微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制專(zhuān)家講座

微生物試驗(yàn)室質(zhì)量控制準(zhǔn)則微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第1頁(yè)質(zhì)量控制相關(guān)定義質(zhì)量控制：滿(mǎn)足質(zhì)量要求操作技術(shù)和活動(dòng)。質(zhì)量確保：為了滿(mǎn)足試驗(yàn)室質(zhì)量要求，制訂對(duì)應(yīng)計(jì)劃，實(shí)施證實(shí)（統(tǒng)計(jì)）所進(jìn)行一系列系統(tǒng)活動(dòng)外部質(zhì)量控制：經(jīng)過(guò)相互校準(zhǔn)和/或檢驗(yàn)對(duì)試驗(yàn)室操作和結(jié)果所進(jìn)行控制內(nèi)部質(zhì)量控制：試驗(yàn)室內(nèi)部采取以對(duì)比分析、跟蹤以及相關(guān)方法，對(duì)試驗(yàn)室工作連續(xù)性控制計(jì)劃。質(zhì)量手冊(cè)：是描述質(zhì)量系統(tǒng)元素文件或文件集合。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第2頁(yè)試驗(yàn)室要求組織：按國(guó)家試驗(yàn)室認(rèn)可概念，是指一個(gè)能夠負(fù)擔(dān)法律責(zé)任實(shí)體。這里所指是試驗(yàn)室（微檢室）內(nèi)建立質(zhì)量管理確保體系。人員房屋滿(mǎn)足檢測(cè)工作需要。設(shè)備微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第3頁(yè)人員要求試驗(yàn)室人員分類(lèi)：管理人員、技術(shù)人員、技術(shù)支持人員等。對(duì)應(yīng)崗位人員，應(yīng)具備對(duì)應(yīng)技術(shù)能力，對(duì)應(yīng)技術(shù)能力證實(shí)（證書(shū)及證件）。微生物檢驗(yàn)室因有對(duì)應(yīng)技術(shù)能力人負(fù)責(zé)室內(nèi)技術(shù)工作。并設(shè)置質(zhì)量監(jiān)督員。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第4頁(yè)房屋條件要求房屋要求：含有適宜、足夠?qū)挻蟆⑼L(fēng)有良好照明。房屋內(nèi)墻面及地等應(yīng)采取易于清潔材料，保持房間清潔。房間設(shè)置，以其開(kāi)展工作內(nèi)容加以分用，設(shè)置專(zhuān)用房間。房間大小還應(yīng)依據(jù)從事試驗(yàn)人員進(jìn)入數(shù)量上加以考慮。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第5頁(yè)環(huán)境設(shè)施要求專(zhuān)用房間溫濕度控制與統(tǒng)計(jì)（樣品存放室）特殊環(huán)境微生物指標(biāo)控制與統(tǒng)計(jì)（無(wú)菌室等）專(zhuān)用工作室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程和定時(shí)檢測(cè)校準(zhǔn)程序。（潔凈室等）特殊環(huán)境中專(zhuān)用設(shè)施質(zhì)量控制應(yīng)符合相關(guān)要求（凈化工作臺(tái)）微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第6頁(yè)環(huán)境設(shè)施相關(guān)技術(shù)指標(biāo)凈化室、凈化工作區(qū)域、潔凈環(huán)境按國(guó)家及部頒標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)?？諝鉂崈舳戎笜?biāo)：檢測(cè)頻率及檢測(cè)方法。一次/月；空氣細(xì)菌檢測(cè)（沉降法）。級(jí)別≥0.5μm塵粒(個(gè)/L)≥5μm塵粒(個(gè)/L)活菌顆粒平均數(shù)(cfu/平板)100≤3.5≤0.0≤1.010000≤350.0≤2.5≤3.0微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第7頁(yè)設(shè)備/儀器要求總則滿(mǎn)足開(kāi)展相關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目標(biāo)要求。制訂相關(guān)設(shè)備/儀器作業(yè)指導(dǎo)書(shū)。設(shè)備/儀器檢定校準(zhǔn)，尤其室新購(gòu)儀器檢定。設(shè)備/儀器分別以送檢、送校、自檢、自校表示其所檢定狀態(tài)。。設(shè)備/儀器運(yùn)行檢驗(yàn)計(jì)劃。設(shè)備/儀器運(yùn)行情況及適用統(tǒng)計(jì)維修后設(shè)備/儀器再校準(zhǔn)或檢驗(yàn)，并含有完整檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第8頁(yè)設(shè)備控制和程序微生物檢驗(yàn)慣用需監(jiān)控設(shè)備和儀器1培養(yǎng)箱（生化培養(yǎng)箱或CO2培養(yǎng)箱等）、干燥箱、高壓滅菌鍋、凈化工作臺(tái)、pH計(jì)、冰箱，（低溫冰箱或冷柜）溫度計(jì)、紫外燈、顯微鏡、離心機(jī)、天平、。2小計(jì)量容器3微生物測(cè)定儀器、微生物檢定儀器、空氣采樣器、酶標(biāo)儀專(zhuān)用等。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第9頁(yè)溫度計(jì)試驗(yàn)室必須要有工作溫度計(jì)和參考溫度計(jì)。工作溫度計(jì)：用于日常溫度檢驗(yàn)。參考溫度計(jì)：用于校正工作溫度計(jì)。溫度計(jì)運(yùn)行檢驗(yàn)：普通可采取一次/六個(gè)月運(yùn)行檢驗(yàn)。日常檢驗(yàn)、校準(zhǔn)檢驗(yàn)、運(yùn)行檢驗(yàn)等都應(yīng)做好對(duì)應(yīng)技術(shù)統(tǒng)計(jì)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第10頁(yè)培養(yǎng)箱、水浴箱和冰箱溫度控制依據(jù)培養(yǎng)物性質(zhì)及溫度要求，培養(yǎng)箱應(yīng)分別設(shè)置（以用途和溫度分）培養(yǎng)箱溫差要求，普通顯示值與實(shí)測(cè)值相差小于±1℃，箱體內(nèi)各點(diǎn)溫差（內(nèi)部溫度均衡性）以及溫度波動(dòng)一樣小于±1℃。溫度監(jiān)控方法：可將工作溫度計(jì)置甘油中，放入待測(cè)箱體內(nèi)，觀察工作溫度計(jì)溫度，最好1-2次/天監(jiān)控統(tǒng)計(jì)，微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第11頁(yè)高壓滅菌鍋溫度控制（一）高壓滅菌鍋；生物指示菌法（慣用）、化學(xué)變色紙片及高壓滅菌鍋溫度計(jì)等方法進(jìn)行檢測(cè)。生物指示菌法是一個(gè)高壓滅菌鍋效果顯示法。高壓滅菌鍋由專(zhuān)員按作業(yè)指導(dǎo)書(shū)操作，并做好每一次作業(yè)統(tǒng)計(jì)。高壓滅菌鍋使用時(shí)，內(nèi)置物品不能太多，單位體積內(nèi)內(nèi)容物（每瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基）不能太多。同時(shí)應(yīng)注意內(nèi)容物不一樣耐受溫度?？偙┞稌r(shí)間最好不要超出45min。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第12頁(yè)高壓滅菌鍋溫度控制（二）高壓滅菌鍋日常工作統(tǒng)計(jì)應(yīng)包含以下信息：高壓滅菌材料、開(kāi)始時(shí)間、壓力/溫度、取出時(shí)間、高壓滅菌膠帶顏色改變（日常慣用無(wú)菌培養(yǎng)代替）高壓滅菌鍋溫度波動(dòng)范圍：110，115和121±2℃。高壓滅菌鍋校準(zhǔn)周期普通在六個(gè)月。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第13頁(yè)干燥滅菌箱溫度控制干燥滅菌箱日常工作統(tǒng)計(jì)中應(yīng)包含以下信息：開(kāi)始時(shí)間、抵達(dá)滅菌溫度時(shí)時(shí)間、取出時(shí)間（或關(guān)閉時(shí)間）。干燥滅菌箱溫度校準(zhǔn)；用參考溫度計(jì)進(jìn)行溫度測(cè)試。干燥滅菌箱溫度要求與準(zhǔn)確度：160±5℃或180±5℃。前者為滅菌2h，后者為30min。干燥滅菌箱校按時(shí)間普通為一年。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第14頁(yè)培養(yǎng)基配制用蒸餾水控制對(duì)于蒸餾水器來(lái)說(shuō)：按設(shè)備說(shuō)明，定時(shí)清潔離子交換器和更換離子交換材料。檢測(cè)要求：西歐標(biāo)準(zhǔn)為微生物檢驗(yàn)用蒸餾水特定電導(dǎo)率＜0.5ms/m；細(xì)菌數(shù)＜50cfu/ml。我們?nèi)諔T用標(biāo)準(zhǔn)為＜10ms/m，未見(jiàn)有細(xì)菌指標(biāo)。檢測(cè)頻率：1次/每個(gè)月。蒸餾水定點(diǎn)供給，并做好對(duì)應(yīng)質(zhì)量控制，統(tǒng)計(jì)檢測(cè)結(jié)果。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第15頁(yè)天平管理天平放置要求：無(wú)振動(dòng)、無(wú)氣流影響及水平臺(tái)面上。天平要有使用及運(yùn)行檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)。天平作為計(jì)量?jī)x器是列入國(guó)家強(qiáng)制檢定范圍，普通1次/年進(jìn)行檢定。運(yùn)行檢驗(yàn)頻率按運(yùn)行計(jì)劃或按產(chǎn)品（天平生產(chǎn)廠家）給出標(biāo)準(zhǔn)重量單位進(jìn)行對(duì)照。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第16頁(yè)容積控制（一）經(jīng)過(guò)一定控制方法，確保高壓滅菌后稀釋劑滿(mǎn)足標(biāo)準(zhǔn)用量。采取稱(chēng)中法來(lái)測(cè)定蒸發(fā)量，體積100ml稀釋劑起重量為101g。高壓夠體積偏差不得超出1%。采取先高壓后定量分裝，可防止因高壓造成體積誤差。對(duì)保留定量液體應(yīng)在使用時(shí)，注意補(bǔ)充容積。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第17頁(yè)容積控制（二）吸管控制：經(jīng)過(guò)小計(jì)量容器校準(zhǔn)，后使用。小計(jì)量容器吸管、容量瓶、量筒等玻璃器皿，校準(zhǔn)周期普通為1-2次/一年。小計(jì)量容器日常使用檢驗(yàn)可每七天進(jìn)行一次，包含容器完整性。并做好對(duì)應(yīng)統(tǒng)計(jì)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第18頁(yè)pH計(jì)pH計(jì)使用前應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校準(zhǔn)。緩沖液使用使用期：PH4.00約1年P(guān)H7.00約6個(gè)月pH9.00約6個(gè)月pH計(jì)維護(hù)：電極外表定時(shí)清洗；電極敏感性檢測(cè)及極性恢復(fù)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第19頁(yè)凈化工作臺(tái)控制水平流凈化工作臺(tái)工作區(qū)域，要求潔凈度為100級(jí)。空氣沉降30min，細(xì)菌數(shù)＜1個(gè)/皿。垂直流凈化工作臺(tái)，細(xì)菌數(shù)＜0.49個(gè)/皿.凈化工作臺(tái)運(yùn)行檢驗(yàn)頻次：1次/月主要是細(xì)菌沉降檢測(cè)。凈化工作臺(tái)高效過(guò)濾膜普通為一年更換一次，并同時(shí)進(jìn)行粒子與細(xì)菌沉降檢測(cè)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第20頁(yè)紫外線燈控制檢測(cè)方法：儀器測(cè)試法和生物測(cè)試法。前者是經(jīng)過(guò)專(zhuān)用儀器檢測(cè)紫外燈管發(fā)射紫外光強(qiáng)度。國(guó)家消毒技術(shù)規(guī)范中表明在距離照射無(wú)1米處，要求其強(qiáng)度為90。生物測(cè)試法：采取一定菌培養(yǎng)物，經(jīng)一定百分比稀釋?zhuān)靠刂圃?00-250個(gè)/0.5ml，涂布平板在紫外燈光下照射，2min，同時(shí)設(shè)置普通光源對(duì)照組，后置37℃48h，計(jì)算其殺滅率。要求殺滅率達(dá)99%。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第21頁(yè)顯微鏡控制顯微鏡應(yīng)制訂作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，日常維護(hù)統(tǒng)計(jì)及自校統(tǒng)計(jì)。顯微鏡應(yīng)置于無(wú)振動(dòng)，防止灰塵，防潮等要求環(huán)境。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第22頁(yè)其它微生物檢測(cè)專(zhuān)用儀器控制細(xì)菌判定儀、酶標(biāo)儀等設(shè)備，工作中慣用陽(yáng)性對(duì)照檢測(cè)其功效正常性。儀器檢定則按相關(guān)部門(mén)檢定或按自校作業(yè)指導(dǎo)書(shū)進(jìn)行。儀器使用登記、校準(zhǔn)計(jì)劃、校準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)等文件存檔。儀器專(zhuān)員使用、操作者應(yīng)取得對(duì)應(yīng)崗位培訓(xùn)合格，持證上崗。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第23頁(yè)培養(yǎng)基質(zhì)量控制正確進(jìn)行培養(yǎng)基質(zhì)量控制，并作為一項(xiàng)經(jīng)常性工作，建立完整檢驗(yàn)資料，是試驗(yàn)室今后經(jīng)過(guò)對(duì)應(yīng)級(jí)別認(rèn)證，在整個(gè)檢驗(yàn)質(zhì)量控制體系中所必須具備文件資料?，F(xiàn)有依據(jù)：衛(wèi)生部1993年公布食品檢驗(yàn)用干燥培養(yǎng)基生產(chǎn)質(zhì)量控制。但這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)不完善。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第24頁(yè)培養(yǎng)基分類(lèi)按其成份分類(lèi)：有天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。按用途分類(lèi)：基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇性培養(yǎng)基、判別培養(yǎng)基及厭氧培養(yǎng)基。按培養(yǎng)基形態(tài)分類(lèi)：液體培養(yǎng)基、流體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基及固體培養(yǎng)基。依據(jù)培養(yǎng)基劑型不一樣分類(lèi)：新鮮配制培養(yǎng)基和干燥培養(yǎng)基兩種。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第25頁(yè)檢驗(yàn)中慣用培養(yǎng)基水質(zhì)檢測(cè)用培養(yǎng)基：7種化裝品檢驗(yàn)用培養(yǎng)基：8種食品檢驗(yàn)用培養(yǎng)基：慣用有37種，110種被列入了GB4789中，其中生化試驗(yàn)培養(yǎng)基23種，普通和專(zhuān)用培養(yǎng)基89種。食品、化裝品及涉水產(chǎn)品等產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目中所用增菌分離培養(yǎng)基有所不一樣，對(duì)于菌種判定所用培養(yǎng)基，各類(lèi)產(chǎn)品分離菌種其判定所用培養(yǎng)基基本相同。

微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第26頁(yè)慣用培養(yǎng)基質(zhì)量控制（一）檢驗(yàn)項(xiàng)目與方法：對(duì)新批號(hào)干燥培養(yǎng)基物理、化學(xué)及生物學(xué)指標(biāo)判定A：感官（外觀）研細(xì)程度和顏色（溶解前后），透明度，雜質(zhì)等；B：PH測(cè)定，按各種培養(yǎng)基要求PH±0.2，蒸餾水PH應(yīng)在6.4-7.0之間。C：生物學(xué)指標(biāo)檢定，被檢培養(yǎng)基對(duì)應(yīng)細(xì)菌生長(zhǎng)率測(cè)試；菌落大小及特征檢測(cè)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第27頁(yè)慣用培養(yǎng)基質(zhì)量控制（二）生長(zhǎng)率測(cè)試：適用與液體和固體培養(yǎng)基：將菌培養(yǎng)液，用生理鹽水做倍比稀釋?zhuān)∵m當(dāng)稀釋度進(jìn)行平板計(jì)數(shù)或接種被檢培養(yǎng)基試管，同時(shí)以按相關(guān)培養(yǎng)基國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)配方新鮮配制培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。不低與10%。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第28頁(yè)慣用培養(yǎng)基質(zhì)量控制（三）菌落大小測(cè)試：劃線分離測(cè)試菌，取10個(gè)菌落測(cè)量直徑大小，其直徑均值與新鮮配制培養(yǎng)基無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第29頁(yè)慣用培養(yǎng)基檢定用標(biāo)準(zhǔn)菌株甲型副傷寒沙門(mén)菌50002傷寒沙門(mén)菌50096乙型副傷寒沙門(mén)茵鴨沙門(mén)茵50083鼠傷寒沙門(mén)氏菌痢疾志賀菌1型5157O福氏志賀菌2大腸埃希菌25922（ATCC）金黃色葡萄球菌25923（ATCC普通變形桿菌肺炎克雷伯菌肺炎亞種弗勞地枸櫞酸桿菌4197綠膿桿菌27853（ATCC）副溶血性弧菌微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第30頁(yè)慣用培養(yǎng)基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

外觀和理化標(biāo)準(zhǔn)：干粉顏色：淡黃色粉末或展現(xiàn)本培養(yǎng)基特有顏色溶解后培養(yǎng)基色澤：清楚透明（含瓊脂除外）淡黃色或特有色澤；滅菌后培養(yǎng)基PH：7.2±2℃為多；個(gè)別弧菌檢驗(yàn)用培養(yǎng)基pH值偏高為：8.0±2℃生物學(xué)指標(biāo)：菌落特征及菌落大小。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第31頁(yè)培養(yǎng)基保留環(huán)境

制成培養(yǎng)基保留環(huán)境為4℃冰箱，如制成平板則用塑料袋包裝置冰箱保留，干燥培養(yǎng)基干粉含有活性物質(zhì)、遇熱易分解物質(zhì)應(yīng)仔細(xì)查看存放條件，多數(shù)也須放在2-8℃條件保留。有培養(yǎng)基則以存放于10-15℃條件為易。如含有高濃度膽鹽培養(yǎng)基。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第32頁(yè)養(yǎng)基制備控制程序

培養(yǎng)基配制所用儀器設(shè)備培養(yǎng)基配制所用儀器設(shè)備必須經(jīng)過(guò)對(duì)應(yīng)判定。配制培養(yǎng)基所用用具及容器配制培養(yǎng)基所用用具及容器必須是清潔或是滅菌，一些特殊不易洗刷清潔玻璃器皿，必要時(shí)可用重鉻酸鉀硫酸清潔浸泡后，取出置5%氫氧化鈉溶液浸泡數(shù)分鐘，再用3%鹽酸溶液進(jìn)行中和，然后用清水沖洗，烘干后備用。培養(yǎng)基配制原料，試劑質(zhì)量控制微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第33頁(yè)培養(yǎng)基配制程序（一）不一樣培養(yǎng)基配制程序有所不一樣，但普通培養(yǎng)基配制程序主要有以下7個(gè)步驟、調(diào)配、融化、矯正pH、澄清過(guò)濾、分裝、滅菌及判定。注意點(diǎn)：配制時(shí)注意各類(lèi)成份用途。pH測(cè)定干燥培養(yǎng)基在工廠生產(chǎn)時(shí)，對(duì)培養(yǎng)基PH進(jìn)行了一定調(diào)試，在實(shí)際工作中，因?yàn)榕渲骗h(huán)境、配制所用溶劑（蒸餾水）PH等條件有所不一樣，都會(huì)對(duì)所用培養(yǎng)基PH要有所影響。所以對(duì)于干燥培養(yǎng)基配制，一樣需要進(jìn)行PH測(cè)驗(yàn)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第34頁(yè)培養(yǎng)基配制程序（二）配制好培養(yǎng)基（尤其是糖發(fā)酵管）不宜久放。，因?yàn)榕囵B(yǎng)培養(yǎng)基吸收空氣中二氧化碳，會(huì)使培養(yǎng)基變酸，從而影響細(xì)菌生長(zhǎng)。培養(yǎng)基中抑制劑及指示劑一定要準(zhǔn)確稱(chēng)量，抑制劑要注意合理配伍。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第35頁(yè)培養(yǎng)基主要原料質(zhì)量控制，

配制培養(yǎng)基主要原料有蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸膏、膽鹽、無(wú)機(jī)鹽和瓊脂等，這些主要原料有劣，直接影響到培養(yǎng)基質(zhì)量，由此也將影響檢驗(yàn)質(zhì)量。指標(biāo)有感官、理化、物理、生物學(xué)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第36頁(yè)培養(yǎng)基相關(guān)試劑質(zhì)量控制培養(yǎng)基相關(guān)試劑質(zhì)量控制及陰、陽(yáng)性對(duì)照菌株試驗(yàn)。對(duì)做生化反應(yīng)各類(lèi)試劑，在配就后均應(yīng)進(jìn)行各項(xiàng)必要判定。用已知陰、陽(yáng)性菌株進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)。對(duì)于其它如氧化酶、觸酶、染色液等也一樣需要經(jīng)判定后用于試驗(yàn)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第37頁(yè)不合格培養(yǎng)基可能原因（一）

干燥培養(yǎng)基結(jié)塊l

培養(yǎng)基過(guò)于陳舊l

培養(yǎng)基處于潮濕環(huán)境中l(wèi)

培養(yǎng)基生產(chǎn)時(shí)水分過(guò)高PH偏離要求值l

培養(yǎng)基過(guò)于陳舊l

配制時(shí)所使用蒸餾水非中性l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第38頁(yè)不合格培養(yǎng)基可能原因（二）培養(yǎng)基不清澈l

使用了劣質(zhì)水l

培養(yǎng)基PH值不對(duì)l

使用了不一樣容器制備l

生產(chǎn)原料精度不夠l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌凝固溫度過(guò)高l

培養(yǎng)基干粉用太多l(xiāng)

瓊脂質(zhì)量發(fā)生了改變微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第39頁(yè)不合格培養(yǎng)基可能原因（三）凝膠強(qiáng)度過(guò)低l

培養(yǎng)基干粉用太少l

培養(yǎng)基未完全溶解l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌l

傾注前未振搖培養(yǎng)基瓶l

瓊脂粉凝固強(qiáng)度較低顏色不對(duì)l

PH不正確（帶指示劑培養(yǎng)基）l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌l

使用了不潔容器制備微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第40頁(yè)不合格培養(yǎng)基可能原因（四）培養(yǎng)基被污染l

培養(yǎng)基滅菌不徹底l

滅菌后存放不妥而污染l

試驗(yàn)時(shí)使用了污染器皿生長(zhǎng)不良l

可能由制備容器設(shè)備、水或樣品帶入抑制物l

樣品中含有亞致死性損傷微生物l

PH不正確l

添加物（抑制劑）等濃度不妥l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌l

試驗(yàn)時(shí)培養(yǎng)基或溶解樣品時(shí)溫度過(guò)高微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第41頁(yè)不合格培養(yǎng)基可能原因（五）過(guò)分生長(zhǎng)l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌，選擇性物質(zhì)受到了破壞l

添加物濃度不妥菌落蔓延l

瓊脂表面過(guò)濕l

使用了過(guò)多接種體積l

培養(yǎng)基過(guò)分滅菌非經(jīng)典生長(zhǎng)l

培養(yǎng)基制備不妥l

干燥培養(yǎng)基存放陳舊l

制備成培養(yǎng)基存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)l

生長(zhǎng)條件不妥（溫度、時(shí)間、氣體）微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第42頁(yè)檢測(cè)質(zhì)量確保

定時(shí)使用有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和次級(jí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（參考物質(zhì)）進(jìn)行內(nèi)部質(zhì)量控制。試驗(yàn)室間比對(duì)或能力驗(yàn)證利用相同或不一樣方法進(jìn)行重復(fù)檢測(cè)對(duì)留存樣品進(jìn)行在檢測(cè)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第43頁(yè)微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法（一）菌落計(jì)數(shù)精密度控制直接計(jì)數(shù)選擇同一標(biāo)本，要求檢驗(yàn)人員進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。將大腸菌（25922）或經(jīng)檢定標(biāo)化菌片，經(jīng)過(guò)適當(dāng)梯度稀釋?zhuān)x擇適當(dāng)稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)試驗(yàn)操作。36±1℃培養(yǎng)24h進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第44頁(yè)微生物檢驗(yàn)質(zhì)控方法（二）菌落計(jì)數(shù)精密度控制重復(fù)計(jì)數(shù)法選擇十個(gè)平板，每個(gè)平板含有適當(dāng)菌落數(shù)（100以?xún)?nèi)）。將平板編號(hào)，由試驗(yàn)人員進(jìn)行計(jì)數(shù)并統(tǒng)計(jì)結(jié)果。去掉平板編號(hào)，將平板置冰箱保留過(guò)夜，次日取出，重新給予編號(hào)，由試驗(yàn)人員重復(fù)計(jì)數(shù)并統(tǒng)計(jì)。計(jì)算每位試驗(yàn)人員每對(duì)結(jié)果平均數(shù)（X）。X=（a+b）/2；相對(duì)誤差（rd）計(jì)算：rd=|a+b|/X×100%。其它試驗(yàn)人員間相對(duì)誤差范圍計(jì)算：先計(jì)算全部試驗(yàn)人員平均菌落數(shù)，X=[Σx]/n，要求每一結(jié)果均應(yīng)在X±18.2%范圍內(nèi)。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第45頁(yè)重復(fù)計(jì)數(shù)要求本身同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差小于7.7%試驗(yàn)人員之間同一平皿重復(fù)計(jì)數(shù)誤差±18.2%本身同一梯度平行加樣兩皿間相對(duì)誤小于7.7%試驗(yàn)人員之間同一梯度計(jì)數(shù)誤差X±18.2%范圍不一樣梯度間菌落計(jì)數(shù)最終誤差小于7.7%微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第46頁(yè)菌種判定質(zhì)控菌種判定質(zhì)控要求，對(duì)所給微生物菌種，按相關(guān)方法及指標(biāo)進(jìn)行生化、血清等方面判定。判定質(zhì)量評(píng)價(jià)：判定程序是否正確；判定方法是否正確；詳細(xì)操作技術(shù)是否熟練，結(jié)果匯報(bào)是否正確。每一項(xiàng)設(shè)置分值為25分。總分為100分。微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第47頁(yè)內(nèi)部質(zhì)量控制推薦頻率菌落計(jì)數(shù)精密度控制：1次/3月；菌種判定控制：1次/六個(gè)月或1年盲樣測(cè)定丟失對(duì)照1次/六個(gè)月微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制第48頁(yè)試驗(yàn)室安全防護(hù)1

培訓(xùn)與告之試驗(yàn)室管理人員及試驗(yàn)人員必須了解相關(guān)工作相關(guān)危險(xiǎn)。對(duì)