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本文格式為Word版,下載可任意編輯——動脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)理及藥物的影響動脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)理及藥物的影響
通過觀測神經(jīng)、體液因素及藥物等對動脈血壓的作用及影響,加深理解動脈血壓作為心血管功能活動的綜合指標(biāo)、及其相對恒定的調(diào)理原理和
重要意義。學(xué)習(xí)大動物試驗(yàn)的基本方法和技術(shù)。
動脈血壓是心血管功能活動的綜合指標(biāo)。正常心、血管的活動在神經(jīng)、體液因素的調(diào)理控制下,保持相對穩(wěn)定,動脈血壓相對恒定。因而通過改變神經(jīng)、體液因素或施加藥物,觀測動脈血壓的變化,以間接反映諸因素對心、血管功能活動的調(diào)理及影響。動脈血壓的相對恒定對于保持各組織、器官正常的血液供應(yīng)和物質(zhì)代謝是極其重要的,動脈血壓的猛烈變化會顯著影響各組織、器官的正?;顒?。當(dāng)動脈血壓大大降低時,會造成組織、器官的血供嚴(yán)重不足,功能障礙,甚至危及生命,此時需要及時救治。
心臟受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)(迷走神經(jīng))的雙重支配。交感神經(jīng)興奮通過其末梢釋放的去甲腎上腺素(norepinepherine,NE)與心肌細(xì)胞膜上的?1受體結(jié)合,引起心率加快、心肌收縮力加強(qiáng),心輸出量增加,血壓升高。迷走神經(jīng)興奮通過其末梢釋放的乙酰膽堿(Acetylcholine,Ach)與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合,引起心率減慢、心房肌收縮力減弱,心輸出量減少,血壓降低。絕大多數(shù)血管受交感神經(jīng)支配。交感縮血管神經(jīng)興奮通過其末梢釋放的NE與血管平滑肌上的?受體結(jié)合,引起血管收縮,循環(huán)外周阻力增大,血壓升高。反之,交感縮血管神經(jīng)的緊張性降低,血管舒張,循環(huán)外周阻力減小,血壓下降。本試驗(yàn)通過切斷、刺激支配心、血管的神經(jīng)以及給藥或體液因素等方法,除可直接觀測心率、心臟收縮力及縮血管效應(yīng)外,還可通過觀測動脈血壓的變化間接了解心、血管活動的變化狀況。
1.動物家兔。
2.器材兔手術(shù)臺、捕綁固定用繩、哺乳類動物手術(shù)器械、紗布、搪瓷碗、盛毛筒、量筒、手術(shù)燈、動脈插管、股動脈插管、動脈夾、血壓換能器、石蠟油、多道生理記錄儀或計算機(jī)記錄分析系統(tǒng)、心電圖記錄導(dǎo)線、雙凹夾、鐵支架、保護(hù)電極、電子刺激器、2ml注射器、5ml注射器、20ml注射器、有色絲線、棉線、20%氨基甲酸乙酯、肝素(1000單位/毫升)、5%檸檬酸鈉、1:1萬腎上腺素、1:
1萬去甲腎上腺素、生理鹽水、1%肝素生理鹽水、0.1%多巴胺、1:10萬異丙腎上腺素、2.5%妥拉唑林、0.1%普萘洛爾。
1.試驗(yàn)裝置計算機(jī)Biolap98軟件系統(tǒng)的使用:開啟計算機(jī),顯示windows桌面。點(diǎn)擊圖標(biāo)“biolap98〞,進(jìn)入BL-310智能型生物信號顯示與處理系統(tǒng)。點(diǎn)擊“可進(jìn)行生理、藥理、毒理、病理等試驗(yàn)〞,進(jìn)入主畫面。點(diǎn)擊菜單“輸入信號〞欄,選擇通道1及標(biāo)Ⅱ?qū)?lián)顯示動物心電,通道2顯示壓力曲線;點(diǎn)擊菜單“顯示方式〞欄,選擇雙通道顯示方式。調(diào)理增益至100左右,時間常數(shù)為“DC〞,濾波用“1kHz〞。
如用多道生理記錄儀,則開啟電源后,校正兩個通道的掃描電壓,并調(diào)理增益至適當(dāng)位置。開啟記錄儀,調(diào)理描筆的位置,校正描筆的搖擺幅度。電子刺激器的準(zhǔn)備開啟電源,選擇“連續(xù)〞刺激方式,波寬為0.5ms,電壓為2~3V,頻率為16Hz。將刺激電極連接于刺激器。
檢查血壓換能器,用石蠟油將其充滿,將換能器三通管與動脈插管的導(dǎo)管相連,將換能器導(dǎo)線與計算機(jī)或多道生理記錄儀相連。
2.準(zhǔn)備動物秤重后,用20%氨基甲酸乙酯按每公斤體重1克的劑量從耳緣靜脈緩慢注入,動物麻醉的標(biāo)志為四肢松軟,角膜反射消失。麻醉后用繩子將動物背位固定于手術(shù)臺上,開啟手術(shù)臺底部的電燈保溫。剪去頸部手術(shù)野的毛以便施行手術(shù)。
3.手術(shù)沿頸部正中線切開皮膚6~7厘米,用止血鉗沿正中線分開皮下組織及肌肉(胸舌骨肌),暴露出氣管。用兩把組織鉗分別夾住氣管兩側(cè)的皮膚和肌肉的邊緣,并將其拉向兩側(cè),即可見到氣管兩側(cè)與氣管平行的左、右頸總動脈及與其相伴而行的一束神經(jīng),這束神經(jīng)中包括迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。由于神經(jīng)被包繞于動脈鞘中,所以應(yīng)防備分開頸動脈鞘,細(xì)心鑒別三條神經(jīng)。迷走神經(jīng)最粗,交感神經(jīng)較細(xì),減壓神經(jīng)最細(xì)且常與交感神經(jīng)緊貼再一起。一般先分開頸總動脈與迷走神經(jīng),然后分開減壓神經(jīng)與交感神經(jīng)。每條神經(jīng)各分開出2~3厘米,并在各神經(jīng)下穿一條不同顏色的絲線以便區(qū)別和使用。右側(cè)頸總動脈下穿一條線備用,左側(cè)頸總動脈用于血壓測量,在其遠(yuǎn)心端(頭端)和近心端各穿一條線備用。
4.插動脈插管插管前先用肝素生理鹽水注滿插管,檢查插管有無破碎,插管尖端是否光滑,不光滑時要用砂紙磨搽。再次鈍性分開左頸總動脈,盡可能長的向頭端分開,然后結(jié)扎動脈頭端。用動脈夾(與動脈垂直并處于水平位置)夾住動脈的近心端,在盡可能長的靠遠(yuǎn)心端處用眼科剪將動脈剪開一斜口,約剪開管徑的一半,然后將動脈插管向心臟方向插入動脈,用已穿好的線結(jié)扎緊插入動脈的插管,并將同一結(jié)扎線固定于插管壁。在插管的適當(dāng)位置固定插管并使其與動脈的走向一致,以防止插管刺破動脈。
向耳緣靜脈內(nèi)注射肝素以抗凝,每公斤體重1000單位。注射后一分鐘左右即可開啟、移去動脈夾,此時即可見血液沖入動脈插管,同時在顯示器上可見有壓力波動圖象,開啟記錄儀可記出壓力搏動曲線。
5.心室搏動觀測裝置將帶有小旗的針灸針于胸骨柄下緣左側(cè)垂直刺入,直至小旗隨心室搏動而搖動為止,說明針尖已刺入心室肌。
6.心電引導(dǎo)將心電引導(dǎo)線與針灸針相連接,然后將針灸針刺入動物各肢體末端并固定,在顯示器上可觀測到心電圖象,作為心率、心律的觀測指標(biāo)。
1.觀測描記正常血壓曲線從正常血壓曲線上可見到三級波:一級波即心跳波,是由于心臟舒縮而引起的血壓波動,與心率及其節(jié)律一致。二級波即呼吸波,是由于呼吸時肺的張縮而引起的血壓波動,與呼吸周期及其節(jié)律一致。一般一個呼吸波中有3~5個心跳波。三級波,不很明顯,有時可明白看到,其原因不完全明白,可能是由于血管運(yùn)動中樞緊張性活動的周期性變化所致。三級波歷時最長,有數(shù)個呼吸波組成。
2.觀測心率及心室收縮強(qiáng)度從心電圖上可確鑿觀測和記數(shù)心率。心室收縮強(qiáng)度可通過觀測針灸針上小旗的搖擺幅度進(jìn)行估計(可設(shè)一個數(shù)值為正常強(qiáng)度,試驗(yàn)時與其比較,給出大約的變化值)。
3.用動脈夾夾閉右頸總動脈15秒鐘,同時觀測、記錄血壓及心率的變化。4.用保護(hù)電極、以適當(dāng)強(qiáng)度和頻率刺激右側(cè)減壓神經(jīng),同時觀測、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。然后用兩條線在減壓神經(jīng)中部結(jié)扎,再于兩結(jié)扎間剪斷。用上述同樣電刺激分別刺激減壓神經(jīng)的中樞端和末梢端,同時觀測、記錄上述各指標(biāo)的變化。
5.先在手術(shù)燈下觀測兩耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度,再結(jié)扎右側(cè)交感神經(jīng),并于結(jié)扎線的末梢端(近心端)剪斷,稍待片刻后再觀測兩耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度的變化。然后用上述電流刺激交感神經(jīng)頭側(cè)端,同時觀測右耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度的變化。
6.用兩條線在右側(cè)迷走神經(jīng)中部結(jié)扎,并于兩結(jié)扎間剪斷,用上述電流分別刺激近心端和頭側(cè)端,觀測、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。7.從耳緣靜脈注入1:1萬的腎上腺素0.3毫升,觀測、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。待完全恢復(fù)后,靜脈注射1:1萬的去甲腎上腺素0.3毫升,并進(jìn)行同樣觀測。
8.從耳緣靜脈注入0.1%多巴胺0.5ml/kg,觀測血壓變化。待血壓恢復(fù)正常后,再注入同樣劑量的多巴胺,隨即注入2.5%妥拉唑林0.3ml/kg,觀測血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。
9.從耳緣靜脈注入1:10萬異丙腎上腺素0.5ml/kg,觀測血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。待血壓等指標(biāo)恢復(fù)正常后,再注入同樣劑量的異丙腎上腺素,隨即注入0.1%普萘洛爾0.5ml/kg,并進(jìn)行同樣觀測。
10.股動脈插管和放血在后肢腹股溝部切開皮膚3~5厘米,用血管鉗分開皮下組織及筋膜,可看到股神經(jīng)、股靜脈和股動脈,股動脈的位置在中間偏后,恰被股神經(jīng)和股靜脈所遮蓋。防備分開出股動脈約2~3厘米,穿線備用。用兩個動脈夾分別夾閉末梢端和近心端,在兩個動脈夾之間剪一斜口,向近心端方向插入股動脈插管,并結(jié)扎固定;插管所連導(dǎo)管的末端置于量杯中,為防止血液凝固,可在量杯中參與少許5%檸檬酸鈉或肝素。待準(zhǔn)備就緒,松開近心端動脈夾(不要移去)開始放血,同時密切觀測血壓變化,當(dāng)血壓降至原水平的50%上下或出現(xiàn)休克現(xiàn)象時,即中止放血,同時觀測、記錄血壓、心率和心室
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