章十微生物的分類(lèi)和鑒定

第一節(jié) 通用分類(lèi)單元一、種以上的系統(tǒng)分類(lèi)單元界Kingdom門(mén)Phylum（或Division）——亞門(mén)綱Class——亞綱 ——超目 目Order——亞目 科Family——亞科 ——族 ——亞族 屬Genus 種Species必要時(shí)可添加“亞”、“超”、“族”當(dāng)前1頁(yè)，總共76頁(yè)。種的概念種的定義：種是一個(gè)基本分類(lèi)單位，是一大群表型特征高度相似、親緣關(guān)系極其接近、與同屬內(nèi)其他種有明顯差異的菌株的總稱(chēng)。在微生物中，一個(gè)種只能用該種內(nèi)的一個(gè)典型菌株作為具體標(biāo)本，它就是該種的模式種。新種：sp.nov.或nov.sp.，新被鑒定的種，在以往權(quán)威性的分類(lèi)、鑒定手冊(cè)中從未記載過(guò)的微生物。發(fā)表時(shí)應(yīng)在其學(xué)名后標(biāo)上sp.nov.的符號(hào)，新種發(fā)表前應(yīng)將其模式菌株的培養(yǎng)物應(yīng)存放在一個(gè)永久性的保藏機(jī)構(gòu)中，并應(yīng)允許人們從中取得。當(dāng)前2頁(yè)，總共76頁(yè)。種的分類(lèi)地位舉例當(dāng)前3頁(yè)，總共76頁(yè)。二、微生物的學(xué)名學(xué)名：菌種的科學(xué)名稱(chēng)。菌種的學(xué)名是按照《國(guó)際細(xì)菌命名法規(guī)》命名的國(guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)，并通用的名稱(chēng)。命名原則：學(xué)名=屬名+種的加詞+（首次定名人）+現(xiàn)名定名人和鮮明定名年份規(guī)定與常識(shí)：屬名應(yīng)大寫(xiě)首字母、單數(shù)、可以組合外而成。種的加詞代表一個(gè)種的次要特征，首字小寫(xiě)當(dāng)前4頁(yè)，總共76頁(yè)。(一)雙名法當(dāng)前5頁(yè)，總共76頁(yè)。(二)三名法在少數(shù)情況下，當(dāng)某種是一個(gè)亞種（subspecies，簡(jiǎn)稱(chēng)“subsp．”，排正體字）或變種*（variety，簡(jiǎn)稱(chēng)“var．”，排正體字）時(shí)，學(xué)名就應(yīng)按“三名法”構(gòu)成。當(dāng)前6頁(yè)，總共76頁(yè)。(三)有關(guān)學(xué)名的其它知識(shí)1.屬名2.種名加詞3.學(xué)名的發(fā)音當(dāng)前7頁(yè)，總共76頁(yè)。1.屬名當(dāng)前8頁(yè)，總共76頁(yè)。2.種名加詞當(dāng)前9頁(yè)，總共76頁(yè)。3.學(xué)名的發(fā)音當(dāng)前10頁(yè)，總共76頁(yè)。三、亞種以下的幾個(gè)分類(lèi)單元（一）亞種（二）變種（三）型（四）菌株/品系/毒株當(dāng)前11頁(yè)，總共76頁(yè)。（一）亞種是一種進(jìn)一步細(xì)分種時(shí)所用的單元。一般指除了某一明顯而穩(wěn)定的特征外，其余鑒定特征與模式種相同的種。命名方法按“三名法”（二）變種是亞種的同義詞。不主張?jiān)儆?。（三）型作若干菌株變異型的后綴。當(dāng)前12頁(yè)，總共76頁(yè)。（四）菌株/品系/毒株/株任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞（或單個(gè)病毒）繁殖而成的遺傳型上純的群體及其后代叫菌株。同一菌種的不同菌株間，主要性狀相同，但一些生理生化性狀卻存在差異；菌株是物種內(nèi)遺傳多樣性的客觀反映，其數(shù)目是無(wú)數(shù)的；菌株與克隆概念相同；某一菌株發(fā)生穩(wěn)定變異的后代需要重新命名；菌株的確定：實(shí)驗(yàn)室可以自己命名。EscherichiacoliK12,E.coliO-157：H7當(dāng)前13頁(yè)，總共76頁(yè)。亞種以下的分類(lèi)單元亞種（subspeciers）：種的進(jìn)一步細(xì)分，一般指其某一民而穩(wěn)定的特征與模式中不同的種常在種名、署名的加詞后寫(xiě)上subsp.然后再寫(xiě)具體亞種的加詞；變種（variety）：容易引起混亂；型form：使用中用型作為后綴；表示細(xì)菌菌株，現(xiàn)已作廢；類(lèi)群（group）：沒(méi)有分類(lèi)地位非正式地指定一組具有某些共同性狀的生物；菌株（strain）：表示任何由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞繁殖而成的純種群體極其一切后代；實(shí)際上是一個(gè)微生物達(dá)到遺傳性純的標(biāo)志。小種（race）：涵義較亂，在不同分支學(xué)科中由不同涵義；相（phase）：自然界存在的微生物交互變異的一定階段；態(tài)（state）：通常指微生物的菌落變異狀態(tài)。當(dāng)前14頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前15頁(yè)，總共76頁(yè)。一、生物的界級(jí)分類(lèi)學(xué)說(shuō)二、三域?qū)W說(shuō)及其發(fā)展第二節(jié) 微生物在自然界的地位當(dāng)前16頁(yè)，總共76頁(yè)。第二節(jié) 微生物在自然界的地位生物的界級(jí)分類(lèi)學(xué)說(shuō)：是在認(rèn)識(shí)發(fā)展過(guò)程中存在的對(duì)生物分類(lèi)的不同階段的不同觀點(diǎn)。如：二界系統(tǒng)、三界系統(tǒng)、四界系統(tǒng)、五界系統(tǒng)、六界系統(tǒng)和三原界系統(tǒng)三原界系統(tǒng)是1978年由R.H.Whittaker和L.Margulis提出的。所有生物存在一個(gè)共同祖先，由它分三條進(jìn)化路線，就形成了三個(gè)原界：古細(xì)菌原界（Archaebacter）、真細(xì)菌原界、真核生物原界提出了內(nèi)共生學(xué)說(shuō)，主要是Margulis的貢獻(xiàn)當(dāng)前17頁(yè)，總共76頁(yè)。三原界系統(tǒng)示意圖當(dāng)前18頁(yè)，總共76頁(yè)。一、生物的界級(jí)分類(lèi)學(xué)說(shuō)1.二界系統(tǒng)2.三界系統(tǒng)3.五界系統(tǒng)當(dāng)前19頁(yè)，總共76頁(yè)。生物界級(jí)學(xué)說(shuō)發(fā)展的示意圖。陰影部分指微生物。當(dāng)前20頁(yè)，總共76頁(yè)。1.二界系統(tǒng)：1753Linnaeus標(biāo)準(zhǔn)：取食方式、光和作用、運(yùn)動(dòng)性、細(xì)胞壁

動(dòng)物界植物界當(dāng)前21頁(yè)，總共76頁(yè)。2.三界系統(tǒng)：1866Heackel新物種的發(fā)現(xiàn)，如細(xì)菌有壁、無(wú)光合作用動(dòng)物界植物界原生生物界—原始或古老的生命形式、單細(xì)胞及無(wú)核類(lèi)當(dāng)前22頁(yè)，總共76頁(yè)。3.五界系統(tǒng)：1969（Whittaker）原生生物界(Protista)：?jiǎn)渭?xì)胞藻類(lèi)、原生動(dòng)物、粘菌真菌界(Fungi)：真菌、酵母菌原核生物界(Monera)：細(xì)菌、藍(lán)細(xì)菌植物界(Plantae)動(dòng)物界（Animalia）當(dāng)前23頁(yè)，總共76頁(yè)。原核生物真核單細(xì)胞生物真核多細(xì)胞生物光合營(yíng)養(yǎng)吸收式營(yíng)養(yǎng)攝食式營(yíng)養(yǎng)當(dāng)前24頁(yè)，總共76頁(yè)。導(dǎo)管植物綠藻門(mén)苔蘚植物子囊菌門(mén)擔(dān)子菌門(mén)接合菌門(mén)粘菌節(jié)肢動(dòng)物脊椎動(dòng)物肉足蟲(chóng)孢子蟲(chóng)甲藻金藻門(mén)細(xì)菌藍(lán)藻原核生物界原生生物界動(dòng)物界真菌界植物界當(dāng)前25頁(yè)，總共76頁(yè)。二、三域?qū)W說(shuō)及其發(fā)展1980（Woese）16sRNA共同的祖先古細(xì)菌域：產(chǎn)甲烷細(xì)菌、極端嗜鹽菌、極端嗜酸熱菌真細(xì)菌域：除古細(xì)菌原界以外的細(xì)菌真核生物域：原生生物、真菌、動(dòng)物、植物當(dāng)前26頁(yè)，總共76頁(yè)。嗜熱菌真細(xì)菌原界紫色細(xì)菌G+細(xì)菌綠色非硫細(xì)菌藍(lán)細(xì)菌黃桿菌極端嗜鹽菌甲烷細(xì)菌極端嗜酸熱菌動(dòng)物纖毛蟲(chóng)真菌植物鞭毛蟲(chóng)微孢蟲(chóng)原始祖先RNA?真核原界古細(xì)菌原界當(dāng)前27頁(yè)，總共76頁(yè)。內(nèi)共生假說(shuō)現(xiàn)今一切生物都有一個(gè)共同的遠(yuǎn)祖進(jìn)化而來(lái)。小細(xì)胞先分化出細(xì)菌和古生菌。古生菌分支上的細(xì)胞喪失細(xì)胞壁后，先后吞噬了α變形細(xì)菌（相當(dāng)于G-細(xì)菌）和藍(lán)細(xì)菌，并形成了內(nèi)共生，從而使兩者進(jìn)化成與宿主細(xì)胞難分難解的細(xì)胞器—線粒體和葉綠體，于是宿主最終也就發(fā)展成了各類(lèi)真核生物。當(dāng)前28頁(yè)，總共76頁(yè)。三域?qū)W說(shuō)及其生物進(jìn)化譜系樹(shù)當(dāng)前29頁(yè)，總共76頁(yè)。促使人們提出三原界學(xué)說(shuō)的最重要原因是具有一系列獨(dú)特性狀的曾稱(chēng)作“第三生物”的古細(xì)菌的發(fā)現(xiàn)。與真細(xì)菌相比，古細(xì)菌有以下幾個(gè)特點(diǎn)：

（1）細(xì)胞膜的類(lèi)脂特殊古細(xì)菌所含的類(lèi)脂是不可皂化的。其中的中性類(lèi)脂以類(lèi)異戊二烯（isoprenoid）類(lèi)的烴化物為主，極性類(lèi)脂則以植烷甘油醚（phytanylglycerolethers）為主。（2）細(xì)胞壁成分獨(dú)特而多樣有的以蛋白質(zhì)為主，有的含雜多糖，有的類(lèi)似于肽聚糖（“假肽聚糖”），但不論是何種成分，它們都不含胞壁酸、D型氨基酸和二氨基庚二酸。（3）核糖體的16SrRNA其核苷酸順序獨(dú)特，既不同于真細(xì)菌，也不同于真核生物。（4）tRNA成分其核苷酸順序也很特殊，且不存在胸腺嘧啶。（5）蛋白質(zhì)合成的起始密碼始于甲硫氨酸，與真核生物相同。（6）對(duì)抗生素等的敏感性對(duì)那些作用于真細(xì)菌細(xì)胞壁的抗生素如青霉素、頭孢霉素和D-環(huán)絲氨酸等不敏感；對(duì)真細(xì)菌的轉(zhuǎn)譯有抑制作用的氯霉素不敏感；對(duì)真核生物的轉(zhuǎn)譯有抑制作用的白喉毒素卻十分敏感。（7）生態(tài)條件獨(dú)特有的是嚴(yán)格厭氧菌，如產(chǎn)甲烷菌（metnanogens）；有的是極端嗜鹽菌（extremehalophiles）；有的則是嗜熱嗜酸菌當(dāng)前30頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前31頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前32頁(yè)，總共76頁(yè)。第三節(jié)各大類(lèi)微生物的分類(lèi)系統(tǒng)綱要一、Bergey原核生物分類(lèi)系統(tǒng)綱要二、Ainsworth的真菌分類(lèi)系統(tǒng)綱要當(dāng)前33頁(yè)，總共76頁(yè)。各大類(lèi)微生物的分類(lèi)系統(tǒng)綱要原核生物分類(lèi)系統(tǒng)綱要——伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)真菌界分類(lèi)系統(tǒng)很多，各國(guó)采用不同的系統(tǒng)，比較混亂。近年來(lái)為較多人接受的是Ainsworth的綱要。當(dāng)前34頁(yè)，總共76頁(yè)。一、Bergey原核生物分類(lèi)系統(tǒng)綱要《伯杰氏鑒定細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》1sted,1923；8thed,1974,15個(gè)國(guó)家、130多位科學(xué)家參與撰寫(xiě)；9thed,1994;其不同版本代表了出版時(shí)的細(xì)菌分類(lèi)的最新成果。70年代以來(lái)該書(shū)所提出的分類(lèi)系統(tǒng)已被各國(guó)學(xué)術(shù)界普遍采納。大量的分子生物學(xué)資料的采用似的原核分類(lèi)已從以往的以表型、實(shí)用性鑒定指標(biāo)為主的舊體系向以遺傳型為基礎(chǔ)的系統(tǒng)進(jìn)化分類(lèi)新體系逐漸轉(zhuǎn)變。當(dāng)前35頁(yè)，總共76頁(yè)。

《伯杰氏系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》1sted,1984-1989,分為4卷；是在《伯杰氏鑒定細(xì)菌手冊(cè)》8thed的基礎(chǔ)之上增加了大量的分子生物學(xué)資料。但由于當(dāng)時(shí)細(xì)菌系統(tǒng)發(fā)育的資料仍較零碎，所以有相當(dāng)一部分類(lèi)群未能科目級(jí)別分類(lèi)，從實(shí)際需要出發(fā)，主要根據(jù)表型特征將整個(gè)原核生物分為33組，33個(gè)組的劃分見(jiàn)表。國(guó)際上最為流行的版本。微生物分類(lèi)技術(shù)和學(xué)術(shù)理論的發(fā)展促進(jìn)了生物科學(xué)的進(jìn)步。2eded,2000開(kāi)始出版，分為5卷，提出完整的系統(tǒng)分類(lèi)，將原核生物分為：古細(xì)菌界（2門(mén)、5組、8綱、11目、17科、63屬、208種）；細(xì)菌界：（16門(mén)、26組、27綱、62目、163科、814屬、4727種）；反映了人們對(duì)生物系統(tǒng)發(fā)育的深刻認(rèn)識(shí)。當(dāng)前36頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前37頁(yè)，總共76頁(yè)。二、Ainsworth等人的菌物分類(lèi)系統(tǒng)綱要

（用菌物代替以往的真菌）

目前廣為接受Ainsworth第7版的分類(lèi)系統(tǒng)及第八版菌物界當(dāng)前38頁(yè)，總共76頁(yè)。Ainsworth等人的菌物分類(lèi)系統(tǒng)綱要

當(dāng)前39頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前40頁(yè)，總共76頁(yè)。第四節(jié)微生物分類(lèi)鑒定的方法一、微生物分類(lèi)鑒定的經(jīng)典方法二、微生物分類(lèi)鑒定中的現(xiàn)代方法當(dāng)前41頁(yè)，總共76頁(yè)。微生物的鑒定主要步驟：純化、測(cè)定一系列必要的指標(biāo)、查找權(quán)威性鑒定手冊(cè)鑒定方法分四個(gè)水平：細(xì)胞的形態(tài)和習(xí)性水平：形態(tài)特征、運(yùn)動(dòng)、酶反應(yīng)、營(yíng)養(yǎng)要求及生長(zhǎng)條件等細(xì)胞組分水平：細(xì)胞壁成分、氨基酸庫(kù)、脂類(lèi)、醌類(lèi)、光合色素等的分析蛋白質(zhì)水平：氨基酸序列分析、凝膠電泳和血清學(xué)反應(yīng)等基因或DNA水平：核酸分子雜交、（G+C）mol%、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)、16SrRNA寡核苷酸族分分析、DNA或RNA核苷酸序列分析等當(dāng)前42頁(yè)，總共76頁(yè)。一、微生物分類(lèi)鑒定的經(jīng)典方法（一）經(jīng)典的鑒定指標(biāo)（二）微型、簡(jiǎn)便、快速、自動(dòng)化鑒定技術(shù)當(dāng)前43頁(yè)，總共76頁(yè)。（一）經(jīng)典鑒定指標(biāo)當(dāng)前44頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前45頁(yè)，總共76頁(yè)。（二）微型、簡(jiǎn)便、快速、自動(dòng)化鑒定技術(shù)1.API細(xì)菌數(shù)值鑒定系統(tǒng)2.Enterotube系統(tǒng)3.Biolog全自動(dòng)和手動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)當(dāng)前46頁(yè)，總共76頁(yè)。1.API細(xì)菌數(shù)值鑒定系統(tǒng)當(dāng)前47頁(yè)，總共76頁(yè)。2.Enterotube系統(tǒng)

（腸管系統(tǒng)）當(dāng)前48頁(yè)，總共76頁(yè)。3.Biolog全自動(dòng)和手動(dòng)細(xì)菌鑒定系統(tǒng)全自動(dòng)儀器和手動(dòng)儀器鑒定96孔的細(xì)菌培養(yǎng)板，其中95孔中各加有氧化還原指示劑和不同的發(fā)酵性碳源的培養(yǎng)基干粉，另一個(gè)孔為清水對(duì)照。鑒定前先把待檢純種制成適當(dāng)濃度的懸液，再吸入有八個(gè)頭子的接種器中，接著用接種器按12下，即可接種完96孔菌液。在37℃下培養(yǎng)，把培養(yǎng)基平板放入檢測(cè)室用分光光度計(jì)檢測(cè)，再通過(guò)計(jì)算機(jī)系統(tǒng)最終確定該樣品為何種微生物。當(dāng)前49頁(yè)，總共76頁(yè)。二、微生物分類(lèi)鑒定中的現(xiàn)代方法（一）通過(guò)核酸分析鑒定微生物遺傳型（二）細(xì)胞化學(xué)成分用作鑒定指標(biāo)（三）數(shù)值分類(lèi)法當(dāng)前50頁(yè)，總共76頁(yè)。（一）通過(guò)核酸分析鑒定微生物遺傳型1.DNA堿基比例的測(cè)定2.核酸分子雜交3.rRNA寡核苷酸編目4.微生物全基因組序列的測(cè)定當(dāng)前51頁(yè)，總共76頁(yè)。1.DNA堿基比例的測(cè)定兩個(gè)菌株G+Cmol％值相差：<2%無(wú)分類(lèi)意義；2.5-4.0%種內(nèi)菌株；>5%不同的種；>10%不同的屬。DNA堿基比例的測(cè)定即G+C%測(cè)定，是利用增色效應(yīng)測(cè)定Tm值，用Tm值確定某微生物DNA中的G+Cmol％值。當(dāng)前52頁(yè)，總共76頁(yè)。2.核酸分子雜交DNA-DNA雜交法DNA-rRNA雜交法rRNA-rRNA雜交法雜交同源性:>60%,同種>70%,同一亞種20%-60%,同一屬當(dāng)前53頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前54頁(yè)，總共76頁(yè)。3.rRNA寡核苷酸編目分析rRNA普遍存在,易于提取;rRNA重要恒定的生理功能;在細(xì)胞中含量大，易于提??；編碼rRNA的基因在細(xì)胞中不像質(zhì)粒DNA那樣會(huì)轉(zhuǎn)移，而是十分穩(wěn)定的

；rRNA的非常保守性--進(jìn)化尺度;16S/18SrRNA核苷酸數(shù)量適中,信息量大,易于分析。在原核生物核糖體所含的三種rRNA（23S，16S和5S，見(jiàn)圖11-11）中，其核苷酸數(shù)分別約為2900、1540和120個(gè)，其中的16SrRNA不但核苷酸數(shù)適中，而且信息量較大且易于分析，故是理想的研究材料。

分析生物細(xì)胞中rRNA寡核苷酸序列同源性，以確定不同生物間的親緣關(guān)系和進(jìn)化譜系的方法。選用rRNA做生物進(jìn)化和系統(tǒng)分類(lèi)的原因當(dāng)前55頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前56頁(yè)，總共76頁(yè)。原理：水解rRNA，產(chǎn)生很多長(zhǎng)短不一的寡核苷酸片段，電泳分離，放射自顯影技術(shù)獲得指紋圖譜，確定不同長(zhǎng)度寡核苷酸斑點(diǎn)在電泳譜上的位置，找出圖譜中鏈長(zhǎng)在6個(gè)核苷酸以上的寡核苷酸片段作序列分析，獲得的結(jié)果進(jìn)行按不同長(zhǎng)度進(jìn)行編目、列表。通過(guò)比較、分析、計(jì)算，就可知道各菌株間的親緣關(guān)系大小。若兩種或兩株微生物的親緣關(guān)系越近，則其產(chǎn)生的寡核苷酸片段的序列也越接近，反之亦然。3.rRNA寡核苷酸編目分析當(dāng)前57頁(yè)，總共76頁(yè)。通過(guò)T1RNA酶的水解，一般可使rRNA形成含有1～20個(gè)核苷酸單位的寡核苷酸片段。如果形象地把只含一個(gè)核苷酸的片段稱(chēng)為“字母”的話，則含兩個(gè)以上核苷酸的片段就成了“單詞”。將含有6個(gè)“字母”以上的所有“單詞”一一測(cè)定其核苷酸序列，最后可把它們編成一部“詞典”。于是，兩個(gè)茵株rRNA的相似性就可通過(guò)查閱“詞典”來(lái)作比較。比較的具體方法是計(jì)算它們間的締合系數(shù)（associatedcoefficient）或相關(guān)系數(shù)SAB值：上式中，NAB是A、B兩被測(cè)菌株所共同具有的“單詞”的“字母”數(shù)，而NA和NB則是兩株菌分別具有的“單詞”的“字母”數(shù)。根據(jù)SAB值進(jìn)行數(shù)值分析，就可推知它們之間的親緣關(guān)系。它的作用很大，至今Woese及其同事已對(duì)400多株細(xì)菌和放線菌進(jìn)行過(guò)分析，并從其中發(fā)現(xiàn)了生命的第三種形式——古細(xì)菌，提出了生物界級(jí)分類(lèi)中的“三域?qū)W說(shuō)”當(dāng)前58頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前59頁(yè)，總共76頁(yè)。4.微生物基因組全序列的測(cè)定正式公布:53種正在進(jìn)行:100種當(dāng)前60頁(yè)，總共76頁(yè)。當(dāng)前61頁(yè)，總共76頁(yè)。（二）細(xì)胞化學(xué)成分用作鑒定指標(biāo)1.細(xì)胞壁化學(xué)成分2.全細(xì)胞水解液的糖型3.磷酸類(lèi)脂分析4.枝酸菌的分析5.醌類(lèi)的分析6.氣相色譜技術(shù)用于微生物鑒定當(dāng)前62頁(yè)，總共76頁(yè)。1.細(xì)胞壁化學(xué)成分根據(jù)肽尾第3位氨基酸的種類(lèi)、肽橋結(jié)構(gòu)、肽橋交聯(lián)的位置，肽聚糖可以分為5類(lèi)。當(dāng)前63頁(yè)，總共76頁(yè)。第3位為內(nèi)消旋的二氨基庚二酸（meso-DAP），第3位為賴(lài)氨酸（Lys），第3位為L(zhǎng)-DAP第3位為L(zhǎng)-鳥(niǎo)氨酸（L-Orn），第3位氨基酸的種類(lèi)不固定當(dāng)前64頁(yè)，總共76頁(yè)。2.全細(xì)胞水解液的糖型以放線菌為例。它們的糖型可分四類(lèi)當(dāng)前65頁(yè)，總共76頁(yè)。3.磷酸類(lèi)脂分析磷酸類(lèi)脂是極性類(lèi)脂，位于細(xì)菌、放線菌的細(xì)胞膜上。不同屬放線菌其磷脂類(lèi)組分有所不同，故分析這一成分是鑒別放線菌屬的重要指標(biāo)之一。磷酸類(lèi)脂的種類(lèi)很多，其中有5種可用于作為鑒定指標(biāo)：①磷脂酰乙醇胺（PE）；②磷脂酰甲基乙醇胺（PME）；③磷脂酰膽堿（PC）；④磷脂酰甘油（PG）；⑤含葡萄糖胺未知結(jié)構(gòu)的磷酸類(lèi)脂（GluNu）。當(dāng)前66頁(yè)，總共76頁(yè)。4.枝酸菌的分析枝菌酸（mycolicacid）存在于Nocardia、Mycobacterium和Corynebacterium等屬稱(chēng)作“諾卡氏菌形放線菌”中，它們是一些在形態(tài)上具有初生菌絲體，并多少呈規(guī)律性斷裂成球狀或桿狀小體的一類(lèi)放線菌。其形態(tài)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，且細(xì)胞壁化學(xué)組分都為Ⅳ型，但它們所含的枝菌酸卻差別明顯，例如，分枝桿菌的枝菌酸（mycobactomycolicacid）約含80個(gè)碳原子，諾卡氏菌的枝菌酸（nocardomycolicacid）約含50個(gè)碳原子，而棒桿菌的枝菌酸（corynemycolicacid）則約含30個(gè)碳原子，因此，可分析其所含的枝菌酸來(lái)對(duì)它們分屬。當(dāng)前67頁(yè)，總共76頁(yè)。5.醌類(lèi)的分析在細(xì)菌和放線菌中所含有的醌類(lèi)物質(zhì)主要可分兩大類(lèi)，即甲基萘醌（menaquinone，即維生素K）和泛醌（ubiquinone，即輔酶Q）。在它們的分子中各有長(zhǎng)度為1～14個(gè)異戊烯單位不等的側(cè)鏈，除了多烯側(cè)鏈長(zhǎng)度不同以外，多烯鏈的氫飽和度（或氫化度）也不同，這些特點(diǎn)就使醌的分析成為近年來(lái)放線菌分類(lèi)鑒定上有相當(dāng)重要價(jià)值的方法。據(jù)研究，大多數(shù)細(xì)菌含有甲基萘醌、泛醌或兩者均有，但革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌和放線菌只含有甲基萘醌。放線菌所含甲基萘醌的異戊烯側(cè)鏈長(zhǎng)度和氫飽和度都有較大的變化（8～10個(gè)異戊烯單位，一般為部分飽和）。當(dāng)前68頁(yè)，總共76頁(yè)。6.氣相色譜技術(shù)用于微生物鑒定氣相色譜技術(shù)（gaschromatograph，GC）是一種新型的物理及物理化學(xué)分離分析方法，具有極高的選擇性、分離效率、靈敏度和分析速度，為微生物細(xì)胞組分和代謝產(chǎn)物的分析帶來(lái)了較理想的分析方法，并由此產(chǎn)生了一門(mén)氣相色譜化學(xué)分類(lèi)學(xué)（gaschromatography-chemotaxonomy）。1963年，Able等首次通過(guò)細(xì)胞脂肪酸的分析來(lái)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分類(lèi)，同時(shí)，Oyama等又提出了用裂解氣相色譜法（Pyrolysisgaschromatography，PGC，是一種熱裂解法與色譜技術(shù)相結(jié)合的方法）來(lái)鑒定