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植物根結(jié)線蟲防治進展專題報告目錄1.植物根結(jié)線蟲病害簡介2.根結(jié)線蟲致病機理3.根結(jié)線蟲綜合防治概述4.根結(jié)線蟲生物防治資源介紹5.展望一、植物根結(jié)線蟲病害簡介根結(jié)線蟲在全世界廣泛分布,寄主范圍廣,是危害農(nóng)作物的重要病原物之一。目前國際上已報道的根結(jié)線蟲有80多種,我國報道有29種,主要寄生在蔬菜、糧食作物、經(jīng)濟作物、果樹、觀賞植物及雜草等3000多種寄主上。植物受害嚴重,其危害已超過細菌、病毒,是僅次于真菌的第二大植物病害。病害一旦發(fā)生,一般減產(chǎn)10%—15%,嚴重的高達75%。據(jù)不完全統(tǒng)計,光2000年全世界因根結(jié)線蟲造成的損失就高達1000億美元。同時也是誘發(fā)植物產(chǎn)生病害的重要誘因之一。根據(jù)國際根結(jié)線蟲組織的研究,發(fā)生最普遍的根結(jié)線蟲只有4種:南方根結(jié)線蟲、爪哇根結(jié)線蟲、花生根結(jié)線蟲、北方根結(jié)線蟲。它們造成的損失在整個根結(jié)線蟲所引起的作物損失中占90%以上。其中南方根結(jié)線蟲危害最大,屬于重點防治對象。
根結(jié)線蟲發(fā)病規(guī)律主要分布在土壤0-25cm土層內(nèi),以在3-10cm土層內(nèi)分布最多。常以卵或2齡幼蟲病殘體遺留在土壤中越冬。病株及灌溉水是其主要傳播途徑。田間土壤濕度是影響孵化的重要條件,一般保護地溫濕度適合蔬菜生長,也適于根結(jié)線蟲活動,有利于發(fā)病,且連茬種植發(fā)病重,適宜侵染溫度25-30度,線蟲在土壤中一般存活1-3年。根結(jié)線蟲的繁殖力極強,通常每個雌蟲可產(chǎn)卵1500—3000枚。其生活史包括卵、四個幼蟲階段和一個成蟲階段,完成生活史周期所需時間與溫度有關(guān),作物生長季中一般需要25天。根結(jié)線蟲病害癥狀根結(jié)線蟲的危害作物
黃瓜馬鈴薯油麥番茄芹菜根結(jié)線蟲的危害狀況番茄大棚黃瓜大棚二、根結(jié)線蟲致病機理南方根結(jié)線蟲屬于專性寄生,主要寄生在根部的須根或側(cè)根上,以三種方式對寄主產(chǎn)生危害:一是直接的機械損傷,破壞寄主表皮細胞;二是誘發(fā)其他病原物侵染為害,根結(jié)線蟲對植株產(chǎn)生的機械損傷為枯萎病菌、根腐病菌等土傳病原菌的侵染提供了便捷通道;三是以口針刺傷寄主,分泌有毒物質(zhì),這些物質(zhì)含有多種消化酶,誘發(fā)寄主組織發(fā)生各種病理變化,破壞寄主細胞的正常代謝功能而產(chǎn)生病變,使根表產(chǎn)生變形或使植株內(nèi)部組織受到破壞。南方根結(jié)線蟲為害植物后,最典型的癥狀是所形成的巨型細胞,結(jié)果在根上可形成大小不等的瘤叫“根結(jié)”。輕病株癥狀不明顯,重病株矮小、發(fā)育不良,干旱時中午萎蔫或提早枯死。病土、病苗及灌溉是主要傳播途徑。根結(jié)線蟲生活史雌成蟲二齡幼蟲三、根結(jié)線蟲防治概述目前階段,根結(jié)線蟲的防治方法主要有以下幾種:植物檢疫農(nóng)業(yè)防治(1)抗病品種
(2)抗性砧木(3)輪作(4)土壤改良物理防治(1)
高溫悶棚(2)水淹處理(3)石灰氮(4)超聲波(5)射線生物防治(1)天敵真菌(2)細菌(3)放線菌(4)病毒(5)捕食性線蟲(6)昆蟲和螨類等化學防治
病害綜合防治的主體,目前為止最有效的方法,分熏蒸型藥劑和非熏蒸型藥劑植物檢疫(一)概念:檢疫(Quarantine)實際上就是法規(guī)防治,是通過國家立法并授權(quán)檢疫機構(gòu),制定和強制執(zhí)行法規(guī),完成檢疫目的的一種防治措施。(二)目的:防止人們在貿(mào)易活動和社會交往中,人為傳播(傳入、傳出)危險性植物線蟲,從疫區(qū)進入非疫區(qū)。(三)線蟲遠距離傳播途徑:種苗、種薯等無性繁殖材料調(diào)運;種子;土壤;貨物、包裝材料等。我國確定檢疫對象的因素:(1)國內(nèi)尚未發(fā)生或分布未廣,其主要寄主植物是我 國主要經(jīng)濟作物,一旦傳入可能造成國民經(jīng)濟 重大損失;(2)靠人為傳播且傳播途徑廣、速度快、繁殖力和 適應(yīng)性強;(3)抗逆性強,傳入后難于防治或除害處理困難。植物線蟲檢疫對象名錄:根據(jù)2007.5.28發(fā)布的《中華人民共和國進境植物檢疫性有害生物名錄》。
剪股穎粒線蟲Anguinaagrostis草莓滑刃線蟲Aphelenchoidesfragariae菊花滑刃線蟲Aphelenchoidesritzemabosi椰子紅環(huán)腐線蟲Rhadinaphelenchuscocophilus馬鈴薯金線蟲Globoderarostochiensis馬鈴薯白線蟲Globoderapallida相似穿孔線蟲Radopholussimilis松材線蟲Bursaphelenchusxylophilus水稻莖線蟲Ditylenchusangustus鱗球莖莖線蟲Ditylenchusdipsaci甜菜胞囊線蟲Heteroderaschachtii腐爛莖線蟲Ditylenchusdestructor根結(jié)線蟲屬Meloidogynespp.(非中國種);長針線蟲屬Longidorusspp.;(傳毒種類)毛刺線蟲屬Trichodorusspp.;(傳毒種類)擬毛刺線蟲屬Paratrichodorus(傳毒種類)劍線蟲屬Xiphinemaspp.;(傳毒種類)異常珍珠線蟲Nacobbusabberans最大擬長針線蟲Paralongidorusmaximus短體線蟲Pratylenchus(非中國種)農(nóng)業(yè)防治原理:通過改進耕作制度和栽培管理方法,創(chuàng)造有利于植物生長發(fā)育而不利于線蟲繁殖的環(huán)境條件,以控制病原線蟲群體發(fā)展。農(nóng)業(yè)防治具體措施(一)選留無病種子,培育無病苗木(二)加強栽培管理(肥水管理)(三)輪作(四)改良土壤(五)休閑(六)田間衛(wèi)生(七)深種或深施肥(八)翻曬土壤(九)種植時間的選擇化學防治化學防治按施用方法分為熏蒸法和非熏蒸法兩種熏蒸法常用的殺線劑有溴甲烷、氯化苦、二氯丙烯、威百畝、棉隆、敵線酯等,該方法操作復(fù)雜,防治成本較高,且對環(huán)境有破壞作用。其中溴甲烷已于2015年在發(fā)展中國家全部禁用。非熏蒸法常用的殺線劑有阿維菌素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、噻唑磷、滅線磷、涕滅威和克百威等,由于有機磷類農(nóng)藥安全性較差、氨基甲酸酯類農(nóng)藥高毒等弊端都已在蔬菜上禁用,當前防治根結(jié)線蟲主要用阿維菌素、甲維鹽和伊維菌素。物理防治(一)熱力處理熱力(熱水)處理:植物根、種子、鱗莖、塊莖、其他無性繁殖材料;熱蒸氣處理:苗床或溫室土壤(二)種子汰選1.液體浮載篩選法:清水、20%食鹽水和黃泥水等;2.機械汰選法:"小麥粒線蟲蟲癭汰除機“3.水噴射沖洗馬鈴薯能將附著其上的胞囊沖洗掉。(三)高頻處理在外電場作用下,物質(zhì)分子來回頻繁運動磨擦產(chǎn)生熱量殺死線蟲。經(jīng)高頻電場刺激后,種子發(fā)芽率高,發(fā)芽整齊,長勢旺盛。(四)射線處理國外發(fā)現(xiàn)一定劑量射線可破壞線蟲生活史和使線蟲喪失生殖力,但仍未應(yīng)用到生產(chǎn)實踐中。生物防治生物防治:指通過引入捕食線蟲和寄生于線蟲的生物,從而降低線蟲群體,把線蟲引起的經(jīng)濟損失減少到最低水平,或通過生物所產(chǎn)生的毒素殺死線蟲的一種防治方法。線蟲天敵生物:真菌、細菌、放線菌、病毒、立克次氏體、原生動物、捕食性線蟲、昆蟲和螨類等(一)真菌
1.捕食性真菌
(1)黏著性捕捉器真菌
(2)環(huán)狀捕捉器真菌
Arthrobotrysspp.形成的Constrictingring孢子萌發(fā)形成的收縮性環(huán);
CT對線蟲的捕食捕食器官a.黏性菌絲;b-c.黏性分枝;d-e.黏性網(wǎng);f.漏斗狀黏球;g.黏性球及非收縮環(huán);h.收縮性環(huán)(劉杏忠提供)少孢節(jié)叢孢(A.oligospora)在瓊脂平板上捕食線蟲(仿RickHurst)2.內(nèi)寄生真菌(1)線蟲卵寄生真菌:淡紫擬青霉
(2)蟲體內(nèi)寄生真菌:厚孢輪枝菌對淡紫擬青霉、厚壁孢子輪枝菌的研究報道認為,這兩種食線蟲真菌均有寄生南方根結(jié)線蟲卵的能力,能顯著降低番茄上的南方根結(jié)線蟲幼蟲群體數(shù)量和根結(jié)指數(shù),厚壁孢子輪枝菌還優(yōu)于淡紫擬青霉。在此基礎(chǔ)上,我國科研人員已研制出以厚垣輪枝菌為生防菌的商品制劑-“線蟲必克”和以淡紫擬青霉為生防菌的商品制劑-“滅線寧”。
淡紫擬青霉菌通過研究發(fā)現(xiàn),淡紫擬青霉對南方根結(jié)線蟲、孢囊線蟲、白色球胞囊線蟲、穿刺線蟲、金色線蟲、異皮線蟲和珍珠線蟲等多種病原線蟲有很強的寄生能力,其中對云南煙草根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲分散卵的相對抑制率達57.8%,對線蟲卵囊孵化的相對抑制率達60.38%。一般認為淡紫擬青霉防治線蟲的機制是與線蟲的孢囊或卵接觸后,在菌絲機械壓力及其分泌水解酶的作用下使卵殼表皮破裂,隨后穿入并寄生在早期胚胎發(fā)育的卵中,最終致使整個胚胎被菌絲體取代、卵的內(nèi)容物被破壞而致死。淡紫擬青霉具有多重控害作用,并可在多種天然有機基質(zhì)上繁衍。使用方法也很簡單,可采用拌種、穴施、撒施、條施等方法,是具有廣闊應(yīng)用前景的線蟲生防菌劑。3.機會真菌:定殖固定性內(nèi)寄生線蟲的繁殖體上茄病鐮孢和尖孢鐮孢屬于機會真菌,可寄生于南方根結(jié)線蟲卵和雌蟲4.分泌毒素的真菌:能夠分泌毒素或裂解酶類來殺死或抑制線蟲。目前已發(fā)現(xiàn)90余個殺線蟲菌物毒素,其中包括擔子菌、子囊菌、半知菌中部分菌物產(chǎn)生殺死線蟲的毒素,其成分主要有醌類、生物堿類、萜類、肽類、吡喃類、呋喃類、脂肪酸類、萘類等高等擔子菌如側(cè)耳屬的粗皮側(cè)耳、肺狀側(cè)耳、漏斗狀側(cè)耳、長柄側(cè)耳、裂皮側(cè)耳、阿魏側(cè)耳等23個種的菌株產(chǎn)生的毒素具有殺線蟲活性;子囊菌槍林盤屬的代謝產(chǎn)物殺線蟲譜很廣。糙皮側(cè)耳分泌細胞所產(chǎn)生的微小的毒素殺死線蟲后,菌絲便從線蟲的自然孔口侵入(二)細菌
1.穿刺巴斯德桿菌(Pasteuriapenetrans)是一種產(chǎn)生芽孢的專性寄生的革蘭氏陽性細菌此菌分布非常廣泛,迄今已在世界上五大洲的51個國家及太平洋、大西洋、印度洋的各類島嶼上從96個屬196種土壤線蟲體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了巴氏桿菌或其類似物。穿刺巴氏桿菌作用機理穿刺巴氏桿菌以球形孢子粘附于線蟲表面,然后孢子萌發(fā)成芽管。在酶的作用和芽管的機械作用下,侵入線蟲表皮,在線蟲假體腔內(nèi)漂浮和皮下定殖,繼續(xù)不斷地削弱線蟲,并在線蟲體內(nèi)生長發(fā)育,產(chǎn)生大量菌體,菌體產(chǎn)生有毒代謝物,使感染的幼蟲反應(yīng)遲鈍,但不影響幼蟲吸收營養(yǎng)。待線蟲發(fā)育到成蟲時,其體內(nèi)充滿菌體孢子而導(dǎo)致成蟲被徹底摧毀,釋放大量的孢子于土壤中,從而再次感染其他線蟲,達到持續(xù)防治的效果。
穿刺巴氏桿菌對根結(jié)線蟲的防治效果根據(jù)相關(guān)的研究報道,穿刺巴氏桿菌對感染根結(jié)線蟲的植物都有保護效果,凡是被穿刺巴氏桿菌侵染的二齡幼蟲可以繼續(xù)發(fā)育到成蟲階段,但不能再產(chǎn)卵繁殖,大約可使蟲口密度降低75%-80%;同時該菌使根結(jié)線蟲致根成根結(jié)的情況有所緩和,從而根冠比倒轉(zhuǎn)的癥狀有很大改善,各組試驗的解剖結(jié)果證明,穿刺巴氏桿菌的寄生都導(dǎo)致蟲癭、卵塊,雌蟲,雄蟲以及各期幼蟲明顯減少,試驗結(jié)果表明對根結(jié)線蟲的防治效果明顯。穿刺巴氏桿菌防治根結(jié)線蟲的優(yōu)缺點雌成蟲體內(nèi)產(chǎn)生的休眠孢子具有良好的抗逆性,能抗高溫、干旱(燥)、高濕及各種化學和物理因子。穿刺巴斯德菌具有獨特的抗逆性和作用機制,是一種非常有效防治根結(jié)線蟲病的生防因子,具有廣闊的開發(fā)前景。盡管穿刺巴氏桿菌具有上述優(yōu)點,但是穿刺巴氏桿菌能否廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)主要取決于該菌是否可以大規(guī)模低成本的生產(chǎn)。穿刺巴氏桿菌的生產(chǎn)方式包括依靠活體寄主線蟲的體內(nèi)培養(yǎng)和無寄主組織存在的體外培養(yǎng)兩種方式。穿刺巴氏桿菌從不可培養(yǎng)到可培養(yǎng)經(jīng)歷了漫長的研究過程,雖然美國PasteuriaBioscience公司已報道可以人工培養(yǎng)巴氏桿菌,但該技術(shù)一直受專利保護,尚未公開;另外,據(jù)了解目前穿刺巴氏桿菌的體外培養(yǎng)成本非常高,還不適合規(guī)?;a(chǎn),無法大面積應(yīng)用推廣;而且現(xiàn)階段該菌的體外培養(yǎng)技術(shù)還不能被引進。2.根際細菌根際細菌是指從根際分離所得,依據(jù)其對植物的作用效果分為有益、有害和中性三類。人們研究的根際細菌多指在生防中具有拮抗作用或促生作用的有益根際細菌(PGPR)。根際細菌對線蟲的作用機理目前不是特別清楚,將其歸納為三個主要的方面:一是產(chǎn)生殺線蟲物質(zhì)。殺線蟲物質(zhì)可能是含氮物降解過程中產(chǎn)生的揮發(fā)性的NH3
和NO2
。二是改變根分泌物與線蟲作用方式。三是營養(yǎng)和空間位點競爭。目前對南方根結(jié)線蟲具有防效的根際細菌主要有:熒光假單胞菌、球形芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、放射性土壤桿菌以及致金色假單胞菌等,根際細菌在溫室自然土中防效同田間效果一致,大部分超過40%。其中利用最成功的為蘇云金芽孢桿菌,用以防治農(nóng)作物害蟲80余種,成為無公害生產(chǎn)中首推的生物殺蟲劑品種。我國劉志明等(2000)從1995年起,開展了根結(jié)線蟲幼蟲致病細菌的篩選,從205份樣品中分離和純化細菌142株,其中4株對番茄根結(jié)線蟲的校正死亡率達80%以上,同時使香蕉根結(jié)線蟲侵染率為零。3.放線菌
放線菌中的一些種類以拮抗或毒殺方式作用于線蟲,能夠產(chǎn)生具有抗生或殺線蟲特性的化合物,主要是鏈霉菌及其變種?!鞍⒕S菌素”是由灰色鏈霉菌發(fā)酵產(chǎn)生,是一種新型抗生素殺蟲、殺螨、殺線蟲劑,屬昆蟲神經(jīng)毒劑,具有廣譜、高效、低殘留和對人畜及環(huán)境安全等特點,屬于無公害農(nóng)藥。在黃瓜、西瓜、花生、番茄、胡椒等植物上的試驗表明阿維菌素對根結(jié)線蟲病具有很好的防治效果,但由于該化合物在土壤內(nèi)易被土壤團粒吸附不會移動,并被微生物迅速
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