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實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色詳解演示文稿當(dāng)前1頁(yè),總共21頁(yè)。優(yōu)選實(shí)驗(yàn)細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色當(dāng)前2頁(yè),總共21頁(yè)?!粲脡A性染料結(jié)晶紫對(duì)菌液涂片進(jìn)行初染◆用碘溶液進(jìn)行媒染,其作用是提高染料和細(xì)胞間的相互作用從而使二者結(jié)合得更牢固?!粲靡掖蓟虮獩_洗進(jìn)行脫色。在經(jīng)歷脫色后仍將結(jié)晶紫保留在細(xì)胞內(nèi)的為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,而革蘭氏陰性細(xì)菌的結(jié)晶紫被洗掉,細(xì)胞呈無(wú)色。◆用一種與結(jié)晶紫具有不同顏色的堿性染料對(duì)涂片進(jìn)行復(fù)染。例如沙黃,它使原來(lái)無(wú)色的革蘭氏陰性細(xì)菌最后呈現(xiàn)桃紅到紅色,而革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌繼續(xù)保持深紫色當(dāng)前3頁(yè),總共21頁(yè)。當(dāng)前4頁(yè),總共21頁(yè)。實(shí)驗(yàn)三
細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和
革蘭氏染色當(dāng)前5頁(yè),總共21頁(yè)。細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色和革蘭氏染色一目的要求二基本原理三實(shí)驗(yàn)材料四無(wú)菌操作過程五操作步驟六實(shí)驗(yàn)報(bào)告七思考題當(dāng)前6頁(yè),總共21頁(yè)。一目的要求1學(xué)習(xí)制染色片技術(shù),學(xué)習(xí)簡(jiǎn)單染色\革蘭氏染色原理,理解著色機(jī)理。學(xué)習(xí)并掌握無(wú)菌操作的技術(shù)。3掌握簡(jiǎn)單染色\革蘭氏染色的方法,并能正確染色4鞏固顯微鏡油鏡的使用方法。當(dāng)前7頁(yè),總共21頁(yè)。(一)細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色原理(二)革蘭氏染色基本原理二基本原理當(dāng)前8頁(yè),總共21頁(yè)。細(xì)菌細(xì)胞微小,且含水量較多,在普通光鏡下表現(xiàn)為無(wú)色透明,不易觀察,所以必須進(jìn)行染色處理,使細(xì)胞著色,便于觀察。簡(jiǎn)單染色是使用單一染料染色,可用于觀察細(xì)菌形態(tài)、大小、及排列方式.染色前一般要將細(xì)胞固定,其目的是殺死菌體并使之粘附于玻片上,還可以增強(qiáng)菌體的著色能力。固定有加熱法和化學(xué)法兩種,無(wú)論采用何種方法均應(yīng)維持細(xì)胞原有形態(tài)。(一)細(xì)菌的簡(jiǎn)單染色原理當(dāng)前9頁(yè),總共21頁(yè)。(二)革蘭氏染色基本原理革蘭氏染色是用于細(xì)菌鑒別的一種重要染色方法。它是根據(jù)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、陰性細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)、組成的不同而使用一系列的染色處理使之差別顯色。其染色方法是先將細(xì)菌分別用結(jié)晶紫和碘液初染媒染后,乙醇脫色,再經(jīng)復(fù)染劑復(fù)染。最終被染成紅色的是革蘭氏陰性細(xì)菌;被染成紫色的是革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌。當(dāng)前10頁(yè),總共21頁(yè)。占細(xì)胞壁的10%占細(xì)胞壁的90%當(dāng)前11頁(yè),總共21頁(yè)。當(dāng)前12頁(yè),總共21頁(yè)。1、細(xì)胞壁
革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的細(xì)胞壁當(dāng)前13頁(yè),總共21頁(yè)。革蘭氏染色與細(xì)胞壁:革蘭氏陽(yáng)性\陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁對(duì)比當(dāng)前14頁(yè),總共21頁(yè)。革蘭氏染色原理:第一步:結(jié)晶紫使菌體著上紫色第二步:碘和結(jié)晶紫形成大分子復(fù)合物,分子大,能被細(xì)胞壁阻留在細(xì)胞內(nèi)。第三步:酒精脫色,細(xì)胞壁成分和構(gòu)造不同,出現(xiàn)不同的反應(yīng)。G+菌:細(xì)胞壁厚,肽聚糖含量高,交聯(lián)度大,當(dāng)乙醇脫色時(shí),肽聚糖因脫水而孔徑縮小,故結(jié)晶紫-碘復(fù)合物被阻留在細(xì)胞內(nèi),細(xì)胞不能被酒精脫色,仍呈紫色。Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,因其含脂量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,酒精將細(xì)胞脫色,細(xì)胞無(wú)色,蕃紅復(fù)染后呈紅色。當(dāng)前15頁(yè),總共21頁(yè)。1234?當(dāng)前16頁(yè),總共21頁(yè)。三實(shí)驗(yàn)材料大腸桿菌(24h培養(yǎng))斜面菌種枯草桿菌(16h培養(yǎng))斜面菌種當(dāng)前17頁(yè),總共21頁(yè)。四無(wú)菌操作過程無(wú)菌操作:不讓除我們接種的微生物以外
其它微生物侵入的技術(shù)。當(dāng)前18頁(yè),總共21頁(yè)。當(dāng)前19頁(yè),總共21頁(yè)。(一)簡(jiǎn)單染色操作步驟1涂片:載玻片、無(wú)菌水、斜面菌種、無(wú)菌操作、均勻的薄層2干燥:3固定:加熱固定4染色:結(jié)晶紫染1min或蕃紅染2-3min或石炭酸復(fù)紅染1
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