果蠅綜合大實驗-性狀觀察及雜交設計

果蠅綜合大實驗－－性狀觀察及雜交實驗設計綜合實驗內(nèi)容：實驗一、果蠅性別鑒定、性狀觀察與飼養(yǎng)方法實驗二、果蠅分離定律的實驗分析實驗三、果蠅自由組合的實驗分析實驗四、果蠅的伴性遺傳實驗分析實驗五、果蠅的三點測驗實驗分析實驗六、果蠅的連鎖與交換實驗分析實驗一果蠅性別鑒定、性狀觀察與飼養(yǎng)方法實驗目的1、了解果蠅的生活史；3、通過實驗學習掌握果蠅性別的鑒定方法；4、了解果蠅的飼養(yǎng)方法；5、仔細觀察并記錄實驗室各品系果蠅的性狀。2、掌握果蠅的麻醉及觀察方法；（一）果蠅的生活史果蠅屬于昆蟲綱，雙翅目，與家蠅是不同的種。它的生活史包括：卵→幼蟲→蛹→成蟲。受精卵一齡幼蟲二齡幼蟲三齡幼蟲蛹成蟲圖一、果蠅生活史圖解果蠅的生活周期長短與溫度關系很密切，30℃以上的溫度能使果蠅不育和死亡，低溫則使它生活周期延長，同時生活力也減低，果蠅培養(yǎng)的最適溫度20—25℃。10℃15℃20℃25℃卵幼蟲8天5天幼蟲成蟲57天18天6.3天4.2天從表中可以看出25℃時，從卵到成蟲約10天；在25℃時成蟲約活15天。果蠅一般是培養(yǎng)在恒溫箱內(nèi)，盛夏時，要注意降溫。生長迅速，生活史較短，短時間內(nèi)可獲得大量子代；容易飼養(yǎng)，在常溫下以玉米粉做飼料就可使之生長繁殖；染色體數(shù)目少，加之唾腺染色體巨大，是細胞學觀察的好材料；突變性狀多，且多數(shù)是形態(tài)突變，便于觀察。（二）果蠅是遺傳學分析的好材料對果蠅進行檢查時，可用乙醚麻醉，使它保持靜止狀態(tài)。因果蠅對乙醚很敏感，易麻醉，麻醉的深度看實驗要求而定（作種蠅以輕度麻醉為宜，做觀察可深度麻醉，致死也無妨。果蠅翅膀外展45℃角表示已死）。麻醉時將乙醚（2－3滴）滴到麻醉瓶塞的綿球上（注意不要讓乙醚流到瓶內(nèi)），同時麻醉瓶要保持干燥，否則會粘住果蠅翅膀。將培養(yǎng)瓶倒置，讓果蠅向瓶底部運動，然后打開麻醉瓶和培養(yǎng)瓶塞，迅速將兩者瓶口相接（麻醉瓶在上，培養(yǎng)瓶在下），輕拍培養(yǎng)瓶壁使果蠅落入麻醉瓶中，迅速蓋好兩個瓶塞，并倒置麻醉瓶，一分鐘后果蠅即處于昏迷狀態(tài)。麻醉后的果蠅放在白瓷板上，用毛筆輕輕撥動進行觀察。必要時可進行第二次麻醉。觀察完畢后倒入煤油或酒精瓶中（死蠅盛留器）。（三）果蠅的麻醉及觀察方法（四）果蠅的雌雄鑒別果蠅有雌雄之分，幼蟲期區(qū)別較難，成蟲區(qū)別容易。

雄性體型較小，腹部環(huán)紋5節(jié)，末端鈍而圓，顏色深。第一對腳的跗節(jié)前端表面有黑色鬃毛流蘇，稱性梳（sexcombs）。

雌性體型較大，腹部環(huán)紋7節(jié)，末端尖，顏色淺，跗節(jié)前端無黑色鬃毛流蘇。圖2、一對雌雄果蠅（左雄，右雌）下一張另一對雌雄果蠅（左雌，右雄）1下一張另一對雌雄果蠅（左雌，右雄）2返回圖3、性梳性梳下一張下一張性梳（五）果蠅的培養(yǎng)果蠅在水果攤或果園里常可見到，但它并不是以水果為生，而是食生長在水果上的酵母菌，因此實驗室內(nèi)凡能發(fā)酵的基質(zhì)，均可作為果蠅飼料。

目前本實驗室所用的果蠅培養(yǎng)基配方如下：A：蔗糖13克，瓊脂1.3克，加水100毫升，煮沸溶解。B：玉米粉17克，加水80毫升，混合均勻。將B慢慢倒入A中，并不停攪動混合，加熱成糊狀后，再加1.4克酵母粉，混合均勻，稍冷卻后加入1毫升丙酸，調(diào)勻后即可分裝到培養(yǎng)瓶中。A、培養(yǎng)基的制備返回除了以上的飼料外，常用的還有米粉飼料和香蕉飼料：1.米粉飼料的配制：瓊脂0.9—2.5克加入100毫升水中，加熱煮沸溶解；再加10克紅糖，待溶解后將8克米粉（或麩皮）倒入正在煮沸的瓊脂—紅糖溶液中去，不斷攪拌煮沸數(shù)分鐘，待成稀粥狀后即可分裝使用。2.香蕉飼料配制：將熟透的香蕉搗碎，制成香蕉漿（約50克）。將1.5克瓊脂加到48毫升的水中煮沸，溶解后拌入香蕉漿，再煮沸后即可分裝。

以上兩種飼料容易生霉菌，必要時需加少量防霉劑。返回培養(yǎng)果蠅的飼養(yǎng)瓶，常用的有牛奶瓶，大中型指管，用紗布包裹的棉花球作瓶塞（有條件的地方可改用泡沫塑料作瓶塞）。飼養(yǎng)瓶先消毒，然后倒入飼料（2厘米厚），待冷卻后，用酒精棉擦瓶壁，然后滴入酵母菌液數(shù)滴，再插入消毒過的吸水紙，作為幼蟲化蛹時的干燥場所。B、培養(yǎng)容器返回C、原種培養(yǎng)在作為新的留種培養(yǎng)時，事先檢查一下果蠅有沒有混雜，以防原種丟失。親本的數(shù)目一般每瓶5—10對，移入新培養(yǎng)瓶時，須將瓶橫臥，然后將果蠅挑入，待果蠅清醒過來后，再把培養(yǎng)瓶豎起，以防果蠅粘在培養(yǎng)基上。原種每2－4周換一次培養(yǎng)基（按溫度而定），每一原種培養(yǎng)至少保留兩套。培養(yǎng)瓶上標簽要寫明名稱，培養(yǎng)日期等，作為原種培養(yǎng)，可控制到10—15℃，培養(yǎng)時避免日光直射。返回（六）果蠅的性狀果蠅的性狀主要從以下四個方面進行觀察：體色翅型眼剛毛每個方面都有不同的性狀：灰體黑體b(2)黑檀體e(3)黃體y(1)紅眼白眼w(1)棒眼B(1)長翅短翅m(1)卷翅Cy(2)殘翅vg(2)直剛毛卷剛毛sn(1)返回1、體色灰體果蠅下一張黑檀體果蠅下一張黃體果蠅返回2、眼色紅眼下一張白眼下一張棒眼返回3、翅型長翅下一張下一張短翅卷翅下一張下一張卷翅殘翅返回4、剛毛直剛毛（七）實驗室果蠅品系性狀觀察品系體色眼色翅型剛毛346182226認真觀察實驗室果蠅品系的性狀，完成下表顯示答案返回（七）實驗室果蠅品系性狀觀察品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白短卷18灰紅長直22灰白長直26黑檀紅長直認真觀察實驗室果蠅品系的性狀，完成下表（八）思考題1、如何準確鑒定果蠅的雌雄個體？最主要特征是什么？2、果蠅的生活史分幾個階段？3、果蠅作為遺傳學模式材料的優(yōu)點有哪些？附：果蠅綜合大實驗雜交設計1、果蠅分離定律的實驗分析2、果蠅自由組合的實驗分析3、果蠅的伴性遺傳實驗分析4、果蠅的三點測驗實驗分析5、果蠅的連鎖與交換實驗分析利用實驗室保存的哪兩個果蠅品系進行雜交，一次實驗即可驗證前述四個遺傳基本定律？？思考體色翅型眼剛毛灰體黑體b(2)黑檀體e(3)黃體y(1)紅眼白眼w(1)棒眼B(1)長翅短翅m(1)卷翅Cy(2)殘翅vg(2)

直剛毛卷剛毛sn(1)品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白短卷18灰紅長直22灰白長直26黑檀紅長直品系體色眼色翅型剛毛3黃紅長直4灰紅殘直6灰白w(1)短m(1)卷sn(1)18灰紅長直22灰白長直26黑檀e(3)紅長直正交：6(♀）×26(♂)反交：26(♀)×6(♂)

設計果蠅雜交實驗（PPT及紙質(zhì)）一、實驗目的二、實驗原理三、實驗材料

1、果蠅材料；

2、實驗器具與藥品四、實驗步驟（技術路線）正交：6(♀）×26(♂)

反交：26(♀)×6(♂)

用箭頭短線逐步示出實驗流程，并注明每步驟所需的時間及注意事項。自行設計果蠅培養(yǎng)瓶標簽。以8人為小組，提交PPT；紙質(zhì)設計報告每人一份。正交組講臺反交組正交組反交組五、實驗結果記錄表格參考實驗指導書，自行設計實驗記錄表格。六、預期的實驗結果及統(tǒng)計學分析方法

正交組：1、分離定律；2、自由組合定律；

3、伴性遺傳；4、三點測驗

反交組：1、分離定律；2、自由組合定律；

3、伴性遺傳；

自行設計卡方檢測表。七、實驗中可能存在的困難、問題及解決方法親本雌蠅為何一定要選用處女蠅？怎樣才能保證所選雌蠅為處女蠅？在進行親本雜交或F1自交一定時間后為什么要釋放雜交親本或F1？反交組為何不能直接進行三點測驗？如果