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觀察洋蔥根尖細胞有絲分裂阿壩師范高等?？茖W校化學化工與生命科學系劉莉娟（3307）觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第1頁

1.學會制作洋蔥根尖細胞有絲分裂裝片一、試驗目標：2.學會識別有絲分裂不一樣時期，并比較各時期特點二、試驗器材洋蔥、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、剪刀、鑷子、清水、吸水紙、滴管、解離液、0.01g/ml龍膽紫溶液觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第2頁二、試驗步驟：成熟區(qū)沒有細胞分裂。伸長區(qū)有少許細胞分裂。分生區(qū)有大量細胞分裂。1.選材：切取洋蔥根尖2~3mm觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第3頁2.解離：根尖解離液解離液=15%鹽酸+95%酒精（1：1混合）3~5分鐘問：解離時間過長或者過短分別會有什么影響？答：解離時間過短造成細胞不分散，易重合；時間太長會解離過分使細胞結(jié)構(gòu)破壞。均不利于觀察。問：解離后細胞是死還是活？答：已被鹽酸殺死，不具備活性。觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第4頁3.漂洗：解離液清水根尖10分鐘漂洗目標是洗去多出鹽酸，預防解離過分和影響染色。（染色劑是堿性）觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第5頁4.染色：清水龍膽紫染液根尖3~5分鐘利用堿性染液可將細胞不一樣結(jié)構(gòu)染成深淺不一顏色，方便于觀察。0.01g/mL龍膽紫染液也能夠用0.02g/mL醋酸洋紅代替。觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第6頁5.制片注意：1.蓋蓋玻片時盡可能不要產(chǎn)生氣泡。2.壓片時力度適中，過重易壓碎根尖、玻片；過輕則不易使細胞分散,不能錯動。用鑷子將根尖取出放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子尖把洋蔥根尖弄碎，蓋上蓋玻片，再加一個載玻片，輕輕擠壓兩個載玻片，使細胞分散。觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第7頁

用顯微鏡觀察細胞有絲分裂各個時期注意：

先低倍鏡，后高倍鏡愛護顯微鏡，尤其是物鏡保護我們目標是分生區(qū)細胞

6.觀察觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第8頁顯微鏡下細胞有絲分裂末期后期中期低倍鏡觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第9頁間期末期中期后期前期高倍鏡觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第10頁想一想、議一議：問：能否觀察到某一個細胞有絲分裂全部過程？為何？答：不能，解離時細胞已被殺死，不能再進行分裂。問：怎樣經(jīng)過觀察裝片來確定一個細胞周期中各個分裂時期長短？答：看裝片中觀察到該時期細胞數(shù)目多少。處于某一時期細胞越多，該時期時間越長。反之越短。觀察洋蔥根尖細胞的有絲分裂專家講座第11頁試驗成功關(guān)鍵：1、解離充分是試驗成功必要條件。2、染色是試驗成功關(guān)鍵步驟。3、制片是試驗成功主要保障。注意：三種濃度：鹽酸是質(zhì)量分數(shù)濃度（15%）、酒精是體積分數(shù)（95%）、染液是質(zhì)量濃度（0.01g/mL龍膽紫或0.02g/mL醋酸洋紅）。

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