GB/T 5009.192-2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定

ICS67.040C53中華人民共和國國家標準GB/T5009.192-2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定Determinationof4-amino-3,5-dichloro-aC(tert-butylamino)methyl-benzylalcohol(clenbuterol）residuesinanimalfoods2003-08-11發(fā)布2004-01-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布中國國家標準化管理委員會

GB/T5009.192一2003前本標準修改采用了EUR15127-EN《獸藥殘留.動物性食品及制品參考物質(zhì)和分析方法.2ndEd.Sg2.1、Cg2.3、Sg2.4和Cy2.3歐盟獸藥殘留方法：動物性食品中魯藥殘留的測定方法》1994年英文第二版）。本標準與歐盟《動物性食品中獸藥殘留的測定方法》Sg2.1、Sg2.3、Sg2.4和Cy2.3不同之處為：-Sg2.1、Sg2.3、Sg2.4和Cy2.3為動物性食品中B興奮劑的多組分殘留檢測方法。本標準僅提出動物性食品中克倫特羅單一組分殘留的檢測方法。Sg2.1為牛尿液中B興奮劑的GC-MS篩選方法.Sg2.3為牛尿液中B興布劑的ELISA篩進方法,Sg2.4為牛肝、腎和肉中子興奮劑的GC-MS篩選方法.Cy2.3為牛尿液中子興奮劑的GC-MS確證方法。本標準則提出從酶聯(lián)免疫法（ELISA)篩選、高效液相色譜法(HPLC)定量到氣質(zhì)聯(lián)機法(GC-MS)確證和定量的一套方法，以滿足我國動物性食品中克倫特羅殘留監(jiān)控的需要。本標準中酶聯(lián)免疫法(ELISA)篩選和氣質(zhì)聯(lián)機法（GC-MS)的測定原理、操作過程和要求、主要技術(shù)參數(shù)及檢測靈敏度與歐盟方法一致。本標準中的高效液相色譜法(HPLC)是根據(jù)實驗資料及驗證結(jié)果提出的。本標準由中華人民共和國衛(wèi)生部提出并歸口。本標準起草單位：中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所、中國肉類食品綜合研究中心、北京市疾病預(yù)防控制中心。本標準主要起草人：吳永寧、苗虹、趙云峰、趙京玲、趙榕、吳國華、王凌瓏

GB/T5009.192-2003克倫特羅.為強效選擇性β-受體激動劑，有強而持久的松弛支氣管平滑肌的作用.用于治療哮嘴克倫特羅可促進動物生長·改善動物體內(nèi)脂肪分配·并增加瘦肉率。20世紀90年代·我國錯誤地將其作為科研成果開始以飼料添加劑引人并推廣.被俗稱為“瘦肉精”。一連串因食用含克倫特羅的食物而引起的中毒事件發(fā)生后.使克倫特羅成了世界上普遍禁用的飼料添加劑。1997年以來·我國有關(guān)行政部門多次明令禁止畜牧行業(yè)生產(chǎn)、銷售和使用鹽酸克倫特羅。但我國各地克倫特羅中毒事件仍然頻繁發(fā)生，說明非法使用克倫特羅現(xiàn)象依然存在。為了對畜禽產(chǎn)品中的克倫特羅開展監(jiān)測.加強市場監(jiān)督檢驗力度，預(yù)防中毒事件的發(fā)生，必須建立有效的檢測方法。我國在這方面的檢測工作起步較晚，伴隨著國際和國內(nèi)對克倫特羅的禁用和監(jiān)控要求.迫切需要發(fā)展適合我國國情的從篩選到確證的一套檢測方法。為此，本標準提出了從酶聯(lián)免疫法（ELISA)篩選、高效液相色譜法（HPLC)定量到氣質(zhì)聯(lián)機法(GC-MS)確證和定量這一套方法來滿足我國動物性食品中克倫特羅殘留監(jiān)控的需要

GB/T5009.192一2003動物性食品中克倫特羅殘留量的測定1范圍本標準規(guī)定了動物性食品中克倫特羅的測定方法本標準適用于新鮮或冷凍的畜、禽肉與內(nèi)臟及其制品中克倫特羅殘留的測定。本標準也適用于生物材料(人或動物血液、尿液)中克倫特羅的測定。本方法檢出限：第一法氣相色譜-質(zhì)譜法為0.5g/ke:第二法高效液相色譜法為0.5g/kg;第三法酶聯(lián)免疫法為0.5g/kg。線性范圍：第一法氣相色譜-質(zhì)譜法為0.025ng～2.5ng;第二法高效液相色譜法為0.5g～4ng;第三法酶聯(lián)免疫法為0.004ng～0.054ng.第一法氣相色譜-質(zhì)譜法(GC-MS)2原理固體試樣剪碎,用高氯酸溶液勻漿。液體試樣加人高氯酸溶液，進行超聲加熱提取，用異丙醇士乙酸乙酯(40+60)萃取,有機相濃縮,經(jīng)弱陽離子交換柱進行分離,用乙醇十濃氨水(98+2)溶液洗脫,洗脫液濃縮，經(jīng)N,O-雙三甲基硅烷三氟乙酰胺（BSTFA)衍生后于氣質(zhì)聯(lián)用儀上進行測定。以美托洛爾為內(nèi)標·定量3試劑3.1克倫特羅(clenbuterolhydrochloride),純度>99.5%3.2美托洛爾(metoprolol）.純度二99%3.3磷酸二氫鈉.3.4氫氧化鈉。3.5氯化鈉。3.6高氣酸307依氨水、3.8異丙醇。3.9乙酸乙酯。3.10甲醇：HPLC級3.11甲苯：色譜純。3.123.13衍生劑：N.O-雙三甲基硅烷三氟乙酰胺(BSTFA）3.14高氯酸溶液(0.1mol/L)。3.15氯氧化鈉溶液(1mol/L）。3.16磷酸二氫鈉緩沖液(0.1mol/L.pH=6.0).3.17異丙醇十乙酸乙酯(40+60)。3.18乙醇十濃氨水(98+2）3.19美托洛爾內(nèi)標標準溶液：準確稱取美托洛爾標準品·用甲醇溶解配成濃度為240mg/L的內(nèi)標儲備液·貼于