī)學(xué)中心2008年）同種異基因細(xì)胞系NK-92治療12例晚期腎癌和黑色素瘤病人1例完全緩解，1例穩(wěn)定，1例為混合反應(yīng)NK細(xì)胞目前六十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Kobayashi等（東京女子醫(yī)學(xué)大學(xué)2007年）自身γδT細(xì)胞治療7例進(jìn)展期肺癌治療后患者γδT細(xì)胞明顯增多無明顯毒副作用。γδT細(xì)胞目前六十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Bennouna等（2008年，法國）自身γδT細(xì)胞（8×109）+IL-210例轉(zhuǎn)移性腎癌患者6例患者治療后25.7周內(nèi)病情穩(wěn)定僅出現(xiàn)感冒樣癥狀γδT細(xì)胞目前六十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Okai等（澳大利亞昆土蘭州醫(yī)學(xué)研究所2002年）α半乳糖神經(jīng)酰胺（α-galcer）荷載DC4例癌轉(zhuǎn)移患者治療后病人NKT細(xì)胞明顯增多患者未出現(xiàn)不良反應(yīng)NKT細(xì)胞

目前六十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)Shikawa等（神奈川縣千葉大學(xué)醫(yī)院2005年）α-galcer荷載DC9例復(fù)發(fā)性非小細(xì)胞肺癌治療后5例病情穩(wěn)定未出現(xiàn)不良反應(yīng)NKT細(xì)胞

目前六十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)2008年，千葉大學(xué)醫(yī)院α-galcer荷載DC9例頭部腫瘤1例部分緩解4例穩(wěn)定NKT細(xì)胞

目前六十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)DC-CIK免疫治療聯(lián)合常規(guī)治療方法治療時(shí)機(jī)與方案聯(lián)合治療意義術(shù)后聯(lián)合DC-CIK1.快速恢復(fù)手術(shù)造成的免疫損傷；2.特異清除術(shù)后殘余腫瘤細(xì)胞；防治轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)3.增強(qiáng)放療敏感性，減少放療毒副作用；4.抵抗化療藥物的免疫抑制作用；5.增強(qiáng)對(duì)化療藥物敏感性；6.支持骨髓功能衰竭后的免疫重建；放療聯(lián)合DC-CIK化療聯(lián)合DC-CIK常規(guī)治療無效支持療法目前七十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)DC-CIK治療與常規(guī)治療方法比較

治療種類特點(diǎn)DC-CIK免疫治療增強(qiáng)機(jī)體免疫功能增強(qiáng)放、化療的敏感性清除微小病灶和殘余腫瘤細(xì)胞無明顯毒副作用手術(shù)局部快速切除腫瘤組織；見效快；微小病灶或轉(zhuǎn)移病灶；放療局部減少腫瘤負(fù)荷；見效快；不敏感細(xì)胞，復(fù)發(fā)根源；造成免疫損傷；化療全身減輕腫瘤負(fù)荷；見效快；不敏感細(xì)胞，復(fù)發(fā)根源；毒副作用大，造成免疫損傷；目前七十一頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)CD3AK細(xì)胞：免疫原性較強(qiáng)的腫瘤（具有T細(xì)胞受體（TCR）除外）CIK細(xì)胞：各種腫瘤，對(duì)低表達(dá)MHCⅠⅡ分子更有效γδT細(xì)胞：各種腫瘤，對(duì)呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)以及部分血液惡性疾病療效好樹突狀細(xì)胞：成熟DC可與各種細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用，增強(qiáng)抗腫瘤免疫效果樹突狀細(xì)胞疫苗：可以預(yù)防和治療相應(yīng)的各種腫瘤NKT細(xì)胞：對(duì)消化系統(tǒng)尤其是肝癌和呼吸系統(tǒng)腫瘤以及頭頸部腫瘤效果好NK細(xì)胞：對(duì)不表達(dá)MHC分子的腫瘤效果好巨噬細(xì)胞：Ⅰ型MФ具有一定的抗腫瘤作用，可一其他免疫細(xì)胞聯(lián)合應(yīng)用免疫細(xì)胞和細(xì)胞群抗癌譜目前七十二頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)免疫聯(lián)合治療CIK細(xì)胞DC-CIK共培養(yǎng)細(xì)胞DC聯(lián)合CIK細(xì)胞CD3AK細(xì)胞DC疫苗聯(lián)合CIK、CD3AK細(xì)胞共刺激T細(xì)胞巨噬細(xì)胞聯(lián)合CIK細(xì)胞腫瘤特異性T細(xì)胞聯(lián)合NK、γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞……目前七十三頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)場所細(xì)胞培養(yǎng)場所條件:符合GMP要求按照《品質(zhì)管理架構(gòu)》之模式管理。

GTP細(xì)胞培養(yǎng)/治療流程實(shí)驗(yàn)室管理流程生物安全實(shí)驗(yàn)流程消毒程序與周期流程維護(hù)和性能驗(yàn)證程序

設(shè)備3Q品質(zhì)驗(yàn)證設(shè)備清潔和維護(hù)保養(yǎng)試劑、耗材的外購品質(zhì)檢測流程最終細(xì)胞產(chǎn)品檢測流程:用常規(guī)方法進(jìn)行細(xì)菌和真菌培養(yǎng)試驗(yàn)用鱟試劑法進(jìn)行內(nèi)毒素檢測用功能性殺瘤實(shí)驗(yàn)法進(jìn)行殺傷活性檢測用流式細(xì)胞儀進(jìn)行表面標(biāo)記檢測用常規(guī)方法檢測細(xì)胞總數(shù)、細(xì)胞存活率、特定生物活性效價(jià)目前七十四頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)各種細(xì)胞回輸方法培養(yǎng)細(xì)胞收集于離心瓶。2500rpm×8min，20℃

進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)、檢查內(nèi)毒素、細(xì)胞表型，將細(xì)胞重懸于自身血漿中，按照不同的細(xì)胞選擇不同的回輸方法。留樣封存。0.9％注射用生理鹽水2000rpm×8min×2次，20℃核對(duì)好病人姓名、性別、年齡、住院號(hào)、細(xì)胞數(shù)、無菌結(jié)果、病區(qū)及治療項(xiàng)目目前七十五頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)CIK細(xì)胞制備培養(yǎng)

用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血2000g×15min，20℃

75cm2培養(yǎng)瓶CIK培養(yǎng)液（含IFN-γ）第2天加混合細(xì)胞因子PMNC層CIK培養(yǎng)隔天擴(kuò)瓶培養(yǎng)瓶內(nèi)細(xì)胞收集、離心、洗滌回輸?shù)?天擴(kuò)瓶后抽樣送檢（細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析）第3天擴(kuò)瓶培養(yǎng)留血漿50ML備用分離出6ml富含白細(xì)胞的血液淋巴細(xì)胞分離液目前七十六頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)第10天培養(yǎng)瓶內(nèi)DC細(xì)胞收集、離心、洗滌和回輸?shù)?天補(bǔ)充含半量細(xì)胞因子的培養(yǎng)基，并加腫瘤抗原第6天補(bǔ)充培養(yǎng)基，加TNF-，抽樣送檢（細(xì)菌培養(yǎng)和表型分析）75cm2培養(yǎng)瓶1640培養(yǎng)液2000g×15min，20℃

留血漿50ML備用分離出6ml富含白細(xì)胞的血液淋巴細(xì)胞分離液PMNC層用血液保養(yǎng)袋采集200ML外周血細(xì)胞貼壁120min貼壁細(xì)胞進(jìn)行DC細(xì)胞培養(yǎng)方案懸浮細(xì)胞進(jìn)行CIK培養(yǎng)方案樹突狀細(xì)胞制備流程目前七十七頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)癌癥生物治療的優(yōu)點(diǎn)1）應(yīng)用范圍廣幾乎可以應(yīng)用于所有腫瘤患者。2）對(duì)原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤均有明顯療效3）對(duì)于手術(shù)后的惡性腫瘤患者的殘存腫瘤細(xì)胞的清除預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)有著比化療更明顯的作用。4）副作用小，目前僅發(fā)現(xiàn)有發(fā)燒類似感冒的副作用。5）不損傷正常組織并能提高機(jī)體免疫力和改善身體狀況的作用。生物治療具有無創(chuàng)傷無痛苦安全無副作用等特點(diǎn)，是未來腫瘤治療的重要發(fā)展方向。特異性強(qiáng)適應(yīng)癥廣延長生命性強(qiáng)抗復(fù)發(fā)性強(qiáng)安全性好(副作用低幾乎沒有)合適的費(fèi)用目前七十八頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)適應(yīng)癥

主要用于惡性黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、膀胱癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、直腸癌、乳腺癌、宮頸癌、各種肺癌、喉癌、鼻咽癌、胰腺癌、肝癌、胃癌等實(shí)體瘤手術(shù)后防止復(fù)發(fā)；也可以用于多發(fā)性骨髓瘤、B細(xì)胞淋巴瘤和白血病等血液系統(tǒng)惡性腫瘤緩解期進(jìn)一步預(yù)防復(fù)發(fā)；還可以用于上述實(shí)體瘤緩解期進(jìn)一步鞏固治療或上述晚期腫瘤配合放化療、介入治療、熱療等方法，達(dá)到延長生存期、提高生活質(zhì)量和控制腫瘤進(jìn)展的目的。目前七十九頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)適應(yīng)癥A、適合免疫治療者：①年齡大于16歲；②病理組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診為腫瘤患者③生活自理，卡氏體力狀況評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)60分以上；④預(yù)計(jì)生存期至少大于6個(gè)月；⑤簽署知情同意書；⑥放化療結(jié)束一個(gè)月以上的；⑦如若可以接受手術(shù)治療或其它方式能夠獲得一定數(shù)量的腫瘤組織件或細(xì)胞的患者最佳。目前八十頁\總數(shù)八十九頁\編于點(diǎn)不適合癥不適合免疫治療者：①懷孕或哺乳期婦女；②器官功能衰竭者：心臟：IV級(jí)以上；肝臟：達(dá)到國內(nèi)肝功能分級(jí)C級(jí)以上；腎臟：腎功能衰竭及尿毒癥期以上；肺：出現(xiàn)嚴(yán)重的呼吸衰竭癥狀，并累及到其他臟器，如肝、腎功能；腦：腦轉(zhuǎn)移并伴意識(shí)障礙者；③臟器移植者；