2011年水產(chǎn)養(yǎng)殖11級(jí)水環(huán)境調(diào)查實(shí)習(xí)指導(dǎo)

PAGEPAGE9武漢工業(yè)學(xué)院2012-2013年第2學(xué)期水產(chǎn)養(yǎng)殖學(xué)專業(yè)《水環(huán)境調(diào)查》實(shí)習(xí)安排表實(shí)習(xí)班級(jí)：1107021-3總?cè)藬?shù)：67實(shí)習(xí)時(shí)間：2012年6月24日至6月28日實(shí)習(xí)地點(diǎn)：武漢市東西湖漁場(chǎng)動(dòng)科學(xué)院水產(chǎn)養(yǎng)殖專業(yè)實(shí)驗(yàn)室（動(dòng)科學(xué)院201實(shí)驗(yàn)室—水質(zhì)分析；203實(shí)驗(yàn)室-水生生物分類鑒定）實(shí)習(xí)安排：1、6月2、6月253、6月26-28日：在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行水樣的分析，主要分析水質(zhì)指標(biāo)有：溶解氧、氨氮和總磷，每個(gè)指標(biāo)都要測(cè)定分析；同時(shí)鑒定浮游動(dòng)物、浮游植物和底棲動(dòng)物的組成，要求鑒定到屬；書寫實(shí)習(xí)報(bào)告，并進(jìn)行實(shí)驗(yàn)總結(jié)。需攜帶以下物品：溫度計(jì)1支；pH試紙1盒；采水器2-3個(gè)；塞奇圓盤1-2個(gè)250ml具塞磨口瓶30個(gè)（1個(gè)用于DO測(cè)定，其他3個(gè)溶于總硬度、氨氮和總磷測(cè)定用）；MnSO4和KI500ml各1瓶，吸管若干以及實(shí)驗(yàn)記錄本2012年水環(huán)境調(diào)查實(shí)習(xí)指導(dǎo)前言：水環(huán)境調(diào)查一般可分為：水環(huán)境調(diào)查和水生態(tài)調(diào)查。水環(huán)境調(diào)查主要是非生物環(huán)境組成成分的測(cè)定，如：調(diào)查水體的寬度、水深、流速、水溫、水質(zhì)（感官指標(biāo)、pH值、DO、BOD、電導(dǎo)率及懸浮固體物質(zhì)）及水域地形和地貌調(diào)查等。水生態(tài)調(diào)查包括水域中各種水生生物，如魚類、蝦蟹類、藻類、水生昆蟲、螺貝類、環(huán)節(jié)動(dòng)物、植物等第一部分水環(huán)境調(diào)查-董桂芳負(fù)責(zé)水化學(xué)調(diào)查基本知識(shí)一、水樣的采集與保存供化驗(yàn)用的水樣，必須有足夠的代表性。水樣取出后，到分析工作結(jié)束之前，應(yīng)盡量避免水中原有成分發(fā)生明顯變化，又要避免受到外來污染。這是水質(zhì)調(diào)查工作中十分重要的一環(huán)。這一環(huán)往往被人輕視。如果所取水樣沒有代表性，或者成分已發(fā)生了變化，后續(xù)工作做得再好，也得不到正確結(jié)果，有問題也不容易檢查出來。因此必須重視水樣的采集與保存工作。下面就有關(guān)問題加以討論。（一）采水器采水器應(yīng)力求符合下述要求：能準(zhǔn)確取得所需水層的水樣，其它水層水樣不應(yīng)混入；其內(nèi)壁及導(dǎo)管均不應(yīng)與水樣發(fā)生反應(yīng)，不改變水樣的組成；在采水樣及放水入水樣瓶時(shí)，均不應(yīng)激起氣泡，不改變水樣中溶解氣體的含量；在取深層水樣及需在采水器提出水面后測(cè)定水溫時(shí)，采水器還必須有足夠的熱絕緣性。采水器的型式有很多種。如圖所示（二）水樣瓶水樣瓶的質(zhì)料對(duì)水樣在貯存期間的變化有明顯的影響。例如聚乙烯塑料瓶能強(qiáng)烈地吸附水中的磷酸鹽。普通玻璃瓶則可給水樣增加許多雜質(zhì)，還能吸附水中許多微量成分。目前用作水樣瓶的一般都是硬質(zhì)玻璃磨口試劑瓶和聚乙烯塑料瓶。測(cè)硅水樣不宜用玻璃瓶，測(cè)定含油的水樣不宜用塑料瓶。測(cè)溶氧的水樣瓶也只能用玻璃瓶。水樣瓶在使用之前，要用毛刷洗凈。玻璃瓶可用鉻酸洗液浸泡后(測(cè)鉻水樣切忌用鉻酸洗液)，再用自來水洗凈。測(cè)汞等污染項(xiàng)目的水樣瓶還應(yīng)使用lN硝酸浸泡。有的項(xiàng)目對(duì)水樣瓶有特殊要求，這在各項(xiàng)目中介紹。（三）采水樣的時(shí)間及位置在溫暖季節(jié)，池塘水的成分有周期性的晝夜變化。取樣的時(shí)間要根據(jù)目的來決定。特別是溶解氣體及pH值，日變化率往往很大，采樣時(shí)應(yīng)記錄時(shí)間及天氣情況。如沒有特殊目的，以早晨取樣較好，因這時(shí)垂直分布較均勻。有時(shí)由于條件限制，不能在所希望的時(shí)間取樣，比如在面積較大的水域多點(diǎn)取樣時(shí)，各點(diǎn)的取樣時(shí)間要隨工作的進(jìn)展而定。這時(shí)則應(yīng)將各點(diǎn)的取樣時(shí)間及天氣情況記錄下來，在比較各點(diǎn)數(shù)據(jù)時(shí)，特別是比較溶解氣體及pH值時(shí)，要注意時(shí)間上的差別。取樣位置應(yīng)離岸盡量遠(yuǎn)些。大型水域需分多點(diǎn)取樣。面積為三、五畝的池塘，則可以只取池中心一個(gè)水樣。到池子中間取樣操作麻煩，可以在上風(fēng)及下風(fēng)池岸離岸3米處，分別取中層水樣等體積混合后測(cè)定或分別測(cè)定(溶解性氣體必須分別測(cè)定)。這是因?yàn)轸~池上風(fēng)及下風(fēng)處的水質(zhì)往往有較大的差異，溶解氣體差異尤其明顯。如果只測(cè)定主要離子，或只求得到粗略數(shù)據(jù)，也可只取一個(gè)離岸3米的水樣。取樣時(shí)應(yīng)避開糞堆、入水口等特異環(huán)境。（四）水樣的保存取樣后應(yīng)盡快進(jìn)行測(cè)定。pH值及游離二氧化碳測(cè)定應(yīng)在現(xiàn)場(chǎng)立即進(jìn)行。其它項(xiàng)目在必要時(shí)于加保護(hù)劑(固定劑)或采取一定措施處理后，可保存一定時(shí)間。但水樣保存間題較復(fù)雜，尚不統(tǒng)一，下表方法可供參考。必須注意，即使加了保護(hù)劑，也不能完全阻止水成分的變化，只是使變化減慢而已，所以仍應(yīng)盡快測(cè)定。在1~3℃1、氯仿保存法：每升水樣加氯仿2~4毫升。可測(cè)項(xiàng)目有：磷酸鹽、總磷、硝酸鹽、亞硝酸鹽、銨鹽、總氮、總鐵、鈣、總硬度、總堿度、鉀、鈉、氯化物、硫酸鹽、氟化物、有機(jī)氯農(nóng)藥等。2、硫酸保存法：每升水樣中加1:3H2SO41毫升。可用于測(cè)硅酸鹽、耗氧量、硝酸鹽、銨鹽及總鐵等。3、特殊保存法：有些項(xiàng)目水樣保存需加特殊的試劑，例如溶氧、硫化物、氰化物和酚、重金屬、亞鐵和高鐵等，都需用特定試劑來固定，所取水樣也只能用于特定項(xiàng)目的測(cè)定。有條件時(shí)，在加了上述保存劑后，再將水樣（連瓶）放到1~3℃的低溫環(huán)境中保存，效果將更好。HgCl2以上只是一般情況。水樣的保存方法同測(cè)定方法有關(guān)。測(cè)定方法改變時(shí)，要注意選擇適當(dāng)?shù)谋４娣椒?。各?xiàng)目水樣的保存方法項(xiàng)目保存方法PH，CO2在現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定，不能保存O2按測(cè)定方法中“固定”操作進(jìn)行固定，于一晝夜內(nèi)測(cè)定磷酸鹽每升水樣加氯仿2~4毫升，當(dāng)天測(cè)定銨鹽、硝酸鹽、亞硝酸鹽1、冷卻到0~3℃2、每升水樣加氯仿2~4毫升，在1~2天內(nèi)測(cè)定硅酸鹽水樣應(yīng)裝于聚乙烯容器或內(nèi)壁涂石蠟的玻璃瓶中1、冷卻到0~3℃2、每升水樣加1:3H2SO41毫升，可在1~3天內(nèi)測(cè)定總磷將水樣用致密濾紙過濾(最好用孔徑為0.4~0.5微米的濾膜過濾)后，每升水樣加氯仿2~4毫升，可在數(shù)天內(nèi)測(cè)定亞鐵和高鐵取樣時(shí)避免同空氣接觸。1升新取水樣加50毫升醋酸緩沖液(13.6克CH3COONa.3H2O及33.5毫升CH3COOH配成200毫升)，可在1~3天內(nèi)測(cè)定總堿度用水樣將瓶灌滿保存,可在一天內(nèi)測(cè)定鈣、硬度、鉀、鈉、氯化物、硫酸鹽1、不加固定劑，或加氯仿，于數(shù)日內(nèi)測(cè)定2、用致密濾紙過濾(最好用孔徑為0.4~0.5微米的濾膜過濾)再通CO2到飽和密封保存，可數(shù)月不變，(CO2需經(jīng)蒸餾水洗滌)氟化物水樣裝聚乙烯塑料瓶中，不必固定硫化物每升水樣加2N醋酸鋅5毫升，可在1~2天內(nèi)測(cè)定氰化物加氫氧化鈉使pH為11，可在1~2天內(nèi)測(cè)定重金屬用致密濾紙過濾(最好用孔徑為0.4~0.5微米的濾膜過濾)，每升過濾水樣中加濃硝酸5毫升;硝酸要在取樣之前加入瓶中酚每升水樣加50%NaOH1毫升，可在數(shù)天內(nèi)測(cè)定耗氧量每l00毫升水樣加1:3H2S043毫升，存于0~3℃有機(jī)氯農(nóng)藥每升水加2~4毫升氯仿，可在數(shù)天內(nèi)測(cè)定總磷冷卻到0~3℃每升水加濃H2SO41毫升?？稍跀?shù)天內(nèi)測(cè)定每升水加氯仿2~4毫升，可在數(shù)天內(nèi)測(cè)定總氮冷卻到0~3C保存，可在數(shù)禾內(nèi)測(cè)定每升水加濃H2S041毫升，一晝夜內(nèi)測(cè)定每升水加氯仿2~4毫升，1~2天內(nèi)測(cè)定二.儀器設(shè)備及試劑采水器、塞奇圓盤、溫度計(jì)、pH計(jì)、250ml具塞磨口瓶、MnSO4和KI，吸管若干。四．水樣采集、預(yù)處理及保存方法1.水樣采集一般采用采水器采水樣2.水樣預(yù)處理及保存方法水樣采集后，由于氣體揮發(fā)和發(fā)生化學(xué)或生物化學(xué)反應(yīng)，使樣品的物理、化學(xué)性質(zhì)發(fā)生變化。如不能立即進(jìn)行分析，需要將水樣盛入容器后，立即蓋緊，將樣品迅速冷凍在液氮中，并儲(chǔ)存于干冰凍器內(nèi)運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室?；蛟谒畼又屑尤氡Ｗo(hù)劑（酸、堿、氯仿和氯化汞）（本次需要預(yù)處理的有DO，采集30mL水樣后加入MnSO43滴，KI3滴，加蓋后瓶中無氣泡，顛倒混合）。五．水環(huán)境調(diào)查內(nèi)容（一）現(xiàn)場(chǎng)記錄和測(cè)定的指標(biāo)1．水質(zhì)感官指標(biāo)水的顏色、嗅和味2.水溫檢測(cè)方法一般使用溫度計(jì)在采樣時(shí)，現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定3.透明度測(cè)定-塞奇圓盤法方法：將直徑為25cm白色或黑白相間圓盤沉入水中，至恰看不到板面白色止，此時(shí)圓盤所處深度為SD。（二）實(shí)驗(yàn)室分析測(cè)試指標(biāo)1.水體總硬度測(cè)定—絡(luò)合滴定法具體測(cè)定方法見附錄12.溶解氧測(cè)定-碘量法可用溶氧計(jì)現(xiàn)場(chǎng)測(cè)定或是采用現(xiàn)場(chǎng)采樣固定后帶回實(shí)驗(yàn)室測(cè)定，碘量法測(cè)定見附錄2或《水化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》3.氨氮測(cè)定采用奈氏試劑法，具體方法見附錄3或《水化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》4.總磷測(cè)定具體方法見附錄4或《水化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》六．水質(zhì)調(diào)查/分析資料整理水環(huán)境調(diào)查全過程從采樣、配制標(biāo)準(zhǔn)溶液到測(cè)量記錄、結(jié)果計(jì)算及圖表繪制都需嚴(yán)謹(jǐn)、客觀和完整，原始記錄必須當(dāng)即記錄，可以根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的需要設(shè)計(jì)不同的專用表格來記錄第二部分水生態(tài)調(diào)查（水生生物的采集和調(diào)查方法）—李明負(fù)責(zé)學(xué)習(xí)要點(diǎn)：各類水生生物的采集方法，固定、計(jì)數(shù)，生物量換算一、采樣點(diǎn)的選擇：采樣點(diǎn)在平面分布上必須要有代表性，除湖心、庫心、河心以外，湖灣、庫灣、上中下游、進(jìn)出水口等必須設(shè)點(diǎn)。二、記錄：天氣、日期、時(shí)間、風(fēng)向、表底層水溫、氣溫、理化因子、標(biāo)本號(hào)等。三、采集工具、藥品、必備器材：浮游生物網(wǎng)、采水器、濃縮沉淀器、采泥器等。四、浮游植物的采集、保存、計(jì)數(shù)1.定性標(biāo)本采集(1)采集工具：25號(hào)—網(wǎng)孔0.064mm。(2)其它用品：固定液、顯微鏡，各種瓶，水溫計(jì)，薩氏盤等。(3)采集：作“∞”的撈取，著生藻類可以用鑷子夾取或用小刀刮，漂浮于水中的藻塊可以取其不同顏色的藻塊。(4)固定：標(biāo)本液放入指形管中固定。A-甲醛：100ml水樣加4ml甲醛，標(biāo)本液濃度約為4%B-魯哥液：1000ml水樣加15ml魯哥液，并加幾滴甲醛。配制：KI—6g；I—4g；H2O—100ml，（20mlH2O+KI先溶解，再加I并加水至100ml）C-波恩氏液（苦味酸溶液）苦味酸飽和溶液75ml，甲醛液25ml，冰醋酸3ml，帶水標(biāo)本加入等量的波恩液，此溶液對(duì)標(biāo)本組織保存比較好。(5)標(biāo)簽：寫標(biāo)本號(hào)，日期，采集地，采集人等（臨時(shí)性、永久性）。(6)鏡檢：識(shí)別種類（活體、固定標(biāo)本觀察，臨時(shí)性可以用甘油封片）定性標(biāo)本分析：以一個(gè)視野中出現(xiàn)的數(shù)量的多少來表示。+稀少1%以下；++很少1-5%，+++較多5-30%，++++很多30-60%，+++++大量60-100%2.定量標(biāo)本的采集、處理和計(jì)數(shù)(1)采樣工具：采水器、濃縮沉淀器、固定液，1000ml廣口瓶，30ml廣口瓶，蓋玻片，0.1ml計(jì)數(shù)框，計(jì)數(shù)器等。(2)采樣固定：用采水器在一定深度（或表底層混合）采水樣1000ml，倒入廣口瓶中，加15ml魯哥液固定。(3)把水樣帶回實(shí)驗(yàn)室，在沉淀濃縮器中沉淀48小時(shí)，濃縮為30ml，過多時(shí)則取出清液。(4)計(jì)數(shù)：A．將濃縮液搖動(dòng)200-300次，搖勻后用0.1ml吸管取0.1ml樣品放入0.ml計(jì)數(shù)框內(nèi)，蓋上蓋玻片進(jìn)行計(jì)數(shù)；如果蓋上后水溢出或有氣泡就必須重做。B．計(jì)數(shù)100視野或行格法，數(shù)兩片，取其平均值，誤差不超過15%。行格法：①計(jì)數(shù)：用上述方法搖勻30ml的濃縮水樣，用0.1ml定量吸管吸取0.1ml標(biāo)本液置于0.1ml計(jì)數(shù)框中，蓋上蓋玻片，在高倍鏡下對(duì)計(jì)數(shù)框上第二、五、八行共30小格（全片為10行，共100格）進(jìn)行分門別類計(jì)數(shù)。②1升水中浮游植物個(gè)數(shù)的計(jì)算公式五、浮游動(dòng)物的采集、保存、計(jì)數(shù)1．定性標(biāo)本的采集、保存：同浮游植物用16號(hào)或13號(hào)網(wǎng)，16號(hào)網(wǎng)孔為0.86mm。定性標(biāo)本的處理：當(dāng)時(shí)不觀察可放在陰處，觀察活體可加麻醉劑如：水和氯醛、可卡因、氯仿、烏拉坦；處理同藻類。2．定量標(biāo)本采集處理、計(jì)數(shù)、生物量換算（1）采集A.原生動(dòng)物、輪蟲：采水樣、濃縮同浮游植物，可共用一個(gè)標(biāo)本B.枝角類、橈足類：采不同水層水樣15-50L用25號(hào)浮游生物網(wǎng)過濾（2）計(jì)數(shù)A.原生動(dòng)物用0.1ml計(jì)數(shù)框，全部計(jì)數(shù)B.輪蟲用1ml計(jì)數(shù)框，全部計(jì)數(shù)C.枝角類和橈足類的過濾樣品全部計(jì)數(shù)D.計(jì)算公式：N=V/v×n/cV—沉淀體積（ml）；v—采水體積（L）；c—計(jì)算體積（ml）；n—計(jì)算個(gè)數(shù)（3）生物量計(jì)算A．體積計(jì)算輪蟲體重：最小0.06μg，最大為0.702-16.74μg1μg=10-6mm3例如：萼花臂尾輪蟲：一般橢圓形，V=0.25abc或V=0.13a3當(dāng)b=0.65a；c=0.37a，體長a=233.19μm時(shí)，體重2.5μgB．生物量估算一般取0.003mg作為無節(jié)幼體的濕重粗略估算時(shí)可以取前人已經(jīng)計(jì)算的一些浮游生物重量，但是生物在不同環(huán)境的變異較大，應(yīng)重新計(jì)算六、底棲動(dòng)物的采集和測(cè)定方法1、選點(diǎn)選江河流入庫灣彎部分水庫近壩區(qū)、洪水區(qū)、庫中心、淹沒的水草區(qū)。2.采集工具：帶網(wǎng)夾泥器：面積為1/16m2，采集軟體動(dòng)物改良彼得生采泥器：（開口面積為1/16或1/20m2），昆蟲、寡毛類、軟體動(dòng)物?？寺赡嗥鳎好娣e1/40m2，昆蟲、寡毛類分樣銅篩（40目/寸）、塑料水桶、白色解剖盤、小鑷子、解剖針、臉盆、毛筆。廣口瓶（30-50ml，250ml），塑料袋。藥品：甲醛液、乙醇75-80%3．標(biāo)本采集、整理、稱重、固定放在白磁盤中，撿出各類標(biāo)本，固定后，吸干水，稱重，計(jì)算；每點(diǎn)采集兩次，取其平均值。固定液：水蚯蚓—甲醛；昆蟲、軟體動(dòng)物—75-80%酒精。4．生物量換算如用1/40面積采泥器，則個(gè)數(shù)（重量）×40附錄1水體溶解氧測(cè)定（碘量法）一、實(shí)驗(yàn)原理在堿性條件下，Mn2+與水中溶解氧反應(yīng)生成亞錳酸(H2MnO3)，再在酸性條件下，使亞錳酸與碘化鉀反應(yīng)，析出單質(zhì)碘，然后用硫代硫酸鈉(Na2S2O3)標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定析出的碘。根據(jù)硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積和濃度，計(jì)算水中溶解氧的含量(DO)。1、固定用氫氧化鈉與硫酸錳(或氯化錳)反應(yīng)，生成Mn(OH)2白色沉淀。Mn(OH)2迅速與水樣中的溶解氧反應(yīng)，生成H2MnO3棕色沉淀。Mn2++2OH-=Mn(OH)2↓(白色)2Mn(OH)2+O2=2H2MnO3↓(棕色)水中的溶解氧被轉(zhuǎn)化到沉淀中的過程稱為溶解氧的固定2、酸化將固定后的水樣加入硫酸酸化，當(dāng)溶液中有碘化鉀存在時(shí)，H2MnO3迅速將I-氧化為I2。H2MnO3+4H++2I-=Mn2++3H2O+I23、滴定用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定I2。2S2O-+I2=2I-+S4O-測(cè)定過程的計(jì)量關(guān)系為：滴定每消耗1mol的Na2S2O3，相當(dāng)于水中含有1/4mol的O2，也就是8.0gO2。二、實(shí)驗(yàn)儀器1、溶解氧測(cè)定瓶250ml1個(gè)。2、酸式滴定管30ml1支。3、刻度移液管5ml、2ml、1ml各1支。4、容量瓶1000ml2個(gè)，100ml3個(gè)。5、錐形瓶250ml1個(gè)。6、碘量瓶250ml1個(gè)。7、棕色試劑瓶1000ml1個(gè)。8、燒杯100ml6個(gè)。9、移液管25ml1支。三、實(shí)驗(yàn)試劑及配制1、硫酸錳溶液:稱取520gMnSO4·5H2O或480gMnSO4·4H2O溶于蒸餾水中并稀釋至1000ml。也可用400g2、堿性碘化鉀溶液:稱取500gNaOH和150將兩溶液混合，并稀釋至1000ml。3、濃硫酸密度為1.84的硫酸。4、硫酸(1∶1):不斷攪拌下，緩慢地將濃硫酸沿?zé)诘谷氲润w積的蒸餾水中5、淀粉溶液(0.5%):稱取0.5g可溶性淀粉用少量蒸餾水調(diào)成糊狀，再加入剛煮沸的蒸餾水至100ml，冷卻后加入0.1g水楊酸或0.5g的氯化鋅，以阻止細(xì)菌分解。6、重鉻酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液(1/6K2Cr2O7濃度為0.0100mol/L):將分析純K2Cr2O7在130℃烘干3h，置于干燥器中冷卻后，稱取0.4903g移至1000ml容量瓶并稀釋至刻度，搖勻7、硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(Na2S2O3濃度為0.01mol/L):稱取2.5gNa2S2O3·5H2O，用經(jīng)煮沸冷卻后的蒸餾水溶解，移入到1000ml容量瓶中并稀釋至刻度。加入0.2gNaOH使溶液呈堿性，以減緩Na2S2O3的分解。貯存于棕色試劑瓶中。Na2S2O3溶液的標(biāo)定：吸取25.00mlK2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液與碘量瓶中，加入0.5g碘化鉀并搖動(dòng)使其溶解。加入2ml(1∶1)硫酸溶液，搖勻。加25ml蒸餾水，立即用硫代硫酸鈉溶液滴定至淡黃色，加淀粉溶液1ml，繼續(xù)滴定至藍(lán)色剛好消失并在30s內(nèi)不再出現(xiàn)藍(lán)色為止。按下式計(jì)算Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)確濃度：C(mol/L)=式中C—Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的準(zhǔn)確濃度(mol/L)；V—Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積(ml)；0.0100—K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)；25.00—K2Cr2O7標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積(ml)。四、實(shí)驗(yàn)步驟1、取樣：取250ml溶解氧測(cè)定瓶，用虹吸法注入待測(cè)水樣，并使其外溢約2～3瓶的體積。立即蓋上瓶塞。注入時(shí)導(dǎo)管要插入瓶底，取出導(dǎo)管時(shí)要一邊注水一邊往上提，應(yīng)注意確保瓶內(nèi)無氣泡。取樣時(shí)應(yīng)測(cè)定水溫。2、固定:小心打開瓶塞，加入1.0ml硫酸錳和1.0ml堿性碘化鉀，立即蓋上瓶塞，上下劇烈翻轉(zhuǎn)1min，使之充分混合。加試劑時(shí)，要將移液管的尖端插入水面以下約1cm，任試劑自行流出。此時(shí)瓶中有棕色沉淀生成，水中溶氧越多，顏色越深。3、酸化:沉淀降至中部后，打開瓶塞，加入2ml(1∶1)硫酸溶液，蓋緊瓶塞，上下翻轉(zhuǎn)混合，使沉淀完全溶解，溶液中有I2析出。水中溶解氧越多，析出的碘越多，顏色越深。溶液呈棕色表示溶解氧多，呈淡黃色甚至無色是缺氧的象征。4、滴定:將酸化后的水樣全部轉(zhuǎn)入到250ml的錐形瓶中，用Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1ml0.5%淀粉溶液，搖勻，繼續(xù)滴定至淡黃色，用此溶液洗滌溶解氧測(cè)定瓶，洗滌液再倒回錐形瓶，滴定至藍(lán)色消失。記錄Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積（V）。五、結(jié)果計(jì)算水中溶解氧可由下式計(jì)算：DO(mg/L)=1000式中C——Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度(mol/L)；V——Na2S2O3標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗的體積(ml)；V水樣——溶解氧測(cè)定瓶中水樣的體積(ml)；2.0——溶解氧固定時(shí)加入的MnSO4溶液和堿性KI溶液體積之和(ml)。附錄3水體氨氮測(cè)定（奈氏試劑法）一、方法原理氨氮是指以游離態(tài)的氨和銨鹽形式存在的氮。采用碘化汞鉀的堿性溶液（即奈氏試劑）與氨氮反應(yīng)生成棕色的絡(luò)合物，在420nm波長處，其吸光度與氨氮含量在低于150μmol(N)/L濃度范圍內(nèi)成正比（當(dāng)氨氮含量太高時(shí)，絡(luò)合物逐漸聚集并產(chǎn)生絮狀沉淀）。水樣中的Ca2+、Mg2+和鐵離子與試劑中的強(qiáng)堿產(chǎn)生沉淀對(duì)顯色反應(yīng)的影響，可預(yù)加酒石酸鉀鈉予以避免。本法的最低檢出濃度為2.0μmol(N)/L。儀器及設(shè)備721分光光度計(jì)及配套比色皿(20mm)具塞25ml比色管容量瓶、移液管等常規(guī)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備試劑及其配制無氨純水：1L純水中加入1ml堿性儲(chǔ)備液（15%的NaOH溶液與25%Na2CO3溶液的混合液），然后加熱蒸發(fā)至原體積的一半。酒石酸鉀鈉溶液(30%)：300g酒石酸鉀鈉（KNaC4H4O6·4H2水中，加熱煮沸以驅(qū)除氨，冷卻后以純水稀釋至1000ml。氫氧化鈉溶液(20%)：20gNaOH固體溶于180ml水中，然后再加熱蒸發(fā)至原體積的一半以驅(qū)除氨。奈氏試劑：稱取7gKI和10gHgI2，溶于水中，另稱取16gNaOH，溶于50ml純水中，冷卻至室溫，邊攪拌邊加入上述NaOH，并稀釋至100ml，儲(chǔ)存于棕色瓶中，橡皮塞塞緊，與暗處，可保存一年。氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1000μgN/mL)：準(zhǔn)確稱取3.820g在110℃下干燥1時(shí)的NH4Cl溶于無氨蒸餾水中，轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶中，用無氨蒸餾水稀釋至刻度，加入2ml氯仿固定劑。氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液(10μgN/mL)：移取氯化銨標(biāo)準(zhǔn)貯備液10ml于1000ml容量瓶中用無氨蒸餾水稀釋至刻度。測(cè)定步驟繪制工作曲線取6個(gè)50ml具塞比色管，分別加入0ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液，加無氨蒸餾水至標(biāo)線，混勻。分別加入酒石酸鉀鈉溶液4ml，混勻。分別加入1ml奈氏試劑，混勻后讓其反應(yīng)5分鐘顯色。用分光光度計(jì)在420nm波長處，于比色皿中對(duì)照無氨蒸餾水測(cè)定上述溶液的吸光度E值（其中試劑空白吸光度為E0）。在坐標(biāo)紙上，以吸光度E-E0為縱坐標(biāo)，氨氮濃度為橫坐標(biāo)作圖，得工作曲線。序列號(hào)123456氯化銨標(biāo)準(zhǔn)使用液體積(ml)0.001.002.003.004.005.00氨氮濃度(mgN/L)0.000.200.400.600.801.00吸光度值EE0E-E0水樣的測(cè)定取50ml水樣于比色管中。參照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制過程中的步驟②③④，顯色并測(cè)定該水樣的吸光值E。結(jié)果計(jì)算由水樣的測(cè)定值E-E0查工作曲線，得該水樣中氨氮的含量。附錄4總磷的測(cè)定方法原理天然水中總磷除包括活性磷酸鹽外，還包括以溶解形式和粒狀形式存在的其他無機(jī)磷（如偏磷酸鹽和焦磷酸鹽等）和含磷有機(jī)物。水樣經(jīng)消化后，上述各種形式存在的磷化合物，均轉(zhuǎn)化為能與鉬酸銨—硫酸溶液反應(yīng)的磷酸鹽形式。采用與活性磷酸鹽測(cè)定類似的方法，即可測(cè)得水樣中總磷的濃度。儀器及設(shè)備分光光度計(jì)及配套比色皿具塞25ml比色管電爐、凱氏燒瓶、漏斗、移液管等常規(guī)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備試劑及其配制鉬酸銨溶液(10%)：稱取50g鉬酸銨[(NH4)6Mo7O24·4H5