微生物的生長與環(huán)境條件

第六章微生物的生長及環(huán)境因素的影響p.195生長：是指微生物細胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進行新陳代謝，當(dāng)同化作用大于異化作用時，生命個體的重量和體積不斷增大的過程。繁殖：是單細胞微生物生長到一定階段，由于細胞內(nèi)各種組分按比例增長并達到一定階段時，產(chǎn)生一個新的細胞，即引起細胞數(shù)量增加的整個生物學(xué)過程。在多細胞的微生物中（如絲狀真菌），如果細胞數(shù)目增加的同時并不伴有個體數(shù)目的增加，那么此過程只能稱為生長，只有形成有性和無性孢子的過程才能稱為繁殖。生長是一個逐漸發(fā)生的量變的過程，是繁殖的基礎(chǔ)；繁殖是一個質(zhì)變的過程，是生長的結(jié)果。

個體生長是指微生物細胞個體吸收營養(yǎng)物質(zhì)，進行新陳代謝，原生質(zhì)與細胞組分的增加為個體生長。群體生長是指群體中個體數(shù)目的增加?？梢杂弥亓?、體積、密度或濃度來衡量。個體生長個體繁殖群體生長群體生長=個體生長+個體繁殖第一節(jié)、微生物群體的生長一、獲的純培養(yǎng)的方法1、純培養(yǎng)的定義：從一個細胞繁殖所得到的后代細胞群體稱為純培養(yǎng)。菌落：細菌在固體培養(yǎng)基上生長，由一個或幾個細菌分裂繁殖聚集而形成肉眼可見的群體。2、獲得純培養(yǎng)的方法：p.195（1）單細胞挑取法（2）稀釋分離培養(yǎng)法

（3）平板劃線培養(yǎng)分離法稀釋分離法涂布培養(yǎng)得到單菌落（3）平板劃線分離法：

劃線分離法步驟：劃線挑菌灼燒劃線灼燒劃線二、細菌群體數(shù)量的測量p.1971、顯微直接計數(shù)法每ml原液含菌數(shù)＝每中格平均菌數(shù)×25(16)×104×稀釋倍數(shù)優(yōu)點：快速、方便缺點：不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對運動細菌的計數(shù)；需要相對高的細菌濃度；（107cell/ml）個體小的細菌在顯微鏡下難以觀察；2、比濁法在一定波長下，測定菌懸液的光密度，以光密度(opticaldensity,即O.D.)表示菌量。波長一般選定在450~650nm培養(yǎng)基顏色顆粒雜質(zhì)實驗測量時應(yīng)控制在菌濃度與光密度成正比的線性范圍內(nèi)，否則不準確。一般OD在1.0以下時和微生物數(shù)量呈正比3、稀釋平板法（1）傾注平板法(混合平板法)（2）涂布平板法菌落計數(shù)稀釋到適量濃度傾注或涂布平板培養(yǎng)一般用菌落形成單位（colonyformingunits，CFU）來表示原樣品中的細胞數(shù)。4、膜過濾培養(yǎng)法當(dāng)樣品中菌數(shù)很低時，可以將一定體積的湖水、海水或飲用水等樣品通過膜過濾器，然后將將膜轉(zhuǎn)到相應(yīng)的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，對形成的菌落進行統(tǒng)計。主要適用于只能進行液體培養(yǎng)的微生物，或采用液體鑒別培養(yǎng)基進行直接鑒定并計數(shù)的微生物。5、MPN法：mostprobablenumber

對未知樣品進行十倍稀釋，然后根據(jù)估算取三個連續(xù)的稀釋度平行接種多支試管，對這些平行試管的微生物生長情況進行統(tǒng)計，長菌的為陽性，未長菌的為陰性，然后根據(jù)數(shù)學(xué)統(tǒng)計計算出樣品中的微生物數(shù)目。6、重量法(生物量的測定)以干重、濕重直接衡量微生物群體的生物量；通過樣品中蛋白質(zhì)、核酸含量的測定間接推算微生物群體的生物量；測定多細胞及絲狀真菌生長情況的有效方法7、生理指標法(生物量的測定)微生物的生理指標，如呼吸強度，耗氧量、酶活性、生物熱等與其群體的規(guī)模成正相關(guān)。樣品中微生物數(shù)量多或生長旺盛，這些指標愈明顯，因此可以借助特定的儀器如瓦勃氏呼吸儀、微量量熱計等設(shè)備來測定相應(yīng)的指標。常用于對微生物的快速鑒定與檢測三、分批生長中細菌群體的生長由于微生物細胞極其微小，肉眼看到或接觸到的微生物是成千上萬個單個的微生物組成的群體，研究其個體生長存在著技術(shù)上的困難。而且微生物接種是群體接種，接種后的生長是微生物群體繁殖生長。p.201對細菌群體生長規(guī)律的了解是對其進行研究與利用的基礎(chǔ)(一)生長曲線生長曲線(GrowthCurve)：

細菌接種到定量的液體培養(yǎng)基中，定時取樣測定細胞數(shù)量，以培養(yǎng)時間為橫座標，以菌數(shù)為縱座標作圖，得到的一條反映細菌在整個培養(yǎng)期間菌數(shù)變化規(guī)律的曲線。實驗室常用分批培養(yǎng)，即采用完全封閉的容器，采用液體或固體培養(yǎng)基，一次接種。分批培養(yǎng)的細菌的生長在短期內(nèi)表現(xiàn)出明顯的規(guī)律。細菌的生長曲線一般用菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標作圖一條典型的生長曲線至少可以分為

延滯期，對數(shù)期，穩(wěn)定期和衰亡期四個生長時期延滯期(Lagphase)：將少量菌種接入新鮮培養(yǎng)基后，在開始一段時間內(nèi)菌數(shù)不立即增加，或增加很少，生長速度接近于零。延滯期的特點：分裂遲緩、代謝活躍

細胞形態(tài)變大或增長，例如巨大芽孢桿菌，在遲緩期末，細胞的平均長度比剛接種時長6倍。一般來說處于遲緩期的細菌細胞體積最大,細胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高，合成代謝活躍，核糖體、酶類和ATP的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。對外界不良條件反應(yīng)敏感。遲緩期出現(xiàn)的原因：微生物接種到一個新的環(huán)境，暫時缺乏分解和催化有關(guān)底物的酶，或是缺乏充足的中間代謝產(chǎn)物等。為產(chǎn)生誘導(dǎo)酶或合成中間代謝產(chǎn)物，就需要一段適應(yīng)期。在生產(chǎn)實踐中縮短遲緩期的常用手段：(1)利用對數(shù)生長期的細胞作為種子；(2)盡量使接種前后所使用的培養(yǎng)基組成不要相差太大；(3)適當(dāng)擴大接種量(4)通過遺傳學(xué)方法改變種的遺傳特性使遲緩期縮短；對數(shù)生長期(Logphase)：又稱指數(shù)生長期(Exponentialphase)以最大的速率生長和分裂，細菌數(shù)量呈對數(shù)增加，細菌內(nèi)各成分按比例有規(guī)律地增加，表現(xiàn)為平衡生長。對數(shù)生長期的細菌個體形態(tài)、化學(xué)組成和生理特性等均較一致，代謝旺盛、生長迅速、代時穩(wěn)定。所以是研究微生物基本代謝的良好材料。它也常在生產(chǎn)上用作種子，使微生物發(fā)酵的遲緩期縮短，提高經(jīng)濟效益。在細菌個體生長里，每個細菌分裂繁殖一代所需的時間為代時(世代時間，Generationtime)，代時通常以G表示。而在群體生長里細菌數(shù)量增加一倍所需的時間稱為倍增時間（Doublingtime)。G：代時，細胞每分裂一次所需要的時間==gtnt3.3(lgNt—lgN0)穩(wěn)定生長期(Stationaryphase)：由于營養(yǎng)物質(zhì)消耗，代謝產(chǎn)物積累和pH等環(huán)境變化，逐步不適宜于細菌生長，導(dǎo)致生長速率降低直至零(即細菌分裂增加的數(shù)量等于細菌死亡數(shù))。穩(wěn)定生長期又稱恒定期或最高生長期，此時培養(yǎng)液中活細菌數(shù)最高并維持穩(wěn)定。生產(chǎn)上常通過補充營養(yǎng)物質(zhì)（補料）或取走代謝產(chǎn)物、調(diào)節(jié)pH、調(diào)節(jié)溫度、對好氧菌增加通氣、攪拌或振蕩等措施延長穩(wěn)定生長期，以獲得更多的菌體物質(zhì)或積累更多的代謝產(chǎn)物。衰亡期(Decline或Deathphase)：營養(yǎng)物質(zhì)耗盡和有毒代謝產(chǎn)物的大量積累，細菌死亡速率超過新生速率，整個群體呈現(xiàn)出負增長。有的物質(zhì)可直接被利用(例如葡萄糖或NH4+等)；有的需要經(jīng)過一定的適應(yīng)期后才能獲得利用能力（例如乳糖或NO3-等）。前者通常稱為速效碳源（或氮源），后者稱為遲效碳源（或氮源）。不同的微生物或同一種微生物對不同物質(zhì)的利用能力是不同的。當(dāng)培養(yǎng)基中同時含有這兩類碳源（或氮源）時，微生物在生長過程中會形成二次生長現(xiàn)象。大腸桿菌利用葡萄糖和乳糖時的二次生長曲線由于采用活菌計數(shù)比較麻煩，并要求嚴格進行操作，否則不易得到準確的結(jié)果，重復(fù)性也差，因此在實際工作中多采用分光光度計測定OD值的方法繪制細菌的生長曲線。同步培養(yǎng)(Synchronousculture)：

使群體中的細胞處于比較一致的，生長發(fā)育均處于同一階段上，即大多數(shù)細胞能同時進行生長或分裂的培養(yǎng)方法。(二)同步培養(yǎng)p.203同步培養(yǎng)物常被用來研究在單個細胞上難以研究的生理與遺傳特性，它是一種理想的材料。同步細胞群體在任何一時刻都處在細胞周期的同一相，彼此間形態(tài)、生化特征都很一致，因而是細胞學(xué)、生理學(xué)和生物化學(xué)等研究的良好材料。機械方法離心方法過濾分離法(硝酸纖維素濾膜洗脫法)環(huán)境條件誘導(dǎo)溫度培養(yǎng)基成份控制其它（如光照和黑暗交替培養(yǎng)）密度梯度離心法獲得同步細胞的基本步驟分部收集各層細胞細胞分層離心后不同步群體細菌10%蔗糖↓30%梯度利用各部細胞接種硝酸纖維素濾膜法是最經(jīng)典的獲得同步生長的方法由于細胞的個體差異，同步生長往往只能維持2-3個世代，隨后又逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)殡S機生長。連續(xù)培養(yǎng)(Continousculture）在微生物的整個培養(yǎng)期間，通過一定的方式使微生物能以恒定的比生長速率生長并能持續(xù)生長下去的一種培養(yǎng)方法。四、細菌群體生長的連續(xù)培養(yǎng)p.203控制連續(xù)培養(yǎng)的方法恒濁連續(xù)培養(yǎng)不斷調(diào)節(jié)流速而使細菌培養(yǎng)液濁度保持恒定恒化連續(xù)培養(yǎng)保持恒定的流速，保持恒定生長率（一）恒濁連續(xù)培養(yǎng)測定所培養(yǎng)微生物的光密度值自動調(diào)節(jié)新鮮培養(yǎng)基流入和培養(yǎng)物流出培養(yǎng)室的流速使培養(yǎng)物維持在某一恒定濁度當(dāng)培養(yǎng)室中的濁度超過預(yù)期數(shù)值時，流速加快，使?jié)岫冉档?；?dāng)培養(yǎng)室中的濁度低于預(yù)期數(shù)值時，流速減慢，使?jié)岫壬?；恒濁培養(yǎng)器的工作精度是由光電控制系統(tǒng)的靈敏度來決定的（二）恒化連續(xù)培養(yǎng)使培養(yǎng)液流速保持不變，并使微生物在恒定的生長速率下進行生長繁殖。連續(xù)培養(yǎng)的簡化流程圖第二節(jié)、環(huán)境條件對微生物生長和代謝的影響P.204溫度是影響微生物生長的最重要因素之一。溫度對微生物的影響具體表現(xiàn)在：影響酶活性，溫度變化影響酶促反應(yīng)速率，最終影響細胞合成。影響細胞膜的流動性，溫度高，流動性大，有利于物質(zhì)的運輸，溫度低，流動性降低，不利于物質(zhì)運輸，因此，溫度變化影響營養(yǎng)物質(zhì)的吸收與代謝產(chǎn)物的分泌。影響物質(zhì)的溶解度，對生長有影響。1、溫度一、控制微生物的環(huán)境因素從微生物整體來看:生長的溫度范圍一般在-10℃~100℃極端下限為-30℃，極端上限為105~300℃但對于特定的某一種微生物：只能在一定溫度范圍內(nèi)生長，在這個范圍內(nèi)，每種微生物都有自己的生長溫度三基點，即最低、最適、最高生長溫度處于最適生長溫度時，生長速度最快，代時最短。超過最低生長溫度時，微生物不生長，溫度過低，甚至?xí)劳?。超過最高生長溫度時，微生物不生長，溫度過高，甚至?xí)劳?。低溫型微生物中溫型微生物高溫型微生物低溫型微生物：專性嗜冷微生物和兼性嗜冷微生物中溫型微生物：分布最廣高溫型微生物：嗜熱微生物和極端嗜熱微生物微生物類型生長溫度最低最適最高嗜冷微生物兼性嗜冷微生物嗜溫微生物嗜熱微生物超嗜熱或嗜高溫微生物<01520020～303515～2020～45>454555～65806580～90>100高溫

高溫與低溫對微生物的影響高溫使蛋白質(zhì)、核酸等重要生物大分子發(fā)生不可逆變性、破壞，以及破壞細胞膜上的類脂成分，膜受熱出現(xiàn)小孔，破壞細胞結(jié)構(gòu)導(dǎo)致微生物死亡。熱力滅菌法1、干熱滅菌法：焚燒、燒灼、干烤2、濕熱滅菌法：煮沸、巴氏消毒法、高壓蒸汽法高溫殺菌1.干熱滅菌烘箱內(nèi)熱空氣滅菌殺滅繁殖體要100℃1.5h，芽孢要140℃3h火焰灼燒干熱滅菌160-180℃，2-3小時(2)濕熱滅菌濕熱比干熱滅菌更好：水蒸汽的氣化熱高，更易于傳遞熱量；濕熱對一般營養(yǎng)體和孢子的殺滅條件：多數(shù)細菌和真菌的營養(yǎng)細胞：在60℃左右處理5-10分鐘；酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上溫度處理；細菌的芽孢：121℃處理10分鐘以上；殺滅幾類主要微生物的濕熱條件微生物營養(yǎng)細胞孢子或芽孢酵母菌50-60℃，5分鐘70-80℃，5分鐘霉菌62℃，30分鐘80℃，30分鐘細菌（中溫細菌）50-70℃，10分鐘2-800分鐘，100℃；或120℃，05-12分鐘病毒60℃，30分鐘

各種細菌的芽孢在濕熱中的

致死溫度和致死時間(min)菌種100oC105oC110oC115oC121oC炭疽芽孢桿菌5~10____枯草芽孢桿菌6~17____嗜熱脂肪芽孢桿菌____12肉毒梭狀芽孢桿菌33010032104破傷風(fēng)梭菌5~155~10___蒸氣壓力溫度（℃）磅/平方英寸公斤/平方厘米kPa50.3533.78108.880.5754.04113.0100.7067.55115.6151.0101.33121.3201.46135.10126.2251.77168.88130.4302.10202.66134.6蒸汽壓和溫度的關(guān)系空氣排除程度與溫度的關(guān)系壓力表讀數(shù)滅菌器內(nèi)溫度/℃/Pa未排除空氣排除1/3空氣排除1/2空氣排除2/3空氣完全排除氣35701051401752107290941001099010010510911510010911211512110911511812112611512112412613012l126128130135（3）其它濕熱滅菌方式1）巴斯德消毒（pasteurization）60-85℃處理15秒至30分鐘2）煮沸消毒3）間歇滅菌（fractionalsterilizationORtyndallization）4）瞬間加壓滅菌135-150℃，5-15秒，工業(yè)上發(fā)酵培養(yǎng)基135-150℃，2-6秒，牛奶或其它液態(tài)食品（超高溫滅菌，UHT）UHT超高溫滅菌乳是在本世紀60年代出現(xiàn)的一種產(chǎn)品，首先是由英國的巴頓等研究者提出。其原理是根據(jù)牛奶在加熱中的滅菌效果（SE），也就是殺孢子效率隨著溫度的上升，大大快于牛乳中的化學(xué)變化（褐變、維生素破壞、蛋白質(zhì)變性等）。

在溫度有效范圍內(nèi)，熱處理溫度每升高10℃，牛乳中所含細菌孢子的破壞速度性提高11-30倍，而牛乳中化學(xué)變化褐變速度僅提高2.5-3倍。這意味著溫度越高，其滅菌效果越大，而引起的化學(xué)變化很小。低溫當(dāng)環(huán)境溫度低于微生物的最適生長溫度時，微生物的生長繁殖停止，當(dāng)微生物的原生質(zhì)結(jié)構(gòu)并未破壞時，不會很快造成死亡并能在較長時間內(nèi)保持活力，當(dāng)溫度提高時，可以恢復(fù)正常的生命活動。當(dāng)溫度過低，造成微生物細胞凍結(jié)時，形成冰晶，從而對細胞造成機械性損傷，從而造成微生物死亡。實踐中，采用低溫保藏食品，防止雜菌生長；以及低溫保藏菌種。斜面:4℃

石蠟油:4℃

沙土管:4℃

甘油管:-70℃,液氮

凍干管:4℃

水:常溫

2、輻射作用輻射滅菌(RadiationSterilization)是利用電磁輻射產(chǎn)生的電磁波殺死大多數(shù)物質(zhì)上的微生物的一種有效方法。用于滅菌的電磁波有紫外線(UV)、X-射線和γ-射線等可見光（400-760nm）：紫外線（200-400nm）：殺菌效果不明顯殺菌效果明顯，但穿透能力不強，只能用于表面滅菌。UV引起DNA的斷裂、DNA分子雙鏈的交聯(lián)以及嘧啶二聚體的形成等，其中形成胸腺嘧啶二聚體是最主要的作用。胸腺嘧啶二聚體會阻礙雙鏈的解鏈與復(fù)制、堿基的正常配對，引起突變。生成臭氧胸腺嘧啶二聚體

紫外線滅菌的機理：電離輻射誘變劑:x射線、γ射線、快中子、α射線、β射線和超聲波等，在微生物誘變育種中以前面四種用得比較多。直接作用:輻射的量子擊中染色體，導(dǎo)致發(fā)生直接的原始損傷。間接作用:輻射作用使得細胞中的分子尤其是大量的水分子產(chǎn)生電離，進而形成各種自由基，這些自由基團再進一步與細胞內(nèi)活性大分子產(chǎn)生一系列生物化學(xué)反應(yīng)，造成染色體損傷，導(dǎo)致突變。電離輻射：波長短，能量高，穿透能力強，殺菌效果很明顯3、氧氣氧氣對微生物的毒害機制：產(chǎn)生活性氧（超氧負離子、過氧化氫、羥基自由基）據(jù)微生物對氧氣的敏感性：好氧微生物、厭氧微生物、兼性需氧O2+e-→O2-2O2-+2H+→H2O2+O2O2-+H2O2→O2+OH-+OH·好氧菌消除活性氧傷害的機制：產(chǎn)生SOD、過氧化氫酶和過氧化物酶消除活性氧2O2-+2H+→H2O22H2O2→O2+2H2O2H2O2+NADH+H+→NAD++2H2O超氧化物歧化酶接觸酶過氧化物酶◆影響膜表面電荷的性質(zhì)及膜的通透性，進而影響對物質(zhì)的吸收能力?！舾淖兠富?、酶促反應(yīng)的速率及代謝途徑?！舡h(huán)境pH值還影響培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的離子化程度，從而影響營養(yǎng)物質(zhì)吸收，或有毒物質(zhì)的毒性。4、pH值微生物的生長pH值范圍極廣，從pH<2～>10都有微生物能生長。但是絕大多數(shù)種類都生活在pH5.0～9.0之間。微生物生長的pH值三基點：各種微生物都有其生長的最低、最適和最高pH值。低于最低、或超過最高生長pH值時，微生物生長受抑制或?qū)е滤劳?。不同微生物對pH要求不同5.滲透壓微生物對滲透壓有一定適應(yīng)能力。高滲溶液

-質(zhì)壁分離，低滲溶液

-細胞膨脹破裂。普通微生物一般在

0.85-0.90℅的食鹽溶液（即生理鹽水）中生長。根據(jù)微生物對高滲透壓耐性的不同，將其分為：嗜鹽微生物、耐鹽微生物。

一般細菌在濃鹽液或濃糖液中不能生長、繁殖，所以糖或鹽可以保存食品。

水活度：表示在天然環(huán)境中，微生物可實際利用的自由水或游離水的含量。一般用在一定的溫度和壓力條件下,溶液的蒸汽壓力與同樣條件下純水蒸汽壓力之比表示，即：

aw=P/P0

式中P代表溶液蒸汽壓力,P0代表純水蒸汽壓力。純水a(chǎn)w為1.00,溶液中溶質(zhì)越多,aw越小。微生物一般在aw為0.60～0.99的條件下生長,aw過低時,微生物生長的遲緩期延長,比生長速率和總生長量減少。微生物不同，其生長的最適aw不同。P.206二、控制微生物的化學(xué)方法：p.207各種有機或無機殺菌劑或抑菌劑滅菌（sterilization）采用強烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠喪失其生長繁殖能力的措施。消毒（disinfection）是一種采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的病原菌，而對被消毒的物體基本無害的措施。防腐（antisepsis）是利用某種理化因素完全抑制霉腐微生物的生長繁殖，從而達到防止食品等發(fā)生霉腐的措施。化療（chemotherapy）即化學(xué)治療。利用具有高度選擇毒力（對病原菌具有高度毒力而對宿主無顯著毒性）的化學(xué)物質(zhì)來抑制宿主體內(nèi)病原微生物的生長繁殖，借以達到治療該傳染病的一種措施?；瘜W(xué)因素對微生物的影響化學(xué)消毒劑的作用機理：1）使菌體蛋白變性、凝固或水解；2）破壞細菌的酶系統(tǒng)；3）改變細菌細胞壁或細胞膜的通透性?；瘜W(xué)因素對細菌的影響因其濃度、作用時間、溫度等的不同而呈現(xiàn)不同的殺菌或抑菌作用。影響消毒劑殺菌或抑制作用的因素：１）消毒劑的性質(zhì)、濃度、作用時間及溫度。２）細菌的種類；３）環(huán)境中的有機物。

機理：蛋白質(zhì)變性代表：苯酚（石炭酸），來蘇兒（1）酚：1、有機化合物應(yīng)用范圍：地面，家具，皮膚等石炭酸系數(shù)：

指在一定時間內(nèi)被試藥劑能殺死全部供試菌的最高稀釋度和達到同效的石炭酸的最高稀釋度的比率。一般規(guī)定處理時間為10分鐘，而供試菌定為傷寒沙門氏菌和金黃色葡萄球菌。（2）醇機理：蛋白質(zhì)變性、細胞脫水代表：乙醇（75%）應(yīng)用范圍：器械、皮膚（3）醛機理：蛋白質(zhì)變性代表：福爾馬林液（40%甲醛）應(yīng)用范圍：熏蒸、標本保藏（4）酸機理：蛋白質(zhì)變性代表：醋酸、苯甲酸、山梨酸應(yīng)用范圍：房間消毒、防腐劑（5）表面活性劑機理：破壞細胞膜代表：新潔爾滅、洗衣粉、洗滌劑等應(yīng)用范圍：器械、皮膚2、無機化合物:鹵化物、重金屬、氧化劑等（1）鹵化物：碘、和氯機理：破壞蛋白質(zhì)、細胞膜代表：碘酒、漂白粉、氯氣應(yīng)用范圍：碘酒-皮膚氯氣-自來水、游泳池、澡堂漂白粉-潮濕地面，水體機理：與蛋白質(zhì)中的巰基結(jié)合代表：升汞、硫酸銅應(yīng)用范圍：非金屬器皿表面消毒、真菌病害（2）重金屬（3）堿類

生石灰：地面、水井機理：氧化蛋白質(zhì)中活性基團代表：高錳酸鉀、臭氧、過氧化氫應(yīng)用范圍：皮膚、物品表面等（4）氧化劑3、染料機理：和蛋白質(zhì)上羧基及核酸上磷酸基結(jié)合代表：龍膽紫、孔雀綠等應(yīng)用范圍：皮膚創(chuàng)傷化學(xué)消毒劑的類型與殺菌原理p208-209類別常用消毒劑殺菌原理酚類石炭酸、來蘇兒