無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測

傳統(tǒng)唐氏產(chǎn)前篩查體系存在的問題無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測產(chǎn)品知識無創(chuàng)產(chǎn)前檢測流程及注意事項主要內(nèi)容第一頁，共47頁。傳統(tǒng)唐氏產(chǎn)前篩查體系存在的問題無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測產(chǎn)品知識無創(chuàng)產(chǎn)前檢測流程及注意事項主要內(nèi)容第二頁，共47頁。臨床常見染色體非整倍體疾病第三頁，共47頁。唐氏綜合征即21-三體綜合征，又稱先天

愚型，是一種染色體疾病，在

我國發(fā)病率600-800分之一，

在新生兒染色體疾病中，唐氏

兒占95%左右；主要臨床癥狀：智力低下、五

官異常、生長發(fā)育遲緩、伴有

多系統(tǒng)畸形。迄今為止，醫(yī)學上尚無有

效的治療手段。據(jù)統(tǒng)計，每年新增唐氏綜合征患兒約26600例。目前，我國唐氏患者總計約60萬。第四頁，共47頁。精子或卵細胞形成過程中，若21號染色體不分離，將產(chǎn)生21-三體受精卵，導致唐氏綜合征。精子卵子精子卵子21-三體受精卵發(fā)病機理精卵結(jié)合健康夫婦也會生出唐氏兒！第五頁，共47頁。年齡與發(fā)病風險任何年齡的孕婦，都可能生育唐氏兒！6第六頁，共47頁。我國現(xiàn)行唐氏篩查與預(yù)防模式

產(chǎn)前篩查（唐篩）

母血清學篩查超聲頸部透明帶（NT）篩查

產(chǎn)前診斷

羊水穿刺絨毛取樣

臍靜脈穿刺風險評估產(chǎn)前診斷（行業(yè)金標準）5%假陽性率40%漏診存在一定流產(chǎn)風險第七頁，共47頁。全國婦幼衛(wèi)生檢測辦公室的調(diào)查顯示：2007－2009年全國產(chǎn)篩4097801人，

其中，21三體高風險176130人，占4.23%；而接受產(chǎn)前診斷的93504人，約53.08%，即46.92%拒絕接受產(chǎn)前診斷；確診為21三體胎兒6679例，僅7.14%，即接受產(chǎn)前診斷的人群中92.86%被高危了(假陽性);現(xiàn)行傳統(tǒng)唐氏篩查體系存在的問題第八頁，共47頁?，F(xiàn)行傳統(tǒng)唐氏篩查體系存在的問題被高危漏篩

漏診第九頁，共47頁。傳統(tǒng)唐氏產(chǎn)前篩查技術(shù)并不能達到最終消除唐氏綜合征的目的！孕婦被高危情況嚴重，導致大量被高危孕婦及其家庭承受著不必要的沉重精神負擔！現(xiàn)行傳統(tǒng)唐氏篩查體系存在的問題第十頁，共47頁。傳統(tǒng)唐氏產(chǎn)前篩查體系存在的問題無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測產(chǎn)品知識無創(chuàng)產(chǎn)前檢測流程及注意事項主要內(nèi)容第十一頁，共47頁。發(fā)展歷程無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)1997年，香港中文大學盧煜明教授發(fā)現(xiàn)孕

婦外周胎兒游離DNA存在，經(jīng)十幾年的持續(xù)

的研究，2008年，首次利用高通量測序技術(shù)

在實驗室中首次實現(xiàn)唐氏綜合征檢測；2009到2011年間，全球多家機構(gòu)進行了大

量的臨床試驗研究；2010年底，國內(nèi)率先將無創(chuàng)產(chǎn)前檢測推廣

到臨床應(yīng)用中；2011年底，廣東省率先將“胎兒21－三體綜

合征基因檢測篩查”（250700010－2）項目

列入省醫(yī)療服務(wù)價格項目；第十二頁，共47頁。胎兒游離DNA特征母體外周血的游離胚胎DNA幾乎全部來源于絨毛層；懷孕4周可檢出，8周后含量上升并穩(wěn)定存在；胚胎DNA片段比較小，長度在75bp和250bp之間；母體外周血中的胚胎DNA含量在5%到30%之間。孕周越大外周血中胚胎DNA的含量越高；胎兒游離DNA半衰期短，產(chǎn)后2h即消失。無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)第十三頁，共47頁。是一項基于高通量測序和生物信息分析技術(shù)的新型唐氏綜合征產(chǎn)前篩技術(shù)；僅需10ml孕婦靜脈外周血；即可準確地判斷胎兒是否患有21-三體綜合征（唐氏綜合征）、18-三體綜合征（愛德華氏綜合征）、13-三體綜合征（帕陶氏綜合癥）；準確率99.9%以上；無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)第十四頁，共47頁。評估風險模型（Z值）

正常孕婦的z值

介于-3和+3之間；z值大于3的樣品

則判定染色體三

體；

z值的大小與血漿

中胎兒游離DNA

含量有關(guān)；第十五頁，共47頁。臨床雙盲試驗結(jié)果

截止2013年1月4日，共收集359例孕婦外周血，利用無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)，檢測全部樣本，發(fā)現(xiàn)316例正常胎兒，27例21三體，12例18三體，4例13三體，解盲后與核型結(jié)果完全一致。統(tǒng)計分析顯示，該技術(shù)的檢出率100%，陽性預(yù)測值100%，假陰性率和假陽性率均為0?？蓽蚀_地判斷胎兒是否患有21-三體綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征等染色體數(shù)目異常疾病。無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)第十六頁，共47頁。技術(shù)優(yōu)點

安全：僅需抽取孕婦靜脈血，不傷及胎兒，不導致流產(chǎn)

準確：準確率高達99.9%以上

早期：孕12周以上即可檢測，最佳檢測孕周為12~24周快速：采血后，10個工作日即可出具檢測報告無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)第十七頁，共47頁。截止9月18日，累計檢測樣本數(shù)為10027例，檢測三體陽性169例，其中，21-三體103例，18-三體25例，13-三體6例，其它異常35例；經(jīng)隨訪及核型結(jié)果比對，暫未發(fā)現(xiàn)假陰性報告，陽性預(yù)測值100%；檢測報告時間：采血后，平均檢測周期5個工作日；無創(chuàng)項目推廣情況第十八頁，共47頁。中國母胎醫(yī)學大會2013年4月，衛(wèi)生部全國產(chǎn)前診斷技術(shù)專家組成員邊旭明教授在《產(chǎn)前診斷---走中國自己的路》講演中評價“無創(chuàng)產(chǎn)前檢測技術(shù)——近似于診斷的篩查、結(jié)果明確的篩查”。

截止目前，國內(nèi)有600多家醫(yī)院已開展無創(chuàng)產(chǎn)前檢測項目，數(shù)十萬人接受了此項目檢測；產(chǎn)前診斷技術(shù)專家組高度評價無創(chuàng)產(chǎn)前檢測無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)第十九頁，共47頁。2014年北京地區(qū)圍產(chǎn)醫(yī)學學術(shù)年會邊旭明教授再次對無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測技術(shù)進行肯定，認為NIPT時代已經(jīng)到來。第二十頁，共47頁。美國ACOG與SMFM聯(lián)合推薦無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)用于胎兒染色體非整倍體檢測2012年11月20日，美國婦產(chǎn)科學會（ACOG）與美國母胎醫(yī)學會（SMFM）共同發(fā)表委員指導意見，若有以下適應(yīng)癥，可推薦使用無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測作為非整倍體高危人群的篩查：母親年齡超過35歲的超聲結(jié)果顯示非整倍體高危的生育過三體患兒的早孕期、中孕期或三聯(lián)篩查、四

聯(lián)篩查呈現(xiàn)非整倍體陽性結(jié)果的。。。。。第二十一頁，共47頁。國際產(chǎn)前診斷協(xié)會指導意見2013年4月，國際產(chǎn)前診斷協(xié)會（ISPD）針對胎兒非整倍體產(chǎn)前篩查發(fā)表指導意見，列舉了數(shù)個無創(chuàng)產(chǎn)前臨床實驗的檢測結(jié)果。第二十二頁，共47頁。加拿大婦產(chǎn)科醫(yī)師協(xié)會，2013年2月針對母親血漿中游離DNA進行無創(chuàng)產(chǎn)前檢測21,18和13三體發(fā)表專家共識與指導意見，建議NIPT檢測應(yīng)當適用于胎兒21、18、13-三體高風險人群，該技術(shù)針對唐氏綜合征的檢出率接近100%，假陽性率低于1%。第二十三頁，共47頁。日本的婦產(chǎn)科醫(yī)師協(xié)會，2013年3月日本婦產(chǎn)科協(xié)會發(fā)表無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測的指南及聲明，推薦將無創(chuàng)DNA產(chǎn)前檢測作為非整倍體高風險人群的初篩檢測。并強調(diào)了遺傳咨詢以及患者知情同意原則的重要性。

意大利母胎醫(yī)學協(xié)會，2013年5月針對無創(chuàng)產(chǎn)前檢測（NIPT）這一新技術(shù)發(fā)表行業(yè)學會聲明，認為NIPT檢測是一種可選擇的篩查方案時，可區(qū)分高危人群和低危人群

第二十四頁，共47頁。2014年2月27日，新英格蘭醫(yī)學雜志刊發(fā)表了《DNA測序技術(shù)與常規(guī)產(chǎn)前染色體非整倍體疾病篩查技術(shù)的比較》。結(jié)果證實，無創(chuàng)產(chǎn)前檢測技術(shù)不僅對于高危孕婦可精確檢測，且對一般孕婦檢測的假陽性率顯著低于常規(guī)產(chǎn)前檢測技術(shù)，而陽性預(yù)測值測顯著地高于常規(guī)技術(shù)。第二十五頁，共47頁。2014年3月14

日英國皇家婦產(chǎn)科醫(yī)師學會發(fā)表了第15號科學影響性文件

（Scientific

Impact

Paper

No.15），對NIPT這一臨床新技術(shù)進行了評估，并針對將NIPT納入英國國家醫(yī)療服務(wù)體系（NHS），提供了備選方案與建議。這份文件可以算是歐洲第一個針對NIPT臨床應(yīng)用的指導性文件，由胎兒畸形篩查項目（Fetal

Anomaly

Screening

Programme，F(xiàn)ASP）指導委員會的前任主席Soothill教授和游離胎兒DNA發(fā)現(xiàn)者盧煜明教授撰寫。第二十六頁，共47頁。傳統(tǒng)唐氏產(chǎn)前篩查體系存在的問題無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測技術(shù)無創(chuàng)產(chǎn)前檢測流程及注意事項主要內(nèi)容第二十七頁，共47頁。臨床應(yīng)用及注意事項無創(chuàng)產(chǎn)前檢測基本流程簽訂知情同意書產(chǎn)前檢測咨詢繳費樣本處理與物流領(lǐng)取采血管抽血實驗檢測出具檢測報告①②④③⑤⑥⑦⑧報告解讀⑨第二十八頁，共47頁。采血前，孕婦必須先簽署無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測送檢單/知情同意書，三聯(lián)，金域公司、醫(yī)院、孕婦分別保存后附中國平安保險知情同意書及至客戶一封信兩聯(lián)知情同意原則經(jīng)治醫(yī)生也要在知情同意書上簽名！第二十九頁，共47頁。第三十頁，共47頁。受檢對象基本要求：單胎妊娠，非雙胎或多胎孕婦；孕12~24

周；采血量:采取孕婦靜脈血10ml，無需空腹；孕周超過24周的孕婦，可能出現(xiàn)：在得到檢測報告之前分娩，或得到陽性或高風險檢測結(jié)果后引產(chǎn)困難。若拒絕重新抽血，則無法出具檢測報告，一切后果由孕婦本人承擔。孕婦本人為傳染性疾病患者無法進行進一步產(chǎn)前診斷臨床應(yīng)用及注意事項第三十一頁，共47頁。檢測目標疾病種類目前，金域無創(chuàng)產(chǎn)前項目針對的疾病種類：

唐氏綜合征（21-三體綜合征）愛德華氏綜合征（18-三體綜合征）帕陶氏綜合癥（13-三體綜合征）該檢測結(jié)果不作為最后診斷結(jié)果，如檢測結(jié)果為高風險，建議孕婦進行遺傳咨詢并使用羊膜腔、臍帶血穿刺術(shù)等介入產(chǎn)前診斷方法進一步確診；若拒絕接受遺傳咨詢及進一步診斷的，或因孕婦本身為傳染性疾病患者而無法進行進一步介入產(chǎn)前診斷的，接診及檢測機構(gòu)不承擔由此引起的責任和風險。臨床應(yīng)用及注意事項

三種胎兒染色體非整倍體疾病第三十二頁，共47頁。適用人群產(chǎn)前篩查結(jié)果為高風險的孕婦夫妻任何一方年齡大于30歲的孕婦有不明原因自然流產(chǎn)史、死胎或畸胎史的孕婦不適合侵入性產(chǎn)前診斷的孕婦（如胎盤前置、孕囊低置、羊水過少等）患某些慢性病或傳染病的孕婦（如乙肝病毒攜帶或感染弓形蟲等）RH陰性血型需要進行侵入性產(chǎn)前診斷的孕婦心理壓力過大不能承受侵入性產(chǎn)前診斷的孕婦此技術(shù)適用于所有孕12-24周的單胎孕婦，尤其適合于：注：對于胚胎移植的單胎孕婦，建議檢測孕周為16周以上！第三十三頁，共47頁。不適宜檢測的疾病胎兒患21號、18號、13號染色體中的嵌合體型、易位型、微缺失、微重復、部分單體、部分三體、部分四體等異常導致的疾?。黄渌叭旧w異?！?、“基因組異常”、“基因突變”所致的遺傳??；由環(huán)境因素所引起的智力障礙、畸形等疾病。第三十四頁，共47頁。不適于檢測的人群懷有多胞胎的孕婦；孕婦本人為染色體異?；颊?；孕婦接受過移植手術(shù)、干細胞治療；孕婦在4周之內(nèi)接受過免疫治療；孕婦在一年之內(nèi)輸注過異體血制品。第三十五頁，共47頁。有關(guān)重抽血情況原因主要：血漿中胎兒游離DNA含量過低，導致檢測失敗；主要導致因素：因個體差異、孕周推測不準或孕周過?。▽嶋H孕周<12周）；重抽血率：0.5~1%若出現(xiàn)重抽血的情況，貴州金域客服中心或駐院人員將及時告知院方，并及時通知孕婦重抽血。第三十六頁，共47頁。檢測結(jié)果陽性處理方式該檢測結(jié)果不作為最后診斷結(jié)果，若檢測結(jié)果為陽性或高風險，建議孕婦必須接受進一步產(chǎn)前診斷確診，該診斷費用將由保險公司報銷，每人最高不超過2500元第三十七頁，共47頁。檢測結(jié)果假陰性處理為每位接受無創(chuàng)產(chǎn)前胎兒DNA檢測的孕婦免費提供價值40萬元的保險。

中國平安保險第三十八頁，共47頁。采血要求1)采血量：采孕12周至24周單胎婦靜脈

血10ml，切勿過多或過少。2)采血后，立即輕柔顛倒混合8-10次，

使血液與采血管中保護劑充分混均。10ml第三十九頁，共47頁。注意事項抽血時防倒流：管內(nèi)含有化學保護劑，使用時謹防化學保護劑倒流！以下操作能防止倒流的發(fā)生：--采血時，病人或孕婦的手臂應(yīng)朝下。--握住采血管，始終保持采血管的管蓋朝上。--采血時，管內(nèi)的化學物禁止與管蓋或采血針的針尖接觸。(b)采血后，立即輕柔顛倒8-10次，使血液與管內(nèi)保護劑充分混均，否則將影響檢測準確度。第四十頁，